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不同产地葫芦巴提取物降血糖活性评价



全 文 :实 验 研 究
不同产地葫芦巴提取物降血糖活性评价▲
安福丽 张 仲 1 陈贵银 郭喜军 2 陈迎春 相聪坤
(河北省中医院药剂科 ,河北 石家庄 050011)
  【摘 要】 目的 研究不同产地葫芦巴提取物对正常小鼠及四氧嘧啶所致高血糖小鼠的降血糖作用。
方法 ①将健康小鼠 90只随机分为云南产葫芦巴低 、高剂量组 ,甘肃产葫芦巴低 、高剂量组 ,河北产葫芦巴
低 、高剂量组 ,河南产葫芦巴低 、高剂量组和空白对照组 , 各 10只。空白对照组给予等容积纯化水 ,其他各组
低 、高剂量组分别给予 200、400 mg/(kg· d)相应产地葫芦巴提取物 ,称体质量并测空腹血糖值。 然后再灌胃
给予葡萄糖溶液 2 g/(kg· d), 测定葡萄糖负荷后血糖值并计算血糖曲线下面积(AUC)。 ②将健康小鼠 100
只腹腔注射四氧嘧啶 , 测空腹血糖;随机分为云南产葫芦巴低 、高剂量组 ,甘肃产葫芦巴低 、高剂量组 , 河北产
葫芦巴低 、高剂量组 ,河南产葫芦巴低 、高剂量组 , 模型组和阳性药对照组 , 各 10只。模型组给予等容积纯化
水 , 阳性药对照组给予盐酸苯乙双胍片 40 mg/(kg· d), 其他各组低 、高剂量组分别给予 200、400 mg/(kg· d)
相应产地葫芦巴提取物 ,测空腹血糖值。然后再灌胃给予葡萄糖溶液 2 g/(kg· d), 测定葡萄糖负荷后血糖
值 , 并计算 AUC。结果 不同产地葫芦巴提取物对正常小鼠体质量 、空腹血糖以及葡萄糖负荷后各时间点空
腹血糖值和 AUC均无显著影响。云南 、河北产葫芦巴提取物低 、高剂量组和甘肃 、河南产葫芦巴高剂量组对
四氧嘧啶致高血糖小鼠均可显著降低空腹血糖水平 ,且可显著降低葡萄糖负荷后不同时间点小鼠的空腹血
糖值 , 减少 AUC。结论 不同产地葫芦巴提取物高剂量组均可一定程度降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠的空
腹血糖 , 且对其糖耐量有一定调节作用。
  【关键词】 葫芦巴 , 分析;中药产地;血糖;葡萄糖;疾病模型 ,动物;小鼠
【中图分类号】 R282.71;R932.3  【文献标识码】 A 【文章编号】 1002-2619(2010)04-0590-04
▲项目来源:河北省中医药管理局 2007年度科学研究计划项目
(编号:2007058)
1 河北省沧州市传染病医院药剂科 ,河北 沧州  061001
2 河北省中医院消化科 ,河北 石家庄  050011
作者简介:安福丽(1976—),女 , 主管药师 ,硕士。 从事药物分析
工作。
ResearchonthehypoglycemiceffectofFrenugreekextractsfromdifferentproducingarea ANFuli, ZHANG
Zhong, CHENGuiyin, etal.DepartmentofPharmacy, HebeiProvincialHospitalofTraditionalChineseMedicine, He-
bei, Shijiazhuang050011
【Abstract】 Objective ToevaluatethehypoglycemicefectsoftheextractsfromFrenugreekofdifferentpro-
ducingareaonnormalmiceandalloxan-induceddiabeticmice.Methods ①90 micewererandomlydividedinto
ninegroups, low-, high-doseFrenugreekextractsgroupsfromHenan, low-, high-doseFrenugreekextracts
groupsfromHebei, low-, high-doseFrenugreekextractsgroupsfromHenanandcontrolgroup.Thentheyweread-
ministratedwiththeextracts(200, 400 mg/kg· d)fromdifferentproducingarea, miceincontrolgroupwereadmin-
istratedwithisovolumetricpurifiedwater.ThebodyweightandFBGweremeasured.Bloodglucosewasmeasuredaf-
teroraladministrationwithglucoseliquid(2 g/kg· d), andthechangeofareaunderthebloodglucosecurve
(AUC)wascalculated.②100 diabeticmicewereinducedbyalloxaninKunmingmice.FBGweremeasured.And
theywererandomlydividedintotengroups.Thentheywereadministratedwiththeextracts(200, 400 mg/kg· d)
fromdifferentproducingarea, miceincontrolgroupwereadministratedwithisovolumetricpurifiedwater.Micein
positivecontrolgroupwereadministratedwithPhenforminhydrochloridetablets, 40 mg/kg· d.ThechangesofFBG
valuewereobserved.Bloodglucosewasmeasuredafteroraladministrationwithglucoseliquid(2g/kg· d), andthe
changeofareaunderthebloodglucosecurve(AUC)wascalculated.Thesamemethodwasusedtoevaluatethein-
fluenceofextractsonbodyweight, bloodglucosevalueandglucosetoleranceinnormalmice.Results Theextracts
hadnoinfluenceonbodyweight, bloodglucosevalueandthe
AUCinducedbytheglucoseloadinginnormalmice.The
FrenugreekextractsfromYunnanandHebeidecreasedthe
levelofbloodglucoseindifferentsenserespectivelyondia-
beticmodel.Thebloodglucosevalueof0, 0.5, 2hoursand
theAUCinducedbytheglucoseloadingweredecreasedas
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well.Conclusion TheextractsofFrenugreekfromdiferentproducingareahavethefunctionsofloweringtheblood
glucoseandregulatingglucosetoleranceonaloxan-causeddiabeticmice.
【Keywords】 Frenugreek;Analysis;TraditionalChinesedrugplaceofproduction;Bloodglucose;Glucose
tolerance;Diseasemodel;Mouse
  中医药治疗糖尿病已有数千年历史 , 历代医书中记
载了大量治疗糖尿病的中药及其复方制剂 , 积累了丰富
的经验 [ 1] 。近年来大量临床实践证明 , 中药治疗糖尿病
具有降血糖作用温和持久 、不良反应低 、改善糖耐量和有
效缓解并发症发生发展等优点 [ 2] 。 葫芦巴 Trigonela
foenum-graecumL.又名苦豆(《饮膳正要》)、芦巴(《本
草原始》)、胡巴(《本草求真》)、季豆(《东北药植志》)、小
木夏 、香豆子(《新疆中草药手册》), 为豆科蝶形花亚科一
年生草本植物。在我国 “三北 ”地区和中南等地均有栽
培 , 国内葫芦巴的适生地区是宁夏 、甘肃 、青海 、新疆 、内
蒙古等省区 [ 3, 4] 。我国历代编修的本草著作中均收载有
葫芦巴条目 , 入肝 、肾二经 , 味苦 、性温 , 无毒 , 具有补肾
阳 、祛寒湿之功效。本实验观察不同产地葫芦巴提取物
对正常小鼠及四氧嘧啶所致高血糖小鼠的降血糖作用。
1 材料与方法
1.1 试药 葫芦巴药材购于河北省药材公司 ,产地分别
为河北 、云南 、甘肃 、河南 , 经鉴定符合 《中华人民共和国
药典》 2005版项下标准;葫芦巴提取物(自制备);四氧嘧
啶(美国 Sigma公司产品);盐酸苯乙双胍片(山东博山制
药有限公司 , 国药准字 H37021793);葡萄糖(分析纯 , 天
津市化学试剂三厂 , 国药准字 H12020135);乙醇(分析
纯 , 上海化学试剂公司)。
1.2 葫芦巴提取物的制备 取不同产地葫芦巴药材粉
碎 , 用蒸馏水煎煮 2次 ,每次 1h,合并 2次提取液 ,经减压
浓缩 、喷雾干燥 、粉碎 、过筛孔内径(180.0 ±7.6)μm(
80目),即得葫芦巴提取物。
1.3 仪器 爱康全血糖测试仪(德国 RocheDiagnostics
GmbH公司), 手提式中药粉碎机(青州天地中药设备
厂),离心式喷雾干燥机(无锡市现代干燥设备有限公
司), XZ型旋片式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂),
EYELA旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司), PL203型
电子精密天平(瑞士 MetlerToledo公司)。
1.4 实验动物 8周龄雄性昆明种小鼠 190只南京医科
大学实验动物中心提供 , 动物合格证号:SCXK(苏)
2002-0031, 体质量 20 ~ 22 g。
1.5 实验方法
1.5.1 正常小鼠实验 [ 5, 6] 选取健康昆明种小鼠 90只 ,
禁食不禁水 5 h, 称体质量并尾尖取血测空腹血糖值 , 随
机分为云南产葫芦巴低 、高剂量组 , 甘肃产葫芦巴低 、高
剂量组 , 河北产葫芦巴低 、高剂量组 , 河南产葫芦巴低 、高
剂量组 , 空白对照组 ,各 10只。空白对照组给予等容积纯
化水 , 其他各组低 、高剂量组分别给予 200、 400 mg/
(kg· d)相应产地葫芦巴提取物 , 连续灌胃 30 d。最后 1
次灌胃后禁食 5 h,称体质量并测空腹血糖值。然后再灌
胃给予葡萄糖溶液 2g/(kg· d), 分别测定葡萄糖负荷后
0 h、 30 min、 2 h血糖水平 , 并计算血糖曲线下面积
(AUC), AUC=0.25×(0 h血糖值 + 4 ×30 min血糖值
+3×2 h血糖值)。
1.5.2 四氧嘧啶致高血糖小鼠实验 选取健康昆明种
小鼠 100只 , 禁食不禁水 24 h, 腹腔注射四氧嘧啶
100mg/(kg· d)后 ,禁食 5 h,尾尖取血测空腹血糖值 ,随
机分为云南产葫芦巴低 、高剂量组 , 甘肃产葫芦巴低 、高
剂量组 , 河北产葫芦巴低 、高剂量组 , 河南产葫芦巴低 、高
剂量组 , 模型组 ,阳性药对照组 , 各 10只。 模型组给予等
容积纯化水 , 阳性药对照组给予盐酸苯乙双胍片 40 mg/
(kg· d), 其他各组低 、高剂量组分别给予 200、400 mg/
(kg· d)相应产地葫芦巴提取物 , 连续灌胃 30 d。最后 1
次灌胃后禁食 5 h,测空腹血糖值。然后再灌胃给予葡萄
糖溶液 2 g/(kg· d),分别测定葡萄糖负荷后 0h、30 min、
2 h血糖水平 ,并计算血糖 AUC。
1.6 统计学方法 采用 SPSS11.0统计软件包进行统计
学分析 , 计量资料用均数 ±标准差( x±s)表示 , 采用 t
检验。
2 结 果
2.1 各组对正常小鼠体质量及空腹血糖的影响 见
表 1。
表 1 各组对正常小鼠体质量及空腹血糖的影响 x±s
组  别 n 剂量 [ mg/(kg· d)] 体质量(g) 空腹血糖(mmol/L)实验前 实验后 实验前 实验后
云南产葫芦巴低剂量组 10 200 21.30±0.50 36.10±0.97 6.05±0.66 5.98±0.85
云南产葫芦巴高剂量组 10 400 22.60±0.78 37.60±1.97 5.98±0.84 5.79±0.72
甘肃产葫芦巴低剂量组 10 200 20.60±0.90 34.80±1.07 5.96±0.98 5.98±0.65
甘肃产葫芦巴高剂量组 10 400 22.40±1.90 35.70±2.04 6.02±0.78 5.96±0.64
河北产葫芦巴低剂量组 10 200 21.40±0.90 35.80±2.54 5.98±0.88 5.88±0.76
河北产葫芦巴高剂量组 10 400 22.70±0.94 36.80±1.54 6.04±0.69 5.89±0.96
河南产葫芦巴低剂量组 10 200 21.70±0.84 36.90±3.24 5.98±0.99 6.02±0.86
河南产葫芦巴高剂量组 10 400 23.10±0.50 37.80±2.28 5.96±0.92 5.98±0.56
空白对照组 10 - 20.10±0.79 33.90±3.28 5.90±0.86 5.78±0.53
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  由表 1可见 , 各组小鼠实验前后体质量 、空腹血糖比
较差异均无统计学意义(P>0.05), 说明不同剂量 、不同
产地的葫芦巴提取物对正常小鼠体质量及空腹血糖均无
明显影响。
2.2 各组对正常小鼠糖耐量的影响 见表 2。
表 2 各组对正常小鼠糖耐量的影响 mmol/L, x±s
组  别 n 剂量 [ mg/(kg· d)] 空腹血糖
0h 30min 2h AUC
云南产葫芦巴低剂量组 10 200 5.98 ±0.85 8.39 ±0.58 6.75 ±0.97 14.98 ±1.85
云南产葫芦巴高剂量组 10 400 5.79±0.72 8.38±0.98 6.98±0.81 15.09±1.72
甘肃产葫芦巴低剂量组 10 200 5.98±0.65 8.58±0.78 6.95±0.88 15.08±1.65
甘肃产葫芦巴高剂量组 10 400 5.96±0.64 8.48±1.08 6.72±0.72 14.96±1.46
河北产葫芦巴低剂量组 10 200 5.88±0.76 8.24±1.02 6.78±1.08 14.78±1.76
河北产葫芦巴高剂量组 10 400 5.89±0.96 8.34±0.72 6.74±0.69 15.09±1.96
河南产葫芦巴低剂量组 10 200 6.02±0.86 8.54±1.05 6.98±1.19 14.82±1.86
河南产葫芦巴高剂量组 10 400 5.98±0.56 8.37±0.95 6.76±0.91 15.08±1.56
空白对照组 10 - 5.78±0.53 8.17±0.75 6.90±1.06 14.78±1.53
  由表 2可见 , 各组小鼠灌胃葡萄糖后各时间点空腹血
糖值 、AUC比较差异均无统计学意义(P>0.05),说明不
同产地不同剂量葫芦巴提取物对正常小鼠糖耐量无明显
影响。
2.3 各组对高血糖小鼠空腹血糖的影响 见表 3。
表 3 各组对高血糖小鼠空腹血糖的影响 mmol/L, x±s
组 别 n 剂量 [ mg/(kg· d)] 实验前 实验后
云南产葫芦巴低剂量组 10 200 11.35±0.66 8.98±1.25*■
云南产葫芦巴高剂量组 10 400 11.38±0.84 7.79±1.22**◎
甘肃产葫芦巴低剂量组 10 200 11.36±0.98 10.98±1.15
甘肃产葫芦巴高剂量组 10 400 11.32±0.78 9.36±1.24*◎
河北产葫芦巴低剂量组 10 200 11.38±0.88 8.88±1.27*■
河北产葫芦巴高剂量组 10 400 11.34±0.69 7.89±1.46**◎
河南产葫芦巴低剂量组 10 200 11.38±0.99 10.02±1.26
河南产葫芦巴高剂量组 10 400 11.36±0.92 9.98±1.16*◎
阳性药对照组 10 40 11.39±0.86 9.78±1.13*
模型组 10 - 11.37±1.08 11.43±1.08
  与阳性药对照比较◎P<0.05,与模型组比较 , * P<0.05, ** P<0.01;与甘肃 、河南产葫芦巴低剂量组比较 , ■ P<0.05
  由表 3可见 , 与模型组比较 ,云南 、河北产葫芦巴低剂
量组血糖降低显著(P<0.05),甘肃 、河南产葫芦巴提取
物低剂量组血糖降低不明显;而各产地产葫芦巴高剂量组
血糖均显著降低(P<0.05, P<0.01),组间比较差异无
统计学意义(P>0.05)。说明一定剂量不同产地葫芦巴
提取物可显著降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠空腹血糖 , 其
中云南 、河北产葫芦巴降血糖效果优于甘肃 、河南产葫芦
巴。阳性药对照组能使高血糖小鼠的血糖值显著降低 ,不
同产地产葫芦巴高剂量组与阳性药对照组比较差异无统
计学意义(P>0.05),说明一定剂量不同产地产葫芦巴
提取物的降糖效果与盐酸苯乙双胍接近。
2.4 各组对高血糖小鼠糖耐量的影响 见表 4。
表 4 各组对高血糖小鼠糖耐量的影响 mmol/L, x±s
组  别 n 剂量 [ mg/(kg· d)] 空腹血糖
0h 30min 2h AUC
云南产葫芦巴低剂量组 10 200 8.98±1.25* 12.58±1.07* 10.95±1.28* 28.87±3.85*
云南产葫芦巴高剂量组 10 400 7.79±1.22**■ 12.48±1.28**■ 10.41±1.27**■ 28.08±3.56**■
甘肃产葫芦巴低剂量组 10 200 12.48±1.28 11.38±1.21* 11.78±1.79 29.96±4.01
甘肃产葫芦巴高剂量组 10 400 13.09±1.34*■ 13.09±1.34*■ 11.38±1.81*■ 29.09±3.72*■
河北产葫芦巴低剂量组 10 200 8.88±1.27* 13.24±1.22* 11.06±1.30* 28.78±2.96*
河北产葫芦巴高剂量组 10 400 7.89±1.46**■ 12.54±1.35**■ 10.98±1.91**■ 27.82±3.86**■
河南产葫芦巴低剂量组 10 200 10.02±1.26 13.34±0.72 11.74±1.96 29.87±3.34
河南产葫芦巴高剂量组 10 400 9.98±1.16*■ 13.07±1.95*■ 11.37±1.80*■ 29.08±3.05*■
阳性药对照组 10 40 9.78±1.13* 13.17±1.25** 11.28±1.61** 29.78±3.35**
模型对照组 10 - 11.43±1.08 16.56±2.85 14.52±2.61 30.39±4.35
  与模型组同时间点比较 , *P<0.05, **P<0.01, ■P>0.05
  由表 4可见 , 灌胃葡萄糖后 , 与模型组比较 , 云南 、河 北产葫芦巴低剂量组各时间点空腹血糖值和 AUC明显降
592 河北中医 2010年 4月第 32卷第 4期 HebeiJTCM, February2010, Vol32, No.4
低(P<0.05), 甘肃 、河南产葫芦巴低剂量组各时间点血
糖值和 AUC降低不明显;而各产地产葫芦巴高剂量组各时
间点血糖值和 AUC均显著降低(P<0.05, P<0.01), 表
明一定剂量葫芦巴提取物具有增强高血糖小鼠糖耐量的作
用。阳性药对照组亦能显著降低高血糖小鼠各时间点空腹
血糖值和 AUC(P<0.05, P<0.01), 各产地产葫芦巴高
剂量组作用效果与盐酸苯乙双胍相当(P>0.05)。
3 讨 论
糖尿病是临床常见的内分泌紊乱疾病 ,发病原因主要
是由于机体代谢失调所导致的胰岛素分泌绝对或相对不
足 , 以及不同程度的胰岛素抵抗 , 其临床表现为高血糖和
糖尿 [ 7] 。目前降糖药物仍以西药为主 , 但因其存在低血糖
症和胃肠道反应等诸多不良反应 , 因此寻找高效 、低毒降
糖药仍是医药学家追求的目标。近年来研究发现 ,中药降
血糖作用温和持久 , 不良反应少 , 并可延缓并发症的发生
发展 , 不失为寻找降糖新药的一条重要途径 [ 8] 。
四氧嘧啶能选择性破坏胰岛 β 细胞 , 使血糖升高 [ 9] 。
本实验结果证实 , 葫芦巴提取物在一定剂量范围内可明显
降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠的空腹血糖 ,并存在一定的
剂量依赖关系 , 几乎与盐酸苯乙双胍的降糖效果接近。在
四氧嘧啶小鼠口服葡萄糖耐量的实验中 ,云南 、甘肃 、河北
和河南产高剂量的葫芦巴提取物均能显著降低各时间点
空腹血糖值和血糖 AUC, 表现出明显的增加高血糖小鼠
糖耐量的作用。葫芦巴中的葫芦巴生物碱类成分 、葫芦巴
总皂苷类成分均具有不同程度的降血糖作用 [ 3] 。 葫芦巴
降血糖作用的活性成分及其作用机制有待应用现代科学
技术和新方法深入开展研究。
参考文献
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(收稿日期:2009-11-28)
·中西医结合·
倍他司汀注射液联合天麻素注射液治疗梅尼埃病 50例
舒士敏 顾 洁
(河北省保定市第一中心医院中西医结合内科 ,河北 保定 071000)
  【关键词】 梅尼埃病;药物疗法
【中图分类号】 R764.340.5 【文献标识码】 A 【文章编号】 1002-2619(2010)04-0593-02
作者简介:舒士敏(1958—),女 ,副主任中医师。从事中西医结合
内科临床工作。
  2007-01— 2009 -12, 我们采用倍他司汀注射液联
合天麻素注射液治疗梅尼埃病 50例 ,结果如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 50例均为我院中西医结合内科门诊患
者 , 男 28例 ,女 22例;年龄 20 ~ 70岁 , 平均年龄 42岁;初
发 24例 ,复发 26例。
1.2 诊断标准 西医诊断参照《眼 、耳鼻咽喉科疾病诊
断标准》 [ 1] 。反复发作的旋转性眩晕 ,持续 20 min至数小
时 , 常伴平衡障碍 、恶心 ,重时呕吐。 无意识丧失 , 可见水
平或水平旋转型眼震 , 至少发作 2次以上才可作为诊断
依据。中医辨证参照《中医病证诊断疗效标准》中眩晕风
阳上扰型。证见眩晕耳鸣 , 头痛且胀 ,易怒 , 失眠多梦 ,或
面红目赤 , 口苦 ,舌红 , 苔黄 ,脉弦滑 [ 2] 。
1.3 治疗方法 盐酸倍他司汀氯化钠注射液(河南太龙
药业股份有限公司 ,国药准字 H20064123)500 mL加天麻
素注射液 (昆明制药集团股份有限公司 , 国药准字
H20013046)0.6 g, 滴速为 30 ~ 35滴 /min,每日 1次静脉
滴注。以 14d为 1个疗程。
1.4 疗效标准 参照《中医病证诊断疗效标准》。治愈:
症状 、体征及有关实验室检查基本正常。好转:症状及体
征减轻 , 实验室检查有改善。未愈:症状无改变 [ 2] 。以治
愈 、好转统计总有效率。
2 结 果
本组 50例,治愈 30例, 好转 18例, 未愈 2例 ,总有效率
96%。随访 2年,治愈 30例中复发 10例, (下转 597页)
593河北中医 2010年 4月第 32卷第 4期 HebeiJTCM, February2010, Vol32, No.4