全 文 ：rootsofJuglansmandshurica[ J] .JNatProd, 2002, 65:1707-
1708.
[ 6] 　LiG, XuML, ChoiHG, etal.Fournewdiarylheptanoidsfrom
therootsofJuglansmandshurica[ J] .ChemPharmBul, 2003, 51
(3):262-264.
[ 7] 　胡喜兰 ,朱　慧 , 屠鹏飞 ,等.凤仙花的化学成分研究 [ J].中
成药 , 2003, 25(10):833-834.
[ 8] 　杨念云 ,钱士辉 ,段金廒 ,等.野马追地上部分的化学成分研
究(Ⅰ )[ J].中国药科大学学报 , 2003, 34(3):220-221.
[ 9] 　郭洪祝 ,李家实.南方菟丝子黄酮类成分的研究 [ J] .中国中
药杂质 , 1997, 22(1):38-39.
[ 10] 　张　雁 ,王　克 ,刘宏民 ,等.马桑叶中黄酮类化合物的分离
提取及结构鉴定 [ J] .中草药 , 2006, 37(3):341-343.
[ 11] 　LiW K, XiaoPG, PanJQ.CompleteAssignmentof1Hand13
CNMRSpectraofIkarisosideAandEpimedosideC[ J].Magn
ResonChem, 1998, 36:303-304.
柚皮素 、橙皮素和桑色素硫酸酯的合成及其 HPLC-MS的鉴定
段　宁 1 , 　张　莹 1 , 　李　慧1 , 　刘　文 2 , 　邓亦峰 3 , 　梁念慈 2, 3
(1.广东医学院第一临床学院 05级;2.广东医学院生物化学与分子生物学研究所;3.广东医学院天然药
物研究与开发重点实验室 ,广东 湛江 524023)
收稿日期:2008-06-17
基金项目:广东省重点学科基金资助(9306)
作者简介:段　宁(1986-),女 ,在读本科生。
＊通讯作者:刘　文(1970-),男 ,医学硕士 ,副教授 , 主要从事抗血小板药物作用机理的研究。 Tel:(0759)2388582-4　Email:liuw422@
yahoo.com.cn
关键词:柚皮素;橙皮素;桑色素;高效液相色谱-质谱联用
摘要:目的:合成柚皮素 、橙皮素 、桑色素硫酸酯。 方法:柚皮素 、橙皮素 、桑色素在冰浴中与浓硫酸反应 2 h, 用 6 mol/L
NaOH终止反应。衍生物用高效液相色谱 (HPLC)-大气压化学电离(APCI)-质谱(MS)联用鉴定。结果:有柚皮素 、橙皮
素和桑色素硫酸酯的生成。结论:此方法可以用于柚皮素 、橙皮素和桑色素硫酸酯的合成。
中图分类号:R284.1　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2009)07-1085-03
　　柚皮素(Naringenin)、橙皮素(Hesperetin)和桑
色素(Morin)同属于天然的黄酮类化合物 。柚皮素
在降血脂 、镇静 、抗氧化 、抗真菌 、抗肿瘤 、抗动脉粥
样硬化 [ 1] 、抗牙周炎病原菌[ 2] 、防辐射 [ 3]等方面具
有较强的生物活性;橙皮素具有抗氧化 、抗炎症 、抗
变态性反应 、降血脂 、保护心血管和抗肿瘤等药效作
用 [ 4, 5] ;桑色素则具有抗炎[ 6] 、抗肿瘤 [ 7] 、抗氧化 [ 8] 、
抗菌[ 9] 、免疫抑制 [ 10]等作用。鉴于它们的作用领域
之广及水溶性之差 ,本研究小组采用化学合成法合
成柚皮素 、橙皮素 、桑色素的硫酸酯钠盐衍生物以增
加其水溶性从而提高生物利用度 ,现将此合成实验
报道如下。
1　材料
1.1　试剂
柚皮素 、橙皮素 、桑色素均为 Sigma公司产品 ,
CH3CN(HPLC级)为美国 Fisher公司产品 ,其余为
国产分析纯试剂 。
1.2　仪器
岛津 LCMS-8000a型高效液相色谱-质谱联用
(含在线脱气机 ,两台 LC-10AVP高压输液泵 , SPD-
10AVP紫外检测器 ,柱温箱 , APCI源接口 ,四极杆质
谱检测器)。
2　方法
2.1　水溶性衍生物的制备
采用 1 g柚皮素(橙皮素或桑色素)在冰浴搅拌
下缓慢加入 4 mL浓硫酸 ,搅拌反应 2 h后 , 用 6
mol/LNaOH中和至 pH约为 5,加 150 mL无水乙醇
搅拌后于 4℃放置 3 h, 2 000r/min离心 5min,沉淀
除去生成的 Na2SO4 ,取上清液用 6 mol/LNaOH调
pH约为 8, 4℃存过夜 , 3 000 r/min离心 5 min,得到
的沉淀为柚皮素(橙皮素或桑色素)的水溶性衍生物
硫酸酯钠盐 ,用真空干燥器抽干。
2.2　水溶性衍生物的 HPLC-APCI-MS联用色谱鉴定
2.2.1　色谱条件　采用流动注射法直接进样;流动
相为 50%乙腈-2 mmol/L醋酸铵水溶液;流速 0.2
mL/min,进样 2μL。
1085
2009年 7月
第 31卷　第 7期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
July2009
Vol.31　No.7
2.2.2　质谱条件　ESI离子源 ,电压 -4.5 kV,离
子传输电压 +55 V、温度 250℃,偏转电压 -40 V,
检测器电压 1.6kV,喷雾氮气流速 4.5L/min,采用
负离子扫描方式 , m/z范围 50 ～ 700,扫描间隔 1s。
2.2.3　样品制备　柚皮素和柚皮素衍生物 、橙皮素
和橙皮素衍生物 、桑色素和桑色素衍生物用甲醇
(加几滴 1mol/LHCl)配制成 1 g/L的溶液 ,备用 。
2.2.4　水溶性衍生物的 HPLC-APCI-MS联用色谱
鉴定　将上述样品溶液进行 HPLC-APCI-MS分析。
3　结果与讨论
3.1　水溶性衍生物的 HPLC-APCI-MS色谱图
样品溶液进行 HPLC-APCI-MS分析 ,得到桑色
素和桑色素衍生物 、橙皮素和橙皮素衍生物 、柚皮素
和柚皮素衍生物的总离子流图 ,如图 1。
图 1　桑色素 、橙皮素 、柚皮素及其衍生物的总离子流图
峰 1.桑色素　2.桑色素被酯化的产物　 3.橙皮素　 4.橙皮素被酯
化的产物　 5.柚皮素　6.柚皮素被酯化的产物
3.2　总离子流图解析
图 1中的 1号和 2号峰的质谱图如图 2、3, 3号
和 4号峰的质谱图如图 4、5, 5号和 6号峰的质谱图
如图 6、7。
　　桑色素分子量为 302,图 2显示它在 ESI-MS的
质谱行为为:[ M-H] -=301。图 3是桑色素衍生物
总离子流图中色谱峰的质谱图 , 显示主要产物在
ESI-MS的质谱行为有:[ M+OSO3H-H] -=381, [ M
+2OSO3H-H] -=461,这表明产物分别为增加了一
个(-OSO3H)或两个 硫酸酯基团的桑色素硫酸酯 ,
其中单硫酸酯生占多数 。另外 ,图 3中还有一较高
图 2　桑色素(峰 1)的质谱图
图 3　桑色素衍生物(峰 2)的质谱图
图 4　橙皮素(峰 3)的质谱图
图 5　橙皮素衍生物(峰 4)的质谱图
图 6　柚皮素(峰 5)的的质谱图
图 7　柚皮素衍生物(峰 6)的的质谱图
的峰(285),提示桑色素在质谱分析中被打丢一个
1086
2009年 7月
第 31卷　第 7期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
July2009
Vol.31　No.7
氧原子([ M-O-H] -=285)。
　　橙皮素分子量为 302,图 4显示它在 ESI-MS的
质谱行为为:[ M-H] - =301。图 5是橙皮素衍生物
总离子流图中色谱峰的质谱图 , 显示合成产物在
ESI-MS的质谱行为主要为:[ M+OSO3H-H] - =
381,表明它是在橙皮素上增加了一个硫酸酯的产
物 。图 5中峰 461提示产物中有橙皮素双硫酸酯
([ M+2OSO3H-H] - =461),但含量极低。总的看
来 ,生成产物绝大多数是橙皮素单硫酸酯 。
柚皮素分子量为 272 ,图 6可显示它在 ESI-MS
的质谱行为为:[ M-H] -=271 。图 7是柚皮素衍生
物总离子流图中色谱峰的质谱图 ,显示了主要合成
产物在 ESI-MS的质谱行为:[ M+OSO3H-H] - =
351、[ M+2OSO3H-H] - =431, 提示它们分别为增
加了一个(-OSO3H)或两个硫酸酯基团的柚皮素硫
酸酯 ,其中柚皮素单硫酸酯占产物的绝大部分 ,而柚
皮素双硫酸酯含量极少。
总之 ,用本法合成柚皮素 、橙皮素 、桑色素的硫
酸酯钠盐衍生物生成所需产物比例较高 ,产物相对
单一 ,而且它们母核的基本结构没有被破坏 ,因此适
合大量合成 。而上述 3种天然黄酮类化合物的广泛
作用如果在这些合成产物中得以体现 ,我们有理由
相信它们将有很好的发展前景 。
参考文献:
[ 1] 　杨宏亮 ,田珩.柚皮苷及柚皮素的生物活性研究 [ J] .中药材 ,
2007, 30(6):752-754.
[ 2] 　TsuiVW, WongRW, RabieAB.Theinhibitoryeffectsofnaring-
inonthegrowthofperiodontalpath-ogensinvitro[ J] .Phytother
Res.2007, 22(3):401-406.
[ 3] 　BenkovicV, OrsolicN, KnezevicAH, etal.Evaluationofthe
radioprotectiveefectsofpropolisandflavonoidsingamma-iradia-
tedmice:TheAlkalineCometAssayStudy[ J] .BiolPharm
Bul, 2008, 31(1):167-172.
[ 4] 　徐　春 , 徐萌萌.橙皮素的药效研究及应用 [ J] .天然产物分
离 , 2006, 4(6):1-8.
[ 5] 　ChoiIY, KimSJ, JeongHJ, etal.Hesperidininhibitsexpression
ofhypoxia[ J] .CelBiochem, 2007, 305(1-2):153-61.
[ 6] 　GalvezJ, CoelhoG, CrespoME, etal.Intestinalantinflammato-
ryactivityofmorinonchronicexperimentalcolitisintherat[ J].
AlimentPharnmcolTher, 2001, 15(12):2027-2039.
[ 7] 　BrownJ, OPreyJ, HarrisonPR.Enhancedsensitivityofhuman
oraltumourstotheflavonol, morin, duringcancerprogression:in-
volvementoftheAktandstreskinasepathways? [ J].Carcino-
genesis, 2003, 24(2):171-177.
[ 8] 　KitagawaS, SakamotoH, TanoH.Inhibitoryefectsofflavonoids
onfreeradical-inducedhemolysisandtheiroxidativeefectson
hemoglobin[ J] .ChemPharmBul(Tokyo), 2004, 52(8):999-
1001.
[ 9] 　RanhaJP, RemesS, HeinonenM, etal.Antimicmbialefectsof
finnishplantextractscontainingflavonoidsandotherphenolic
compounds[J].IntJFoodMicrobiol, 2000, 56(1):3-12.
[ 10] 　FangSH, HouYC, ChaoPD.Pharmacokineticandpharmacodyna-
micinteractionsofmorinandcyclosporine[J].ToxicolAppl
Pharmacol, 2005, 205(1):65-70.
HS-SPME-GC-MS法分析紫荆花及其花蕾的挥发性成分
李　勉 1, 2 , 　王金梅 1, 2 , 　康文艺 1, 2
(1.河南大学天然药物研究所 ,河南 开封 , 475004;2.河南大学药学院 ,河南 开封 475004)
收稿日期:2008-05-14
作者简介:李　勉(1954-)女 ,高级实验师 ,从事天然药物化学研究。 Tel:(0378)3880630
关键词:紫荆花;挥发油;固相微萃取
摘要:目的:分析紫荆花和花蕾的挥发性成分。方法:采用固相微萃取法提取 , 运用气相色谱-质谱联用法对其化学成分进
行分析与鉴定 , 用面积归一化法测定各组分的相对百分含量。结果:从紫荆花和花蕾中共鉴定了 63个化合物 ,主要成分为
烃类化合物, 24个成分是共有的。结论:首次分析了紫荆花和花蕾的挥发性成分 ,为这一资源的开发利用提供了依据。
中图分类号:R284.1　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2009)07-1087-04
　　紫荆(CercischinensisBge)又名满条红 ,为豆科
紫荆属植物 ,分布于华北 、华东 、西南 、中南及陕西 、
甘肃 、辽宁等省区 。根 、树皮及木材入药 ,有活血行
气 、消肿止痛 ,祛痰解毒之功效;树皮 、花梗为外科疮
疡要药;民间用花治风湿筋骨痛 [ 1] 。目前对紫荆资
源的研究不多 ,主要集中在紫荆花红色素的提取及
1087
2009年 7月
第 31卷　第 7期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
July2009
Vol.31　No.7