全 文 :Chin J Clin Pharmacol 163
Vol. 32 No. 2 January 2016(Serial No. 208)
赶黄草提取物对大鼠酒精性脂肪肝的影响
Effects of ethanol extract from Phethorum Chinese Pursh on the alcoholic fatty
liver in rats
收稿日期:2015 - 08 - 14
修回日期:2015 - 10 - 27
基金项目:四川省科技厅课题基金资助项目
(LY - 39)
作者简介:李国春(1975 - ),女,硕士,副主任
药师,主要从事临床药学研究
通信作者:黄新武,副教授,硕士生导师
MP:15881958999
E - mail:sc951374839@ 163. com
李国春1,黄新武2,尹加珍1,
邓谷霖1,唐 勇1
(1. 四川医科大学 附属中医医院 静脉用药调配
中心,四川 泸州 646000;2. 四川医科大学
药学院 药理教研室,四川 泸州 646000)
LI Guo - chun1,HUANG Xin - wu2,
YIN Jia - zhen1,DENG Gu - lin1,
TANG Yong1
(1. Pharmacy Intravenous Admixture
Service, Hospital Traditional Chinese
Medicine,Affiliated to Sichuan Medical
University, Luzhou 646000,Sichuan
Province, China; 2. Pharmacology
Teaching and Research Section,School
of Pharmacy, Sichuan Medical
University, Luzhou 646000, Sichuan
Province,China)
摘要:目的 比较不同体积分数乙醇提取赶黄草有效成分对大鼠酒精性脂肪肝
的影响。方法 用加铁高脂饮食并灌胃白酒制备大鼠酒精性脂肪肝模型;以硫
普罗宁(50 mg·kg -1·d -1)为对照,4 个不同浓度乙醇提取(35%,55%,75%,
95%)赶黄草实验组,按赶黄草原药材 3 g·kg -1·d -1(10 mL·kg -1)灌胃给药,
模型组和正常组灌胃等容量 0. 9%氯化钠,均灌胃 4 周;对肝进行病理学检查,
并检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆固醇(TC)、三酰甘油
(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL - C)的含量。结果 造模 6 周后,大鼠肝脂肪
变性明显。与模型组比较,赶黄草实验组大鼠肝脂肪变性明显改善,血清 TC、
TG及 LDL - C含量明显降低(P < 0. 05,P < 0. 01)。与 35%乙醇提取物组比较,
75%,95%乙醇提取物组的 AST、TC、TG 及 LDL - C 含量明显降低(P < 0. 05,
P < 0. 01)。结论 不同体积分数乙醇提取赶黄草对大鼠酒精性脂肪肝有治疗作
用,其中 75%,95%提取物组治疗效果更佳。
关键词:赶黄草;乙醇提取物;酒精性脂肪肝
DOI:10. 13699 / j. cnki. 1001 - 6821. 2016. 02. 022
中图分类号:R285. 5;R972. 6 文献标志码:A
文章编号:1001 - 6821(2016)02 - 0163 - 03
Abstract:Objective To compare alcoholic fatty liver effects of different
volume fraction of ethanol extracts from Penthorum Chinese Pursh
(EPCP)in rats. Methods Rat models of alcoholic fatty liver were in-
duced by intragastric administration of alcohol and breeding provender
with FeSO4. Meanwhile,the rats were treated with tiopronin (50
mg·kg -1·d -1,for 4 weeks),different volume fraction (35%,55%,
75%,95%,3 g·kg -1·d -1,10 mL· kg -1)of ethanol EPCP for 4
weeks. The histopathological changes in the liver were determined. The
serum levels of alanine aminotransferase(ALT),aspartate aminotrans-
ferase(AST) ,total cholesterol(TC) ,triglyceride(TG)and low - density
and lipoprotein cholesterol(LDL - C)were determined. Results Rat
models of alcoholic fatty liver were induced successfully after 6 weeks
intragastric administration of alcoho1. Compared to the model group,the
steatosis states of liver in EPCP group were improved,while the serum
TC,TG and LDL - C levels decreased significantly (P < 0. 05,
P < 0. 01). Compared to the 35% EPCP group,the serum AST,TC,TG
and LDL - C levels of 75% and 95% ethanol EPCP group decreased
significantly (P < 0. 05,P < 0. 01). Conclusion Both the different
volume fraction of EPCP can prevent alcoholic fatty liver,the 75%,95%
EPCP groups have better effect on alcoholic fatty liver.
164 中 国 临 床 药 理 学 杂 志
第 32 卷 第 2 期 2016 年 1 月(总第 208 期)
Key words:Penthorum Chinese Pursh;ethanol extract;alcoholic fatty liver
酒精性脂肪肝(alcoholic fatty liver,AFL)是因酒
精及其代谢产物对肝细胞的毒性作用所发生的肝损
害,其是造成我国慢性脂肪肝发病的首要原因,迄今
尚无防治该病的特效药物。赶黄草性平,味苦,略辛,
主要用于各型肝炎、胆囊炎及脂肪肝等的治疗[1]。关
于其化学成分的提取及其治疗酒精性脂肪肝乙醇提
取加工方法的筛选对比研究尚未见报道。本实验通
过建立大鼠酒精性脂肪肝模型,比较赶黄草不同浓度
乙醇提取物对大鼠酒精性脂肪肝的作用。
材料和方法
1 材料
动物 雌性 SD 大鼠,体重 180 ~ 120 g,鼠龄 4
周,由四川医科大学动物科提供。实验动物许可证
号:SYXK(川)2009 - 121。
药品与试剂 赶黄草,批号:130606 - 1,购于四
川省泸州市百草堂中药饮片有限公司;硫普罗宁,规
格:每片 0. 1 g,批号:130203,河南新谊药业生产。硫
酸亚铁(分析纯),成都市科龙化工试剂厂生产。
仪器 DM750 显微镜,德国徕卡产品。
2 方法
2. 1 赶黄草有效成分提取
提取赶黄草 2 kg共 4 份,分次置于 2 L圆底烧瓶
中,然后加入适量不同体积分数(35%,55%,75%,
95%)赶黄草乙醇浸泡 30 min 后,保温 100 ℃回流提
取 2 h。过滤除药渣,浓缩药液并真空干燥。
2. 2 酒精性脂肪肝大鼠模型制备[2]
每天给予雌性 SD 大鼠高脂加铁饲料,灌胃加糖
酒精饮料,制备酒精性脂肪肝模型。
2. 3 分组和给药方法
将制模成功的 54 只大鼠按照体重随机分为 6 组,
每组 9 只。分别为 4 个不同体积分数(35%,55%,
75%,95%)乙醇提取赶黄草实验组、硫普罗宁组及模型
组,未经任何处理的 10只大鼠作为正常组。其中,4 个
不同体积分数赶黄草实验组按赶黄草原药材
3 g·kg -1·d -1,硫普罗宁组按 50 mg·kg -1·d -1,按
容量为 10 mL·kg -1进行灌胃给药,模型组和正常组
以等容量 0. 9%氯化钠代替,均灌胃 4 周。
2. 4 标本处理及指标检测
在末次给药后,称重,腹腔注射 0. 3%异戊巴比妥
钠(10 μL·g -1)麻醉,腹主动脉采血,进行血清中谷草
转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆固醇(TC)、三
酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL - C)等生化指
标检测;迅速取出肝称重;用 4%多聚甲醛固定肝,石蜡
常规包埋、切片,经 HE染色,观察肝组织病理变化。
3 统计学处理
用 SPSS18. 0 统计软件进行数据分析,计量资料
用 珋x ± s 表示,用单因素方差分析后,再用 LSD 法
检验。
结 果
1 各组大鼠肝形态学改变
HE染色显示,光镜下可见,模型组,大鼠肝细胞
肿胀,脂滴弥漫,炎细胞浸润,表现为肝细胞内有大小
不等呈索状排列,可见数量不一的圆形或类圆形脂滴
空泡融合现象,尤以中央静脉区较为严重,重者细胞
肿大呈气球样变。空白组,结构完整,细胞清晰,呈多
边形,界限清楚,胞浆丰富,核质对比明显。赶黄草各
实验组,脂肪变性程度有所减轻,其中体积分数 75%,
95%赶黄草实验组的动物未见脂变细胞,见图 1。
图 1 HE染色后几组大鼠的肝组织改变 (× 200)
Figure 1 Change of rats liver tissue section with HE staining in different groups(× 200)
Chin J Clin Pharmacol 165
Vol. 32 No. 2 January 2016(Serial No. 208)
表 1 不同体积分数的赶黄草实验组对酒精性脂肪肝血清生化指标的影响(珋x ± s)
Table 1 Effects of alcoholic fatty liver serum biochemical indexes in difference volume fraction Phethorum Chinese Pursh groups(珋x ± s)
Group n TG(mmol·L -1) TC(mmol·L -1) LDL - C(mmol·L -1) AST(U·L -1) ALT(U·L -1)
Normal 10 0. 97 ± 0. 48※ 1. 22 ± 0. 13※ 0. 21 ± 0. 05※ 83. 06 ± 9. 07※ 38. 41 ± 4. 00※
Model 9 7. 08 ± 2. 72※ 21. 36 ± 4. 28※ 18. 13 ± 4. 42※ 119. 56 ± 16. 96※ 57. 9 ± 3. 94
Tiopronin 8 0. 84 ± 0. 47※ 1. 46 ± 0. 47※ 0. 25 ± 0. 06※ 103. 93 ± 10. 06※ 42. 66 ± 8. 86※
35% Ethanol extract 8 1. 80 ± 0. 33※ 3. 07 ± 1. 22※ 0. 95 ± 0. 61※ 101. 80 ± 26. 53 50. 19 ± 14. 53
55% Ethanol extract 8 2. 49 ± 1. 18※ 4. 84 ± 2. 45※ 1. 31 ± 0. 86※ 104. 46 ± 15. 46 50. 52 ± 7. 62
75% Ethanol extract 9 0. 83 ± 0. 42※* 1. 65 ± 0. 80※* 0. 48 ± 0. 34※* 94. 79 ± 11. 93※* 49. 51 ± 4. 89
95% Ethanol extract 9 0. 87 ± 0. 31※* 2. 27 ± 1. 15※* 0. 78 ± 0. 58※* 94. 04 ± 9. 05※* 51. 02 ± 7. 87
TG:Triglyceride;TC:Total cholesterol;LDL - C:Low - density and lipoprotein cholesterol;AST:Aspartate aminotransferase;ALT:Alanine aminotransferase;
vs model group,※P < 0. 01;vs 35% ethanol extract group,* P < 0. 01
2 赶黄草各治疗组对酒精性脂肪肝血清生化指标的
影响
与模型组比较,正常组及各实验组的血清 TC、
TG、LDL - C 含量明显降低,其中体积分数为 75%,
95%赶黄草实验组 AST含量明显降低;正常组和硫普
罗宁组的 ALT 含量明显降低;与 35%实验组比较,
75%,95%实验组 AST、TC、TG、LDL - C 含量明显降
低;与硫普罗宁组比较,75%,95%赶黄草实验组的
TC、TG、LDL - C含量无明显差异,见表 1。
讨 论
急性酒精性脂肪肝动物模型的制备方法有很
多,常见有典型的 Lieber - Decarli 模型、Tsukamoto
- French 模型,以及通过生理诱导途径诱导大鼠酒
精性脂肪肝模型等多种制备模型方法[3]。肝是储
铁的主要部位,也是铁诱导损伤的靶器官。酒精性
脂肪肝时肝铁含量增加,肝铁可进一步增强肝组织
和肝细胞的脂质过氧化损伤,从而加重脂肪肝[4]。
赶黄草作为保肝、护肝药物已在临床上使用,赶黄
草中槲皮素和没食子酸具有抗乙肝病毒和保肝作
用,是其有效成分,因此槲皮素和没食子酸含量的
高低成为赶黄草加工利用的质量考核指标。目前,
赶黄草常用的提取方法有水提取法、0. 04%氢氧化
钠溶液提取法和乙醇提取法,尚无合适浓度乙醇的
乙醇提取报道。
本实验结果显示,给予不同体积分数的赶黄草乙
醇提取物治疗后,大鼠肝形态学脂肪肝明显好转,各
生化指标显著改善,其中体积分数为 75%,95%的乙
醇赶黄草提取物对大鼠酒精性脂肪肝的干预作用明
显优于其他体积分数乙醇赶黄草提取物。
参考文献:
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(本文编辑 权菊香)