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　基金项目:四川省教育厅重点课题基金(编号:07ZA041)
赶黄草超微粉与粗粉总黄酮溶出率比较
何　颖 , 朱　烨 , 税丕先
(泸州医学院药学院 , 四川 泸州 646000)
　　摘　要:目的:比较赶黄草超微粉与粗粉总黄酮含量高
低。方法:50%乙醇超声提取后 , 采用紫外分光光度法 , 检测
波长 510nm , 测定赶黄草超微粉和粗粉总黄酮含量。结果:超
微粉总黄酮含量高于粗粉 44.31%。结论:微粉化技术能提高
赶黄草中总黄酮的溶出率。
关键词:赶黄草;总黄酮;紫外分光光度计;粗粉;超微粉
中图分类号:R927.2 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2009)09-0055-02
赶黄草学名扯根菜 , 属虎儿草科植物赶黄草(Penthorum
chinense Pursh)的地上部分 , 始载于明代《救荒本草》 , 具有退
黄疸化湿热之功效 ,在苗族民间有上千年的用药史 , 是治疗肝
病的著名经验方 , 苗族世代沿用 , 流传至今 , 称之为“神仙草” 。
据《天宝本草》 、《救荒本草》等记载 , 赶黄草具有通络活血 、祛
瘀除湿 ,保肝利胆等作用。现代药理实验证实 , 利用 CCl4 诱
导小鼠急性肝损伤动物模型 , 观察模型小鼠血清及肝组织匀
浆中肿瘤坏死因子(TNFα)、前列腺素(PGE2)及肝脏病理变
化 ,结果表明 , 模型组肝组织明显受损 , 丙氨酸氨基转移酶
(ALT)与肿瘤坏死因子(TNFα)显著增高。赶黄草可以提高
PGE2 水平 , 抑制 TNFα产生。赶黄草的主要化学成分为黄酮
类及鞣质 , 其中黄酮类槲皮素(que rce tin), 鞣质没食子酸
(gullicacid)为已知具有抗乙肝病毒和保肝的作用的有效成
分[ 1] 。超微粉碎是近年应用于制药工业的新型粉碎技术 , 它
是将植物药材的细胞壁 、动物药材的细胞膜打破而使有效成
分直接与溶媒接触溶出 ,这样可节约资源 , 最大限度提高药材
的生物利用度。作者采用紫外分光光度法比较了赶黄草超微
粉与粗粉总黄酮含量的高低 , 为选择赶黄草的粉粹粒径提供
了理论基础。
1　材料及仪器
1.1　材料
1.1.1　药材来源　赶黄草 , 采于泸州市古蔺县小水乡 , 经泸
州医学院药学院生药教研室鉴定 , 来源于虎儿草科植物赶黄
草(Penthorum chinense Pur sh)的地上部分;赶黄草粗粉由人
工辗碎过二号筛制备;赶黄草超微粉委托泸州百草堂中药饮
片有限公司加工制备 ,经该公司检测细胞破壁率在 95%以上 ,
符合超微粉质量标准。
1.1.2　试剂　芦丁对照品(中国药品生物制品检定所 , 批号
080-9303);其余试剂为分析纯;水为重蒸馏水。
1.2　仪器　超声波清洗器(天津奥特赛恩思仪器有限公司 ,
AS3120A);UV-2100 双光束紫外可见分光光度计(北京瑞
利);电子天平(上海民桥精密仪器有限公司 , FA1104N);电热
真空干燥机(上海实验仪器厂 , ZK-72)。
2　方法与结果
2.1　溶液的配制
2.1.1　供试品溶液的制备　精密称取一定量的干燥超微粉
于烧杯中(120℃干燥至恒重), 按 20∶1(g ∶g)的比例加入
50%乙醇 ,搅匀后密封静置 4h , 再超声提取 2 次 , 每次 40min ,
过滤 ,合并滤液 , 密封备用[ 2] 。
2.1.2　芦丁对照品溶液的制备　称取 5.2 mg 芦丁对照品 ,
用 50%乙醇溶解 , 定容于 25m L 容量瓶里 , 得浓度为 0.208
g/ L 。
2.2　标准曲线绘制　分别取 6 份标准液 0.0mL 、0.5m L、
1.0m L、2.0mL 、3.0m L、4.0mL 、于 6 支 10.0m L离心管中 , 另
取一支对照管 , 分别加入 5%亚硝酸钠 0.3m L , 摇匀后放置
6min , 加入 10%硝酸铝溶液 0.3mL , 摇匀后放置 6min ,再加入
1.0mo l/ L NaOH 溶液 4m L ,摇匀后放置 6min , 用 50%乙醇稀
释至 10mL 的刻度线 , 放置 15min 后用紫外分光光度计在波
长 510nm 处测定吸光度 A , 测得吸光度分别为 0 、0.1345、
0.257、0.5171、0.7712 、0.9945。以吸光度 A 为纵坐标 , 浓度
C 为横坐标 ,绘制标准吸收曲线 , 用最小二乘法线性回归 , 得
芦丁浓度 C 与吸光度 A 的关系曲线的回归方程式:A =
12.6310C+0.00003 , R=0.9993。结果见图 1。
图 1　芦丁的标准曲线
2.3　方法学考察
2.3.1　精密度试验　取超微粉供试品溶液 1m L 置于 50mL
具塞试管中 ,照“ 2.2”项下的方法 ,连续在 510nm 处进样 5 次
测定吸光度(A)。 A 平均值为 0.782 , RSD=0.256%。表明
该仪器的精密度良好。
552009 年第 30 卷第 9 期　　　　　　　　　　云 南 中 医 中 药 杂志DOI :10.16254/j.cnki.53-1120/r.2009.09.042
2.3.1　重复性实验　精密称取 5 份超微粉 , 按“ 2.1.1”提取 ,
测定其吸光度 ,得到的结果按公式 S = ∑(Xi-W) /(n-1)
(n 为测定次数 , Xi为各测定值 , W 为 n 次测定平均值)RSD
(%)=s/w ×100%[ 3] , 计算得 RSD=1.48%, 表明重复性
良好。
2.3.2　稳定性实验　取 0.1mL 超微粉滤液 , 按含量测定的
方法进行吸光度测定 , 每隔 10min、20min、 30min 、40min 、
50min、60min 测量 1 次 , RSD=1.94%, 表明在 1h 之内含量
稳定。
2.3.3　回收率测定　精密取得 5 份已知含量的超微粉滤液 ,
各加入芦丁对照品适量分别按“2.2”项下的方法处理后 , 进行
测定并计算回收率 , RSD 为 1.899%。结果见表 1。
表 1　回收率测定结果(n=9)
序号 样品量 加入对照品量 测得量 回收率 平均回收率 RSD(mg) (mg) (mg) (%) (%) (%)
1 0.3804 0.0208 0.4022 105
2 0.3527 0.0208 0.3725 95
3 0.3798 0.0208 0.4006 100 99.0 1.899
4 0.3689 0.0208 0.3897 100
5 0.3773 0.0208 0.3971 95
2.4　含量测定
2.4.1　超微粉含量测定　称取 5 份超微粉 , 按“ 2.1.1”制备
供试品滤液 , 分别从 5 份滤液中取 0.1m L 滤液放入 5 支
10mL离心管 , 另取一支对照管 , 按照“ 2.2”标准曲线绘制项下
的方法进行含量测定。结果见表 2。
表 2　超微粉测定结果(n=5)
试验号 重量(g)滤液体积(mL)吸光度 含量(%)平均含量(%)
1 2.0001 44 0.4346 7.728
2 2.0007 41 0.4677 7.796
3 1.9996 41 0.4640 7.737 7.767
4 1.9996 42 0.4670 7.798
5 2.0000 42 0.4540 7.748
2.4.2　粗粉含量测定　精密称取 5 份赶黄草粗粉 , 分别按
“ 2.1.1”提取和按“2.2”标准曲线绘制项下的方法进行含量测
定。结果见表 3。
表 3　粗粉测定结果(n=5)
编号 重量(g) 吸光度 总黄酮含量(%)平均含量(%)RSD(%)
1 2.0006 0.4133 5.44
2 2.0002 0.4109 5.41
3 2.0000 0.4091 5.38 5.382 0.97
4 1.9998 0.4085 5.38
5 1.9998 0.4027 5.30
　　结果表明 ,赶黄草超微粉总黄酮含量高于粗粉 44.31%。
3　讨论
3.1　提取溶剂选择　赶黄草的有效成分为挥发油和总黄
酮[4] ,一般用 50%～ 70%乙醇提取 ,能最大限度地提取出赶黄
草中总黄酮量 ,有效抑制无效成分或有害物质的溶出 , 降低了
水解反应 ,增强了总黄酮的稳定性[ 5] 。实验用 50%的乙醇提
取符合理论要求。
3.2　显色原理　先用亚硝酸钠还原黄酮 , 硝酸铝与含有特殊
基团的黄酮生成络合物显黄色 , 在 NaOH 碱液中 , 二氢黄酮类
开环后转变成相应的异构体-查耳酮类化合物呈橙-黄
色[6] 。它的显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二
酚羟基部位。
3.3　微粉化技术使赶黄草总黄酮溶解度增大的原理分析　
超微粉因粒子细小 , 细胞壁被破坏 , 亦直接影响到成分的释
放。药物的微粉化可以改善颗粒的润湿性 , 进而提高水不溶
性药物的溶解度和溶解速率 , 中药微粉化后 ,药物粒子细微均
匀 ,比表面积增加 ,孔隙率增大[ 7] , 成分的溶出度增加 , 该实验
为微化技术增加难溶性药物的溶出提供了实验数据。
参考文献:
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2002 , 25(4):46～ 47.
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[ 4] 冯长根 ,汪洪武 ,任启生.赶黄草挥发油化学成分的气相色谱质谱
分析[ J] .中国药学杂志 , 2003, 38(5):340～ 341.
[ 5] 张兆旺.中药药剂学[ M] .北京:中国中医药出版社 , 2003:61.
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1988:181～ 184.
[ 7] 李梅.中药微粉化的研究进展 [ J] .中国药业 , 2006 , 15(19):
62～ 63.
(收稿日期:2009-03-16)
(上接第 54 页)验法 , 但又考虑到挥发油的提取试验次数不是
很多 ,况且单因素筛选法设计全面 ,数据可靠 , 结果可比性强 ,
能分析出事物的内在规律 , 故最终确定本方挥发油的提取采
用单因素筛选法。
在实验中还发现转速对挥发油的包合有一定的影响 , 因
此采用了单因素筛选搅拌速度 , 最终确定以 400r/ min 的转速
对挥发油进行包合。
参考文献:
[ 1] 谢秀琼 ,詹珂 ,尹蓉莉 ,等.川芎挥发油的研究进展[ J] .时珍国医国
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(收稿日期:2009-03-30)
56 云 南 中 医 中 药 杂 志　　　　　　　　　　2009 年第 30 卷第 9 期
Yunnan Journal of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica
Vol.30.N o.9 (General No.195) September , 2009
Main Content
Comparative Study on the Determination of Flavonoids Contents of Ultrafine Powder and Coarse Powder
of Penthorum chinense Pursh
　　 HE Ying , ZHU Ye ,SHUI Pi-x ian⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Determination of Emodin and Chrysophanol in Jinyingdanshu Granules by HPLC
　　 SUN Yu-song ,ZHU Zheng-yu⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Determination of Strychnine in Zhuanggujianxi Granules by HPLC
　　 MI Xiao-lan⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Determination of Chlorogenic Acid in Syrup for Cold and Cough by RP-HPLC
　　 WANG Yan-ping ,QI Zhao-zhong ,WEI Shu-fang⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Comparative Study on the Determination of Flavonoids Contents of Ultrafine Powder and Coarse Powder
of Penthorum chinense Pursh
HE Ying ,ZHU Ye ,SHUI Pi-xian
(School o f Pharmacy , Luzhou Medical Co llege , Luzhou ,Sichuan , 646000)
Abstract:Objective:To com pare the to tal flavonoids contents o f ultrafine powder and coarse pow der of Penthorum chinense
Pursh.M ethods:UV spectropho tometry was used to detect waveleng th 510nm and detrmine the the flavonoids contents of
Penthorum ultrafine powder and coarse powder afte r 50%e thanol of ultrasonic ex traction.Results:The flavonoids contents of the
untrafine pow der a re 44.31%higher than that of the coarse pow der.Conclusion:Micronization techno logy can raise the ext raction
rate of the flavonoids in Penthorum.
Key words:Penthorum chinense Pursh;flavono ids;ulthaviolet spectrometry;coarse pow der;ultrafine pow der
Determination of Emodin and Chrysophanol in Jinyingdanshu Granules by HPLC
SUN Yu-song ,ZHU Zheng-yu
(Jianing Hospital of Laian County , Laian ,Anhui , 239200)
Abstract:Objectives:To establish a method for the determination of emodin and chrysophanol in Jinyingdanshu Granules by
HPLC.Method:The column was Shim Pack C18 and the mobile phase was melhanol 0.1% phosphate acid (80:20), w ith the
detecting w aveleng th at 254 nm.Result:The recovery rate of Emodin w as 99.63%, RSD =0.79% w hile the recovery rate of
Chrysophanol was 98.10%,RSD=2.04%.Conclusion:The method is simple and quick with good reappaerance , and can be used fo r
the quantita tive analysis of Em odin and Chrysophano l.
Key words:Jiny ingdanshu Granules;Emodin;Chrysophanol;HPLC
Determination of Strychnine in Zhuanggujianxi Granules by HPLC
MI Xiao-lan
(Tianjin Mesozoic Emulsion Co., Ltd , Tianjin , 300308)
Abstract:Objective:To establish a simple and rapid method for the de te rmination of strychnine in Zhuanggujianxi g ranules by
HPLC.Methods:Chromatog raphic co lumn w as Kromasil C18 and the mobile phasa was methanol-1%g lacial acetic acid so lution and
trie thy lamin(23:77:0.4), with the flow rate a t 1.0 ml/min at the room tempraraure and the detection w avelength at 260nm.
Results:The method showed a good linear re lationship a t the range of 30.5 ～ 122.0μg/ml fo r strychnine A =21029C-15759(r=0.
9998 , n=5).The recovery rate w as 101.7%;RSD w as 0.67%.Conclusion:The method is simple ,sensitive and accurate with good
reapearance and can be used to control the quality o f Zhuanggujianx i g ranules.
Key words:Zhuanggujianxi granules;strychnine;HPLC;content detrmina tion
Determination of Chlorogenic Acid in Syrup for Cold and Cough by RP-HPLC
WANG Yan-ping ,QI Zhao-zhong ,WEI Shu-fang
(Puer Institute of Food and Drug Inspection ,Puer ,Yunnan , 665000)
Abstract:Objectives:To establish a method for the de te rmination o f chlo rogenic acid in Syrup fo r Cold and Cough by HPLC.
Methods:HPLC was used to determine the chlo rogenic acid.The colum n was Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 (150mm ×4.
6mm ,5μm).The mobile phase w as methano l-w ater-acetic acid glacial(20:80:1).The flow rate was 1.0m l·min-1 .The detection
waveleng th was at 327 nm.Results:The chlorogenic acid showed a good linear relationship at the range of 0.077-0.387mg ·ml-1
(r=0.999 9),and the average recovery ra te w as 99.8%(n=6)(RSD%=0.34%).Conclusion:The method is simple , sensitive and
accurate , and can be used to contro l the quality of Syrup for Cold and Cough.
KeyWords:RP-HPLC;Syrup fo r Cold and Cough;chlorogenic acid;determina tion