全 文 ：菝葜水煎液抗炎活性的实验研究
刘世旺 ,徐艳霞 ,吴中华 ,张志林
(黄冈师范学院生物系,湖北 黄冈 438000)
摘要:目的:探讨菝葜水煎液的抗炎活性。方法:利用巴豆油合剂致小鼠耳肿胀 、醋酸致小鼠胸膜炎和皮下植入棉球致小鼠生
长肉芽等 3个实验模型研究菝葜水煎液的抗炎活性。结果:菝葜水煎液对巴豆油合剂引起的小鼠耳肿胀具有显著的抑制作用 , 而
对醋酸引起的小鼠胸膜炎和皮下棉球引起的小鼠肉芽肿则仅有一定的抑制作用。结论:菝葜水煎液具有一定的抗炎活性。
关键词:菝葜水煎液;耳肿胀;抗炎活性
中图分类号:Q949.72 文献标志码:A 文章编号:1005-8141(2006)06-0534-02
Experimental Study on Anti-inflammatory Effect of Smilax China L.
LIU Shi-wang , XU Yan-xia ,WU Zhong-hua , ZHANG Zhi-lin
(Biology Department , Huanggang Normal University , Huanggang 438000)
Abstract:Objective:investigated the anti-inflammatory effect of Smilax China L.Methods:three inflammatory models were established with
Kunming strain mice in this paper that were ear swelling , pleurisy and granuloma.Results:Smilax China L.decocted by water could markedly in-
hibit the ear swelling induced by the croton-oil mixture in mice , and inhibit the pleurisy induced by acetic acid and the granuloma induced by cotton
in mice.Conclusion:Smilax China L.had obvious anti-inflammatory activity.
Key words:Smilax China L.;ear swelling;anti-inflammatory activity
收稿日期:2006-10-17;修改日期:2006-11-20
基金项目:湖北省教育厅重点科研项目(项目编号:2000A47003)。
作者简介:刘世旺(1965-),男 ,湖北省武汉人 ,医学硕士 ,副教授 ,
现从事生物化学和植物资源学方面的教学与科研工作。
菝葜(Smilax China L.)为百合科(Liliaceae)菝葜属
(Smilax)植物 ,该植物属落叶攀缘状灌木 ,具地下茎 ,原
产中国 ,朝鲜 、缅甸 、越南 、菲律宾也有分布 ,现在我国
大别山地区很常见 。菝葜在民间作药用历史久远 ,菝
葜根茎具有活血化瘀 、清热利湿 、强筋壮骨 、消肿毒 、祛
风湿 、补气活血等功效 ,可用于治疗淤血 、闭经 、风湿 、
痹痛 、跌打损伤 、水肿 、痢疾 、妇科肿瘤等[ 1] ,但至今有
关菝葜药理学研究报道较少。我们对菝葜根茎水煎液
的抗炎药理作用进行了初步研究 。研究结果表明 ,菝
葜根茎水煎液抗动物急性炎症活性显著 ,这为进一步
开发利用菝葜植物资源提供了科学依据 。
1 实验材料
药品及试剂:氢化可的松注射液(天津药业焦作有
限公司 ,批号:030923-2), 氨苄青霉素(华北制药公
司),巴豆(购自湖北省黄冈市中药材公司),无水乙醇 、
乙醚 、硝酸银 、醋酸等均为分析纯 ,生理盐水 、白细胞稀
释液 、TC199溶液(含肝素 50μg/ml)等临用前自己配
制。
仪器:离心机 ,光照培养箱 ,显微镜(北京泰克仪器
厂),旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),精密电子天
平(AB204-N ,METTLER TOLEDO),微量移液器(Ep-
pendorf 公司),高压蒸气消毒器(上海博讯实业有限公
司医疗设备厂)等。
动物:昆明种小鼠 ,体重在 20 ～ 25g 之间 ,雌雄各
半 ,由华中科技大学同济医学院提供。
菝葜水煎液:菝葜根茎于实验当年的 4月份采自
湖北黄州龙王山 ,采回后自然晾干并加工成饮片备用。
取菝葜根茎饮片 6kg 加蒸馏水浸泡 30min 后 ,加热煮
沸 ,开始用强火 ,后用文火保持微沸 2h ,趁热过滤 ,药
渣再加蒸馏水用同法煎煮 ,微沸 1h 后过滤 ,合并滤液
并经旋转蒸发仪减压蒸发浓缩至 1000ml(1ml相当于
生药 6g),冰箱冷藏备用 。
2 实验方法
2.1 巴豆油提取和巴豆油合剂的配制[ 2]
巴豆油提取:将巴豆粉碎后用沙布包裹 ,放入索式
提取器 ,加入适量乙醚后 ,架好索式提取器和冷凝回流
装置 ,再用加热套加热 ,使其保持微沸 3h ,最后烧瓶里
盛装的就是巴豆油和乙醚的混合物 。用冷凝回流装置
蒸发回收混合物中的乙醚 ,直至烧瓶内物质至恒重 ,即
可得到实验所需的巴豆油 ,密封冷藏备用。
巴豆油合剂的配制:按巴豆油 2%、无水乙醇
20%、蒸馏水 5%、乙醚 73%的质量比配制巴豆油合
剂 ,冰箱冷藏备用。
2.2 小鼠耳壳肿胀实验
取小鼠 30只 ,雌雄各半 ,分别称重后用 3%AgNO3
标记小鼠 ,再按随机分组的原则 ,将其平均分为 3组。
·534·
·实验研究· 资源开发与市场 Resource Development &Market 2006 22(6)
对照组灌喂生理盐水 20ml/kg ,给药组灌喂菝葜水煎液
120g/kg ,阳性对照组灌喂氢化可的松 15mg/kg ,均每天
灌喂一次 ,连续给药 4d ,在最后一次给药后的 1.5h用
巴豆油合剂30μl均匀涂于小鼠右耳正反两面 ,4h后脱
臼处死小鼠并沿小鼠耳基线剪下左右两片耳朵 ,用
8mm的打孔器分别在左右两片耳朵上钻取相同部位 ,
置于精密电子天平上称量 ,计算肿胀度(肿胀度=右耳
片重-左耳片重)和抑制率[抑制率=(对照组平均肿
胀率-给药组平均肿胀率)/ 对照组平均肿胀率] 。
2.3 小鼠胸腔白细胞游走实验
取小鼠20只 ,分别称重后随机分为 2组。给药组
于实验前 48h 、24h 、1h 分别用菝葜水煎液灌喂给药 3
次 ,剂量均为 120g/kg ,对照组灌喂同体积的生理盐水。
在末次给药后 1h将小鼠用乙醚浅度麻醉 ,仰卧位固定
于手术台上 ,在小鼠右侧胸腔注入 2%的醋酸 ,剂量为
0.2ml/只 ,5h后断头处死小鼠。在小鼠横膈周边位打
开胸腔(注意尽量靠近胸腔右后角 ,避免伤肺),用注射
器或吸管吸出胸腔液(避免出血)。记录渗出液量和白
细胞数。
2.4 小鼠肉芽肿实验
取小鼠 30只 ,分别称重并随机平均分为 3组 ,分
别装入用紫外光照射灭菌的鼠笼内作短暂饲养 ,待后
述灭菌工作完成后马上使用 。根据 30只小鼠的体重
分别按小鼠体重的 5/14称取棉球并分别编号装入已
灭菌处理的青霉素小瓶内 ,再向棉球中加入 10mg/ml
的氨苄青霉素液 0.1ml/个 ,一起置入 50℃干燥箱烤干
后封装备用 。其它所有手术器械都必须高压灭菌 ,棉
球植入小鼠体内的过程必须为无菌操作[ 3] 。一切准备
好后 ,将已称重的 30只小鼠分别用乙醚麻醉 ,并仰卧
固定在小鼠手术台上 ,在每只小鼠右腹股沟处用碘酒
消毒 ,再用 75%的酒精棉球脱碘后 ,各切 10mm 长小
口 ,用眼科镊子将与之对应的棉球埋入切口内(此时应
注意埋入棉球的位置在各小鼠间应尽可能一致 ,而且
棉球与组织接触的面积也必须尽可能一致),随即缝合
皮肤 。从手术当日开始 , 对照组每天用生理盐水
20ml/kg ,给药组每天用菝葜水煎液 120g/kg ,阳性对照
组每天用氢化可的松 15mg/kg 分别对小鼠灌喂 ,连续
给药 7d ,第 8d打开原切口 ,将棉球连同周围结缔组织
一起取出 ,剔除脂肪组织 ,置入 80℃干燥箱中烘干 ,称
重。总重量减去棉球原重量即得肉芽肿重量 。
3 实验结果
3.1 菝葜水煎液与巴豆油合剂致小鼠耳肿胀的影响
实验数据见表 1。对表 1中实验数据运用生物统
计学方法处理(F检验)后可知:①给药组 、阳性对照组
分别与对照组比较 ,其差异均非常显著(P<0.01);②
给药组与阳性对照组比较 , 其差异则不显著(P >
0.01)。实验结果表明:在 0.01水平上 、99%置信区间
内 ,菝葜水煎液对巴豆油致小白鼠耳肿胀具有明显的
抗炎抑制作用 ,且抗炎抑制作用效果与氢化可的松相
近。
表 1 菝葜水煎液与巴豆油合剂致小鼠耳肿胀影响(X±SD n=30)
组别 动物数量(只) 剂量 肿胀度(mg) 抑制率(%)
对照组 10 20ml/kg 12.63±4.21 -
给药组 10 120g/ kg 7.23±3.12 42.8
阳性对照组 10 15mg/ kg 6.11±3.27 51.7
3.2 菝葜水煎液对小鼠胸腔白细胞游走的影响
实验数据见表 2。对表 2中实验数据运用生物统
计学方法处理(F 检验)后可知:①给药组胸腔渗出液
体积与对照组胸腔渗出液体积相比较 ,其差异不显著
(P>0.05);②给药组白细胞总数与对照组白细胞总数
相比较 ,其差异非常显著(P<0.01)。实验结果表明 ,
菝葜水煎液对降低白细胞数目有较明显作用 ,但对胸
腔渗出液体积无明显影响 ,即菝葜水煎液可以抑制白
细胞游走 ,具有抑制小鼠胸膜炎的作用 。
表 2 菝葜水煎液对小鼠白细胞游走的影响(X±SD n=20)
组别 动物数(只) 剂量 胸腔渗出液(ml) 白细胞总数(个)
对照组 10 20ml/ kg 1.59± 0.21 (34.93±4.21)×105
给药组 10 120g/kg 1.23± 0.19 (25.47±3.44)×105
3.3 菝葜水煎液对小鼠棉球肉芽肿的影响
实验数据见表 3。对表 3中实验数据运用生物统
计学方法处理(F 检验)后可知:①给药组与对照组比
较 ,其差异显著(P <0.05);②阳性对照组与对照组比
较 ,其差异非常显著(P <0.01);③给药组与阳性对照
组比较 ,其差异显著(P<0.05)。实验结果表明:菝葜
水煎液对小鼠棉球肉芽肿有一定的抑制作用 ,即菝葜
水煎液对慢性炎症可以产生较明显的抗炎作用 ,但这
种抑制作用不及急性炎症模型 ———小鼠耳壳肿胀实验
中明显。此外 ,在慢性炎症模型中 ,菝葜水煎液与氢化
可的松的作用存在一定的差异 。
表 3 菝葜水煎液对小鼠棉球肉芽肿的作用(X±SD.n=30)
组别 动物数量(只) 剂量 肿胀度(mg) 抑制率(%)
对照组 10 10ml/kg 12.44±0.4 -
给药组 10 120g/ kg 9.21±0.3/ a 25.9
阳性对照组 10 15 mg/kg 7.06±0.3/b 43.25
4 讨论
当巴豆油合剂涂于小鼠耳壳时 ,小鼠耳壳组织和
微血管受到刺激损伤 ,迅即导致多种可溶性炎症介质
释放 ,由此引起凝血 、激肽和纤溶系统级联反应。这些
作用都会导致血管扩张 、毛细血管通透性升高 、血流变
(下转第 551页)
·535·
资源开发与市场 Resource Development &Market 2006 22(6) ·实验研究·
入高者达 15 万元/hm2 。此外 ,从紫苏的叶 、茎中还可
加工和提制挥发性油 、香气 、色素 、抗癌物质等 ,只是加
工设备和精制技术有待提高。今后紫苏的开发应用 ,
在以下方面具有前途:①营养食品开发 。利用紫苏中
的不同营养物质 ,可以加工成蜜饯 、果脯 、营养饮料 、糖
果 、叶粉 、植物油 、糕点食品等;直接加工食用紫苏 ,如
芽苗菜 、腌制 、拼盘 、炒食 、混用 、全粉等。最新研究发
现 ,紫苏油是迄今为止发现的α-亚麻油酸含量最高
的植物油 ,无害 、无鱼油的臭味 ,双键相应较少 ,稳定性
强于鱼油且胆固醇含量低。近年来 ,国际上对紫苏的
研发和应用方兴未艾 ,除用作药品外 ,在食品方面的应
用前景十分广阔 。②工业方面 。利用现代科技与设备
提制紫苏油 、紫苏醛 ,收集紫苏香气 ,生产紫苏色素 、防
腐剂 、调味剂 、清漆等工业原料 ,很有开发前景。 ③医
药方面。研制紫苏抗肿瘤药物 ,开发紫苏叶浸膏 、紫苏
安胎糖浆等产品 。紫苏是我国卫生部公布的第一批
60种既是药品又是食品的一种植物 ,是在医药和食品
领域有着重要开发价值的经济作物。我国从 20世纪
90年代初开始研究紫苏 ,1997年通过紫苏籽获得具有
良好保健功能的紫苏油;1999年成功研制出了预防心
血管病的保健品紫苏油胶囊;2000年对紫苏叶进行再
利用 ,通过紫苏叶制取了紫苏叶汁保健饮料;2001年
通过紫苏叶提取了紫苏胡萝卜素 ,这是一种更高级的
紫苏提取物 ,具有更广阔的使用前景和更高的附加值。
据悉 ,紫苏叶汁饮料和紫苏胡萝卜素微胶囊在世界上
为我国最早提取应用 ,紫苏叶在我国港澳台地区以及
东南亚 、欧美各国十分畅销。据报道显示 ,在我国种植
紫苏和对紫苏产品进行系列开发大有可为 ,规模化生
产前景广阔。
参考文献:
[ 1] 韦保耀 ,黄丽 ,等.紫苏属植物研究进展[ J ] .食品科学 , 2005 , 26(4)∶
274～ 276.
[ 2] 张卫明 ,刘秀月.紫苏叶的成分分析及利用初探[ J] .中国野生植物资
源 , 1998, 17(2)∶32～ 33.
[ 3] 刘秀月 ,张卫明.紫苏的成分分析[ J] .广西植物 , 1999,(3)∶285～ 288.
[ 4] 韩丽 ,李福臣 ,等.紫苏的综合开发利用[ J] .食品研究与开发 , 2004 ,
25(3)∶24～ 26.
[ 5] 易诚.紫苏资源的开发与利用[ J] .特产研究 , 2003 ,(4)∶57.
[ 6] 王素君 ,张毅功.紫苏的栽培与开发利用[ J] .河北农业大学学报 ,
2003 , 5∶122～ 124.
[ 7] 刘大川 ,王静 ,等.紫苏植物的开发研究[ J] .中国石油 , 2001 , 26(5)∶
7～ 9.
[ 8] 张哲 ,祝丽香.优良的经济作物———紫苏[ J] .中国林副产品 , 2000 , 8
(3)∶32.
[ 9] 刘秉和.要重视紫苏的利用和开发[ J] .湖南中医学报 , 2000 , 6(2)∶
16～ 17.
[ 10] 孙禄.皱紫苏的栽培及利用价值[ J] .特种经济动植物 , 2001 , (4)∶
28～ 29.
[ 11] 王修堂,王晓明.紫苏的生物学特征及科学培育技术[ J] .农村科技
开发 ,2000 ,(7)∶17.
(上接第 535页)
变缓 ,从而导致耳壳水肿 。在给小鼠灌喂菝葜水煎液
后 ,症状很快消失 ,这说明菝葜水煎液对急性炎症有很
强的消炎作用。当醋酸注入小鼠胸腔后 ,由于致炎物
质的作用 ,使小鼠胸膜产生炎症反应 ,在趋化因子的作
用下 ,胸膜上的毛细血管的通透性增加 , 血液流动加
速 ,产生局部水肿。同时 ,胸腔内的白细胞数目增加 ,
并且向炎症部位游动 ,发挥其吞噬作用 。给药组因有
菝葜水煎液的作用 ,促使胸腔渗出液中的白细胞向炎
症部位聚集 ,所以胸腔渗出液中白细胞数目减少的现
象就是菝葜水煎液抑制小鼠胸膜炎的反映。此外 ,菝
葜水煎液对肉芽增生反应也有一定的抑制作用 ,这与
它们在临床上较快地解除以红 、热 、肿 、痛为特点的“热
症”相吻合[ 4] 。
本实验研究主要采用口服给药方式 ,药物剂量约
为临床的等效量 。就中医理论而言 ,抗炎药涉及解表
药 、清热药 、功下药 、祛风湿药 、活血化瘀药 、止咳平喘
药以至补虚药等 。其中 ,清热抗炎药的主要特点是能
较强地抑制炎症早期的毛细血管透性 、亢进 、渗出 、水
肿作用等 ,即血管反应较明显;而对于炎症中期的白细
胞集聚及晚期的炎症组织纤维增生作用则较弱或无 ,
即细胞反应 、组织增生作用等较弱或无 。分析本文报
道的 3个药理实验模型的实验结果可知:菝葜水煎液
与巴豆油致小鼠耳肿胀反应即血管反应的抑制作用十
分明显 ,而对小鼠胸膜炎模型中抑制白细胞游走和棉
球肉芽肿模型中抑制组织增生等作用则不十分明显 ,
仅表现出一定的抗炎能力 ,即菝葜对炎症中期的细胞
反应和晚期的组织增生反应作用不明显 ,这与相关文
献报道的结论基本一致[ 5] 。
菝葜水煎液具有一定的抗炎作用 ,特别是对早期
急性非特异性炎症有较明显的抑制作用 ,对中期 、晚期
慢性非特异性炎症则仅有一定的抑制作用。
参考文献:
[ 1] 曹艳花.菝葜的研究概况[ J] .山东医药工业 , 2002 ,21(3)∶29～ 30.
[ 2] 陈奇.中药药理实验[M] .北京:人民卫生出版社 , 1993, 371～ 375.
[ 3] 沈道修.一种研究中西药抗炎作用塑料环肉芽肿定量法[ J] .中西医
结合杂志 , 1993 , 24(6)∶231～ 233.
[ 4]Warne PJ.West GB.Inhibition of Leucoeyte Migration by Salicylates and in
Domethacin[ J] .Pharm Pharmacol , 1998 ,30(11)∶283～ 284.
[ 5] Von Barbara Rudas.Zur Quantitativen Bestimmung Von Granulationsgewebe
An Experimentel l Erzeugten Wunden[ J] .Arzneimittel-forschung , 1990 , 10
(4)∶226～ 226.
·551·
资源开发与市场 Resource Development &Market 2006 22(6) ·保护与利用·