全 文 ：中国医院用药评价与分析 2013 年第 13 卷第 4 期 Evaluation and analysis of drug-use in hospitals of China 2013 Vol． 13 No． 4 ·359·
·实验研究·
小活络丸中胆南星的薄层色谱鉴别方法
张 超* (苏州市药品检验所，江苏 苏州 215002)
中图分类号 R965 文献标志码 B 文章编号 1672 － 2124(2013)04 － 0359 － 04
摘 要 目的:建立小活络丸中胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的薄层色谱鉴别方法，用以帮助提高胆南星的鉴别手段。方法:采
用薄层色谱方法，在异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水(10∶ 5∶ 5∶ 3∶ 1)上层溶液的展开条件下对所抽取 45 批样品进行实验。结果:经
过对 13 个被抽样单位共 45 批样品的薄层色谱结果进行汇总统计分析，有 73. 33%的样品检出胆酸，86. 67%的样品检出猪去氧胆
酸，93. 33%的样品检出鹅去氧胆酸。结论:建立的胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的薄层色谱鉴别方法，可作为小活络丸中胆南
星鉴别的辅助手段。
关键词 小活络丸; 胆南星; 薄层色谱; 胆酸; 猪去氧胆酸; 鹅去氧胆酸
Identification of Arisaema Cum Bile in Small Meridian-Activating Pill by Thin Layer
Chromatography
ZHANG Chao(Suzhou Institute for Drug Control，Jiangsu Suzhou 215002，China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To identify cholic acid，hyodeoxycholic acid and chenodeoxycholic acid in small meridian-
activating pill by thin layer chromatography (TLC) in an effort to improve the means for identification of arisaema cum
bile． METHODS:45 batches of samples were identified by TLC with the upper solution of isooctane-diethyl ether-acetic
acid-butanol-water (10∶ 5 ∶ 5 ∶ 3 ∶ 1) as developer． RESULTS: In the 45 batches of samples from 13 manufactories
identified，cholic acid was detected in 73. 33% samples， hyodeoxycholic acid in 86. 67% samples and
chenodeoxycholic acid in 93. 33% ． CONCLUSION:The established TLC for identification of cholic acid，hyodeoxycholic
acid and chenodeoxycholic acid could be used as supplementary means for identification of arisaema cum bile in small
meridian-activating pill．
KEY WORDS Small meridian-activating pill; Arisaema cum bile; Thin layer chromatography; Cholic acid;
Hyodeoxycholic acid; Chenodeoxycholic acid
* 药师，硕士。研究方向:药品质量控制。E-mail:colinspecial@
163． com
小活络丸大蜜丸由胆南星、制川乌、制草乌、地龙、乳香
(制)和没药(制)6 味药加炼蜜制成，黑褐色至黑色，气腥且味
苦。该药祛风散寒、化痰除湿、活血止痛，用于风寒湿邪闭阻、
痰淤阻络所致的弊病，症见肢体关节疼痛，或冷痛，或刺痛，或
疼痛夜甚，关节屈伸不利，麻木拘挛等症状。小活络丸源于
《太平惠民和剂局方》中的活络丹，其中胆南星为臣药，辅助君
药制川乌、制草乌发挥疗效。《中华人民共和国药典》规定胆
南星由制天南星细粉与牛、羊或猪胆汁经加工而成，或由生天
南星细粉与牛、羊或猪胆汁经发酵加工而成，具有清热化痰、
息风定惊之功效，用于痰热咳嗽、喀痰黄稠、中风痰迷、，癫狂
惊痫等症状。由于《中华人民共和国药典》标准对于小活络丸
大蜜丸中的胆南星的质量控制所提供的方法不足［1］，单从显
微鉴别的角度在实际操作中很难准确鉴定胆南星存在与否，
无法起到应有的作用。鉴于胆汁是作为胆南星炮制的重要组
成部分，笔者试图利用薄层色谱方法，建立对小活络丸大蜜丸
中胆酸、猪去氧胆酸以及鹅去氧胆酸具有专属性的薄层色谱
方法，并且对不同厂家所提供的样品进行考察，试图利用薄层
色谱手段辅助判别小活络丸大蜜丸中胆南星的投料质量。
1 材料
1. 1 仪器
半自动薄层点样仪(CAMAG LINOMAT5);WINCATS 软
件;电子天平(METTLER TOLEDO XS105);硅胶 G 板(青岛海
洋化工厂分厂生产)。
1. 2 试剂
乙醇、甲醇、异辛烷、乙酸乙酯、乙醚、正丁醇、冰醋酸等，
均为分析纯;纯净水、10%硫酸乙醇溶液均为自制。
1. 3 药品
对照品胆酸(批号:100078-200414)、猪去氧胆酸(批号:
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100087-200610)、鹅去氧胆酸(批号:110806-200303)，均由中
国药品生物制品检定所提供。小活络丸大蜜丸样品来源于 13
个厂家，共45 批样品，规格为每丸 3 g，见表 1。
表 1 小活络丸编号及来源
Tab 1 Number and sources of Small Meridian-Activating Pill
生产厂家编号 批号数量 样品编号
A 12 1—12
B 9 13—21
C 4 22—25
D 4 26—29
E 5 30—34
F 3 35—37
G 2 38—39
H 1 40
I 1 41
J 1 42
K 1 43
L 1 44
M 1 45
2 方法与结果
2. 1 方法
配置 1 mg /ml浓度的胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸以及
内含 3 个标准品的混标溶液，在异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-
水(10∶ 5∶ 5∶ 3∶ 1)上层溶液的展开剂下展开，取出，晾干，喷以
10%的硫酸乙醇溶液，在 105 ℃ 下加热至斑点显色，再在
365 nm紫外灯下检视，见图 1。如图 1 所示，混标溶液中 3 个
荧光斑点 Rf值由小及大分别为胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆
酸，分离状况良好，互不干扰，不影响鉴别。
取小活络丸大蜜丸 8 g，加适量硅藻土研细，加入甲醇
40 ml超声 30 min，滤过，滤液蒸干，加入氢氧化钠试液 20 ml
中溶解，用乙酸乙酯提取 2 次，每次 20 ml，弃去乙酸乙酯液，
用稀盐酸调节 pH值至 2，再用乙酸乙酯提取 2 次，每次20 ml，
合并乙酸乙酯液，在水浴上蒸干，残渣加乙醇 1 ml 中溶解，作
为供试品溶液。另取胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸对照品适
量，加乙醇制成混标溶液，作为对照品溶液。吸取供试品溶液
与对照品溶液各 2 μl，分别点于同一活化的硅胶 G薄层板上，
以异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水(10 ∶ 5 ∶ 5 ∶ 3 ∶ 1)的上层溶液
为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10%的硫酸乙醇溶液，在
105 ℃下加热至斑点显色，再在 365 nm紫外灯下检视。
取制川乌、制草乌、地龙、乳香(制)和没药(制)适量，混合
均匀，制成独缺胆南星的细粉，按样品处理方法提取得阴性对
照溶液。取样品、阴性对照溶液和混标溶液在异辛烷-乙醚-冰
醋酸-正丁醇-水(10∶ 5 ∶ 5 ∶ 3 ∶ 1)上层溶液的展开剂下展开，取
出，晾干，喷以 10%的硫酸乙醇溶液，在 105 ℃下加热至斑点
显色，再在 365 nm 紫外灯下检视。结果如图 1 所示，阴性无
干扰。
2. 2 薄层色谱结果
笔者共进行 13 个抽样单位共 45 批样品的薄层色谱鉴别，
结果如下:
2. 2. 1 A厂家样品薄层色谱结果:A 厂家样品编号为 1—12，
共 12 个批次样品经过处理后与混标中胆酸、猪去氧胆酸以及
图 1 胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸、阴性对照和
混标溶液的薄层色谱结果
Fig 1 TLC results of cholic acid，hyodeoxycholic acid，
chenodeoxycholic acid，negative control and
mixed standard solution
鹅去氧胆酸相应位置上斑点情况见图 2，12 个批次中有 8 批检
测出胆酸，12 批样品均检出猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸。
图 2 A厂家小活络丸大蜜丸薄层色谱实验结果
Fig 2 TLC result of Small Meridian-Activating Pill from
manufacturer A
A．胆酸;B．猪去氧胆酸;C．鹅去氧胆酸
A． cholic acid;B． hyodeoxycholic acid;C． chenodeoxycholic acid
2. 2. 2 B厂家样品薄层色谱结果:B 厂家样品编号为 13—
21，共 9 个批次样品经过处理后与混标中胆酸、猪去氧胆酸以
及鹅去氧胆酸相应位置上斑点情况见图 3，9 个批次中有 8 批
检测出猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸，9 批样品均检测出胆酸。
图 3 B厂家小活络丸大蜜丸薄层色谱实验结果
Fig 3 TLC result of Small Meridian-Activating
Pill from manufacturer B
A．胆酸;B．猪去氧胆酸;C．鹅去氧胆酸
A． cholic acid;B． hyodeoxycholic acid;C． chenodeoxycholic acid
2. 2. 3 C厂家样品薄层色谱结果:C厂家样品编号为 22—25，
共 4 个批次样品经过处理后与混标中胆酸、猪去氧胆酸以及
鹅去氧胆酸相应位置上斑点情况见图 4，4 批样品均检测出胆
酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸。
2. 2. 4 D 厂家样品薄层色谱结果:D 厂家样品编号为 26—
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29，共 4 个批次样品经过处理后与混标中胆酸、猪去氧胆酸以
及鹅去氧胆酸相应位置上斑点情况见图 5，4 批样品均检测出
胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸。
图 4 C厂家小活络丸大蜜丸薄层色谱实验结果
Fig 4 TLC result of Small Meridian-Activating
Pill from manufacturer C
A．胆酸;B．猪去氧胆酸;C．鹅去氧胆酸
A． cholic acid;B． hyodeoxycholic acid;C． chenodeoxycholic acid
图 5 D厂家小活络丸大蜜丸薄层色谱实验结果
Fig 5 TLC result of Small Meridian-Activating
Pill from manufacturer D
A．胆酸;B．猪去氧胆酸;C．鹅去氧胆酸
A． cholic acid;B． hyodeoxycholic acid;C． chenodeoxycholic acid
2. 2. 5 E厂家样品薄层色谱结果:E厂家样品编号为 30—34，
共 5 个批次样品经过处理后与混标中胆酸、猪去氧胆酸以及
鹅去氧胆酸相应位置上斑点情况见图 6，5 批样品全未检测出
胆酸，但是均检测出猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸。
图 6 E厂家小活络丸大蜜丸薄层色谱实验结果
Fig 6 TLC result of Small Meridian-Activating
Pill from manufacturer E
A．胆酸;B．猪去氧胆酸;C．鹅去氧胆酸
A． cholic acid;B． hyodeoxycholic acid;C． chenodeoxycholic acid
2. 2. 6 F厂家样品薄层色谱结果:F厂家样品编号为 35—37，
共 3 个批次样品经过处理后与混标中胆酸、猪去氧胆酸以及
鹅去氧胆酸相应位置上斑点情况见图 7，3 批样品均检测出胆
酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸。
图 7 F厂家小活络丸大蜜丸薄层色谱实验结果
Fig 7 TLC result of Small Meridian-Activating
Pill from manufacturer F
A．胆酸;B．猪去氧胆酸;C．鹅去氧胆酸
A． cholic acid;B． hyodeoxycholic acid;C． chenodeoxycholic acid
2. 2. 7 G、H、I 3 个厂家样品薄层色谱结果:G、H、I 3 个厂家
样品编号为 38—41，共 4 个批次样品经过处理后与胆酸、猪去
氧胆酸以及鹅去氧胆酸标准品相应位置上斑点情况见图 8，
4 批样品中有 2 批检测出胆酸和鹅去氧胆酸，1 批检测出猪去
氧胆酸。
图 8 G、H、I 3 个厂家小活络丸大蜜丸薄层色谱实验结果
Fig 8 TLC results of Small Meridian-Activating
Pill from manufacturer G，H and I
A．胆酸;B．猪去氧胆酸;C．鹅去氧胆酸
A． cholic acid;B． hyodeoxycholic acid;C． chenodeoxycholic acid
2. 2. 8 J、K、L、M 4 个厂家样品薄层色谱结果:J、K、L、M 4 个
厂家样品编号为 42—45，共 4 个批次样品经过处理后与胆酸、
猪去氧胆酸以及鹅去氧胆酸标准品相应位置上斑点情况见图
9，有 3 批样品检测出胆酸，2 批样品检测出猪去氧胆酸，4 批
样品均检测出鹅去氧胆酸。
图 9 J、K、L、M 4个厂家小活络丸大蜜丸薄层色谱实验结果
Fig 9 TLC results of Small Meridian-Activating Pill
from manufacturer J，K，L and M
A．胆酸;B．猪去氧胆酸;C．鹅去氧胆酸
A． cholic acid;B． hyodeoxycholic acid;C． chenodeoxycholic acid
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2. 3 胆酸、猪去氧胆酸以及鹅去氧胆酸的检出结果
本实验共 13 个厂家、45 批样品中胆酸、猪去氧胆酸以及
鹅去氧胆酸的检出结果见表 2。经过对 13 个被抽样单位共
45 批样品的薄层色谱结果进行汇总统计分析，有 73. 33%的样
品检出胆酸，86. 67%的样品检出猪去氧胆酸，93. 33%的样品
检出鹅去氧胆酸。并且，在该薄层色谱实验中，45 批样品中均
检出胆酸、猪去氧胆酸以及鹅去氧胆酸 3 种成分的批次约占
总量的 64. 44%，而检出 2 种成分和检出 1 种成分的批次约分
别占总量的 28. 89%和 2. 22%，有约 4. 44%的样品未检测出
任何成分。
表 2 胆酸、猪去氧胆酸以及鹅去氧胆酸的检出结果
Tab 2 Detection result of cholic acid，hyodeoxycholic
acid and chenodeoxycholic acid
生产厂家 批次数 /个
检出胆酸
批次数 /个
检出猪去氧胆酸
批次数 /个
检出鹅去氧胆酸
批次数 /个
A 12 8 12 12
B 9 9 8 8
C 4 4 4 4
D 4 4 4 4
E 5 0 5 5
F 3 3 3 3
G 2 1 0 1
H 1 1 1 1
I 1 0 0 0
J 1 1 0 1
K 1 1 0 1
L 1 1 1 1
M 1 0 1 1
3 讨论
胆南星是由天南星或制南星细粉与牛、羊或猪胆汁加工
而成的，具有清热化痰、熄风定惊之功效。对于胆南星的质量
控制，现行《中华人民共和国药典》标准［2］只有显微鉴别和试
管鉴别 2 种，小活络丸大蜜丸的《中华人民共和国药典》标
准［2］则只有显微鉴别一项，单一并且专属性不理想。由于胆
汁的加入和炮制对于胆南星的质量有着重要的相关性，所以
对于胆汁的鉴别可以有效地辅助评价胆南星的质量。张能荣
等［3］研究结果显示猪去氧胆酸只在猪胆汁中含有，牛、羊胆汁
中则不含有，并且研究牛、羊、猪胆汁中 15 种成分的结果显
示，只有鹅去氧胆酸是 3 种胆汁共有成分，这提供了一种薄层
色谱鉴别的思路。
胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的薄层色谱展开剂可选
择性较广，报道较多，文献记载方法较为丰富，曾有过报道利
用薄层色谱法来判别胆南星中猪去氧胆酸［4］，但是在同一系
统中同时鉴别 3 种物质并且适用于所使用的提取方法仍然需
要选择合适的展开剂，笔者经过多次实验后采取分离度较好
的以异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水(10 ∶ 5 ∶ 5 ∶ 3 ∶ 1)的上层溶
液为展开剂，结果显示可以有效同时鉴别小活络丸大蜜丸中
的胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸 3 种物质。进一步考察后
发现 3 种胆汁中共有成分鹅去氧胆酸的检出率为 93. 33%，猪
去氧胆酸的检出率为 86. 67%，而胆酸的检出率为 73. 33%。
胆汁的组成复杂，成分较多，尤其投料的不同，例如混合
胆汁和单一胆汁对于薄层色谱的鉴别结果有着一定的影响。
实验结果显示，猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸同时检出率达
100%，这和文献报道中鹅去氧胆酸是牛、羊、猪 3 种胆汁的
共有成分基本一致。同时在所实验的 45 批样品中共有 3 批
样品未检出鹅去氧胆酸，其中有 2 批样品未检测出任何一种
成分;另有 1 批样品只检测出胆酸而未检测出猪去氧胆酸和
鹅去氧胆酸。目前部分小活络丸、小活络片所使用的胆南星
质量控制方法是检测胆酸，由此来判定胆南星的投料真伪及
质量，笔者经过实验发现实际上存在着检出胆酸但是未检出
鹅去氧胆酸及其他成分的现象，说明胆酸的检出并不能有效
证明胆南星的投料状况，而鹅去氧胆酸的鉴别则更能体现出
相关结果。
目前对于胆南星炮制过程中胆汁使用情况和质量控制还
不够完善，薄层鉴别只是一种简便的方式，虽然提供了一种较
为方便有效的检验方法和鉴别途径，但是对于所选 3 种物质
的鉴别是否可以判定炮制所用胆汁的种类依然存在其不确定
性，所以薄层色谱法现如今只能作为辅助方法来帮助检查胆
南星中胆汁存在与否。近年来虽然存在有紫外分光光度计
法［5］和高效液相检测方法［6］用于胆南星中胆汁酸类成分的定
性和定量分析，但是所用胆汁是否和《中华人民共和国药典》
标准相符或者投料药材是否为正品胆南星，依然需要进一步
改善检测手段和检测方法。
参考文献
［1］ 张绍轩，黄青，王学农，等． 胆南星的薄层色谱鉴别
［J］．长春中医药大学学报，2008，24(2):147-148．
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一部［S］． 2010 年版． 北京:中国医药科技出版社，
2010:245-245，509-509．
［3］ 张能荣．牛羊胆汁质量的研究［J］． 中草药，1983，14
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［J］．广东药学院学报，2009，25(2):160-161．
［5］ 万军，翟羽佳，闫翠起，等． 紫外分光光度法测定胆南
星中总胆酸的含量［J］． 中国实验方剂学杂志，2010，
16(14):71-73．
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胆酸的含量［J］． 中国中药杂志，2007，32(16):1634-
1636．
(收稿日期:2012-02-22 修回日期:2012-05-12)
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