全 文 ：兜兰组培快繁影响因素分析
曹 受 金1 ,田 英 翠1
潘 百 红1 ,李 润 唐2
(1.中南林学院 ,湖南长沙 410004;
2.湖南农业大学 ,长沙 410126)
　　摘　要:在兜兰组培快繁过程中 , 细胞分裂素 BA 对类原
球茎诱导有极显著影响 , KT 和 ZT 的作用不明显;BA 和生长
素 NAA 均对类原球茎的诱导和增强起明显的促进作用 , 且
BA对兜兰幼苗的增殖效果更为显著。 GA 和香蕉泥的合理
组配是兜兰生根壮苗的关键。
关键词:兜兰;组织培养;细胞分裂素;生长素
中图分类号:S682.31　文献标识码:B
文章编号:1001-0009(2005)03-0079-02
1　目的 、材料与方法
兜兰(P.purpuratum Pfitz)又称拖鞋兰 。兰科多年生草
本。多数为地生种 ,杂交品种较多。是栽培最普及的洋兰之
一。主要分布亚洲热带和亚热带林下[ 1 ～ 2] 。种子萌发率相当
低 ,分株繁殖周期长 , 繁殖率低 , 远远不能满足商品化生产的
要求。目前关于兜兰组织培养的报道极少[ 3 , 4] 。本试验旨在
探讨兜兰组培快繁过程中各种因素对其类原球茎诱导 、幼苗
分化及生根壮苗的影响 ,以寻找最适的组培快繁条件 , 为其快
繁及大规模工厂化生产提供依据。
切取兜兰幼根 ,消毒处理后剪成 0.5 cm(厘米)左右长的
根段作为诱导类原球茎的外植体材料。以 ZW 和 1/2MS 为
基本培养基 ,添加琼脂 14 g/ L(克/升), pH5.1 ～ 5.4。培养温
度(25±3)℃,光照度约 2 000 Lx(勒克斯), 光照时间为(15
±1)h/ d(小时/天)[ 5 , 6] 。
2　结果与讨论
2.1　不同细胞分裂素对兜兰类原球茎诱导的影响
我们设计了 L9(33)正交试验 , 以了解细胞分裂素 ZT 、
BA、KT 对兜兰类原球茎诱导的影响。每一处理接种 20 个根
段外植体 , 重复 3 次 , 培养基为 ZW+NAA1.0 mg/ L(毫克/
升)+10%椰子汁+CH(水解酪蛋白)2 g/ L(克/升), 培养 4
周后调查类原球茎诱导率和每个外植体所形成的类原球茎的
个数。从试验结果可以看出(表 1), BA对兜兰类原球茎诱导
有显著的作用 , 而 KT 和 ZT 的诱导作用不明显 , 且 BA 对所
诱导的外植体形成的类原球茎个数也有极显著的影响 , 后两
者只在 p=0.05水平上有影响 。
＊资金项目:中南林学院青年基金 0175项部分项目;湖南省教育厅基
金 03C556项部分项目。
收稿日期:2004-12-21
　　表 1 ZT、BA、KT 正交试验结果
处理
序号
ZT
(mg·L-1)
BA
(mg·L-1)
KT
(mg·L-1)
诱出类
原球茎数
类原球茎
诱导率(%)
1 0.2 0.2 0.2 58.0 51.3
2 0.2 1.0 1.0 68.4 64.2
3 0.2 2.0 2.0 70.0 64.7
4 1.0 0.2 1.0 66.5 53.9
5 1.0 1.0 2.0 70.5 68.0
6 1.0 2.0 0.2 63.5 57.0
7 2.0 0.2 2.0 62.0 54.7
8 2.0 1.0 0.2 61.5 51.6
9 2.0 2.0 1.0 70.0 64.7
F值 ZT 5.25＊ 2.10
BA 10.54＊＊ 5.89＊
KT 6.36＊ 5.21＊
　　＊P<0.05:＊＊P<0.01
2.2　蔗糖 、BA 、NAA对兜兰类原球茎诱导的影响
为了了解生长素 、细胞分裂素 、碳源对兜兰类原球茎诱导
的影响 , 找出各种因素的最佳组合 , 设计了 L9(33)正交试验。
碳源选择蔗糖 , 生长素选择 NAA , 细胞分裂素选择 BA 。每个
处理因素分别设置 3 个水平(表 2)。每一处理接种 20 个根
段外植体 , 重复 3 次。培养基为 ZW+10%椰子汁+CH(水鲜
酷蛋白)2 g/ L(克/升),培养 4周后调查各项指标。
结果表明 , 细胞分裂素 BA 和生长素 NAA 均对兜兰类原
球茎诱导有极显著的影响 , 能明显促进外植体形成类原球茎 ,
蔗糖的作用不太明显。可见兜兰原球茎的最佳诱导培养基应
为:ZW+BA1.0 mg/ L(毫克/升)+NAA2.0 mg/ L(毫克/升)
+10%椰子汁+CH 2 g/ L(克/升)+蔗糖 30 g/ L(克/升)。
　　表 2 蔗糖 、BA 、NAA正交试验结果
处理
序号
蔗糖
(g/ L)
BA
(mg/ L)
NAA
(mg/ L)
诱出类原
球茎数
类原球茎
诱导率(%)
1 20 0.2 0.5 49.0 48.0
2 20 1.0 1.0 65.2 68.0
3 20 2.0 2.0 61.0 64.7
4 30 0.2 1.0 58.0 58.0
5 30 1.0 2.0 69.0 71.3
6 30 2.0 0.5 55.4 54.7
7 40 0.2 2.0 58.0 58.0
8 40 1.0 0.5 58.0 51.3
9 40 2.0 1.0 64.0 70.0
F值 蔗糖 0.8 0.9
BA 7.83＊＊ 4.61＊
NAA 9.06＊＊ 10.58＊＊
　　＊P<0.05;＊＊P<0.01.
2.3　蔗糖 、BA 、NAA 对兜兰类原球茎增殖及幼苗分化的影
响
类原球茎的增殖和幼苗的分化关系到兜兰繁殖速度的快
慢 , 繁殖系数的高低。 将蔗糖 、BA、NAA 设置为 L9(33)正交
试验(表 3),以找出适宜的增殖分化培养基。每一处接种 20
个切割后的原球茎 , 重复 3 次。培养基采用 ZW , 培养 4 周后
统计类原球茎增殖个数和幼苗分化率。从表 3 可以看出 , BA
和 NAA对兜兰类原球茎增殖都有极显著的影响 ,而 BA 则对
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北方园艺 2005(3):79～ 80　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　·生物技术·
幼苗的分化率有显著的影响。处理 5 所得到的增殖率和分化
率最高 ,所以适宜的培养基应为:ZW+NAA0.5 mg/ L(毫克/
升)+BA1.0 mg/ L(毫克/升)+蔗糖 30 g/ L(克/升)。
　　表 3 蔗糖 、BA 、NAA 对兜兰类原球茎增殖
及幼苗分化的影响
处理
序号
蔗糖
(g/ L)
BA
(mg/ L)
NAA
(mg/L)
类原球茎
增殖数
幼苗分化
率(%)
1 20 2.0 0.1 84.0 32.2
2 20 1.0 0.2 95.0 51.3
3 20 2.0 0.5 106.0 58.0
4 30 2.0 0.2 88.0 41.3
5 30 1.0 0.5 119.0 64.5
6 30 2.0 0.1 94.0 48.0
7 40 2.0 0.5 99.5 44.7
8 40 1.0 0.1 90.0 58.0
9 40 2.0 0.2 112.0 59.3
F值 蔗糖 1.25 4.28＊
BA 7.29＊＊ 12.75＊＊
NAA 9.75＊＊ 2.52
　　＊P<0.05 , ＊＊p<0.01
2.4　GA 和香蕉泥对兜兰无根苗生根壮苗的影响
为探寻兜兰无根苗生根壮苗的合适培养基 , 设置 4 种不
同的培养基(表 4), 培养中均添加蔗糖 30 g/ L(克/升), 琼脂
7 g/ L(克/升), pH5.4。将大小达 3 cm(厘米)左右的无根苗
切成单苗 ,接种到 4 个不同的生根培养基上 , 每种培养基接种
20 株 ,重复 3 次 , 培养 4 周后统计结果。
由表 4 可以看出 ,前 3 种培养基上瓶苗的根数明显比第
4 种培养基上多 , 苗也明显高 , 说明 GA 和香蕉泥对兜兰无根
苗的生根均有显著的促进作用 , 且对幼苗的生长也有一定的
促进作用。添加 GA的培养基上苗根较长 ,苗明显较高 , 而添
加香蕉泥的培养基上苗根和苗明显粗壮。可见 , GA 有利于
根茎纵向伸长 ,香蕉泥更有利于根茎横向生长 , 两者的合理组
配是形成兜兰健壮瓶苗的关键。
3　结论
表 4　GA 和香蕉泥对兜兰无根苗生根壮苗的影响
序号 培养基 NAA GA 香蕉泥(g/ L) 根数
根长
(cm)
根粗
(cm)
苗高
(cm)
茎粗
(cm)
1 1/2M S 1.0 1.0 200 4.5 2.0 0.25 4.4 0.23
2 1/2M S 1.0 1.0 0 4.0 2.1 0.16 5.0 0.17
3 1/2M S 1.0 0 200 3.5 1.0 0.27 3.8 0.24
4 1/2M S 1.0 0 0 1.5 0.5 0.17 3.4 0.19
　　在兜兰组培快繁过程中 , 细胞分裂素 BA 和生长素 NAA
均可促进类原球茎的诱导和增殖 , 且 BA 对幼苗的分化也有
极显著的影响 , 两者的适宜组配 , 再添加低浓度的蔗糖作碳
源 , 就成为兜兰类原球茎诱导和幼苗分化的最适培养基 ,即:
ZW+BA1.0 mg/ L(毫克/升)+NAA2.0 mg/ L(毫克/升)+
10%椰子汁+CH2 g/ L(克/升)+蔗糖 30 g/ L(克/升);ZW+
BA1.0 mg/ L(毫克/升)+NAA0.5 mg/ L(毫克/升)+蔗糖
30 g/ L(克/升)。GA和香蕉泥对兜兰无根苗的生根壮苗有明
显的促进作用 , 从而确定生根壮苗培养基为:1/ 2MS+NAA
1.0 mg/ L(毫克/升)+GA1.0 mg/ L(毫克/升)+香蕉泥
200 g/ L(克/升)。
参考文献:
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检疫 , 1999 , 8(6):338～ 339.
[ 6] 　邵锡良.中国兰花的茎尖组织培养[ J] .生物学教学 , 1999 , 24
(10):37～ 38.
兰花换盆与分株
兰花换盆与分株是一体两面的事 , 换盆不一定要分
株 ,分株不一定要换盆。换盆目的是将小植盆换大植盆 , 或
培养盆换观赏盆。换盆的时机一年四季均可进行 , 旧盆的
介质若未松脱 , 可原封不动植入新盆 , 空隙中再补入新的
植料 , 如此可减少根部受损 ,开花者花梗也不致弯曲变形。
分株目的在于繁殖数量 , 增加生长空间及切除病株 , 分株
的时机最好选在花期结束至新芽来临前 , 此时兰株正值成
熟阶段 ,受损率可减少至最低。分株前数天须停止浇水 ,
待盆微干后轻拍盆边即可松脱 , 清除介质及腐根及干叶
裤 , 非必要尽量避免动用剪刀。 分株时 , 强壮者二代连 ,弱
株需三代连。分株后 , 若非污浊者 , 不要水洗(避免伤口感
染细菌)直接植入新盆。植入方式:老株靠边站 ,新苗摆中
间 ,无盆缘软盆种八分满 , 方便提拖 , 有盆缘者 , 球茎与盆
面齐 , 可防叶裤积水生病菌。 填充植料实而不虚 , 虚易脱
水而腐根。小盆植料宜细 , 大盆植料宜粗 ,上下大小不论。
定植后 2 d～ 3 d(天)不浇水 , 待伤口愈合后再充分浇灌。
发现病株应立即切除 , 洗净风干后再杀菌 , 植入后一周不
浇水 , 置于阴凉处 ,复元后再恢复一般方法栽培。
(苏奎　江苏省宝应县隅园巷 4-6C 号雨露兰阁 ,
225800)
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