全 文 ：第 26卷第 2期
2006年 6月
林　产　化　学　与　工　业
Chem istry and Indus try of Fo res t Products
Vo.l 26 No. 2
June 2006
核桃楸总黄酮及胡桃醌含量测定
　　收稿日期:2005 - 07 - 21
　　基金项目:黑龙江省自然科学基金资助项目(C 2004 - 28)
　　作者简介:孙墨珑(1961 -),女 ,黑龙江哈尔滨人,教授 ,从事植物提取物化学研究
　*通讯作者:宋湛谦 ,中国工程院院士 ,研究员 ,博士生导师 ,从事生物质资源的化学改性和应用 ,特别是松脂资源的深加工利用研究。
SUN M o-long　　
孙墨珑1 , 宋湛谦 2 , 方桂珍3
(1. 东北林业大学理学院 , 黑龙江 哈尔滨 150040;2. 中国林业科学研究院林产化学工业研究所;
国家林业局 林产化学工程重点开放性实验室 , 江苏 南京 210042;3.东北林业大学
材料科学与工程学院 , 黑龙江 哈尔滨 150040)
摘　要:　研究采取常规提取法 、索氏提取法和超声波提取法浸提核桃楸样品 (核桃楸的树
叶 、树皮和外果皮)。采用紫外 -可见分光光度法测定核桃楸样品总黄酮含量 , 高效液相色谱
法测定核桃楸样品胡桃醌含量。研究结果表明 ,总黄酮含量和胡桃醌含量分别为超声波提取法 >常规提取法 >索氏提
取法。 3种提取法浸提核桃楸样品 , 总黄酮含量均有树叶 >树皮 >外果皮的趋势;胡桃醌含量均有外果皮 >树叶 >树皮
的趋势。超声波法提取核桃楸样品总黄酮含量分别为:树叶 5. 00%, 树皮 4. 17%, 外果皮 3. 05%;胡桃醌含量分别为:
树叶 0. 002 09%,树皮 0. 001 31%,外果皮 0. 002 29%。
关键词:　核桃楸;总黄酮;胡桃醌
中图分类号:TQ351. 014　　　　　　文献标识码:A　　　　　　文章编号:0253 - 2417(2006)02 -0093 - 03
Extraction and Determ ination of Total F lavonoid and Juglone in
Jug lansmandshuricaMaxim.
SUN M o-long1 , SONG Zhan-q ian2 , FANG G ui-zhen3
(1. Co llege of Science, Northeast Forestry University, H arbin 150040, China;2. Institute o f Chem ica l Industry
o f Fore st P roducts, CAF;K ey and Open Lab. on Fo rest Chem ica l Eng ineering, SFA, Nanjing 210042, China;
3. Co llege ofM a te rial Science and Eng inee ring, Northeast Fo restry Un ive rsity, H arbin 150040, China)
Abstrac t:The extractions o f to ta l flavonoid and jug lone ffrom leaves, bark and green pee l o f Jug lans mandshurica M axim. trees
w ere carried out by three ex trac ting m ethods re spec tively, including comm on me thod, re flux m e thod and ultrasonic m ethod. UV
spec tro scopy was used fo r determ ining the am ount of tota l flavono id, and HPLC w as used for de te rm ining the am ount o f jug lone.
Re su lts showed that amounts o f to ta l flavono id and jug lone are in the o rde r o f:u ltrasonic m e thod >comm on m e thod > re flux
m ethod. Furthe rm o re amoun ts of to ta l flavono id ex tracted from threem a te rials by all three m e thod show ed the o rder of leaves>
bark >g reen pee.l Am ounts o f jug lone ex tracted from threem ateria ls by all th reem e thod show ed the o rde r of:g reen pee l>leaves
>bark. The am oun ts of to ta l flavonoid and jug lone ex tracted by ultrasonic m e thod are:5. 00 % and 0. 002 09 % for leaves,
4. 17 % and 0. 001 31% for ba rk, 3. 05 % and 0. 002 29 % for green pee l, respective ly.
K ey words:JuglansmandshuricaM ax im. ;to tal flavono id;jug lonoid
核桃楸 (Jug lansmandshurica Max im. )为胡桃科胡桃属落叶乔木 ,是东北阔叶红松林的重要伴生树
种 ,也是我国重要的药源植物。因其在木材和中药方面均有重要价值 ,故在东北林区的天然林中地位特
殊 。本研究采取不同提取法浸提核桃楸的树叶 、树皮和外果皮 ,并测定样品中总黄酮及胡桃醌含量。
1　材料与方法
1. 1　仪器 、材料与试剂
仪器:TU-1800SPC紫外 -可见分光光度计 , Ag ilent 1100 Se ries高效液相色谱仪;材料:核桃楸样品
94　 林　产　化　学　与　工　业 第 26卷
(树叶 、树皮和外果皮 )采于东北林业大学实验林场;试剂:芦丁和胡桃醌标准样品为美国 Sigma公司生
产;其他试剂均为色谱纯或分析纯。
1. 2　提取方式[ 1-3]
提取方法有 3种 。常规提取法:浸提液体积与样品质量比为 10 ∶1(mL ∶g),在 60℃时振荡浸提 3
次 ,每次浸提 1 h。索氏提取法:取 100mL浸提液 ,水浴加热提取至溶液颜色变淡为止 。超声波提取法:
浸提液体积与样品质量比为 10∶1 ,在 30℃时浸提 3次 ,每次浸提 30m in。
1. 3　总黄酮及胡桃醌含量测定方法
1. 3. 1　总黄酮含量测定　采用紫外 -可见分光光度法 [ 1] 。精确配制芦丁标准溶液(60%乙醇水溶液)
0. 020、 0. 040、 0. 060、 0. 080和 0. 100 g /L。以芦丁作黄酮标准样品 ,采用硝酸铝 -亚硝酸钠比色法测
定 。用紫外 -可见分光光度计在 510 nm波长测定吸光度。
精确称取 2 g核桃楸样品(树叶 、树皮和外果皮),以 60%乙醇水溶液为浸提液 ,分别采取上述 3种
方法浸提。合并浸提液 ,定容至 100mL。精确量取样品溶液 1mL,按照芦丁标准溶液的测定方法测定
吸光度 。
1. 3. 2　胡桃醌含量测定　胡桃醌含量测定方法采用高效液相色谱法 (外标法 )[ 4] 。色谱条件:C-8反
相色谱柱;流动相:56%色谱纯甲醇 -44%重蒸水 (磷酸调 pH 值至 3. 5);检测波长 250 nm;流速
0. 5mL /m in;柱温为室温;进样量 10μL;保留时间 13m in。
精确配制胡桃醌标准甲醇溶液 0. 625、 1. 25、 2. 50、 3. 75和 5. 00μg /mL。分别取 10μL标准溶液
依次进样 5次 ,测定峰面积 ,取平均值 。
精确称取 2 g核桃楸样品 ,以氯仿为浸提液 ,分别采取上述 3种提取法 (常规提取法温度为 50℃)
浸提。合并浸提液 , 减压蒸馏 ,蒸干提取液 , 用甲醇分 3次溶解提取物 ,定容至 10mL。进样前用
0. 45μm微孔滤膜过滤 。按照胡桃醌标准溶液的测定方法测定样品峰面积。
2　结果与讨论
2. 1　总黄酮含量
根据芦丁标准曲线数据线性回归得芦丁浓度(C1)与吸光度(A)的关系:C1 =0. 076 92A -0. 000 6。
线性范围为 0 ～ 0. 100 g /L,线性相关系数 r=0. 999。
从芦丁标准曲线中查找核桃楸样品相应浓度 ,计算得出核桃楸样品总黄酮含量 。 3种提取法浸提
核桃楸样品总黄酮含量如表 1所示。
由表 1可以看出 ,超声波提取法浸提得到的总黄酮含量高于常规提取法 ,而常规提取法得到的总黄
酮含量又高于索氏提取法 。 3种提取法浸提核桃楸样品 ,总黄酮含量均有树叶 >树皮 >外果皮的趋势。
2. 2　胡桃醌含量
根据胡桃醌标准曲线数据线性回归得胡桃醌浓度 (C2)与峰面积(A′)的关系为 C2 =7. 185×10- 3A′。
线性范围为 0 ～ 5. 00mg /L,线性相关系数 r=0. 999。
从胡桃醌标准曲线中查找核桃楸样品相应浓度 ,计算得出核桃楸样品胡桃醌含量 。 3种提取法浸
提核桃楸样品胡桃醌含量亦见表 1。
表 1　3种提取法浸提核桃揪样品总黄酮和胡桃醌含量
Table 1　To ta l flavone and jug lone conten t o f the extract from J. m and shurica w ith d iffe rent extrac ting me thods %
浸提方法
extraction m ethods
总黄酮 total flavone
树叶 leaves 树皮 bark 外果皮 green pee l
胡桃醌 juglone
树叶 leaves 树皮 bark 外果皮 g reen pee l
常规法 comm on 4. 90 3. 99 2. 90 0. 00195 0. 00126 0. 00214
索氏法 ref lux 4. 21 3. 25 2. 33 0. 00182 0. 00111 0. 00205
超声波法 u ltrason ic 5. 00 4. 17 3. 05 0. 00209 0. 00131 0. 00229
　　由表 1可以看出 ,超声波提取法浸提得到的胡桃醌含量高于常规提取法 ,而常规提取法得到的胡桃
醌含量又高于索氏提取法 。 3种提取法浸提核桃楸样品 ,胡桃醌含量均有外果皮 >树叶 >树皮的趋势。
第 2期 孙墨珑 , 等:核桃楸总黄酮及胡桃醌含量测定 95　
3　结 论
3. 1　3种方法浸提核桃楸样品 ,总黄酮含量和胡桃醌含量均为:超声波提取法 >常规提取法 >索氏提
取法。
3. 2　3种提取法浸提核桃楸样品 ,总黄酮含量均有树叶 >树皮 >外果皮的趋势;胡桃醌含量均有外果
皮 >树叶 >树皮的趋势。超声波法提取核桃楸样品总黄酮含量分别为:树叶 5. 00%,树皮 4. 17%,外
果皮 3. 05%;胡桃醌含量分别为:树叶 0. 002 09%,树皮 0. 001 31%,外果皮 0. 002 29%。
参考文献:
[ 1]方桂珍 ,王洪江 ,孙晓轶.正交试验法优选仙鹤草中总黄酮的提取工艺 [ J] .林产化学与工业 , 2002, 22 (3):62-64.
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[ 3]赵兵 ,王玉春 ,欧阳藩 ,等.超声波在植物提取中的应用 [ J] .中草药 , 1999, 30(9):附 1-3.
[ 4]索绪斌 ,高奎滨 ,张云凌 ,等.高效液相色谱法测定青龙衣中胡桃酮含量 [ J] .中药材 , 2003, 26 (11):793.
下　期　要　目
红花忍冬的黄酮类成分研究
微波辐射下没食子酸正辛酯的合成
β-蒎烯合成对异丙基苯甲酸反应的研究
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超声波提取金丝小枣多糖的工艺研究
松油烯与马来酸酐的环加成反应的条件研究
兴安落叶松树皮栲胶残渣木质素磺酸盐理化性能的研究
沙蒿籽胶与黄原胶混合体系流变特性的研究
微波氯化锌法马占相思木材剩余物制备活性炭
石榴皮中多酚的提取条件优化(简报)
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两株芽孢杆菌产纤维素酶的诱导机理研究(简报)
正交试验法优选枇杷叶中科罗索酸提取工艺的研究
(简报)
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展(综述)
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