全 文 ： 制剂与炮制
收稿日期:2006-11-28;　修订日期:2007-03-08
基金项目:中国博士后科学基金资助(No.2004035254)
作者简介:吴彩霞 (1972-),女(汉族),河南开封人 ,现任河南大学天然药
物研究所主管药师 ,主要从事药物分析及质量控制研究工作.
＊通讯作者简介:康文艺 (1971-),男(汉族),河南开封人 ,现任河南大学
天然药物研究所副教授 ,博士学位 ,主要从事天然药物化学工作.
海桐花挥发油的提取工艺研究
吴彩霞1, 2 , 李彩芳 1 , 郅妙利1 , 王二辉 1 , 康文艺1＊
(1.河南大学天然药物研究所 ,河南 开封　475004;
2.河南省疾病预防控制中心 ,河南 郑州　450003)
摘要:目的 比较固相微萃取法和水蒸气蒸馏法提取海桐花中的挥发性成分差异。方法 采用 GC-MS测定其化学成分。结
果 分别鉴定了 62种和 58种成分。结论 与水蒸气蒸馏法相比 ,固相微萃取法得到的十一烷 、壬烷等烷烃的含量增加;并且
提取出了水蒸气蒸馏法不能蒸馏出来的一些成分 ,如马鞭草烯醇 、γ-榄香烯 、白菖烯、(-)-α-古芸烯 、绿花白千层醇等。
关键词:海桐花;　固相微萃取;　水蒸气蒸馏;　气相色谱质谱联用;　挥发油
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)07-1579-03
TheExtractionTechnologyoftheEssentialOilfrom theFlowersofPittosporum
tobiraAit.
WUCai-xia1, 2 ,LICai-fang1 ,ZHIMiao-li1 , WANGEr-hui1 ,KANGWen-yi1＊
(1.InstituteofNaturalProducts, HenanUniversity, Kaifeng475004, Henan, China;2.HenanCenterforDisease
ControlandPrevention, Zhengzhou, 450003, China)
Abstract:ObjectiveToComparetheessentialoilextractedfromtheflowersofPittosporumtobiraAit.bysolid-phasemicroex-
traction(SPME)andsteamdistilation.MethodsGC-MSwasusedtoanalyzetheircomponents.ResultsTherewere62 compo-
nentsidentifiedfromproductsofSPMEand58 fromthoseofsteamdistilation.Conclusion Comparingwiththoseofsteamdistil-
lation, thecontentsofundecane, nonaneincreasedbySPME;andsomecomponentsthatwouldnotbeextractedbysteam;disti
llationwereextractedbySPME, suchasverbenol, y-Elenene, calarene, (1)-a-Gurjunene, viridifloroletc.
KeywordsFlowersofPitosporumtobiraAit, 　SPME;　Steamdistilation;　GC-MS;　Essentialoil
　　海桐 PittosporumtobiraAit.为海桐科植物 , 常绿小乔木或灌
木 , 各地多有栽培 ,为园林绿化观赏树种。具有祛风活络 、散淤止
痛 、解毒止血等药理作用。 国外对海桐花化学成分的研究较少 ,
主要是研究海桐的种子和果实;国内只有李兆琳等 [ 1 ～ 4]对海桐花
头香化学成分进行了研究。未有文献报道水蒸气蒸馏方法与
SPME方法提取海桐花挥发油研究 , 因此我们利用水蒸气蒸馏和
固相微萃取法固相微萃取法(SPME)提取海桐花的挥发油成分 ,
并将这两种方法所得到成分进行了比较。
SPME是一种适合色谱进样分析的快速萃取方法 ,它以带有
特殊涂层石英纤维作为固相提取器将其浸入样品溶液或顶空提
取 , 然后直接进行 GC, HPLC分析。它具有对被测样品的选择
高 , 溶质更容易洗脱 、几乎无空白值和重现性好等特点 [ 5] , 本文
将两种方法提取的挥发油成分用 GC-MS来分析 , 并将 SPME与
GC-MS联用。
1　材料与仪器
海桐花于 2006-05采集于河南省开封市 ,经河南大学药学院
中药教研室袁王俊鉴定为海桐科海桐属植物海桐 ,标本存放于河
南大学天然药物研究所实验室(No.MPBA06051402)。
美国惠普公司 HP6890GC/5973MS气相色谱 -质谱联用仪 ,
美国 Supelco公司手动固相微萃取(SPME)装置 ,萃取纤维头为:
65 μmPDMS/DVB。
2　方法
2.1　挥发油提取
2.1.1　水蒸气蒸馏法 按《中国药典》(2005年版 Ⅰ部)方法 ,用
挥发油提取器提取挥发油。 取新鲜海桐花 100 g, 以水蒸气蒸馏
收集挥发油 , 得到具有浓郁香气的乳白色液体 , 贮于 -4℃冰箱
中。收油率为 0.039 1%。
2.1.2　固相微萃取法 称取阴干海桐花(经粉碎)1.0 g, 置于 15
ml专用采样瓶中 , 插入装有 65 μmPDMS/DVB纤维头的手动进
样器 , 90℃下顶空萃取保持 30 min取出 ,立即插入色谱仪进样口
(温度 250℃)中 ,脱附 1.5min。
2.2　色谱 /质谱分析条件
2.2.1　气相色谱条件 HP5-MS石英弹性毛细管柱(30 m×0.25
mm, 0.25μm);载气 He, 流量 1 ml/ min;进样口温度:250℃;色
谱柱初始温度 50℃(保持 1 min), 以 8℃/ min升温速率升至
160℃(保持 2min),以 10℃/min升温速率升至 250℃, 最后保持
10 min;不分流进样。
2.2.2　质谱条件 EI离子源 ,离子源温度 230℃, 电子能量 70eV,
电子倍增器电压 1 765V, 质量扫描范围 30 ～ 350 amu, 四极杆温
度 150℃, GC-MS传输线温度 280℃。
3　结果
采用 GC-MS法对海桐花挥发油化学成分进行分析 , 检索
Nist98标准质谱图库和 Wiley275质谱图库 ,并结合有关文献从基
峰 、γ相对丰度等几个方面进行直观比较 , 确定海桐花挥发油中
的化学成分。峰面积相对含量分析是通过 HPMSD化学工作站
数据处理系统 ,按峰面积归一化法进行。其结果见表 1 ～ 2。
4　讨论
从水蒸气蒸馏法提取的海桐花挥发油中 ,共分离了 137个化
合物 , 鉴定了其中的 58个化学成分 , 已鉴定成分峰面积占色谱总
馏出峰面积的 73.48%。主要成分为:橙花叔醇(21.7%)、1R-α-
蒎烯(11.43%)、醋酸苄酯(5.91%)、壬烷(5.19%)、喇叭茶醇
(3.97%)、十一烷(2.68%)、芳樟醇(1.74%)、β -蒎烯(1.5%)、
壬醛(1.45%)、橙花叔醇(1.25%)、苯甲酸苄酯(1.14%)等 , 与
文献报道的主要成分大致相同 [ 6] 。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2007VOL.18NO.7 时珍国医国药 2007年第 18卷第 7期
表 1　固相微萃取法提取海桐花挥发性化学成分
序号 保留时间 t/min 化学成分 相对含量(%)
1 2.57 Aceticacid　乙酸 0.04
2 5.23 Styrene　苯乙烯 0.09
3 5.45 Nonane　壬烷 18.91
4 6.24 α-Pinpene　α-蒎烯 18.76
5 6.55 Camphene　莰烯 0.1
6 6.89 Benzaldehyde　苯甲醛 0.29
7 7.27 2-β -Pinene　2-β -蒎烯 1.89
8 7.63 β -Myrcene　β -月桂烯 1.5
9 7.85 Decane　癸烷 0.95
10 8.02 Mentha-1, 4, 8-三萜薄荷 -1, 4, 8-三萜
11 8.65 1-Limonene　1-柠檬烯 0.24
12 9.02 Benzy1 alochol　苯甲醇 1.33
13 9.21 tras-β -Ocimene　反式 -β -罗勒烯 2.41
14 10.79 Undecane　十一烷 22.37
15 10.84 Nonanal　壬醛 0.49
16 11.51 p-Mentha-1, 5, 8-triene　对 -薄荷 -1, 5, 8-三萜 0.2
17 11.6 2, 8-Dimethy1-5, 8-tricyclo[ 5.3.0.0] decadiene 0.28
2, 8-二甲基 -5, 8-三环 [ 5.3.0.0]癸二烯 0.08
18 11.96 Verbenol　马鞭草烯醇 0.58
19 12.5 Aceticacid, phenylmethylester　醋酸苄酯
20 13.28 Cyclooctene, 4-methylene-6-(1-propenylidene)- 0.24
4-亚甲基 -6-(1-亚丙烯基)-环辛烯
21 13.42 Dodecane　十二烷 0.24
2, 8-Dimethy-5, 8-三环[ 5.3.0.0] decadiene
22 13.76 2, 8-二甲基 -5, 8-三环 [ 5.3.0.0]癸二烯 0.82
23 16.16 Tridecane　十三烷 0.13
24 17.21 γ-Elemene　γ-榄香烯 0.06
25 17.56 α-Cubebene　α-荜澄茄油烯 4.44
26 18.24 α-Copaene　α-胡椒烯 1.13
27 18.48 β -Bourbonene　β -波旁烯 0.46
28 18.61 β -Cubebene　β -荜澄茄油烯 1.93
29 18.77 n-Tetradecane　正十四烷 0.1
30 19.35 Calarene　白菖烯 0.49
31 19.6 β -Cubebene　β -荜澄茄油烯 0.15
32 19.65 Widdrene　罗汉柏烯 0.21
33 19.77 Calarene　白菖烯 0.05
34 20.33 (-)-α-Gurjunene　(-)α-古芸烯 0.09
35 20.4 Neoaloocimene　新别罗勒烯 0.4
36 20.54 α-Longipinece　α-长叶蒎烯 0.06
37 20.7 δ-Cadinene　δ-杜松烯 0.03
38 20.79 α-Amorphene　α-紫穗槐烯 0.19
39 20.92 Germacrened　大根香叶烯d 2.48
40 20.01 β -Ionone　β -紫罗兰酮 0.09
41 21.31 Pentadecane　正十五烷 0.3
42 21.31 α-Amorphene　α-紫穗槐烯 0.16
43 21.5 E-α-FarnesenePhenol, 　E-α-金合欢烯 0.39
2, 6-bis(1, 1-dimethyletyy1)-4-methy1-
44 21.64 2, 6-二(1, 1-二甲基乙基)-4-甲基 -苯酚 0.08
45 21.69 α-Amorphene　α-紫穗槐烯 0.19
46 21.9 δ-Cadinene　δ-杜松烯 0.33
Naphthalene, 1, 2, 3, 4, 4a, 7-hexahydro-1, 6-dimethy1-4-(1-methylethy1)-
47 22.13 1, 2, 3, 4, 4a, 7-六氢化 -1, 6-二甲基-4-(1-甲基乙基)-萘 0.25
48 22.25 α-Muurolene　α-衣兰油烯 0.05
49 22.87 Neolidol　橙花叔醇 3.28
50 23.24 Spathulenol　匙叶桉油烯醇 0.08
51 23.58 Vridiflorol　绿花白千层醇 0.51
Pentadecane, 2, 6, 10-trime
52 24.7 2, 6, 10-三甲基 -十五烷 0.1
Naphthalene, 1, 2, 3-trimethy1-4-propeny1-, (E)-
53 25.07 1, 2, 3-三甲基 -4-丙烯基-萘 0.09
Naphthalene, 1, 2, 3-trimethy1-4-propeny1-,
54 25.48 (E)-1, 2, 3-三甲基 -4-丙烯基 -萘 0.15
55 25.64 1, 1-Bis(p-toly1)ethane　1, 1-二(对 -甲苯基)乙烷 0.14
56 25.84 Heptadecane十七烷 0.05
57 25.96 Pristane异十八烷 0.11
5, 6-dihydro-5, 6-dimethylbenzo 0.06
58 26.15 5, 6-双氢 -5, 6-二甲基苯 [ c]噌啉 0.06
59 27.36 Benzy1benzoate苯甲酸苄酯 0.09
60 28.93 Hexahydrofarnesy1acetone　六氢法呢基丙酮 0.3
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 7期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2007VOL.18NO.7　
续表 1
序号 保留时间 t/min 化学成分 相对含量(%)
61 32.55 Nerolidol　橙花叔醇 0.28
62 34.94 Linoleicacid　亚油酸 0.05
表 2　水蒸气蒸馏法提取海桐花挥发性化学成分
序号 保留时间 t/min 化学成分 相对含量(%)
1 3.06 Toluene　甲苯 0.08
2 5.39 Nonane　壬烷 5.19
3 6.22 IR-α-Pinene　1R-α-蒎烯 11.43
4 6.56 Camphene　莰烯 0.07
5 7.19 Sabinene　桧烯 0.22
6 7.27 β -Pinene　β -蒎烯 1.5
7 7.85 Decane　癸烷 0.08
8 7.98 Octanal　辛醛 0.14
9 8.65 D-Limonene　D-柠檬烯 0.27
10 9.2 trans-β -Ocimene　D-柠檬烯 0.34
11 9.86 1-Octanol　正辛醇 0.25
12 10.64 Undecane　十一烷 2.68
13 10.69 Linalol　芳樟醇 1.74
14 10.79 Nonanal　壬醛 1.45
15 11.41 α-Campholenealdehyde　α-龙脑烯醛 0.09
16 12.54 Benzylacetate　醋酸苄酯 5.91
17 13.26 1-α-Terpineol　1-α-松油醇 0.26
18 13.41 Myrtenal　桃金娘烯醛 0.34
2, 8-dimethyl-5, 8-tricyclo[ 5.3.0.0] decadiene
19 13.77 2, 8-二甲基 -5, 8-三环 [ 5.3.0.0]癸二烯 1.26
20 15.45 Citral　柠檬醛 0.15
21 17.55 α-Cubebene　α-荜澄茄油烯 0.76
22 18.1 Phenylpropy1acetate　乙酸苯丙酯 0.37
23 18.24 α-Cubebene　α-荜澄茄油烯 0.69
24 18.48 β -Bourbonene　β -波旁烯 0.15
25 18.61 β -Cubebene　β -荜澄茄油烯 0.69
26 19.37 Caryophylene　石竹烯 0.2
27 19.66 Thujopsene　罗汉柏烯 0.18
28 20.17 Longiborn-9-ene 0.45
29 20.4 Aloaromadendrene　别香橙烯 0.24
30 20.78 α-amorphene　α-紫穗槐烯 0.07
31 20.82 β -Chamigrene　β -花柏烯 0.08
32 20.9 Germarened　大根香叶烯 d 0.23
33 21.02 β -Ionone　α-紫罗兰酮 0.11
34 21.35 α-Muurolene　α-衣兰油烯 0.27
35 21.52 (+)-Cuparene　(+)-花侧柏烯 0.15
36 21.91 δ-Cadinene　δ-杜松烯 0.3
β -Sesquicyclogeraniol
37 22.12 β -倍半环香叶醇 0.06
38 22.97 Nerolidol　橙花叔醇 21.7
39 23.29 (+)-spathulenol　(+)-匙叶桉油烯醇 0.45
40 23.39 Caryophyleneoxide　石竹烯氧化物 0.52
41 23.63 Ledol　喇叭茶醇 3.97
42 23.86 Ledol　喇叭茶醇 0.29
43 24.71 .tau.-Muurolol 1.14
44 24.81 Germacrened　大根香叶烯 d 0.5
45 25.84 Dihydro-neoclovene-(Ⅰ )　二氢 -新丁香三环烯 -(Ⅰ ) 0.22
46 26.08 Ledeneoxide-(Ⅱ)　喇叭烯氧化物 -(Ⅱ) 0.11
47 26.18 Isocaryophylene　异丁香烯 0.15
48 26.41 FarnesolisomerA　金合欢醇异构体 A 0.81
49 27.36 Benzylbenzoate　苯甲酸苄酯 1.14
50 27.99 spiro[ 2, 5] octane, 5, 5-dimethyl-4-(3-oxobuty1)
5, 5-二甲基-4-(3-氧丁基)-螺 [ 2, 5]辛烷 0.17
51 28.08 β -Caryophylene　β -石竹烯 0.12
52 28.36 Ledne　喇叭烯 0.72
53 28.94 2-Pentadecanone, 6, 10, 14-trimethyl-　6, 10, 14-三甲基 -2-十五烷酮 1.02
54 30.01 Npmadecane　十九烷 0.14
55 30.12 Spiro[ 2.5] octane, 5-dimethyl-4-(3-oxobutyl)-
5, 5-二甲基-4-(3-氧丁基)-螺 [ 2.5]新烷 0.2
56 31.31 Dibutylphthalate　酞酸丁酯 0.74
57 32.56 Nerolidol　橙花叔醇 1.25
58 33.85 Heneicosnae　正二十一烷 0.13
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2007VOL.18NO.7 时珍国医国药 2007年第 18卷第 7期
从固相微萃取法提取的海桐花挥发油中 ,共分离了 106个化
合物 , 鉴定了其中的 62个化学成分 , 已鉴定成分峰面积占色谱总
馏出峰面积的 91.29%。 主要成分为:十一烷(22.37%)、壬烷
(18.91%.)、α-蒎烯(18.76%)、α-荜澄茄油烯(4.44%)、橙花
叔醇 (3.28%)、大 根香叶烯 d(2.48%)、反 式-β-罗 勒烯
(2.41%)、β-荜澄茄油烯(1.93%)、2-β-蒎烯(1.89%)、β -月桂烯
(1.5%)、苯甲醇(1.33%)、α-胡椒烯(1.13%)等。与水蒸气
蒸馏法得到的挥发油相比 , 固微萃取法得到的挥发油中 , 十一烷 、
壬烷等烷烃的含量增加;同时提取出了水蒸气蒸馏法不能蒸馏出
来的一些成分 , 如马鞭草烯醇 、γ-榄香烯 、白菖烯 、(-)-α-古芸烯 、
绿花白千层醇等;挥发油的提取时间明显缩短。
固相微萃取技术(SPME)是近年来出现的和一种新型的无
溶剂化样品前处理技术 ,它集样品采集 、萃取 、浓缩 、进样于一体 ,
操作简单 、快速 ,廉价实用 , 环境污染小 [ 7] , 并且它可以与其它技
术联用。因而在分析化学与药物分析领域得到了广泛使用 , 具有
良好的应用前景。
参考文献:
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TetrahedronLeters, 2001, 42:2693.
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大学学报(自然科学版), 1990, 26(3):70.
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仪器 , 2003, 2:15.
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的应用 [ J] .中国中药杂志 , 2004, 29(3):197.
药理药化
收稿日期:2006-12-28;　修订日期:2007-03-12
基金项目:武汉市科技局资助项目(No.20025007170)
作者简介:朱书秀(1973-),男(汉族),湖北监利人 ,现任江汉大学医学与
生命科学院讲师 ,硕士学位 ,主要从事针灸临床 、教学和科研工作.
天灸对哮喘模型大鼠血清白细胞
介素 -4、白细胞介素 -6及 IgE的影响
朱书秀 , 周丽莎 , 涂　乾 , 朱青艳 , 王　芳
(江汉大学医学与生命科学院 ,湖北 武汉　430056)
摘要:目的 研究血清 IL-4, IL-6及 IgE在哮喘发病中的作用及天灸对它们的影响。方法 40只雄性大鼠随机分为正常
组 、模型组 、天灸组及电针组。用卵蛋白(OVA)致敏来制备哮喘模型大鼠。 ELISA法检测血清 IL-4, IL-6及 IgE。结果 模
型组血清 IL-4, IL-6及 IgE高于正常组(P<0.01),经治疗后均有所降低 , 且天灸组最显著。结论 支气管哮喘的发病与血
清 IL-4, IL-6及 IgE的异常有关 ,天灸对其具有调节作用。
关键词:天灸;　白细胞介素-4;　白细胞介素 -6;　IgE
中图分类号:R245.8　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)07-1582-02
EffectofTianjiuontheSerumIL-4, IL-6andIgEinAsthmaticRats
ZHUShu-xiu,ZHOULi-sha,TUQian,ZHUQing-yan,WANGFang
(MedicineandLifeSciencesInstitute, JianghanUniversity, Wuhan430056, China)
Abstract:ObjectiveToinvestigatethefunctionofserumIL-4, IL-6 andIgEinasthmaoccurance, observetheefectofTianjiu
onthem.Methods 40 maleratsweredividedrandomlyintothenormalgroup, modelgroup, Tianjiu-treatedgroupandtheelectric
needle-treatedgroup.Theasthmamodelofbigratsweresensitizedbyovalbumen(OVA)andincitedwithinhalingfog.Theserum
IL-4, IL-6andIgEwereexaminedbyELISAmethod.ResultsTheserumIL-4, IL-6 andIgEofthemodelgroupwasobviously
higherthanthatofthenormalgroup(P<0.01), andtheircontentswerereducedbytreatment, especialyTianjiu-treatedgroup.
ConclusionOccurranceofasthmaisrelatedtoabnormalityofserumIL-4, IL-6 andIgE.Tianjiucanadjustthem.
Keywords:Tianjiu;　IL-4;　IL-6;　IgE
　　支气管哮喘是机体对抗原性或非抗原性刺激引起的一种慢
性气道变态反应性炎症疾病 , 很多细胞参与该炎症过程 , 其中包
括肥大细胞 、嗜酸性粒细胞以及 T淋巴细胞等 [ 1] 。 目前对该病
的治疗缺乏较理想的方法。 根据祖国医学 “发时治标 , 平时治
本” “冬病夏治”的原则 ,采用中药穴位敷贴治疗具有高效 、价廉 、
方便 、无毒副作用等特点 , 已逐渐受到人们的关注 ,被广泛应用于
临床 , 但其作用机理尚需进一步研究。本实验通过观察哮喘模型
大鼠血清白细胞介素-4 (IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)及 IgE的含
量变化来探讨天灸防治支气管哮喘的作用机理。
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 7期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2007VOL.18NO.7