全 文 ：3.4　对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响　飞龙掌
血能抑制二甲苯诱发小鼠耳片的肿胀 ,与生理盐水
组比较差异有显著性(P <0.05 , P <0.01),结果见
表4 。
表 4　飞龙掌血对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响( x±s , n=10)
组别 剂量
g·kg -1
耳廓肿胀度
(mg)
肿胀抑制率
(%)
生理盐水 — 15.59±3.66 —
飞龙掌血 0.15 12.88±5.51 17.38
飞龙掌血 0.30 10.98±5.041) 29.57
飞龙掌血 0.60 10.33±4.621) 33.74
阿司匹林 0.30 9.08±4.572) 41.76
4　讨论
飞龙掌血是一种有待开发的新植物药 ,我们的
研究结果表明飞龙掌血水提物具有镇痛作用 ,能减
少冰醋酸所致小鼠扭体反应的次数 ,延长小鼠舔后
足潜伏期 ,提高小鼠的痛阈;同时具有抗炎作用 ,对
由角叉莱胶及二甲苯所致肿胀有明显抑制作用。药
理实验结果为进一步开发研究提供了依据。
[参考文献]
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复方黄根对小鼠免疫性肝损伤的保护作用
邓家刚＊ ,郑作文 ,王　勤 ,秦华珍 ,王　硕 ,周小雷
(广西中医学院 ,广西 南宁　530001)
　　[ 摘要] 　目的:研究复方黄根对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法:采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)造成免疫性肝损
伤动物模型 ,观察复方黄根对小鼠血清各(ALT)、(AST)活性及肝组织匀浆超氧化酶歧化酶(SOD)、(MDA)、谷胱甘肽过氧化物
酶(GSH-PX)水平的影响 , 并观察肝组织病理学改变。结果:复方黄根可明显降低小鼠血清中 ALT、AST 活性;减少肝匀浆 MDA
含量 ,并能使肝匀浆降低的 SOD、GSH-PX活性升高。结论:复方黄根有明显的保肝作用 , 其抗氧化保肝作用可能与抗脂质过氧
化有关。
[ 关键词] 　复方黄根;免疫性肝损伤;保肝;抗氧化
[ 中图分类号] 　R285.5　　[文献标识码] 　B　　[ 文章编号] 　1005-9903(2007)05-0037-03
Protective Effects of Compound Huanggen on Immunological Liver lnjury
DENGJia-gang＊ , ZHENG Zuo-wen ,WANGQin , Qin Hua-zhen ,WANGShuo , ZHOU Xiao-lei
(Guangxi Traditional Chinese Medical University , Nanning 530001 , China)
[ 收稿日期] 　2006-10-31
[ 基金项目] 　广西科技厅科技攻关资助项目桂科攻(0235023-1);桂科能(0630006-5A)
[ 通讯作者] 　＊邓家刚 , Tel:(0771)3943296;E-mail:dengjg@163.net
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.13 , No.5
May , 2007
DOI :10.13422/j.cnki.syf jx.2007.05.013
　　[ Abstract] 　Objective:To investigate the protective effect of Compound Huanggen on immunological liver injury in
mice.Method:The model of hepatic damage was induced by BCG+LPS.The ALT and AST level in serum and MDA ,
SOD ,GSH-PX activites in liver homogenate were assayed and dimensions of hepatic damage in the histopathology were
observed.Results:Compound Huanggen was found to significantly decrease the serum transaminase activities , Meanwhile
decreasedMDA content and inhilited SOD ,GSH-PX activities in liver homogenate.Conclusion:Compound Huanggen show
significant protective action on immunological liver injury in mice.
[ Key words] 　Compound Huanggen;immunological liver injury;hepatoprotection;antioxident activity
　　复方黄根是由黄根等药物组成的复方 ,具有清
热解毒 、益气护肝等作用。实验研究已表明复方黄
根对 2215 细胞分泌的乙型肝炎病毒表面抗原
(HBsAg)和乙型肝炎病毒 e 抗原(HBeAg)有抑制作
用[ 1] 。本研究采用卡介苗+脂多糖造成免疫性肝损
伤动物模型 ,观察复方黄根对小鼠免疫性肝损伤的
影响 ,为其临床应用提供实验依据。现将实验结果
报告如下 。
1　材料
1.1　动物　清洁级昆明小鼠 ,体重(24±2)g ,雌雄
各半 ,购于广西医科大学实验动物中心 ,许可证号:
SCXK桂 2003-0003
1.2　药品与试剂　复方黄根由黄根 、黄芪等药物组
成。制备工艺为药材经水提(分两次提 ,第 1 次 10
倍量水 ,第 2次 8 倍量水 ,合并提液 ,浓缩至比重约
1.05),醇沉(水提液∶95%乙醇=1∶2 ,醇沉24 h ,弃沉
淀 ,回收乙醇), 残液浓缩成浸膏(每 mL 相当生药
7.3 g ,低温储藏 ,用时用水稀释);卡介苗(BCG),中
国生物技术集团公司上海生物制品研究所生产 ,批
号:2004060501;大肠杆菌脂多糖(LPS),Sigma公司产
品;联苯双酯 ,广州星群(药业)股份有限公司生产 ,
批号 CF40033;谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶
(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱
甘肽过氧化物酶(GSH-PX)试剂盒均购自南京建成
生物工程研究所 。
1.3　仪器　CHEM300半自动生化分析仪(德国豪迈
克公司), LG16-W 离心机(北京医用离心机厂),
JY92-2D超声波细胞粉碎机(宁波新芝科器研究院),
Agilent 8453紫外可见分光光度计;高速低温离心机 ,
德国 Biofuge Stoucctos产。
2　方法
2.1　动物分组与造模[ 2] 　取昆明种小鼠 60只 ,雌
雄各半 , 按体重随机分组 , 设空白组(A)、模型组
(B)、阳性对照组即联苯双酯组(C)、复方黄根高剂
量(D)、复方黄根中剂量(E)、复方黄根低剂量组(F)
共 6个组 ,每组 10只 。除空白对照组外 ,其余 5 组
小鼠均尾静脉注射0.2mL 只BCG溶液(生理盐水配
制 ,约含 108 个活菌 mL),从尾静脉注射 BCG开始 ,
每天用联苯双酯 0.6 g kg ,复方黄根 26.0 g kg ,13.0
g kg和 6.5 g kg(剂量依据临床量折算)分别给 C ,D ,
E ,F 组灌胃 1次 , 20 mL kg ,正常组与模型组每天灌
服等体积的纯净水 ,连续 12 d。末次给药 1 h 后 ,经
尾静脉注射 7.5μg 只 LPS 生理盐水溶液 ,空白对照
组同法尾静脉注射等量的生理盐水 ,禁食(自由饮
水),10 h后经眼球后静脉丛取血 ,处死小鼠后 ,取肝
脏作有关检测。
2.2　检测指标及方法　常规分离血清 ,按试剂盒所
述方法测定血清中 ALT , AST(赖氏法)。取肝脏约
0.5 g ,用冰冷生理盐水漂洗 ,除去血液 ,滤纸拭干 ,称
重 ,在冰浴的平皿上剪碎 ,用生理盐水配成 10%肝组
织 ,用超声波细胞粉碎机匀浆 ,低温离心 ,按试剂盒
说明书所述方法用 Agilent 8453紫外可见分光光度
计测定肝匀浆中 SOD ,MDA , GSH-PX 活性。另取肝
左叶同一部位组织 ,10%甲醛固定 ,按常规方法制备
切片 ,在光镜下进行病理学检查 。
2.3　统计学处理　各项数据均以 x ±s 表示 ,组间
差异用 t 检验 。
3　结果
3.1　对免疫性肝损伤小鼠血清转氨酶的影响 　模
型组血清ALT ,AST 水平升高 ,与空白组相比较 , P <
0.01 ,说明模型建立成功;阳性组和复方黄根各剂量
组均能显著降低小鼠血清中升高的 ALT ,AST 活性 ,
与模型组比较有显著性差异(P <0.05 或 P <
0.01),见表 1。
3.2　对免疫性肝损伤小鼠肝匀浆 SOD ,MDA ,GSH-
PX水平的影响　模型组肝匀浆 MDA 水平升高 ,同
时 SOD ,GSH-PX水平降低 ,与空白组比较 P <0.01。
复方黄根各剂量组能显著降低小鼠肝匀浆 MDA 的
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Vol.13 , No.5
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水平 ,明显升高小鼠肝匀浆 SOD ,GSH-PX水平 ,与模
型组比较差异显著(P <0.05 , P<0.01),见表2。
3.3　小鼠肝脏病理组织学检查结果　病理形态学
观察结果显示 ,空白组肝小叶结构正常 ,无肿胀 ,无
明显水肿 、脂肪变性 ,肝小叶内及汇管区无炎细胞浸
润 、无纤维结缔组织增生;模型组肝小叶结构紊乱不
清 ,肝细胞明显肿胀 ,体积增大 ,广泛水肿变性及气
球样变性 ,小区出现肝细胞片状坏死伴多量炎细胞
浸润 ,汇管区大量炎细胞浸润及明显纤维结缔组织
增生 ,说明模型建立成功;联苯双酯组和复方黄根
高 、中剂量组均无明显坏死 ,高剂量组肝细胞稍有轻
微水肿外 ,大部分肝细胞结构正常 ,低剂量组肝细胞
仍见肿胀 ,大片水肿变性 、胞浆疏松 ,偶见气球样变
性 ,灶性坏死及炎细胞浸润。提示:复方黄根对免疫
性肝损伤有保护作用 。
表 1　复方黄根对免疫性肝损伤小鼠血清
ALT、AST的影响( x±s , n=10)
组别 剂量(g kg) ALT(U L) AST(U L)
空白组 — 39.1±6.02) 45.3±8.82)
模型组 — 66.6±7.5 88.9±18.1
联苯双酯组 0.6 45.1±8.62) 58.8±9.82)
复方黄根 26.0 50.9±4.82) 60.7±9.22)
复方黄根 13.0 51.5±3.22) 67.3±8.42)
复方黄根 6.5 58.3±5.51) 71.3±11.11)
　　注:与模型组比较:1)P<0.05 , 2)P<0.01。(下同)
表 2　复方黄根对免疫性肝损伤小鼠肝匀浆
SOD、MDA、GSH-PX的影响( x ±s , n=10)
组别 剂量(g kg)
SOD
(U mg·prot)
MDA
(nmol mg·prot)
GSH-PX
(U mg·prot)
空白组 — 168.7±13.02) 8.2±2.32) 227.7±27.12)
模型组 — 69.5±9.8 21.7±4.9 160.0±20.62)
联苯双酯组 0.6 133.6±12.62) 12.1±2.82) 214.4±14.52)
复方黄根 26.0 105.6±10.92) 14.9±4.62) 188.3±16.92)
复方黄根 13.0 96.1±10.02) 14.9±2.62) 187.0±19.02)
复方黄根 6.5 80.7±11.51) 16.2±4.91) 178.6±15.81)
4　讨论
中医学认为 ,病毒性乙型肝炎是在人体正气不
足基础上湿热疫毒侵于血分所致。湿热疫毒内侵是
首要因素 ,正气不足是慢性乙型肝炎发生发展的内
在基础 ,复方黄根是由具有广西特色的道地药材组
成的抗慢性乙型病毒性肝炎复方 ,由黄根 、黄芪等药
物组成的小处方 ,其中黄根为君药 ,味微苦 ,性平 ,功
能祛瘀生新 ,可缓解慢性乙型肝炎之经络瘀阻 ,现代
研究表明黄根具有护肝作用[ 3] ,黄芪味甘 ,性温 ,能
扶正固本 ,健脾化湿 ,鼓舞正气托毒外出 ,研究表明
其对 HBsAg , HBeAg 的分泌有不同程度的抑制作
用[ 4] 。
免疫性肝损伤动物模型 ,接近人肝炎发生的病
理过程 ,是筛选和研究保肝药物较为理想的模型之
一 ,预先给小鼠注射卡介苗可使多核中性粒细胞或
巨噬细胞聚集于肝 ,继而用低剂量大肠杆菌脂多糖
攻击注射 ,可激发这些细胞释放对肝细胞有毒性作
用的多种免疫效应分子(如自由基等),自由基的过
度释放 ,可导致肝细胞内脂质过氧化反应的发生 ,造
成脂质过氧化物的积累而损伤肝细胞 ,造成免疫性
肝损伤[ 2 , 5 , 6] 。
本实验结果显示:卡介苗与脂多糖联用可以引
起小鼠血清中 ALT ,AST 明显升高 ,肝组织可见散在
细胞变性坏死 ,造成免疫性肝损伤;该模型肝细胞浆
脂质过氧化产物MDA明显升高 ,提示肝细胞内脂质
过氧化是本模型的重要终末肝损伤机制之一;复方
黄根各剂量组能减轻模型鼠肝脏的病理损伤;高 、中
剂量能使血清中 ALT ,AST 活性向正常水平恢复 ,其
作用效果与联苯双酯组相近;能降低肝细胞浆
MDA ,升高肝损伤小鼠肝细胞浆内 SOD , GSH-PX 的
活性 ,抗肝细胞内脂质过氧化可能是其抗免疫性肝
损伤的重要机制之一 。
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