全 文 ：收稿日期:2007-06-04;　修订日期:2007-10-20
作者简介:艾尼娃尔·艾克木 (1976-),男(维吾尔族), 新疆乌鲁木齐人 ,
现任新疆医科大学药学院讲师 , 硕士学位 , 主要从事天然药物的研究
工作.
维吾尔药黑种草子中总黄酮含量的测定
艾尼娃尔·艾克木 , 美丽万·阿不都热依木 , 王　岩 , 张　烜
(新疆医科大学药学院 ,新疆 乌鲁木齐　830054)
摘要:目的 采用比色法测定维吾尔药黑种草子中总黄酮的含量。方法 以芦丁作对照品 , 以亚硝酸钠 -硝酸铝 -氢氧
化钠体系为显色剂 , 检测波长为 500nm。结果 线性范围为 0.008 ～ 0.040 mg· ml-1 , 平均回收率为 98.2%, 相对标准偏
差(RSD)为 0.55%。结论 该法为控制维吾尔药黑种草子的内在质量提供了依据 。
关键词:维吾尔药黑种草子;　总黄酮;　比色法
中图分类号:R284.1;R291.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)05-1167-01
DeterminationofFlavonoidsinNigelaglanduliferaPreynetSint
Ainiwaer· Aikemu, Meiliwan·Abudureyimu, WANGYan, ZHANGXuan
(ColegeofPharmacology, XinjiangMedicalUniversity, Urumqi830054 , China)
Abstract:ObjectiveToanalyzethetotalcontentofflavonoidsinNigelaglanduliferaPreynetSintbycolorimetricmethod.
MethodsRutinwasusedasreferencesubstanceandthedetectionwavelengthwas500 nm.ResultsThelinearityofflavonoids
wasfineintherangeof0.008 ～ 0.040 mg/ml, theaveragerecoveryratewas98.2%, andRSDwas0.55%(n=5).
ConclusionThemethodhaslaidthefoundationforthecontroloftheinherentqualityinNigellaglanduliferaPreynetSint.
Keywords:NigelaglanduliferaPreynetSint;　 Totalflavonoids;　Colorimetricmethod
　　黑种草为毛茛科(Raunnculaceae)黑种草属(Nigela)植物 ,
一般药用部位为种子。目前作为药用的 3个种分别为瘤果黑种
草(又名腺毛黑种草)、果黑种草(又名家黑种草 Nigelasativa
L.)以及黑种草。瘤黑种草 NigelaglanduliferaPreynetSint为新
疆维吾尔族和西双版纳傣族习用药材 , 维吾尔族名为斯亚旦 ,秋
季采收成熟果实 , 除泥沙及果皮 , 晒干 ,得干燥种子入药。其性味
甘 , 辛 ,温。功效为利尿 , 补脑肾 ,活血 , 解毒 ,下乳 , 通经 ,止咳 ,乌
发 , 抗衰老 ,常用于治疗胸闷气促 、乳肿 、耳呜 、乳汁减少 、热淋 、石
淋 、闭经等症 [ 1] ,瘤黑种草在新疆大部分地区都有种植 , 如吐鲁
番 、善鄯等地。为了进一步开发和利用其药用价值 , 本实验对维
吾尔药黑种草子的总黄酮含量进行了测定。
1　仪器与材料
TU-1800型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任
公司);电热恒温水浴锅(型号:HH-S4);电子天平(型号:AB104
-N);芦丁对照品由中国药品生物制品检定所提供 , 亚硝酸钠 ,
硝酸铝 , 氢氧化钠 ,甲醇试剂均为分析纯;实验用水为蒸馏水。
维吾尔药黑种草子购于新疆维吾尔民族医院 ,经新疆医科大
学生药学教研室邢文兵鉴定。
2　方法与结果
2.1　维吾尔药黑种草子黄酮类化合物的提取 取维吾尔药黑种
草子 25g精密称定 ,置 100ml圆底烧瓶中 ,加入甲醇 50 ml,回流
3 h, 滤过 ,提取液置 100 ml量瓶中 ,加甲醇至刻度 , 摇匀 ,待用 。
2.2　标准曲线的绘制 精密称取芦丁对照品 100 mg, 置 50 ml容
量瓶中 , 加入甲醇 70 ml,置水浴中微热使溶解 , 放冷 ,加甲醇至刻
度 , 摇匀 ,得浓度为 2.0 mg· ml-1的标准溶液。 精密量取对照品
溶液 0.0, 0.4, 0.8, 1.2, 1.6, 2.0 ml,置 10 ml量瓶中 ,分别加水至
2.4 ml, 再分别加 5%NaNO2溶液 0.4 ml,摇匀 , 放置 6 min;再加
10%Al(NO3)3溶液 0.4 ml,摇匀 , 放置 6min;再加 10%NaOH溶
液 4.0ml,摇匀 , 室温放置 15min。在 500 nm波长处测定吸光度 ,
同时以试剂空白作参比。以吸光度为纵坐标 ,溶液质量浓度为横
坐标 , 绘制标准曲线。
2.3　测定波长的选择 精密吸取 3.0 ml芦丁 , 余下部分按 “ 2.3”
方法操作 ,在紫外 -可见分光光度计上 , 波长 400 ～ 800 nm扫描 ,
确定最大吸收波长为 500 nm。
2.4　标准曲线与回归方程 结果表明 , 芦丁标准溶液浓度线性关
系良好 。得到回归方程:A= 0.010 9C- 0.000 3, r=0.999 8。
2.5　维吾尔药黑种草子总黄酮含量的测定 精密量取样品溶液
0.5 ml,置 10ml量瓶中 ,余下部分按 “ 2.3”项方法操作 ,在 500 nm
波长处平行测定 5次 ,同以样品空白做参比。根据回归方程 , 计
算总黄酮浓度。 根据公式:总黄酮含量(%)=(黄酮化合物质
量 /样品质量)×100%,得维吾尔药黑种草子总黄酮含量。结果
见表 1。
表 1　维吾尔药黑种草子总黄酮含量测定结果
编号 样品重m/g
吸收
度
总黄酮含量
C/mg· g-1
均值
C/mg· g-1
RSD
(%)
1 24.998 2 0.193 0.257 0
2 24.997 8 0.192 0.256 8
3 24.998 6 0.193 0.257 0 0.256 9 0.443
4 24.996 9 0.191 0.255 2
5 25.001 9 0.194 0.258 4
2.6 　精密度实验 取一定质量浓度的供试品溶液 , 按 “ 2.3”项显
色 , 连续测定 5次 , 结果见表 2。采用本法测定维吾尔药黑种草
子总黄酮含量 ,精密度良好 , 其相对标准偏差(RSD)为 0.59%。
表 2　精密度实验结果
测定次数 吸光度 RSD(%)
1 0.191
2 0.194
3 0.192 0.59
4 0.193
5 0.192
2.7　稳定性实验 取对照品溶液及供试品溶液 , 按 “ 2.3”项显
色 , 于室温分别放置 0, 15, 30, 45, 60min,测定对照品及供试品溶
液吸光度 ,其 RSD分别 1.68%, 2.92%。表明对照品及供试品溶
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.5 时珍国医国药 2008年第 19卷第 5期
液在 1 h内稳定。结果见表 3。
表 3　稳定性实验结果
时间 t/min 对照品吸光度 样品吸光度
0 0.172 0.191
15 0.172 0.193
30 0.170 0.196
45 0.170 0.201
60 0.165 0.205
RSD% 1.680 2.920
2.8 　回收率实验 精密称取已知量的维吾尔药黑种草子 5份 ,
分别精密加芦丁对照品适量 , 按 “ 2.3”项下方法测定 , 平均回收
率为 98.2%, RSD为 0.55%。结果见表 4。
表 4　回收率实验结果
进样量
m/mg
加入量
m/mg
测得量
m/mg
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1.285 2.4 3.611 98.0
1.290 2.4 3.653 99.0
1.291 2.4 3.617 98.0 98.2 0.55
1.287 2.4 3.599 97.6
1.288 2.4 3.633 98.5
3　讨论
有关维吾尔药黑种子草中总黄酮的含量测定 ,目前尚未见相
关报道。本方法采用甲醇回流提取维吾尔药黑种草子中总黄酮 ,
以 NaNO2 -Al(NO3)3 -NaOH体系为显色剂 , 利用分光光度法测
定总黄酮 ,操作简便 , 重复性好 ,结果准确可靠 , 为维吾尔药黑种
草子的质量控制提供了可行的方法。
收稿日期:2007-07-05;　修订日期:2007-09-10
作者简介:张　军 (1973-),男(汉族),湖北阳新人 ,现任湖北省黄石市康
利药品器械有限公司主治医师 ,学士学位 ,主要从事临床内科工作.
当归素对溃疡性结肠炎患者
氧化损伤和花生四烯酸代谢的影响
张　军 , 万淑琼
(湖北省黄石市康利药品器械有限公司　435000)
摘要:目的 探讨当归素(SF)对溃疡性结肠炎(UC)患者氧化损伤与花生四烯酸代谢的影响及其临床治疗意义。方法 检
测 38例溃疡性结肠炎患者和 30例健康对照者的血 MDA, LPO, SOD, NO, PGE2和 TXB2的水平变化 ,同时检测结肠髓过
氧化物酶(MPO)活性 ,评价 UC患者病情活动指数(CAI)与内镜分级。结果 UC患者组血 MDA, LPO, NO, PGE2 , TXB2水
平及结肠组织 MPO活性显著高于正常对照组 ,血 SOD活性显著低于正常对照组(P<0.01), SF治疗后 UC患者组各检
测指标异常得到显著改善 ,同时 CAI评分与内镜分级亦显著得到改善(P<0.01)。结论 当归素显著缓解 UC患者氧化
损伤 , 抑制花生四烯酸代谢过度 , 减轻结肠炎症反应与损伤 ,有一定临床治疗价值。
关键词:当归素;　溃疡性结肠炎;　氧化损伤;　花生四烯酸代谢
中图分类号:R285.6　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)05-1168-02
EffectsofSodiumFerulateontheOxidativeDamageandArachidonicAcidMetabolismin
PatientswithUlcerativeColitis
ZHANGJun, WANShu-qiong
(KangliDrugandInstrumentLimitedCompany, Huangshi, Hubei435000, China)
Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofSodiumFerulateontheoxidativedamageandarachidonicacidmetabolisminpatientswithulcerativecolitis(UC)anditssignificanceofclinictherapy.MethodsIn38 patientswithUCand30 healthypeo-
ple, prostaglandinE2(PGE2), thromboxaneB2(TXB2), Malondiadchyde(MDA), Lipidsuperoxide(LPO), activityofsuperox-idedismutase(SOD)inbloodandactivityofmyeloperoxidase(MPO)incolonweredetectedbycorrespondingkitswhileCAI
gradeandendoscopegradewereevaluated.ResultsComparedwiththecontrolgroup, levelsofMDA, LPO, NO, PGE
2
, TXB
2
in
bloodandactivityofMPOincoloninpatientswithUCgroupweresignificantlyincreasedwhileactivityofSODinbloodwassignif-
icantlydecreased(P<0.01);afterSFinjectiontreatment, alltheabnormaldetectionandevaluatingindexesinpatientswithUC
groupweremarkedlyameliorated(P<0.01).ConclusionSodiumferulatecanamelioratetheoxidativedamage, inhibitarachidon-
icacidmetabolismandinflammatoryreactioninpatientswithUC.
Keywords:Sodiumferulate;　Ulcerativecolitis;　Oxidativedamage;　Arachidonicacidmetabolism
　　当归素(SodiumFerulate, SF)是中药提取的单体药性成分 ,
具有抑制花生四烯酸代谢 、拮抗组胺 、降低血管通透性 、清除自由
基 、抑制脂质过氧化 、改善血液循环 、抑制血小板聚集活化及血栓
形成 、抑制巨噬细胞活化等广泛药理作用 [ 1 ～ 3] 。大量研究证实花
生四烯酸代谢紊乱 、氧自由基损伤 、血小板活化 、微循环障碍等均
是溃疡性结肠炎(UC)的重要致病环节 [ 4 , 5] 。笔者基础研究显示
SF对结肠炎大鼠模型具有明显氧化损伤保护作用 , 显著抑制花
生四烯酸过度代谢 , 从而明显缓解其结肠炎症反应与组织损
伤 [ 1 ～ 3] 。本临床研究旨在观察 SF对 UC患者氧化损伤与花生四
烯酸代谢的影响 ,评价其临床治疗效果。
1　资料与方法
1.1　一般资料 选择 2004-06 ～ 2006-08间在湖北省黄石市中心
医院和武汉大学人民医院住院与门诊治疗的病情轻至中度的 UC
患者 38例 ,均符合 2000年全国炎症性肠病学术研讨会制订的
UC诊断标准 [ 6] 。按 CAI评分标准进行病情分期 [ 7] , ≤4分为缓
解期 , > 4分为活动期。按 Truelove标准进行内镜分级 [ 7] , 其中
活动期患者 14例 ,男 6例 ,女 8例 , 平均年龄(38.6±12.4)岁;缓
解期患者 24例 , 男 11例 , 女 13例 , 平均年龄(44.2±10.3)岁。
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 5期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.5