全 文 ：(μg/ml)对吸光度 A进行线性回归 ,得回归曲线:C
=15.01A, r2 =0.99999,线性范围为 1.04 μg/ml～
11.44 μg/ml。
2.3.2　萸黄连提取物供试液的制备:精密称取萸
黄连提取物 0.01020 g,置于 50 ml容量瓶中 ,加甲
醇溶解 ,定容。精密量取上述溶液 1 ml置 25 ml容
量瓶中 ,加甲醇定容 ,作为供试液。
2.3.3　测定波长的考察:将盐酸小檗碱 、萸黄连提
取物与黄连提取物供试液在波长 200 nm～ 400 nm
内测定其紫外吸收光谱 ,结果以上各溶液的紫外吸
收光谱基本一致 ,在 349 nm处有最大吸收峰 。
2.3.4　萸黄连总生物碱提取物中吴茱萸成分对黄
连总生物碱紫外吸收光谱影响的考察:配制相当于
萸黄连样品液测定浓度中吴茱萸成分浓度的吴茱萸
对照液 ,以甲醇为空白对照 ,结果吴茱萸成分在 349
nm处无吸收峰 ,且吸光度小于 0.005,所以在 349
nm处测定萸黄连提取物中黄连总生物碱含量 ,吴茱
萸的成分对其无影响 。
2.3.5　供试液的测定:以甲醇为空白 ,在 349 nm
处测定 ,测定 3批 ,总生物碱含量以盐酸小檗碱计
算 。结果见表 1。
2.3.6　精密度考察:取供试液一份 ,连续测定其吸
光度 5次 ,结果 RSD为 0.28%,表明精密度良好。
2.3.7　稳定性测定:取供试液一份 ,在 0, 2, 4, 6,
8, 10h分别测其吸光度 ,结果 RSD为 1.37%,稳定
性良好 。
　表 1　萸黄连提取物黄连总生物碱含量测定结果(n=3)
样品 含量(%) 平均值(%) RSD(%)
1 60.2
2 59.7 60.5 1.5
3 61.5
2.3.8 　回收率测定:称取提取物 5份 ,各 0.01000
g,加入定量的盐酸小檗碱 ,按 “2.3项黄连总生物碱
盐的含量测定 ”中供试液的制备及测定方法 ,测定
其吸光度 , 计算回收率 。结果平均回收率为
99.2%, RSD为 1.0%。
3　讨论
萸黄连提取物的有效部位为黄连总生物碱 ,主
要成分为盐酸小檗碱 、巴马汀和药根碱;同时还含有
吴茱萸的成分 。本文用薄层层析法对提取物中的吴
茱萸成分进行鉴别 ,用紫外分分光光度法测定黄连
总生物碱含量 ,为制剂有效部位的质量控制提供了
简便而准确的手段 。
参 考 文 献
[ 1] 卫生部国家药典委员会 .中华人民共和国药典(一
部).北京:化学工业出版社 , 2005:118, 214.
[ 2] 戴开金 , 罗奇志 ,罗佳波 , 等.葛根芩连方药中黄连总生
物碱的含量测定 .第一军医大学学报 , 2004, 24(4):
437-438.
(2006-09-15收稿)
HPLC法测定草豆蔻中山姜素 、小豆蔻明的含量
梁嘉敏 ,何敬愉 ,彭　维 ,王永刚 ,李沛波 ,苏薇薇
(中山大学生命科学学院 ,广东广州 510275)
　　摘要　目的:建立同时测定草豆蔻中山姜素 、小豆蔻明含量的方法。 方法:采用 HPLC法 , 色谱柱为 Diamonsil
C18柱(250×4.6mm, 5 μm);流动相为甲醇-4.5%四氢呋喃溶液(用冰醋酸调节 pH至 3.0), 采用线性梯度洗脱 [ 0
※ 80 min, 甲醇 57%※67%, 4.5%四氢呋喃溶液(用冰醋酸调节 pH至 3.0)43%※ 33%] , 流速 1 ml/min;检测波长
为 300 nm。结果:山姜素 、小豆蔻明平均回收率分别为 100.3%、 99.20%, RSD分别为 1.25%、 2.14%。结论:本法
为评价草豆蔻的质量提供了依据。
关键词　草豆蔻;山姜素;小豆蔻明;HPLC法
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2007)03-0299-02
　　草豆蔻为姜科植物草豆蔻 Alpiniakatsumadai
Hayata的干燥近成熟种子 ,收载于中国药典 2005年
版一部 ,无含量测定项 。其性辛 、温 ,归脾 、胃经 ,具
有燥湿健脾 、温胃止呕的功效 ,用于寒湿内阻 、脘腹
胀满冷痛 、嗳气呕逆 、不思饮食〔1〕。小豆蔻明 、山姜
素具有抗菌 、止呕 、健脾等药理活性 〔2〕 ,是草豆蔻的
主要有效成分 。笔者采用 HPLC法同时测定了草豆
蔻中山姜素 、小豆蔻明的含量 ,依此作为其质量评价
·299·中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 3期 2007年 3月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2007.03.019
指标。
1 　仪器与试药
Waters高效液相色谱仪 , N-2000色谱工作站 。
试剂甲醇为色谱纯 ,冰醋酸 、四氢呋喃为分析纯 。山
姜素 、小豆蔻明对照品由中国药品生物制品检定所
提供 , 批号分别为 110762-200303、110763-200302。
草豆蔻药材来源见表 1。
2 　方法与结果
2.1 　色谱条件　色谱柱:DiamonsilC18(250×4.6
mm, 5μm);流动相:甲醇-4.5%四氢呋喃溶液 (用
冰醋酸调节 pH至 3.0),采用线性梯度洗脱 [ 0※80
min,甲醇 57%※67%, 4.5%四氢呋喃溶液(用冰醋
酸调节 pH至 3.0)43%※33%] ,流速 1 ml/min;检
测波长为 300 nm。
2.2 　溶液的配制
2.2.1　对照品溶液:精密称取山姜素 、小豆蔻明对
照品适量 ,用甲醇配制成浓度分别为 164.8 μg/ml、
81.6μg/ml的混合对照品溶液。
2.2.2　供试品溶液:取草豆蔻药材粉末约 0.1 g,
精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入甲醇 50 ml,称
定重量 ,超声处理 30 min,放冷 ,再称定重量 ,用甲醇
补足减失的重量 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤液 ,即得。
2.3 　线性关系考察 　精密吸取混合对照品溶液
0.1ml、0.5 ml、1.0 ml、2.0 ml、3.5 ml、5.0 ml至 6
个 10ml量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀。分别精
密吸取 20μl不同浓度的对照品溶液注入液相色谱
仪 ,按 2.1项所述色谱条件进行分析 。以对照品浓
度 C(μg/ml)为横坐标 ,以峰面积为纵坐标进行回
归分析 ,山姜素回归方程:A=5.196×104C+2.082
×104 , r=0.99995;小豆蔻明回归方程:A=7.338×
10
4C+1.312×104 , r=0.99995。结果表明:山姜素
进样量在 0.033 μg～ 1.65 μg、小豆蔻明在 0.016μg
～ 0.816 μg范围内 ,与峰面积呈良好的线性关系 。
2.4 　精密度试验　精密吸取山姜素 、小豆蔻明混
合对照品溶液 ,连续进样 6次 ,每次 20 μl。山姜素
峰面积的 RSD=1.72%,小豆蔻明峰面积的 RSD=
1.98%。
2.5 　重现性试验　精密称取同一批号的草豆蔻药
材粉末 6份 ,分别按供试品溶液制备方法平行操作 ,
精密吸取供试品溶液各 20 μl,分别注入液相色谱
仪 ,测定峰面积 ,山姜素 、小豆蔻明峰面积 RSD分别
为 1.06%、0.88%,表明方法重复性好。
2.6　稳定性试验　取供试品溶液 ,分别放置 0、2、
4、8、12、24、48h后进样 ,测定峰面积 。山姜素 、小豆
蔻明峰面积 RSD分别为 2.62%、1.77%。
2.7　回收率试验　分别精密称取已测知含量的草
豆蔻药材适量 ,再分别精密加入一定量的对照品 ,使
供试品溶液中山姜素 、小豆蔻明浓度分别在山姜素 、
小豆蔻明标准曲线的高 、中 、低三个浓度区域 ,每个
浓度平行操作 3份 ,按样品测定项下操作 , 依法测
定 , 计算回收率 。结果山姜素平均回收率为
100.3%, RSD为 1.25%,小豆蔻明平均回收率为
99.92%, RSD为 2.14%。
2.8　样品测定　精密吸取供试品溶液 、混合对照
品溶液各 20μl,注入液相色谱仪 ,依法测定 ,按峰面
积外标法计算含量 。结果见表 1。
　表 1 　草豆蔻药材中山姜素 、小豆蔻明含量
药材来源 山姜素含量(%) 小豆蔻明含量(%)
山姜素 、小豆蔻明总含量(%)
广州林和药店 1.433 0.3626 1.796
广州清平市场 1.229 0.4879 1.717
广州柏康药店 1.073 0.8540 1.927
广州林和药店 1.323 0.5266 1.850
广州清平市场 1.463 0.6392 2.102
广州海王星辰 1.244 0.9270 2.171
3　讨论
本文采用 HPLC法同时测定草豆蔻中山姜素 、
小豆蔻明的含量 ,为评价草豆蔻质量提供了依据。
由于山姜素 、小豆蔻明互为异构体 ,在一定条件下可
互相转化 ,故应以山姜素 、小豆蔻明的总含量作为草
豆蔻药材的质量控制指标。
参 考 文 献
[ 1] 卫生部国家药典委员会编 .中华人民共和国药典 .一
部 .北京:化学工业出版社 , 2005:165.
[ 2] SiEunLee, Hyun-TakShin, HyunJinHwang, etal.An-
tioxidantActivityofExtractsfrom Alpiniakatsumadai
Seed.PhytotherapyResearch, 2003, 17:1041-1047.
(2006-08-28收稿)
·300· 中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 3期 2007年 3月