免费文献传递   相关文献

基于小鼠生理生化指标的天南星与胆南星的寒热药性探讨



全 文 :书收稿日期:2012-05-21; 修订日期:2012-09-21
基金项目:陕西省中医管理局项目 ( No. 13)
作者简介:王 薇( 1972-) ,女( 汉族) ,陕西三原人,现任陕西中医学院药
学院副教授,博士学位,主要从事太白中草药资源及质量控制研究工作.
* 通讯作者简介:宋小妹( 1963-) ,女( 汉族) ,陕西蒲城人,现任陕西中医
学院药学院教授,硕士研究生导师,博士学位,主要从事中药药效物质基
础及中药炮制研究工作.
基于小鼠生理生化指标的天南星
与胆南星的寒热药性探讨
王 薇,王 珊,刘 超,杨新杰,崔九成,宋小妹*
(陕西中医学院,陕西 咸阳 712046)
摘要:目的 通过检测小鼠生理生化指标来探讨生南星和胆南星的寒热药性。方法 将生南星、胆南星分别制备成水煎
液,分别给小鼠灌胃 11 d后,测量体质量、饮水量、进食量、体温、耗氧量、肝组织总蛋白含量、Na - K - ATPase 活性、肝脏
系数等生理生化指标。结果 与对照组比较,生南星组、胆南星组对小鼠的体质量、进食量、体温均无明显差别; 生南星可
使小鼠的饮水量、耗氧量、Na - K - ATPase活力、肝脏组织总蛋白含量增加; 胆南星可使小鼠的耗氧量、肝脏组织总蛋白
含量、Na - K - ATPase活力降低。结论 该结果与传统理论相一致。故饮水量、耗氧量、Na - K - ATPase 活力及肝脏组织
总蛋白含量可作为评价生南星、胆南星的寒热药性的生理生化指标。
关键词:生南星; 胆南星; 寒热药性; 生理生化指标
DOI标识:doi: 10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 12. 039
中图分类号:R2 -03 文献标识码:B 文章编号:1008-0805( 2012) 12-3037-02
天南星为天南星科植物天南星 Arisaema erubescens (Wall.)
Schott.、异叶天南星 A. heterophyllum BI.或东北天南星 A. amurense
Maxim.的干燥块茎。中医理论认为天南星味辛,性温,有毒,主
治顽痰咳嗽、胸膈胀闷、眩晕、中风、口眼歪斜、癫痫及破伤风
等[1]。胆南星是制天南星的细粉与牛、羊或猪胆汁经加工而成,
或为生天南星细粉与牛、羊或猪胆汁经发酵加工而成,其味苦、微
辛,性凉;临床用于痰热咳嗽、咯痰黄稠、中风痰迷、癫狂惊痫等
症[2]。
生南星辛温燥烈最甚;以胆汁炮制后,经苦寒的胆汁制后,一
方面减低生南星的毒副作用,另一方面使其药性由温转凉,此所
谓的以寒制热,谓之“反制”。药性反映药物在影响人体阴阳盛
衰、寒热变化方面的作用倾向,是说明中药作用性质的概念之一。
中药寒热药性研究是中药药性现代研究的核心问题。本文通过
生南星、胆南星对小鼠生理生化指标的影响来探讨其寒热药性,
为深入阐明天南星炮制机制、扩大临床应用奠定基础。
1 材料与仪器
1. 1 动物 昆明种小鼠 45 只,SPF级,雄性,体质量 18 ~ 22 g,由
西安交通大学医学院实验动物中心提供,动物合格证号:SCXK
(陕)20070001。
1. 2 药品及试剂 ATP 酶测试盒、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒、
蛋白标准(均购自南京建成生物工程研究所) ,凡士林(南京金陵
石油化工公司化工一厂) ,医用钠石灰(北京德尔利钠石灰厂) ,
蒸馏水,天南星、胆南星购自安徽新兴中药材饮片有限公司,经陕
西中医学院王继涛高级实验师鉴定均为正品。
1. 3 仪器 MC - 108L 欧姆龙电子体温计(欧姆龙大连有限公
司) ;自制耗氧量检测装置(有盖可密闭容器、胶管、刻度管、烧
杯) ;秒表;UV - 2000 型紫外可见分光光度计(UV1102) ;530 型
台式低温离心机(赛特) ;HH -2 电热恒温水浴锅(国华电器有限
公司) ;微量移液器;涡旋混匀器。
2 方法[3]
2. 1 药物的制备 取生南星 50 g,胆南星 75 g。粉碎,将药材粗
粉分别置于圆底烧瓶中加 10 倍量水浸泡 1 h,煎煮两次,2h /次,
过滤;残渣加 8 倍量水,煎煮 1 h,过滤。合并水煎液,浓缩至 200
ml,即得。
2. 2 动物分组及给药 将小鼠常规饲养 3 d 适应环境后随机分
为 3 组:对照组(CG)、生南星组(AR)、胆南星组(ACB) ,每组 15
只。从第 4 天开始灌胃给药,生南星组灌胃给予生南星水煎液
0. 15 g /10g,胆南星组灌胃给予胆南星水煎液 0. 1 g /10g,对照组
给予同等剂量蒸馏水,连续给药 10 d。给药期间小鼠按昼夜节律
自然照明,常规自由喂养,给水。
2. 3 检测指标[3]
2. 3. 1 一般指标 从分组当天起每日对小鼠体质量称重并记录,
每日记录各组小鼠总饮水量、总进食量。
2. 3. 2 小鼠体温测定 分别测量给药前和给药 1 h 后的体温。
各组动物平行交替进行测试。
2. 3. 3 耗氧量的测定 小鼠实验前禁食 18 h。小鼠于检测当日
给药后 1 h,用自制的简易耗氧量测定装置进行测定,记录水柱上
升 2. 5 ml所需时间和 6 min水柱上升的高度,来粗略衡量 6 min
内小鼠的耗氧量。各组动物交替平行进行实验。所得数据按体
质量折算为 20 g 体质量耗 2. 5 ml O2 所需时间,20 g 体质量 6
min耗氧量。
2. 3. 4 对小鼠肝组织 ATP 酶、总蛋白、脏器系数等生化指标的
测定 实验取材前一天晚小鼠禁食不禁水,次日上午灌胃给药 1h
后,测完耗氧量后,处死小鼠,打开动物胸腔、腹腔,取出肝脏,剔
除脂肪组织及系膜等进行称重;后迅速放入 - 20℃冰箱保存备
用。按 ATP酶测试盒、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒、标准蛋白试
剂盒说明书进行测定并计算;计算脏器系数。
2. 4 数据统计 对各组小鼠的饮水量、食量,用每组小鼠的平均
值 珋x表示,进行粗略比较。其余数据均以 珋x ± s 表示,采用
SPSS19. 0 软件进行方差分析,P < 0. 05 为差异显著,P < 0. 01 为
差异极显著,均具有统计学意义。
3 结果
3. 1 小鼠的一般状况的检测结果 由于受实验条件限制,饮水
量、进食量由整笼小鼠饮水量、进食量的平均值表示,粗略反映小
鼠饮水量、食量的变化趋势:与对照组比较,生南星组的饮水量略
有增加,胆南星组无明显区别;生南星组、胆南星组进食量都有增
加的趋势,但无统计学差异;生南星组、胆南星组小鼠体质量无明
显区别。结果见图 1,表 1。
3. 2 生南星、胆南星对小鼠体温的影响 实验结果表明,与对照
组比较,生南星组、胆南星组小鼠体温无明显区别。结果见表 2。
·7303·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012VOL . 23 NO. 12 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 12 期
书A -对饮水量的影响;B -对进食量的影响
图 1 生南星和胆南星对小鼠的影响
表 1 生南星和胆南星对小鼠体质量的影响(珋x ± s)
组别
剂量
C /g生药·(10g)- 1
体质量 /g
给药第 1 天 给药第 5 天 给药第 11 天
CG - 21. 27 ± 1. 91 23. 29 ± 1. 75 25. 18 ± 1. 86
AR 0. 15 21. 47 ± 1. 28 22. 58 ± 2. 52 24. 96 ± 1. 88
ACB 0. 1 21. 61 ± 1. 81 23. 19 ± 1. 82 25. 27 ± 1. 77
n =15
表 2 生南星、胆南星对小鼠体温的影响(珋x ± s)
组别
剂量
C /g生药·(10g)- 1
体温 T /℃
给药第 1 天 给药第 5 天 给药第 11 天
CG - 37. 41 ± 0. 24 37. 26 ± 0. 53 36. 79 ± 0. 40
AR 0. 15 37. 36 ± 0. 73 37. 65 ± 0. 60 36. 58 ± 0. 61
ACB 0. 1 37. 72 ± 0. 54 37. 42 ± 0. 59 36. 5 ± 0. 58
n =15
3. 3 生南星、胆南星对小鼠耗氧量的影响 实验结果显示,①与
对照组比较,生南星组 2. 5ml /20g 耗氧时明显缩短,并有显著性
差异(P < 0. 05) ;胆南星组也有耗时缩短的趋势,但无统计学差
异。与生南星组比较,胆南星组耗时明显增加,有显著性差异(P
< 0. 05)。②与对照组比较,生南星组耗氧量明显增加,并有显著
性差异(P < 0. 05) ;胆南星组耗氧量略有降低,但无统计学差异。
与生南星组比较,胆南星组耗氧量明显降低,并有显著性差异(P
< 0. 05)。结果见表 3。
表 3 生南星、胆南星对小鼠耗氧量的影响(珋x ± s)
组别
剂量
Cg生药·(10g)- 1
20g体质量耗
2. 5 mlO2 需时 t / s
20g体质量
6min耗 O2 量 V /ml
CG - 348 ± 95 2. 5 ± 0. 1
AR 0. 15 243 ± 75* 4. 2 ± 0. 2*
ACB 0. 1 364 ± 105△ 2. 1 ± 0. 1△
与对照组比较,** P < 0. 01,* P < 0. 05;与生南星组比较,△P <
0. 05,△△P < 0. 01;n = 15
3. 4 生南星、胆南星对小鼠组织生化指标的影响
3. 4. 1 生南星、胆南星对小鼠 Na + - K + - ATPase 活力的影响
从表 4 可以看出,与对照组比较,生南星组 Na - K - ATPase 活力
有增加的趋势,且有显著性差异(P < 0. 05) ,胆南星组 Na + - K +
- ATPase活力有降低的趋势,但无统计学差异;与生南星组比
较,胆南星组 Na - K - ATPase活力有降低趋势,且有显著性差异
(P < 0. 05)。
3. 4. 2 生南星、胆南星对小鼠总蛋白含量的影响 从表 4 可以看
出,与对照组比较,生南星组总蛋白含量有增加的趋势,且有显著
性差异(P < 0. 01) ,胆南星组总蛋白含量有降低趋势,但无统计
学差异;与生南星组比较,胆南星组总蛋白含量有降低趋势,且有
显著性差异(P < 0. 01)。
表 4 生南星、胆南星对小鼠生化指标的影响(珋x ± s)
组别
剂量 /
g生药·(10g)- 1
Na + - K + - ATPase活力 /
mmolpi - 1·hour - 1·
mg -1·pro - 1
总蛋白 /
g·L -1
肝脏指数 /
10 - 2·g - 1
CG - 2. 6836 ± 0. 2417 1. 845 ± 0. 0749 4. 10 ± 0. 79
AR 0. 15 3. 0301 ± 0. 2046* 2. 122 ± 0. 101** 5. 31 ± 0. 72*
ACB 0. 1 2. 542 ± 0. 3897△ 1. 819 ± 0. 086△△ 4. 892 ± 0. 496*
与对照组比较,**P < 0. 01,* P < 0. 05;与生南星比较,△P < 0. 05,△△P
<0. 01;n =15
3. 4. 3 生南星、胆南星对小鼠肝脏指数的影响 从表 4 可以看
出,与对照组比较,生南星组肝脏系数有明显的增加趋势,且有显
著性差异(P < 0. 05) ,胆南星组也有明显的增加趋势,且有显著
性差异(P < 0. 05)。生南星与胆南星组间无统计学差异。
4 讨论
选择指标的原则是:全面系统;文献已报道的可能和寒热药
性相关;临床常见;可量化。因此,本文选定体重、食量、饮水量作
为一般指标;耗氧量、体温、肝组织 ATP酶作为能量代谢指标;肝
功能以总蛋白含量进行衡量。另外,还选择肝脏系数作为测定参
数。
从以上的实验结果可以初步的确定,天南星和胆南星的寒热
之性与小鼠的饮水量、耗氧量、总蛋白含量、Na + - K + - ATPase
活力具有一定的关系。具体来说,生南星的热性可使小鼠的饮水
量、耗氧量、Na + - K + - ATPase活力、肝脏组织总蛋白含量增加;
胆南星的寒性可使小鼠的饮水量、耗氧量、Na + - K + - ATPase活
力、肝脏组织总蛋白含量降低。实验结果与传统的“牛胆汁转天
南星之温热之性而为寒凉”的理论相一致。
中药的寒热之性与中药本身所含的物质基础有一定的相关
性。徐国钧等[4]认为温性药物大多含有挥发油;热性药所含化
学成分种类较多,有挥发油、脂肪油(具有强烈刺激性)、生物碱
等;寒性药物以苷类为主,也含有生物碱等。杨波等[5]在研究植
物类寒热性与化学成分相关性的文献研究中发现,甾体类是寒性
的较强判别因子,甾体类化合物尤其是植物甾醇和甾体皂苷是药
物表现寒性的影响因子,以甾体类成分为主成分的中药类趋于寒
性。倍半萜类化合物是热性的较强判别因子,含倍半萜类化合物
的主要趋于热性。从单一化合物方面研究,发现寒性药中含棕榈
酸较多;含亚油酸、绿原酸、胡萝卜苷、β -蒎烯这几种化合物多
趋向于热性。天南星块茎含有三萜皂苷、β -谷甾醇、棕榈酸、氨
基酸等。天南星属(Arisaema)植物块茎大多含皂苷,并含一种刺
激性的辛辣物(此物质和明矾作用则失去刺激辛辣性)。生南星
的热性有其相应物质基础。但是具体是如何起作用以及构效关
系如何还需要做进一步的研究工作。而目前关于胆南星药性物
质基础方面的研究还未见有相关文献报道。生南星经胆汁炮制
后药性由温热转为寒凉,是否与其化学成分的改变有关?所有这
些还需进一步深入研究,以便确切阐释天南星的药性理论,为其
临床合理应用提供理论依据。
参考文献:
[1] 高学敏.中药学[M].北京:中国中医药出版社,2008:1.
[2] 龚千锋.中药炮制学[M].北京:中国中医药出版社,2009:5.
[3] 赵兴业,潘思源. 中药寒热药性生理生化评价指标的初步研究
[D].北京中医药大学论文集,2005:10.
[4] 徐国钧,张 伟.有关中药气味归经理论的初步探讨[J].南京药学
院学报,1961,5(6) :91.
[5] 杨 波,王振国.植物类中药寒热药性与化学成分相关性的文献研
究[D].山东中医药大学论文集,2010:34.
·8303·
时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 12 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012VOL. 23 NO. 12