全 文 :基金项目:国家自然科学基金(81060350)
作者简介:吴燕妮(1988-),女(土家族),在读硕士,研究方向:中药学。
通信作者:耿 直,男,研究员,E-mail:gengzhi001@163.com。
通信作者:兰 卫,男,副教授,硕士生导师,研究方向:中维药研究,E-mail:lanwei516@sina.com。
唇香草多糖超声提取工艺研究
吴燕妮1,郭玉婷2,耿 直1,兰 卫1
(1新疆名医名方与特色方剂学自治区重点实验室,2新疆医科大学对口协作办公室,乌鲁木齐 830011)
摘要:目的 研究唇香草多糖最佳超声提取工艺。方法 以唇香草多糖含量为考察指标,利用正交实验法
确定唇香草多糖的最佳超声提取条件。结果 超声提取的最佳工艺为:提取温度60℃,20倍量的水,超声提取
30min,唇香草多糖得率为7.50%。结论 超声法提取唇香草多糖方法可行。
关键词:唇香草多糖;正交实验;超声提取
中图分类号:R917 文献标识码:A 文章编号:1009-5551(2014)03-0263-02
doi:10.3969/j.issn.1009-5551.2014.03.003
On the ultrasonic extraction technology of polysaccharide in
Ziziphora clinopodioides Lam
WU Yanni 1,GUO Yuting2,GENG Zhi 1,LAN Wei 1
(1 Xinjiang Key Laboratory of Famous Prescription and Science of Formulas,
2 Counterpart Cooperation office of Xinjiang Medical University,Urumuqi 830011,China)
Abstract:Objective To determine the optimum ultrasonic extraction technology of polysaccharide in
Ziziphora clinopodioides Lam.Methods Ziziphora clinopodioides Lam′s polysaccharide content are as
examining index and then to determine the optimal ultrasonic polysaccharide extraction conditions by or-
thogonal experimental method.Results The best process for ultrasonic extraction:Extracting
temperature is 60℃,with 20times water,and ultrasonic extraction of 30min.And the yield would be
7.50%.Conclusion The technology is efficient,fast and feasible.
Key words:Ziziphora clinopodioides Lam polysaccharide;the orthogonal experiment;Ultrasonic extraction
维吾尔药唇香草 (Ziziphora clinopodioides
Lam.)为唇形科新塔花属多年生半灌木草本植物唇
香草的干燥地上部分,维吾尔族名字为苏则[1]。唇香
草为维吾尔族民间常用药材,具有提高免疫力的作
用。为了更好地使用唇香草,本研究以唇香草多糖含
量为检测指标,用苯酚-硫酸法进行含量测定,考察料
液比(g/mL)、提取温度(℃)、超声时间(m)三因素,
探讨超声提取条件下提取多糖的最佳工艺条件。
1 仪器与试剂
透析袋(MWCO:500)(上海绿岛科技发展有限
公司),UV-2550紫外光谱仪(日本岛津)、EYELA SB-
1000型旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司)等。葡
萄糖标准品、蒽酮、硫酸等均为分析纯,蒸馏水。唇香
草(购买自新疆医科大学附属中医院中药房)经新疆
医科大学药学院王新玲副教授鉴定为唇形科植物唇
香草 (Ziziphora bungeanaJuz.)的干燥地上部分。
第37卷 第3期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Vol.37 No.3
2014年3月 Journal of Xinjiang Medical University Mar.2014
2 方法与结果
2.1 葡萄糖对照品溶液的制备 精密称取105℃干
燥至恒重的葡萄糖标准品101.9mg置于100mL的
容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,精密吸取1mL至
10mL容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,即得浓度为
0.1mg/mL的葡萄糖对照品溶液。
2.2 蒽酮试剂的制备 准确称取0.1g蒽酮溶
于100mL 72%硫酸中(需当天配制)[2]
2.3 标准曲线的制作 用微量吸取器分别吸取葡萄
糖对照品溶液0.3、0.5、0.7、0.9、1.1、1.3、1.5mL分
别置于10mL具塞试管中,均用蒸馏水补充至2.0
mL。空白管加入2.0mL蒸馏水做对照,各管中加入
6mL硫酸-蒽酮溶液摇匀,沸水浴中加热10min,后
冷却至室温。620nm处测定吸光值。标准曲线的回
归方程为:A=10.783C+0.007 9,r=0.999 8,样
品检测量在3.82~19.10μg/mL范围内与吸光度线
性关系良好。
2.4 正交试验 参照文献[2-3],根据单因素预试
验结果,选择超声温度、超声时间及料液比为参考因
素,以唇香草多糖的提取率为指标,采用L9(33)正交
试验设计(表1),对唇香草中多糖的提取条件进行优
化(表2),方差分析见表3。
表1 因素水平
水平 A料液比 B超声时间(m) C提取温度
1 1∶20 20 40
2 1∶30 30 60
3 1∶40 40 80
表2 正交实验设计及数据处理表
实验号数
因素
A B C D
多糖含量/%
1 1 1 1 1 5.84
2 1 2 2 2 7.05
3 1 3 3 3 6.43
4 2 1 2 3 6.55
5 2 2 3 1 6.98
6 2 3 1 2 6.10
7 3 1 3 2 6.48
8 3 2 1 3 6.90
9 3 3 2 1 7.20
K1 19.32 18.87 18.84 20.02
K2 19.63 20.93 20.80 19.63
K3 20.58 19.73 19.89 19.88
R 1.26 2.06 1.96 0.39
以唇香草多糖的提取率为考察指标,由表2的R
值可以看出,各因素对试验结果影响的大小顺序为B
>C>A;其中,B因素和C因素,各因素之间具有统
计学差异(P<0.05)。A因素,各因素间无统计学差
异 (P>0.05),从节约溶剂考虑,选择A1,从极差和
方差分析的结果可以看出,最佳提取工艺条件为
A1B2C2。 表3 方差分析表
变异来源 偏差平方和 自由度 均方 F值 P值
A 0.287 2 0.144 11.043 0.083
B 0.714 2 0.357 27.426 0.035
C 0.641 2 0.321 24.646 0.039
误差 0.026 2 0.013
总 1.668
2.5 常规提取结果 取唇香草药材5.0g,粉碎,按料
液比1:30,加入蒸馏水,回流提取2次,每次1.0h,合
并提取液,浓缩,经含量测定,唇香草总多糖含量为
6.36%。
2.6 验证性试验 根据2.4的分析结果,依照提取
工艺A1B2C2进行提取试验,唇香草样品平行提取5
次,试验结果精密度良好(表4)。
表4 重现性试验结果
提取次数 1 2 3 4 5 珔x s RSD/%
提取率/% 7.87 7.12 7.55 7.51 7.43 7.496 0 0.268 66 3.58
3 结论
为了更科学合理利用唇香草资源,本研究以唇香
草多糖含量为检测指标,考察料液比(g/mL)、提取
温度(℃ )、超声时间(m)三因素,确定超声提取条件
下提取多糖的最佳工艺条件,超声法提取唇香草多糖
具有高效、方便特点。唇香草多糖超声提取法与常规
提取法相比,提取效率提高了17.9%。
参考文献:
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[2] 勾建刚,刘春红.白茅根多糖超声提取的优化[J].时珍国医国
药,2007,18(11):2749-2750.
[3] 任雪峰,吴冬青,王永生,等.人参果多糖超声提取工艺的研究
[J].食品研究与开发,2010,31(1):9-11.
[收稿日期:2014-02-20]
(本文编辑 张巧莲)
462 新 疆 医 科 大 学 学 报 第37卷