全 文 ：北方园艺 2007(12):211 ～ 213 ·生物技术 ·
第一作者简介:韩颖(1981-),女 ,辽宁省朝阳农业学校教师 ,从事
园林植物栽培的教学和科研工作。 E-mail:hanying0104@163.
com。
收稿日期:2007-07-25
新 几 内 亚 凤 仙 的 组 织 培 养
韩 　颖 , 刘忠智
(辽宁省朝阳农业学校,辽宁朝阳 122000)
　　摘　要:新几内亚凤仙为凤仙花科凤仙花属多年生常绿草本植物。试验对新几内亚凤仙的
组织培养进行了研究。结果表明:新几内亚凤仙繁殖采用组织培养具有变异几率小 、花大 、繁殖
速度快等特点。新几内亚凤仙最好选择春季接种 ,可以减少杂菌污染。试验利用多组培养基配
方进行组织培养试验 ,筛选出适合新几内亚凤仙的培养基:诱导培养基MS+BA 2.5 ,增殖培养基
MS+BA 2.5+NAA 2.5 ,生根培养基 MS+NAA 2.0。新几内亚凤仙在 MS+BA 2.5+NAA 2.5
上进行培养 ,增殖系数可达 4～ 5;在生根培养基 MS+NAA 2.0上进行培养 ,10 d后的生根率可
达67.5%。新几内亚凤仙组培苗移栽易于成活。以素砂为基质 ,驯化后移栽 ,成活率达95.2%。
关键词:新几内亚凤仙;组织培养;培养基
中图分类号:S 681.103.6　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2007)12-0211-03
　　新几内亚凤仙(Impatiens Platgptala)又名霍克凤
仙 ,是凤仙家族中的一个新种。原产于非洲南部和澳洲
的新几内亚岛 ,为凤仙花科 ,凤仙花属多年生常绿草本
植物[ 1] 。新几内亚凤仙于近几年引入我国 ,作为一种草
花新秀 ,因其具有漂亮的花朵 ,丰富的色彩独特的叶色 、
叶形以及极长的花期和较强的适应性而具有着广阔的
市场前景[ 2] 。国外学者对新几内亚凤仙的变异性 、育种
选择和生长等方面进行了较多的研究 ,而在组织培养方
面的报道较少。我国学者曾前 、熊丽等对新几内亚凤仙
的组织培养和快速繁殖进行了初步试验 ,取得了较好的
结果[ 3-4] 。
试验在前人研究的基础上 ,利用多组培养基配方进
行组织培养试验 ,找出最适合新几内亚凤仙组织培养所
需的激素种类和水平及培养基。
1　材料和方法
试验在沈阳农业大学花卉基地和组织培养实验室
中进行。
1.1　供试材料
新几内亚凤仙当年生的新发幼茎。
1.2　供试药品
生长素:吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸
(NAA)、2 ,4-二氯苯氧乙酸(2 ,4-D);细胞分裂素:激动素
(KT)、6-苄基氨基嘌呤(6-BA)。70%的酒精及 0.1%的
升汞。
1.3　试验方法
1.3.1　取材方法　2002年 3月从花卉棚内选取健康无
病虫害的盆栽植株移入温室 ,杀菌剂喷洒处理 ,一周后
选取外植体。
1.3.2　培养基设计　以培养基 MS(每 500 mL中琼脂
3.5 g ,蔗糖 15 g ,蒸馏水 500 mL)为对照 ,以 MS+BA
1.0、2.5 、5.0;MS+KT 1.0 、2.5 、5.0做 6组培养基 ,筛选
适合的细胞分裂素及诱导培养基。以 MS+BA 1.0 、2.5
+IAA 0.5 、1.0 、2.5;MS+BA 1.0 、2.5+IBA 0.5、1.0、
2.5;MS+BA 1.0 、2.5+NAA 0.5 、1.0、2.5;MS+BA
1.0、2.5+2 ,4-D 0.5、1.0 、2.5做24种培养基 ,筛选适合
的生长素及增殖培养基。以培养基 MS 为对照 ,以
MS+NAA 1.0、2.0 、3.0做3种培养基 ,筛选出适合的生
根培养基。
1.3.3　试验程序　试材消毒:选取长约 2 cm的茎尖或
细嫩的茎段剪下 ,剪去大叶自来水冲洗30min ,在无菌条
件下 ,70%的酒精浸泡30 ～ 60 s ,再用 0.1%的升汞溶液
加 1～ 2滴吐温20消毒8 ～ 10min(必要时:用3%的次氯
酸钠溶液进行消毒灭菌10min),无菌水冲洗4 ～ 5次 ,无
菌滤纸将外植体表面水分吸干。接种和初代培养:将经
消毒的外植体接种到诱导培养基MS+BA 1.0、2.5 、5.0;
MS+KT 1.0 、2.5 、5.0中 ,每瓶培养基接种3个外植体 ,
每组培养基 10瓶。1周后 ,茎尖开始生长 ,少数外植体
基部开始膨大 ,并产生愈伤组织;1个月后 ,外植体在原
茎尖生长的同时 ,侧芽萌发 ,并从基部愈伤组织分化形
成大量的丛生芽 ,此后的发育主要是愈伤组织的继续形
成及丛生芽数量的增加;当诱导的丛生芽变的扁大而变
异时 ,可将丛生芽分割成小块后转入诱导培养基。继代
增殖和生根培养:将分割成小块的丛生芽接种到培养基
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·生物技术· 北方园艺 2007(12):211～ 213
MS+BA 1.0 、2.5+IAA 0.5 、1.0、2.5;MS+BA 1.0 、
2.5+IBA0.5 、1.0 、2.5;MS +BA 1.0 、2.5+NAA 0.5 、
1.0 、2.5;MS +BA 1.0 、2.5 +2 ,4-D 0.5 、1.0、2.5中 ,
使丛生芽长高长粗壮。每种接种 7个 ,每组培养基 10
瓶。增殖培养基可以和诱导培养基交替使用 ,使繁殖系
数达到最高 ,并且使生长出来的丛生芽质量更好 ,芽更
粗壮。1个月后 ,将分化形成的丛生芽分割成小丛或单
株转接到新鲜的增殖培养基中 ,当繁殖系数达到所需要
求时 ,可将带茎尖的1 ～ 1.5 cm长的小苗转入生根培养
基。练苗和移栽培养:试管苗生根培养 15 ～ 20 d后 ,即
可移到室外进行练苗移栽。先将瓶口打开小缝 ,在有散
射光的室内锻炼1 ～ 2 d ,再揭除封口膜锻炼1 d。然后用
镊子将根长约为1 cm ,株高2 ～ 3 cm的完整植株从培养
基中小心取出 ,经清洗去掉根部粘连的培养基。用1 000
倍的多菌灵溶液浸泡2 min后移至素砂床中。移栽前基
质要浇透水 ,移栽后搭小拱棚 ,覆膜 ,并扣遮阳网。采用
间隔喷雾法 ,保持温度为 26℃左右 ,湿度为 90%～ 95%。
1～ 2周后 ,可将相对湿度降至 70%～ 80%;15 d后可移
植到营养钵中。钵内基质可按泥炭∶砂∶园土=3∶1
∶1的比例混合配制。
1.4　试验处理及调查项目
1.4.1　取材时间的选择　分别在 2002年 3月、6月、9
月取材 ,接种在同一培养基上。接种芽数均为 30个 ,均
采用 0.1%的升汞消毒 10 min ,接种 5 ～ 10 d调查污染
率。评价指标如下:
污染率(%)=污染茎尖个数/接种茎尖个数×100。
1.4.2　最适合组织培养的细胞分裂素　茎尖萌发的基
本培养基均为 MS ,添加激素的种类和浓度见表 1 ,接种
时间为 2002年 3月 ,接种 20 d后调查。统计萌发的茎
尖数 ,评价指标如下:
萌芽率(%)=萌发的茎尖个数/接种茎尖个数×100。
　　表 1　　茎尖萌发效果试验因素和水平
激素种类 激素浓度/mg·mL-1
BA 1.0 2.5 5.0
KT 1.0 2.5 5.0
　　表 2　　　增殖效果试验因素和水平
激素种类 激素浓度/mg·mL-1
BA 0.5 1.0 2.5
IAA 0.5 1.0 2.5
IBA 0.5 1.0 2.5
NAA 0.5 1.0 2.5
2 ,4-D 0.5 1.0 2.5
1.4.3　不同生长调节剂水平的增殖效果　试验研究了
IAA 、IBA 、NAA 、2 ,4-D不同浓度的组合对于新几内亚凤
仙增殖效果的影响 ,生长调节剂种类和浓度(见表 2)。
接种 1个月后调查增殖株数。试验时间为初代培养建
立后 2个月 ,比较不同处理的增殖系数:
增殖系数(%)=转瓶后的茎段数/转瓶前的茎段数×100。
1.4.4　不同生长调节剂水平的生根效果　试验研究了
NAA在浓度为 1.0 、2.0 、3.0时 ,对新几内亚凤仙生根的
影响(标准为移入生根培养基10 d后)。
1.4.5　生根试管苗移栽成活率　试管苗在瓶内生根后
20 d左右 ,练苗并移栽。试验时间为 2002年 9月 ,移栽
后 15 d调查成活率:
成活率(%)=成活株数/移栽株数×100。
2　结果和分析
2.1　不同的取材时间对组培污染的影响
在无菌体系建立过程中 ,外植体的选择十分重要。
试验分别于2002年3月 、6月 、9月 3个时期取材 ,研究
对比了不同取材时期对组培污染的影响 ,均采用 0.1%
的升汞消毒 10min(见表3)。从表 3可以看出 ,6月份接
种的污染率最高为 53.3%,而 3月和 9月份相对污染较
轻。这可能是因为6月份气温偏高 ,棚内和实验室内的
杂菌都较多的原因。所以 ,试验认为新几内亚凤仙的组
织培养在春季的接种效果较好。
　　表 3　不同取材时期对新几内亚凤仙茎尖
培养污染的影响
接种时期 3月 6月 9月
接种芽数 30 30 30
污染芽数 6 16 10
污染率/ % 20.0 53.3 33.3
　　注:培养基均为MS+BA 2.5。
2.2　茎尖组培中细胞分裂素类对萌发的影响
表 4列出了使用 BA和使用KT 的培养基对新几内
亚凤仙接种效果的影响。可以看出 BA组中以 BA 2.5、
BA 5.0的萌发情况最好 ,KT 组中 KT 5.0的萌发情况
最好。但是使用BA 2.5与使用KT 5.0相比较 ,BA 2.5
的萌发效果好于KT 5.0。所以 ,适于新几内亚凤仙进行
组织培养的细胞分裂素是 BA ,适合的诱导培养基是
MS+BA 2.5。
　　表 4　　不同细胞分裂素对新几内亚凤仙茎尖
萌发的影响
序号 培养基/ mg·mL-1 接种数 萌发数 萌发率/ %
CK MS 30 16 53.3
1 MS+KT 1.0 30 20 66.7
2 MS+KT 2.5 30 22 73.3
3 MS+KT 5.0 30 26 86.7
4 MS+BA 1.0 30 23 76.7
5 MS+BA 2.5 30 26 86.7
6 MS+BA 5.0 30 26 86.7
2.3　不同生长调节剂水平对增殖的影响
由表 5可以看出 ,使用 NAA 和使用 IAA 培养基 ,
其增殖系数都比较高。但是经过多次试验 ,从整体效果
来讲 , IAA的使用效果不稳定。这是因为 IAA本身不稳
定。在培养基的灭菌过程中 ,由于温度过高 , IAA 易分
解 ,所以弃用 IAA ,选择使用 NAA。在新几内亚凤仙的
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北方园艺 2007(12):211 ～ 213 ·生物技术 ·
增殖培养中 ,使用培养基MS+BA 2.5+NAA 2.5的增
殖系数最高 ,可达到 4.9 ,所以选择该种培养基作为增殖
培养基。
　　表 5　不同激素水平对新几内亚凤仙增殖的影响
序号 培养基/mg·mL-1 接种数 增殖后株数 增殖系数
1 MS+BA 1.0+IAA 0.5 70 298 4.3
2 MS+BA 1.0+IAA 1.0 70 275 3.9
3 MS+BA 1.0+IAA 2.5 70 325 4.7
4 MS+BA 1.0+IBA 0.5 70 275 3.9
5 MS+BA 1.0+IBA 1.0 70 289 4.1
6 MS+BA 1.0+IBA 2.5 70 309 4.4
7 MS+BA 1.0+NAA 0.5 70 285 4.1
8 MS+BA 1.0+NAA 1.0 70 300 4.3
9 MS+BA 1.0+NAA 2.5 70 313 4.5
10 MS+BA 1.0+2 , 4-D 0.5 70 290 4.1
11 MS+BA1.0+2 ,4-D1.0 70 294 4.2
12 MS+BA 1.0+2 , 4-D 2.5 70 309 4.4
13 MS+BA 2.5+IAA 0.5 70 300 4.3
14 MS+BA 2.5+IAA 1.0 70 274 3.9
15 MS+BA 2.5+IAA 2.5 70 345 4.9
16 MS+BA 2.5+IBA 0.5 70 290 4.1
17 MS+BA 2.5+IBA 1.0 70 314 4.5
18 MS+BA 2.5+IBA 2.5 70 315 4.5
19 MS+BA 2.5+NAA 0.5 70 298 4.3
20 MS+BA 2.5+NAA 1.0 70 321 4.6
21 MS+BA 2.5+NAA 2.5 70 344 4.9
22 MS+BA 2.5+2 , 4-D 0.5 70 301 4.3
23 MS+BA 2.5+2 , 4-D 1.0 70 312 4.5
24 MS+BA 2.5+2 , 4-D 2.5 70 318 4.5
2.4　不同生长调节剂水平对生根的影响
试管苗移入生根培养基 10 d后 ,其生根率见表 6。
从表 6中可以看出 ,向 MS中添加 NAA以后 ,有效提高
了新几内亚凤仙的生根率。使用 NAA 1.0时的生根率
为55.5%,比对照提高了 5.5%;使用 NAA 2.0时的生
根率为 67.5%,比对照提高了 17.5%;使用 NAA3.0时
的生根率为 66.5%,比对照提高了 16.5%。由于新几内
亚凤仙本身易于生根 ,并且 NAA浓度过高时 ,生根率反
而下降。因此 ,试验认为 ,适合新几内亚凤仙的生根培
养基是 MS+NAA 2.0。
　　表 6　NAA不同浓度对新几内亚凤仙生根的影响
序号 NAA/ mg·mL-1 生根率/ %
MS 0 50.0
1 1.0 55.5
2 2.0 67.5
3 3.0 66.5
2.5　生根试管苗移栽成活率
新几内亚凤仙试管苗下地移栽成活率较高 ,平均成
活率达 95.2%(表 7)。
　　表 7　　新几内亚凤仙试管苗移栽成活率
序号 下地株数 成活株数 成活率/ %
1 70 66 94.3
2 70 67 95.7
3 70 67 95.7
3　结论和讨论
试验对新几内亚凤仙的离体繁殖进行了初步的研
究 ,从外植体的选择到组培苗的下地做了一系列的试验。
3.1　接种与增殖
试验筛选出适于新几内亚凤仙进行组培繁殖的诱
导培养基 MS+BA 2.5和增殖培养基 MS+BA 2.5+
NAA 2.5。
研究认为最适于新几内亚凤仙接种的时期为春季
3 、4月份 ,此时杂菌相对较少 ,接种后污染较轻 ,茎尖萌
发率高。
由于新几内亚凤仙侧枝的萌发能力不强 ,以茎段增
殖为主 ,又极易长根 ,所以在不玻璃化的前提下 ,可适当
提高 BA的浓度 ,培养环境温度也可以调整的高一些 ,光
强也可以适当强一些 ,但要避免阳光直接照射到组培苗
上。由于新几内亚凤仙组培苗的生长周期为 1个月 ,封
口膜最好用不透气的膜 ,否则培养基容易变干 ,对组培
苗的生长不利。组培条件管理得当 ,新几内亚凤仙的增
殖系数可以达到4 ～ 5倍。
3.2　生根和移栽
试验筛选出了适于新几内亚凤仙生根的培养基
MS+NAA 2.0。生根对于新几内亚凤仙来说不是问题 ,
新几内亚凤仙组培繁殖后期需要注意的是组培苗驯化
阶段的管理。此阶段应该注意出瓶的组培苗根长要适
中 ,避免根过长 ,否则操作中容易伤根;种植前 ,将受污
染的小苗剔除;种后相对湿度应保持在 90%～ 95%之
间 ,随后逐渐降低湿度 ,防止腐烂死苗;并使小苗逐渐适
应自然环境;小苗移栽后 ,极易受病菌侵染 ,要及时用药
剂进行防治和加强水肥管理。
参考文献
[ 1] 　叶剑秋.凤仙花—春夏季节理想的居住盆花[ J] .园林,2000(3):14-15.
[ 2] 　陈延.来自异国的花卉明星—新几内亚凤仙[ J] .中国花卉盆景 , 2000
(3):4-5.
[ 3] 　曾前.新几内亚凤仙的组织培养和快速繁殖[ J] .中国林副特产 2002
(1):12-14.
配制农药都应注意啥
1　要严格掌握药剂的加水倍数。每种农药都有一定的使用浓
度范围 ,加水过多 ,影响药剂;加水不足 ,不但浪费农药 ,还会引
起药害 ,尤其是高效农药 ,更应严格掌握使用浓度。
2　注意选择水的质量。配制药剂的用水应该用清水,如河水、
塘水以及井水 ,不要用脏水、污水和苦井水。脏水 、污水里杂质
多 ,配制农药液容易堵塞喷头 ,同时还会影响药剂的效果。在
没有清水的情况下 ,只能使用苦水、硬水时,应选在水中加些碱
面(每 50 kg加 0.1 kg 碱面),使水里的矿物质沉淀。
3　注意加水方法。可湿性粉剂 、乳剂或其它可以溶在水里的
农药,再加入大量水之前应先加少量水 ,配好母液 ,然后按照所
需要的浓度加足水量。这样可以相对提高可湿性粉剂的悬浮
率和乳剂的稳定性,对可溶于水的药剂也便于搅拌,促使其均
匀溶解。
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