全 文 ：零陵香为报春花科珍珠菜属植物灵香草的地上干
燥部分，又名香草、蕙草、广零陵香、熏草,产于广
西、云南、四川等地[1,2]。香豆素（coumarin） 来源于
零陵香豆（coumarou），1820年Vogel从圭亚那的零
陵香豆（黄香草木樨） 中首次获得天然香豆素[3]。香
豆素及其衍生物具有苯并 α -吡喃酮结构[4,5]。
香豆素类化合物因具有芳香气味,能给消费者传
递愉悦的嗅觉感受，因此可以作为除臭剂和定香剂使
用。此类化合物具有抗肿瘤、抗人类免疫缺陷病毒、
抗氧化、抗炎、抗微生物、抗凝血等多方面的生物
活性[6]。
莱雅公司在中国专利CN101095650中公开了香
豆素及其衍生物治疗灰发症上的用途，以及含香豆素
及其衍生物的化妆品用于改善头发美观程度[7]；CN
103767889公开了含有香豆素的中药丁柠玫花露水[8]；
联合利华公司在中国专利CN1688287 中公开了香豆
素衍生物在亮肤剂中的应用[9]。
香豆素及其衍生物通常以提取物的形式应用到日
化产品中。零陵香提取物（Lysimachiafoenum-gracum
Hanceextract） 是一种常见的日化原料，笔者建立了
高效液相色谱测定零陵香提取物中香豆素含量的方
法，为有效监控零陵香提取物的品质提供理论依据。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
Agilent1260高效液相色谱仪（带DAD检测器），
（chemstation化学工作站）；过滤膜：孔径0.45μm。
乙腈：色谱纯；香豆素标准品：阿拉丁试剂，已知质
量分数≥99.7％；乙醇：分析纯。
1.2 色谱条件
色谱柱：ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 m ，
5μm)；柱温：35℃；流动相：V（乙腈）∶V（超纯
水）＝45∶55；流速：1.0mL/min；检测波长：275nm；
参比波长：360nm；进样量：5μL。
1.3 溶液配制
标准溶液：准确称取香豆素标准品0.01g（精确
至0.0001g） 于10mL容量瓶中，加适量乙醇超声溶
解，冷却至室温后用乙醇定容至刻度，然后分别移取
0.1，0.2，0.4，0.8和1.6mL于10mL容量瓶中，用
乙醇定容至刻度制得系列标准溶液，备用。
2 结果与讨论
2.1 流动相的选择
流动相中乙腈与超纯水的比例对零陵香提取物中
香豆素与杂质的分离有较大影响。实验发现，当乙腈
体积分数大于60%，目标物香豆素的出峰会包含提
取物的其他活性成分；当乙腈体积分数小于 40%，
香豆素出峰太晚，影响检测效率。因此选择乙腈体积
分数在45%，此时香豆素与提取物中其他成分可以
达到完全分离，且在10min内完全出峰，因此选择
流动相组成为 V（乙腈）∶ V（超纯水） =45∶55，此
时香豆素出峰时间为5.3min。
收稿日期：2015-05-29
作者简介：黄 亮（1980-），男，广州人，工程师。
高效液相色谱法测定零陵香提取物中香豆素的含量
黄 亮，鹿桂乾，陈玉娥，张利萍
（广州立白企业集团有限公司 创新研发中心，广东 广州 510170）
摘要：研究了高效液相色谱测定零陵香提取物中香豆素含量的方法，选定的分析条件为：ZORBAXSB-C18
（4.6mm×250mm,5μm）；柱温35℃；流动相为 V（乙腈）∶V（超纯水） ＝45∶55；流速1.0mL/min；检
测波长275nm。标准曲线的回归方程为 y=19907.19x+7.04，R2=1.00，相对平均偏差为0.6222%，回收率
为101.26%~103.10%。
关键词：零陵香提取物；香豆素；高效液相色谱
中图分类号：TQ658 文献标识码：A 文章编号：1006-7264（2015）08-0027-02
DOI：10.13222/j.cnki.dc.2015.08.008
日用化学品科学
DETERGENT ＆ COSMETICS
第 38卷第 8期
2015年 8月
Vol．38 No．8
Aug. 2015
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日用化学品科学 第 38卷
（下转第 35页）
图 2 香豆素标准曲线
Fig.2 Standard curve of coumarin
2.2 检测波长的选择
对香豆素标准溶液在紫外-可见光（190～800 nm）
进行扫描分析，发现该化合物在212和275nm附近
都有较大吸收。考虑到过低的波长会造成较大的基线
漂移，影响定量的准确性，且在212nm处很多物质
都有一定吸收，容易引入干扰，因此选择275nm为
检测波长。
2.3 香豆素色谱图
按1.2色谱条件得到香豆素标准品及零陵香提取
物色谱图（见图1）。由图1可以看出，在选定的色
谱条件下，香豆素出峰时间为5.3 min，与其他活性
物出峰完全分离，满足分析要求；同时出峰较快，可
兼顾分析效率。
2.4 标准曲线
将配制好的系列标准溶液分别进样5μL，按1.2
色谱条件分析，得到标准曲线见图2。
2.5 方法精密度
准确称取2.00g（精确到0.0001g） 零陵香提取
物样品3份于10mL容量瓶中，加入乙醇定容至刻
度，用过滤膜过滤后在上述色谱条件下进样测试，同
一样品平行测试2次，共测试6次，实验数据见表
1。由表1可知，相对平均偏差在1%以下。
2.6 样品加标回收率
准确称取2.00g（精确到0.0001g） 零陵香提取
物样品 3 份于 10 mL 容量瓶中。3 份样品各自加入
高、中、低浓度的标准品，分别加入乙醇定容至刻
度，用0.45μm滤膜过滤后进行测试。同一浓度样品
平行测试2次，共测试6次。实验结果见表2。由表
2 可知，零陵香提取物中香豆素的加标回收率为
101.26%~103.10%，满足测试的要求。
3 结论
实验结果表明，该方法简便、快速、准确、重现
性好，对监控零陵香提取物中活性成分香豆素的含
量、提升产品质量有一定意义。
图 1 香豆素标准品及零陵香提取物样品色谱图
Fig.1 Chromatogram of coumarin and Lysimachia
foenum-gracum Hance extract
表 1 精密度测试 (n=6)
Tab.1 Relative standard deviation (n=6)
序号 称样量/g 保留时间/min 含量/（mg·g-1） 相对平均偏差/%
1 1.9802 5.304 0.1605
2 1.9802 5.320 0.1607
3 2.024 5.327 0.1588
4 2.024 5.332 0.1596
5 2.035 5.325 0.1611
6 2.035 5.333 0.1588
0.6222
表 2 香豆素回收率测试（n=6）
Tab.2 Recovery of coumarin（n=6）
序号
提取物中香豆
素含量/mg
加入量
/mg
保留时
间/min
总含量
/mg
加标测试
含量/mg
回收率
/%
1 0.3203 0.1590 5.309 0.4819 0.1616 101.64
2 0.3203 0.1590 5.311 0.4813 0.1610 101.26
3 0.3207 0.3181 5.310 0.6479 0.3272 102.86
4 0.3207 0.3181 5.312 0.6449 0.3242 101.91
5 0.3237 0.4769 5.311 0.8154 0.4917 103.10
6 0.3237 0.4769 5.312 0.8151 0.4914 103.04
科技广场
·28·
第 8期
（上接第 28页）
参考文献：
[1]江苏新医学院.中药大辞典：下册[M].上海:上海人民出版
社,1977:2470-2472.
[2]李向日,林瑞超.不同产地零陵香挥发油成分的GC-MS分析
[J].中成药,2007,29(6):853-858.
[3]张新乐.香豆素衍生物的合成及其生物活性研究[D].郑州：
郑州大学,2012.
[4]黄劲梅.消脱痔及零陵香浸膏中香豆素含量测定方法比较研
究[J].中药新药与临床药理,1997,8(1):36-37.
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[J].医药导报,2010,29(4):498-501.
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[9]荷兰联合利华公司.包含衍生自间苯二酚衍生物的香豆素的
亮肤剂:CN,1688287[P].2005-10-26.
Determination of coumarin in Lysimachia foenum-gracum Hance extract by HPLC
HUANG Liang, LU Gui-qian, CHEN Yu-e, ZHANG Li-ping
(Analysis&Evaluation Research Department, Guangzhou Liby Enterprise Group Co., Ltd. , Guangzhou，
Guangdong 510170, China)
Abstract: Highperformanceliquidchromatography(HPLC)wasdevelopedtodeterminecoumarininLysimachiafoenum-gracumHanceextract.
TheHPLCanalysewasperformedonZORBAXSB-C18(5μm,4.6mm×250mm)column，andthecolumntemperaturewas35℃.Themobile
phasewasCH3CN/H2O(V(CH3CN)∶V(H2O)=45∶55),withaflowrateof1.0mL/min.ThewavelengthofUVdetectorwassetto275 nm. The
regressionequationofstandardcurvewasy =19907.19x+7.04withR2=1.00,relativemeandeviation0.6222% and the recovery 101.26%~
103.10%.
Key words: Lysimachiafoenum-gracumHanceextract；coumarin; HPLC
发提供基本的思路与方法。
2） 牙膏原料技术理论：以各原料的理化性能、
安全性能、工业化生产、应用性能、质量控制为主要
内容，为牙膏原料的采购、牙膏新原料的开发与应用
提供技术支持。
3） 牙膏包装技术理论：包括牙膏包装材料的性
能、生产工艺、质量控制及工业设计、商标管理、品
牌战略、标识规范等内容，为牙膏包装材料的采购、
牙膏新包装的设计开发提供技术支持。
4） 牙膏工艺技术理论：以制膏工艺、灌装工艺、
包装工艺、水处理工艺、自动化控制5个部分为主要
内容，通过对牙膏生产每一个环节的详细分析，为牙
膏生产管理与过程控制提供科学的理论依据。
5） 牙膏设备技术理论：以制膏设备、灌装设备、
包装设备、水处理设备、自动化控制设备、公用工程
设备6个部分为主要内容，通过对牙膏生产每一类设
备的详细分析，为牙膏生产设备的技术开发、操作使
用提供基础知识和技术支持。
6） 牙膏质量检验技术理论：以牙膏原料和成品
各类指标分析的基本原理与检验方法为主要内容，为
牙膏质量的全面评价提供科学的手段。
7） 牙膏的安全性和功效评价理论：以牙膏的安
全性毒理学评审、功效的临床试验为主要内容，提供
客观科学的评价方法。
8） 牙膏工程技术理论：分为项目可行性研究、
项目环境评价、厂区设计、车间设计、公用工程设计
5个部分。通过对牙膏项目技术经济分析、牙膏生产
三废处理、牙膏工厂建筑设计规范、牙膏生产车间与
辅助车间设计规范、牙膏生产用水、电、气、热设计
规范等环节的详细分析，为牙膏工厂建设和车间技术
改造提供基础技术知识。
9） 牙膏企业管理理论：通过对牙膏生产许可认
证及其他管理体系认证的必要性和重要性、认证标
准、文件化管理体系、体系运行管理、审核工作、不
合格纠正工作、证书管理等内容的详细分析，为牙膏
企业生产运营提供必要的基础管理知识。
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徐春生：牙膏生产技术理论的创立与发展 知识世界
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