全 文 ：书·论著·
稻芽不同炮制品中 α-淀粉酶活性的
比较研究
王朝晖 朱丽婷 许娟 魏仁荣 贺福元 石继连
【摘要】 目的 比较稻芽 3 种炮制品中 α-淀粉酶活性。方法 采用国家标准《谷物及其制品中 α-
淀粉酶的测定比色法》(GB /T 5521 － 2008) ，以测定酶的活性。结果 稻芽随着炮制加热程度的增加，其
α-淀粉酶活性逐渐降低。结论 本方法准确可靠、简便可行，可广泛用于谷物类炮制品的 α-淀粉酶活性
的测定。
【关键词】 稻芽;炮制品;α-淀粉酶活性;比色法
Study on the alpha amylase activity in different processed products of oryzae fructus germinatus
WANG Zhao-hui，ZHU Li-ting，XU Juan，et al． Affiliated Ningxiang Hospital of Hunan University of Chinese Med-
icine，Changsha 410208，China
【Abstract】 Objective To compare the activity of the alpha amylase different processed products from
Oryzae fructus germinatus (OFG)． Methods The activity of the alpha amylase were determined by the nation-
al standard，the content determination method of the alpha amylase activity in the grain and its products (GB /
T 5521-2008)． Results With the increase of heat processing degree，the alpha amylase activity gradually re-
duced in the OFG． Conclusion This method is accurate，simple and reliable，which can be widely used in the
determination of alpha amylase activity of the grain products．
【Key words】 Oryzae Fructus Germinatus (OFG) ;Processed product;Alpha amylase activity;Colori-
metry
基金项目:湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目(项
目编号:2010169)
作者单位:410600 湖南中医药大学附属宁乡医院(王朝晖) ;湖
南中医药大学药学院中药药性与药效实验室(朱丽婷 许娟 魏仁荣
贺福元 石继连)
通讯作者:石继连 Email:hnsjl@ 163． com
稻芽(稻芽)为禾本科植物稻 Oryza sativa L．的成熟果实
经发芽干燥而得。中国药典收载了其生稻芽、炒稻芽及焦稻
芽等常用的 3 种炮制品具有的不同功效:生稻芽具有和中消
食，健脾开胃的功效，用于食积不消，腹胀口臭，脾胃虚弱，不
饥食少;炒稻芽偏于消食，用于不饥食少;焦稻芽善化积滞，
用于积滞不消［1］。目前关于稻芽不同炮制品的 α-淀粉酶活
性的研究，尚未见国内外有相关文献的报道。本研究采用国
家标准《谷物及其制品中 α-淀粉酶活性的测定比色法》［2］中
的方法，对稻芽加热炮制前后 3 种炮制品的 α-淀粉酶活性进
行了研究，为探讨其炮制机制提供实验依据。
1 实验材料
1. 1 仪器 UV-9200 双光束紫外可见分光光度计(北京瑞
利分析仪器公司) ;AR1140 型分析天平(上海力衡仪器仪表
有限公司) ;HHD-2 型电热恒温水浴锅(无锡沃信仪器有限
公司)。
1. 2 试药 稻谷购于长沙市望城县黄金乡，经湖南中医药
大学药学院杨梓懿教授鉴定为禾本科植物稻 Oryza sativa L．
的成熟新鲜干燥果实;试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 不同炮制品的制备［3］
2. 1. 1 生稻芽 取新鲜成熟而饱满的净稻子，用清水浸泡
至六七成透，捞出，置能排水的容器(竹匾)内，覆盖，每日淋
水 1 ～ 2 次，保持湿润，2、3 d 后待须根长至 1 cm 时，取出干
燥，除去杂质。
2. 1. 2 炒稻芽 取净生稻芽置炒制容器内，用文火加热，炒
至表面深黄色，大部分暴裂，并有香气逸出时，取出晾凉，筛
去灰屑。
2. 1. 3 焦稻芽 取净生稻芽置炒制容器内，用中火加热，炒
至表面焦黄色，大部分暴裂，并有焦香气逸出时，取出晾凉，
筛去灰屑。
2. 2 α-淀粉酶活性的测定［2］
2. 2. 1 试液的配制 碘贮备液的制备称取 11. 0 g碘化钾溶
于少量水中，加入 5. 50 g结晶碘，搅拌至碘完全溶解，定容至
250 ml，置于棕色瓶中，在暗处贮存即可。碘稀释液的制备，
称取 40. 0 g碘化钾溶于水中，加 4. 00 ml 碘贮备液，并稀释
至 1L即得(用时现配，不可过夜)。缓冲液的制备，称取 164
g无水乙酸钠溶于水中，加入 120 ml 冰乙酸，用水定容至
1000 ml，即得。β-淀粉酶溶液的制备 称取 10 g 有酶活性的
黄豆粉(过六号筛) ，加入 85 ml 水和 15 ml 0. 05 mol /L 硫酸
充分搅匀，静置 15 min，抽滤，滤液即为 β-淀粉酶溶液。
β-极限糊精溶液的制备，称取 5. 00 g可溶性淀粉于小烧
杯中，加入约 20 ml水混匀，将其边搅拌边缓慢倒入盛有 100
ml沸水的 500 ml烧杯中，并用洗瓶将小烧杯中的淀粉全部
转移至烧杯中，继续搅拌并加热，缓慢煮沸 2 min。加盖表面
皿，在自来水中冷却至 30 ℃以下，加入 25 ml缓冲溶液及 50
mlβ-淀粉酶溶液，在室温下放置 20 h，加入 1 勺浮石粉，将此
溶液在 10 min之内缓慢煮沸，然后继续沸腾 5 min以上。冷
却至 30℃以下，用水定容至 250 ml，摇匀，过滤。滤液中加几
滴甲苯，此溶液的 pH 值应为(4. 7 ± 0. 1) ，在 25℃以下可连
·1·中国现代药物应用 2011 年 10 月第 5 卷第 19 期 Chin J Mod Drug Appl，Oct 2011，Vol． 5，No． 19
DOI:10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2011.19.014
续使用 5 d。
2. 2. 2 供试品溶液的制备 称取稻芽炮制品样品粉末(过
二号筛)约 5 g(精确到 0. 05 g) ，倒入 300 ml锥形瓶中，加入
预热到 30℃的 0. 2%氯化钙溶液 100 ml，充分摇匀，置于 30
℃水浴中，在 15、30、45 min 时从水浴中取出，上下颠倒锥形
瓶 10 次，重新置于水浴，共提取 60 min。取出，过滤，即得 α-
淀粉酶供试品溶液。
2. 2. 3 α-淀粉酶活性的测定 空白调整吸取 0. 2%氯化钙
溶液 2. 0 ml加到 10. 0 ml稀碘溶液中，然后以适量的水(V0)
稀释，混匀后达到 20℃，在分光光度计下 575 nm 处测定，调
整其吸光度为零。
底物溶液的校准，分别吸取 5. 0 mlβ-极限糊精溶液和
15. 0 ml 0. 2%氯化钙溶液于 100 ml烧杯中，混匀。吸取 2. 0
ml混合液至另一 100 ml烧杯中，加入 10. 0 ml稀碘溶液及适
量的水，混匀置于 20℃水浴中，在波长 575 nm处，按上述“空
白调整”的溶液为参比，测其吸光度。调整加水量，使测得的
吸光度在 0. 55 ～ 0. 60 之间，记下此时的加水量 V0，并用它调
整空白溶液的加水量，V0 即为该 β-极限糊精测试时的加
水量。
活性测定，将供试品溶液和 β-极限糊精溶液分别置于
30℃水浴中，10 min后快速吸取 5. 0 ml β-极限糊精溶液至盛
有 15. 0 ml供试品溶液的锥形瓶中，加塞后摇匀。在加液的
同时，用秒表计时。吸取 10. 0 ml 稀碘溶液于各个 50 ml 量
瓶中，加入水 V0 ml，混匀加塞后置于 20℃水浴中，每隔 5 min
或 10 min进行下列操作:吸取 2. 0 ml 混合液到一个盛有
10. 0 ml稀碘溶液和 V0 ml水的 50 ml量瓶中，摇匀后置于水
浴，使之达到 20 ℃后，测其吸光度(见表 1) ，并按公式(1)计
算 α-淀粉酶活性，结果见表 2。
A = 500 × fm ×
100
100-h ×
lgD1-lgD2
t1-t2
= 500 × f × bm ×
100
100-h (1)
式(1)中:A--α-淀粉酶活性，U;
m-100 ml氯化钙提取的试样质量，g;
h-试样中水分含量，%;
f-酶提取液的稀释倍数;
t1、t2-不同的反应时间，min;
D1、D2-时间 t1、t2 时的吸光度;
b-lgD对 t曲线的斜率的绝对值。
表 1 吸光度测定结果
样品编号 取样量(m，g) 含水量(h，%) 稀释倍数(f)
吸光度(D)
5 min 10 min 15 min 20 min 25 min
生稻芽 1 5. 00 8. 5 5 0. 595 0. 503 0. 428 0. 362 0. 306
2 5. 05 8. 5 5 0. 616 0. 520 0. 441 0. 372 0. 315
3 5. 08 8. 5 5 0. 558 0. 474 0. 402 0. 342 0. 291
炒稻芽 1 5. 14 4. 7 5 0. 546 0. 485 0. 433 0. 384 0. 341
2 4. 96 4. 7 5 0. 549 0. 499 0. 438 0. 388 0. 345
3 5. 06 4. 7 5 0. 589 0. 521 0. 462 0. 412 0. 366
焦稻芽 1 5. 09 2. 3 2 0. 566 0. 502 0. 449 0. 396 0. 351
2 4. 98 2. 3 2 0. 567 0. 508 0. 452 0. 402 0. 357
3 5. 04 2. 3 2 0. 556 0. 493 0. 437 0. 387 0. 344
表 2 α-淀粉酶活性计算结果
样品编号
α-淀粉酶活性(A)
5 ～ 10 min 10 ～ 15 min 15 ～ 20 min 20 ～ 25 min x RSD(%)
生稻芽 1 7. 9 7. 8 7. 9 8. 0 7. 8 2. 29
2 8. 0 7. 8 7. 9 7. 9
3 7. 6 7. 7 7. 5 7. 5
炒稻芽 1 5. 2 5. 1 5. 3 5. 2 5. 3 2. 47
2 5. 3 5. 2 5. 5 5. 4
3 5. 5 5. 4 5. 2 5. 4
焦稻芽 1 2. 1 2. 0 2. 2 2. 1 2. 1 2. 87
2 2. 0 2. 1 2. 1 2. 1
3 2. 1 2. 2 2. 1 2. 1
将表 2 结果通过 SPSS 17. 0 软件分析可知，稻芽各炮制
品的 α-淀粉酶活性具有显著性差异。稻芽经加热炮制后，其
α-淀粉酶的活性随加热程度的增加而降低。
3 讨论
本研究采用国家标准《谷物及其制品中 α-淀粉酶活性
的测定比色法》［2］中的方法，本法准确可靠、简便可行，可广
泛用于发芽类炮制品中 α-淀粉酶活性的测定。
通过对稻芽 3 种炮制品 α-淀粉酶活性的比较，发现生稻
芽酶活性最高，随加热炮制程度的增加，而 α-淀粉酶活性降
低。可证实稻芽、麦芽等经炒制后开胃消食作用增强，不是
由其淀粉酶起主要作用。
参考文献
［1］ 中国药典委员会．中国药典．北京;化学工业出版社，2010:352.
［2］ 国家标准．谷物及其制品中 α-淀粉酶活性的测定比色法(GB /
T 5521-2008)．国家标准化管理委员会，2008．
［3］ 龚千锋．中药炮制学．第 2 版． 北京:中国中医药出版社，2007:
338，340.
·2· 中国现代药物应用 2011 年 10 月第 5 卷第 19 期 Chin J Mod Drug Appl，Oct 2011，Vol． 5，No． 19