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构菌菌丝酒提物的药效学研究



全 文 :构 菌 菌 丝酒 提 物 的 药 效 学 研 究
王亚芳 , 张建军**
(中国医学科学院 , 中国协和医科大学药物研究所 , 北京 100050)
  摘要:用东莨菪碱造成小鼠记忆获得障碍或用亚硝
酸钠破坏小鼠记忆巩固 , 用明暗箱法来观察菌丝酒提物
对小鼠学习记忆障碍的改善作用;用断头喘息法观察菌
丝酒提物的抗氧化作用;用游泳法观察菌丝酒提物的抗
疲劳作用。结果显示 , 小鼠灌胃菌丝酒提物能明显延长
避暗实验中记忆障碍小鼠从明场进入暗场的潜伏期 , 减
少错误次数;能显著延长小鼠断头喘息时间和小鼠在冷
水中的游泳时间。 说明菌丝酒提物具有较强的改善小鼠
学习记忆障碍 、 抗氧化作用和抗疲劳作用。
关键词:菌丝酒提物;学习记忆;抗氧化;抗疲劳
中图分类号:R931 , 71   文献标识码:A
文章编号:1003-8310 (2003) 04-0035-03
食用菌 , 素有 “素中之荤” 的美称 , 不仅有很
高的营养价值 , 而且还有很高的药用价值[ 1] 。构菌
是药食两用菌 , 俗称增智菇。我所生物合成室多年
来在对多种构菌菌株进行筛选的基础上优选出的具
有高产和显著生物活性的菌株 , 我所植化室对发酵
物进行了分离提取 , 我们对其中的一个提取物-菌
丝酒提物进行了一系列的药效学研究 , 以开发其药
用价值。
1 材料
1.1 动物 ICR小鼠 , 18-22g , 雄性。购于北京
维通利华实验动物技术有限公司 , 许可证为
SCXK11-00-0008。
1.2 菌丝酒提物的制备 发酵菌丝用 70%乙醇提
取 , 得到菌丝酒提物。临用前用生理盐水 (NS)配
制成浓度为 (小) 0.5g/kg 、 (中) 1g/kg、 (大)
1.5g/ kg三个浓度。按 0.1ml/10g体重给药。
1.3 试剂及仪器 氢溴酸东莨菪碱:购自中国药
品生物制品检定所;亚硝酸钠 (NaNO2):购自北京
化学试剂公司;多萘哌齐 (DO):由医科院药物所
合成。 明 暗箱:PASSIVE AVOIDANCE CONTROL
(日本生产)。
2 方法与结果
2.1 菌丝酒提物对东莨宕碱致小鼠学习记忆障碍
的影响 ICR 小鼠 60 只 , 体重 18-22g , 雄性 , 实
验前在本实验室饲养两天以适应环境。实验时随机
分为 6 组 , 每组 10只。设正常对照组 (NS)、 模型
对照组 、 菌丝酒提物 0.5g/ kg 组 、 菌丝酒提物 1g/
kg组 、 菌丝酒提物 1.5g/ kg 组和阳性药对照组 (多
萘哌齐 3mg/ kg), 均灌胃给药。第一天下午给受试
药物一次 , 第二天学习前先给受试药物 , 30min 后
除正常对照组外 , 每组小鼠腹腔注射东莨菪碱
1mg/kg , 30min后将小鼠放进明暗箱中先适应环境
3min , 然后给定电压为 36V , 进行学习 5min , 下午
再给一次药。第三天先给一次药 , 30min 后进行记
忆测试 , 记录小鼠第一次进入暗箱的潜伏期及
5min 内进入暗箱的次数 (或称错误次数)。结果见
表 1。模型组与正常对照组比 , 小鼠第一次进入暗
场的潜伏期明显缩短 (P<0.001), 错误次数明显
增多 (P<0.01), 给药组与模型组相比 , 菌丝酒提
物 0.5g/kg、 1g/ kg、 1.5g/kg剂量组均能明显延长小
鼠第一次进入暗场的潜伏期 , 呈量效关系 , 1g/ kg
和 1.5g/ kg剂量组能明显减少错误次数 (P<0.05)。
由小鼠第一次进入暗场的潜伏期结果计算得到菌丝
酒提物 0.5g/ kg、 1g/kg 和 1.5g/kg 剂量组对小鼠学
习记忆的改善率分别为 59.5%、 79.8%和 91.6%。
表 1 菌丝酒提物对东莨菪碱致小鼠记忆障碍的影响
(X±SD , n=10)
组别 剂量(g/ kg)
东莨菪碱
(mg/kg)
潜伏期
(s)
改善率
(%)
错误次数
 
正常对照组 NS NS 278±67*** 0.1±0.3**
模型组 NS 1 100±92 1.9±1.9
菌丝酒提物 0.5 1 206±13* 59.5 0.5±1.0
1.0 1 242±96** 79.8 0.3±0.5*
1.5 1 263±72*** 91.6 0.5±0.7*
多萘哌齐 0.003 1 278±42*** 100.2 0.4±0.5*
  与模型组比 *P<0.05 **P<0.01 ***P<0.001
2.2 对亚硝酸钠造成小鼠记忆巩固障碍的影响 
分组 、 给药同 2.1 项 , 第二天学习前先给受试药
35第 22 卷 第 4期       中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA
国家自然科学基金资助项目 (30070918)
  **本文通讯作者
收稿日期:2002-12-30
DOI :10.13629/j.cnki.53-1054.2003.04.011
物 , 30min后除正常对照组外 , 每组小鼠皮下注射
亚硝酸钠 120mg/kg , 30min 后将小鼠放进明暗箱中
学习 , 24h 后进行记忆测试。 结果见表 2。与模型
组相比 , 菌丝酒提物 1g/ kg 和 1.5g/kg 剂量组均能
明显延长小鼠第一次进入暗场的潜伏期 (P<0.05
和P<0.01), 1.5g/ kg 剂量组与多萘哌齐组小鼠第
一次进入暗箱的潜伏期都超过了正常对照组。 1g/
kg和 1.5g/kg 剂量组能明显减少错误次数 (P<
0.05)。菌丝酒提物 0.5g/kg、 1g/ kg和 1.5g/kg 剂量
组小鼠的记忆改善率分别为 56.4%、 77.3%和
116.8%。
表 2 菌丝酒提物对亚硝酸钠致小鼠脑记忆巩固的影响
(X±SD , n=10)
组别 剂量(g/ kg)
亚硝酸钠
(mg/ kg)
潜伏期
(s)
改善率
(%)
错误次数
 
正常对照组 NS NS 252±81* 0.5±0.7*
模型组 NS 120 142±129 1.8±1.5
菌丝酒提物 0.5 120 204±108 56.4 0.8±1.3
1.0 120 227±113* 77.3 0.7±0.8*
1.5 120 270±79** 116.8 0.5±1.1*
多萘哌齐 0.003 120 272±68** 118.7 0.4±0.9*
  与模型组比 *P<0.05 **P<0.01
2.3 对小鼠断头喘息的影响 ICR小鼠 40 只 , 体
重 18~ 22g , 雄性 , 随机分为 4组 , 每组 10 只。设
正常对照 NS 组 、 菌丝酒提物 0.5g/kg 组 、 菌丝酒
提物 1g/kg组和菌丝酒提物 1.5g/kg 组 , 均皮下注
射给药。小鼠皮下注射药物 30min 后 , 用剪刀迅速
剪下小鼠头部 , 立即计时 , 记录小鼠头部脱离身体
后张口喘息的时间。结果见表 3。小鼠被断头后菌
丝酒提物组 1g/kg 和 1.5g/ kg 与正常对照组比较 ,
其喘息时间分别延长了41.8%和72.7%, 均有统计
学差异 (P<0.001)。菌丝酒提物 0.5g/ kg与正常对
照组相比其喘息时间延长了 6.2%, 具有统计学差
异 (P<0.05)。
表 3 菌丝酒提物对小鼠断头喘息时间的影响
(X±SD , n=10)
组别 剂量(g/ kg) 喘息时间 (s)
延长百分率
(%)
正常对照组 NS 19.4±2.1
菌丝酒提物 0.5 20.6±5.8* 6.2
1.0 27.5±5.3*** 41.8
1.5 33.5±6.6*** 72.7
  与正常对照组比 *P<0.05 , ***P<0.001
2.4 抗疲劳作用 分组 、 给药同 2.3 项 , 灌胃给
药。桶中放入 19cm深的水 , 再用冰调节水温度至
19℃。给药 30min 后 , 观察其在水中的游泳 (存
活)时间。结果见表 4。 灌胃菌丝酒提物 0.5g/kg、
1g/kg 和 1.5g/kg 与正常对照组比较 , 游泳时间分
别延长了 32.5%、 64.9%和 97.4%, 均具有统计学
差异 (P<0.05)。
表 4 菌丝酒提物对小鼠游泳时间的影响
(X±SD , n=10)
组别 剂量(g/kg) 游泳时间 (min)
延长百分率
(%)
正常对照组 NS 11.4±2.3
菌丝酒提物 0.5 15.1±2.2* 32.5
1.0 18.8±5.6* 64.9
1.5 22.5±8.2* 97.4
  与正常对照组比 *P<0.05
3 讨论
回避性条件反射方法已得到广泛应用, 但正常动
物经一次训练即可学会逃避电击, 且很快趋于巩固 ,
维持相当一段时间。在这种情况下观察药物增强正常
动物记忆的作用是困难的。采用记忆缺失的动物模
型 , 观察药物改善动物记忆障碍的作用, 不但有助于
评定药物的作用 , 且可初步分析药物的作用机制[ 2] 。
东莨菪碱造成小鼠记忆获得障碍和亚硝酸钠造成小鼠
记忆巩固障碍是国内外经常使用的较为成熟的模型 ,
避暗法也是研究学习记忆的经典实验方法。
药物影响记忆可能有两种形式:①药物改变一般
机能状态而影响记忆;②药物作用于与记忆有关的神
经结构 , 易化记忆过程[ 3] 。已有研究表明, 东莨菪碱
是M-胆碱能受体阻滞剂, 亚硝酸钠是致脑缺氧剂。
胆碱能路径是记忆的内在基础 , 脑部缺氧可破坏记忆
的保持[ 4] 。因此我们采用上述模型来观察菌丝酒提物
对小鼠学习记忆的作用。本研究结果提示, 菌丝酒提
物 0.5~ 1.5g/ kg对东莨菪碱造成的记忆获得障碍及亚
硝酸钠造成的记忆巩固障碍都有较明显的改善作用 ,
且此作用有量效关系。剂量越大, 作用越明显。说明
菌丝酒提物可能具有胆碱能样作用 , 尚需进一步的实
验证明。断头喘息实验结果提示, 菌丝酒提物可促进
需氧代谢, 改善脑缺氧, 为菌丝酒提物可改善亚硝酸
钠造成的记忆巩固障碍提供了一个理论依据;游泳实
验结果提示 , 菌丝酒提物有抗疲劳和抗寒冷作用 , 其
作用机制正在研究中。
[参 考 文献]
[ 1] 孙万山, 徐景英.我国食用菌产业成为农村经济发展
的支柱产业 [ J] .中国食用菌.1999, 18(2):5-6.
36 中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA       Vol.22 , No.4
松口蘑的镇咳 、祛痰 、平喘作用研究
吴映明 , 陈爱葵 , 曾小龙 , 曾晓春
(广东教育学院生物系 , 广东 广州 510310)
  摘要:用动物实验方法 , 研究松口蘑子实体水溶性
提取液治疗支气管炎 , 咳 、 痰 、 喘三种症状的效果及其
药理作用。给豚鼠腹腔注射松口蘑子实体水溶性提取液 ,
能非常显著地增大方波刺激迷走神经的引咳阈值;给小
白鼠灌胃 , 能非常显著增加其呼吸道的酚红排泌量;给
豚鼠离体气管滴入提取液 , 对气管有非常显著的扩张效
应;该提取液能非常显著地延长豚鼠的引喘潜伏期 , 对
蛙口腔粘膜上皮的纤毛运动有一定的加快作用。松口蘑
子实体水溶性提取液有明显的镇咳 、 祛痰和平喘作用。
关键词:松口蘑提取液;引咳阈值;酚红排泌量;
引喘潜伏期
中图分类号:R965   文献标识码:A
文章编号:1003-8310 (2003) 04-0037-04
松口蘑 [ Tricholoma matsutake (S.Itoet Imai)
Sing.] , 别名杉蕈 、 松菇 , 日本称松茸。 隶属真菌
门 、 担子菌亚门 、 蘑菇目 、 口蘑科 、 口蘑属[ 1] , 主
要分布在日本 、 朝鲜半岛以及我国东北 、 西南和台
湾等省[ 2] 。由于松口蘑质地细嫩 , 口味鲜美且具有
淡雅的松脂清香 , 故倍受美食家的赞誉。同时松口
蘑还具有很高的药用价值。据文献记载 , 松口蘑具
有强身 、 益肠胃 、 止痛 、 理气化痰和驱虫等功
效[ 3] 。现代研究表明 , 松口蘑还可治疗糖尿病 , 并
具有抗癌作用。关于松口蘑治疗支气管炎的药效和
药理作用未见专题报道。我们结合临床 , 以动物为
对象 , 对松口蘑子实体水溶性提取液 (以下简称松
口蘑提取液)的镇咳 、 祛痰 、 平喘作用进行了初步
研究。
1 实验材料
1.1 松口蘑制剂 松口蘑子实体干片购自昆明食
用菌研究所 , 产地为云南省中甸 , 实验用其水溶性
提取液。
1.2 实验动物 昆明种小白鼠购自广东省医药实
验动物中心;豚鼠购自广州市白云九佛强龙动物养
殖场;青蛙购自广州农贸市场。
1.3 实验药品  氯化乙酰胆碱 , 纯度 98.0% ~
100%, 配制成 2%水溶液;磷酸组胺 , 纯度 ≥
98%, 配制成 0.4%水溶液。
2 方法与结果
2.1 镇咳作用
选取 480 ~ 500g健康豚鼠 10 只 , 腹腔注射乌拉
收稿日期:2003-01-07
[ 2] 张均田主编.现代药理实验方法 [M] .北京医科大
学中国协和医科大学联合出版社 , 1998.1029
[ 3] 韩怡凡 , 陈先瑜.中枢胆碱递质系统与学习记忆关系
的研究 [ J] .生理科学进展 , 1983, 14 (3):216.
[ 4] 沈映君主编.中药药理学 [ M] .上海科学技术出版
社 , 1997.129 , 160.
Pharmacological Activity of Cultured Products of Flammulina velutipes
WANG Ya-fang , ZHANG Jian-jun*
(Institute of Materia Medica , Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College , Beijing 100050, China)
Abstract:Mice were given Flammulina velutipes (FV)(0.5g/ kg , 1g/kg and 1.5g/ kg) orally twice before exper-
iments.Learning and memory impairment was induced by injection of scopolamine (1mg/kg , ip) or NaNO2 (120 mg/
kg , ip), and the step-through test was performed.The gasping time of mice after decapitation was used to evaluate the
effect of FV on hypoxia.Swimming experiment was performed to observe the effect of FV on fatigue in mice.Results indi-
cated FV (0.5g/kg , 1g/ kg and 1.5g/kg , p.o.) significantly decreased the latencies and error frequency of mice in
the step-through test , and prolonged the gasping time of decapitated mice and the swimming time of normal mice.These
data showed that FV significantly improved the learning and memory impairment induced by scopolamine or NaNO2 , and
showed strong protective action on hypoxia and improvement of fatigue.
Key words:Flammulina velutipes (FV);Learning and memory;Anti-hypoxia;Anti-fatigue
37第 22 卷 第 4期       中国食用菌 EDIBLE FUNGI OF CHINA