全 文 ：2014 第十六卷 第一期 ★Vol.16 No.1
〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕
收稿日期：2014-01-02
修回日期：2014-01-07
＊ 四川省教育厅省属高校科研创新团队建设计划（11TD004）：中藏药资源保护与利用，负责人：张艺。
＊＊ 通讯作者：范刚，博士，讲师，主要研究方向：中药及民族药质量标准化研究。
藏药打箭菊的质量标准研究＊
周礼仕，周 林，岳清洪，陈一龙，叶 凡，张 艺，范 刚＊＊
（成都中医药大学民族医药学院 成都 611137）
摘 要：目的：建立藏药打箭菊的质量标准。方法：采用显微、薄层色谱法建立其鉴别方法；参考 2010
年版《中国药典》（一部）相关方法测定其水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物的含量；采用高效液相
色谱法测定木犀草素的含量。结果：藏药打箭菊药材的显微、薄层色谱鉴别特征明显，专属性强；打箭
菊药材中木犀草素含量为 0.036%~0.104%（均值 0.078%），水分为 9.32%~15.82%（均值 13.11%），总
灰分为 6.65%~8.29%（均值 7.45%），酸不溶性灰分为 0.23%~0.59%（均值 0.42%），浸出物为 21.42%~
30.15%（均值 24.86%）。结论：本文建立的方法操作简单、准确可靠、重复性良好，可用于控制打箭菊药
材的质量
关键词：藏药 打箭菊 质量标准 木犀草素 高效液相色谱法
doi: 10.11842/wst.2014.01.025 中图分类号：R291.4 文献标识码：A
藏药打箭菊（藏药名：阿夏塞尔郡）为菊科植物
川西小黄菊 Pyrethrum tatsienense（Bur. et Franch.）
Ling 的干燥花序，主要分布于西藏、青海、四川、云
南等地 [1]。打箭菊具有散瘀、止痛、敛“黄水”的功效，
常用于治疗黄水病、瘟疫病等 [2]。打箭菊药材主要含
有黄酮类、萜类、香豆素等化学成分，其中黄酮类成
分具有抗炎镇痛、抗缺氧、保肝等药理活性 [3~7]。因
此，已有藏药打箭菊中的总黄酮、木犀草素含量测
定的文献报道 [8,9]。藏药打箭菊为 1995 年版《卫生部
药品标准·藏药（第一册）》收载品种 [10]，但该标准未
收载其薄层鉴别和含量测定项。本文对不同产地的
打箭菊药材进行了显微和薄层鉴别研究，测定了水
分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物的含量，
并采用 HPLC 法测定了木犀草素的含量，为打箭菊
药材的质量控制提供了科学依据。
1 仪器与试药
Agilent 1200 高效液相色谱仪（美国 Agilent 公
司），包括四元泵、自动进样器和 DAD 检测器；
ULUP-I-10T 优普超纯水机（成都超纯科技有限公
司）；CQ-250 型超声波清洗器（上海必能信公司）；
BP211D 1/10 万电子天平（德国 Sartorius 公司）。
木犀草素对照品（批号：111520-200504，供含量
测定用）由中国药品生物制品检定研究院提供；甲
醇为色谱纯（Fisher 公司），水为超纯水，其他试剂均
为分析纯。打箭菊药材共 9 批，主要来自于四川、云
南、西藏、青海等地（见表 1），经成都中医药大学严
铸云教授鉴定为川西小黄菊 P. tatsienense（Bur. et
Franch.）Ling 的干燥花序。
2 方法与结果
2.1 鉴别
2.1.1 显微鉴别
取 9 批打箭菊药材，分别粉碎，按照 2010 年版
《中国药典》（一部）附录 IIC 显微鉴别法，观察药材
粉末的显微特征。本品粉末棕黄色。花粉粒多见，圆
球形，棕黄色，具 3 个萌发孔，萌发沟明显，外壁边
缘具刺。花粉囊内壁细胞多见，呈椭圆形或长椭圆
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形，具点状﹑条状或螺旋状增厚的壁。柱头碎片先端
表皮细胞呈钝圆头的绒毛凸起，顶端较长。花药与
花丝相接处为长方形﹑类方形或梯形厚壁细胞。非
腺毛众多，弯曲，柄部细胞 2~5 个，扭转或不扭转，
内含黄棕色物质。苞片的下表皮细胞类长方形，壁
薄，气孔不定式，副卫细胞 3~4 个。导管多为螺纹导
管，偶见双螺纹导管。见图 1。
2.1.2 薄层鉴别
取本品粉末约 0.5 g，加甲醇 5 mL，超声处理
15 min，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。另取木
犀草素对照品，加甲醇制成每 1 mL 含 0.1 mg 的溶
液，作为对照品溶液。按照 2010 年版《中国药典》
（一部）附录Ⅵ B 薄层色谱法 [11]，吸取上述两种溶液
各 3 μL，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以三氯甲
烷-乙酸乙酯-甲酸（9∶5∶0.5）为展开剂，展开，取出，
晾干，喷以 10%硫酸乙醇溶液，在 105℃加热数分
钟，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在
与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
见图 2。
2.2 检查项及浸出物的测定
水分测定参照 2010 年版《中国药典》（一部）附
录Ⅸ H 第一法；总灰分和酸不溶性灰分测定参照附
录Ⅸ K；浸出物测定参照附录 X A 热浸法。9 批药
材的测定结果见表 1。
2.3 含量测定
2.3.1 色谱条件
色谱柱：Ultimate XB -C18（4.6 mm ×250 mm，5
μm）；流动相：乙腈-0.2%磷酸水溶液（30∶70）；检测波
长：350 nm；流速：1.0 mL·min-1；柱温：30℃；进样量：20
μL。理论塔板数按木犀草素峰计算应不低于 5 000。
2.3.2 对照品溶液的制备
精密称取木犀草素对照品适量，加甲醇制成每
1 mL 含木犀草素 28.08 μg 的溶液，即得。
2.3.3 供试品溶液的制备
取本品粉末约 0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶
中，精密加入 70%甲醇 30 mL，密塞，称定重量，超
声处理（功率 200 W，频率 40 kHz）40 min，取出，放
冷，再称定重量，用 70%甲醇补足减失的重量，摇
匀，滤过，取续滤液，即得。
2.3.4 线性关系考察
精密吸取上述对照品溶液各 2、5、10、15、20、
25 μL，注入液相色谱仪，测定其峰面积。以木犀
草素峰面积值为纵坐标，进样量（μg）为横坐标，
进行线性回归，得回归方程 Y = 3 829.1X +
0.691 6（r = 0.999 9）。结果表明，木犀草素在
0.056 2~0.702 0 μg 范围内，进样量与峰面积线
性关系良好。
2.3.5 精密度试验
精密吸取同一对照品溶液，按上述色谱条件连
图 1 打箭菊药材粉末显微特征图
注：1.柱头先端表皮细胞，2.气孔，3.花粉粒，4.花粉囊内壁细胞，
5.导管，6.厚壁细胞，7.腺毛。
图 2 打箭菊的 TLC 图
注：1.木犀草素对照品，2~10. 9批打箭菊药材样品。
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续进样 6 次，记录峰面积。结果木犀草素峰面积的
RSD 为 0.88%，表明仪器精密度良好。
2.3.6 重复性试验
取同一批样品（编号：2）粉末约 0.5 g，共 6 份，
精密称定，分别按“2.3.3”项下方法制备供试品溶
液，按上述色谱条件进样，记录峰面积，计算木犀草
素的含量，其 RSD 为 0.76%，表明重复性良好。
2.3.7 稳定性试验
取同一供试品溶液，按上述色谱条件，分别在
0、1、2、4、8、12 h 进样，记录峰面积，其 RSD 为
0.67%，表明样品在 12 h 内稳定性良好。
2.3.8 加样回收率试验
取已知含量的样品（编号：2）粉末 6 份，每份约
0.25 g，精密称定，分别精密加入对照品适量，按
“2.3.3”项下方法制备供试品溶液，在上述色谱条件
下测定木犀草素的含量，计算回收率，见表 2。结果
木犀草素的加样回收率在 95%~105%之间，平均回
收率为 98.08%，RSD 为 1.57%。
2.3.9 样品含量测定
取不同批次的打箭菊药材样品，平行 2 份，按
“2.3.3”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件
进行含量测定。结果见图 3 和表 1。
3 讨论
藏药打箭菊药材中主要含有黄酮类、香豆素类
成分[12,13]。现代研究表明，木犀草素等黄酮类成分具
图 3 对照品（A）和供试品（B）的 HPLC 图谱
注：1.木犀草素。
表 1 打箭菊检查项、浸出物及木犀草素含量测定结果（n=2）
编号 产地 水分/% 总灰分/% 酸不溶性灰分/% 浸出物/% 木犀草素/%
1 西藏山南县金珠雅砻藏药厂 11.66 7.27 0.23 25.64 0.103
2 西藏雄巴拉曲藏药厂 9.32 7.31 0.59 26.16 0.062
3 云南省德钦县人民医院藏医科 14.18 — — 30.15 0.103
4 云南省香格里拉县格咱乡 15.71 7.42 0.47 23.57 0.086
5 云南省德钦县茫雪山 15.82 7.53 0.33 23.46 0.104
6 四川省若尔盖县藏医院 12.32 7.92 0.43 25.57 0.086
7 四川省康定县雅加梗 15.38 6.65 0.40 23.13 0.061
8 四川省阿坝州藏医院 11.08 7.23 0.43 24.61 0.058
9 青海省西宁市八一路药材市场 12.48 8.29 0.47 21.42 0.036
均值/% 13.11 7.45 0.42 24.86 0.078
注：第 3批样品量不足，故未测定其总灰分和酸不溶性灰分。
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有抗炎、镇痛的作用 [14~16]，这与打箭菊药材的传统功
效基本一致。因此，本文选择木犀草素作为打箭菊
药材的薄层鉴别、含量测定的指标性成分。
本文考察了三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（9 ∶5 ∶
0.5）、环己烷-乙酸乙酯-甲酸（8 ∶9 ∶0.5）展开系统，
显色条件（10%硫酸乙醇溶液，3%三氯化铝溶液）和
点样量（1、3、5、8 μL）。结果表明，以三氯甲烷-乙
酸乙酯-甲酸（9 ∶5 ∶0.5）为展开剂，以 10%硫酸乙醇
溶液为显色剂，供试品和对照品溶液点样量为 3 μL
时，打箭菊供试品溶液中的木犀草素能得到良好的
分离，斑点清晰、圆整。此外，还考察了不同薄层板、
不同温度、不同湿度对薄层展开效果的影响，结果
发现木犀草素均能得到很好的分离，说明该薄层鉴
别方法的耐用性较好。
将木犀草素对照品溶液进行 DAD 全波长扫描，
并参考相关文献 [8,9]，最终确定 350 nm 为检测波长。
本文考察了不同流动相体系，最终确定乙腈-0.2%
磷酸水溶液（30∶70）为最佳流动相。考察了不同柱温
（25℃、30℃、40℃） 和不同色谱柱（DiamonsiL-C18、
ULtimate XB-C18、WeLchrom-C18）对木犀草素分离效
果的影响，结果木犀草素均能得到良好的分离，表
明所建立的 HPLC 方法有较好的耐用性。另外，在供
试品溶液制备时，考察了不同提取方法（超声和回
流）、不同提取时间（20、30、40、60 min）、不同提取
溶媒（50%、70%、80%、100%甲醇）和溶媒用量（15、
30、40 mL）的提取情况，最终确定了最佳的供试品
溶液制备方法。
藏医药学是祖国医学宝库的重要组成部分。由
于藏药材的品种整理、药效学、药效物质基础筛选
等基础性研究工作仍然处于起步阶段，因此目前藏
药材的质量控制水平均较低，这直接影响和制约了
藏药的现代化和产业化发展。在继承民族药传统特
色的前提下，积极采用现代质量标准研究技术和方
法，建立和完善常用藏药材的质量标准体系，对于
提高藏药及其复方制剂的质量，保证临床用药的安
全性与有效性有着重要的意义。本文根据《中国药
典》中药质量标准研究制定技术要求，开展了常用
藏药材“打箭菊”的质量标准规范化研究，所建立的
方法操作简单、准确可靠、重复性良好，为打箭菊药
材的质量控制提供了科学依据。
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表 2 木犀草素加样回收率试验结果
编号 取样量/g 样品中量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/% 平均回收率/% RSD/%
1 0.250 4 0.140 4 0.140 4 0.277 3 100.10
98.08 1.57
2 0.250 5 0.140 3 0.140 4 0.276 3 97.91
3 0.250 3 0.140 3 0.140 4 0.272 8 96.07
4 0.250 7 0.140 4 0.140 4 0.274 0 98.42
5 0.250 6 0.140 4 0.140 4 0.274 3 99.35
6 0.250 6 0.140 4 0.140 4 0.276 1 96.64
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Quality Standard of Pyrethri Tatsienenis Flos
Zhou Lishi, Zhou Lin, Yue Qinghong, Chen Yilong, Ye Fan, Zhang Yi, Fan Gang
(College of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, China)
Abstract: This study was aimed to establish the quality standard of Pyrethri Tatsienenis Flos. The medical material
was identified by the microscopy and the thin layer chromatography (TLC) methods. The moisture , total ash,
acid -insoluble ash and alcohol -soluble extract were determined according to procedures recorded in the Chi-
nese Pharmacopoeia (2010 edition). The content of luteolin was determined by the HPLC method. The results
showed a strong characteristic microscopic of Pyrethri Tatsienenis Flos, and its TLC identification had a good
resolution with clear spots . The mass fractions of luteolin was 0.036%~0.104% (average of 0.078%), moisture
was 9.32%~15.82% (average of 13.11%), total ash was 6.65%~8.29% (average of 7.45% ), acid-insoluble
ash was 0.23%~0.59% (average of 0.42% ), and the extraction was 21.42%~30.15% (average of 24.86% ).
It was concluded that this established standard was simple to operate with good stability and reproducibility ,
which can be used for quality evaluation of Pyrethri Tatsienenis Flos.
Keywords: Tibetan medicine, Pyrethri Tatsienenis Flos, quality standard, luteolin, HPLC
（责任编辑：李沙沙 张志华，责任译审：王 晶）
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