全 文 : *基金项目:湖北省自然科学基金资助项目 (2006ABA204)。
竹节参总皂苷抗炎作用的研究*
袁 丁 , 鲁科明 , 张长城
(三峡大学医学院 , 湖北 宜昌 443002)
摘 要:目的:观察竹节参总皂苷抗炎作用。方法:建立二甲苯致小鼠耳肿胀和弗氏完全佐剂诱导大鼠的足
肿胀炎症模型 , 观察竹节参总皂苷对急 、 慢性炎症的治疗效果。结果:与模型组比较 , 竹节参总皂苷高剂量组
能够显著对抗二甲苯所致的炎症 (P<0.01), 且可明显减轻佐剂关节炎大鼠的足肿胀程度 (P<0.01)。 结论:
竹节参总皂苷具有较显著的抗炎作用。
关键词:竹节参;竹节参总皂苷;耳肿胀;足肿胀;抑制作用
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1000-0704 (2008)04-0007-02
竹节参 , 别名竹节三七 、 竹根七 、 竹节人参 、 白三
七等 , 民间俗称 “草药之王 ” , 为五加科植物竹节参
PanaxjaponicusC.A.Mey.的干燥根茎 , 1977年以后
各版 《中国药典 》 均予收载 , 有滋补强壮 、 散瘀止痛 、
止血祛痰等功效 [ 1] 。 其有效成分皂苷类化合物具有显著
抗炎活性 , 本实验研究竹节参总皂苷对急 、 慢性炎症的
治疗作用。
1 材料
1.1 动物
清洁级昆明种小白鼠 , 体重 (20±2)g, 雌雄各半 ,
共 40只;清洁级雄性 Wistar大鼠 , 体重 (160±10)g, 共
40只 (购于华中科技大学同济医学院实验动物中心)。
1.2 药物与试剂
竹节参采自湖北省宜昌市五峰县种植基地 , 经宜昌市
药检所鉴定。竹节参总皂苷 (TSPJ)的制备 [ 2] :新鲜采集
的竹节参 1kg于室温干燥 , 粉碎后经甲醇冷浸 、 回流提取 ,
随后用含水的石油醚萃取多次除去脂质;然后用水饱和正
丁醇萃取多次 , 回流蒸干正丁醇得竹节参总皂苷约 20g。
阿司匹林片 (西安利君沙制药有限公司), 白芍总苷
胶囊 (浙江宁波立华制药有限公司)。二甲苯 (武汉江北
化学试剂有限责任公司), 弗氏完全佐剂 (CFA, Sigma公
司)。
2 方法与结果
2.1 对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用
取小白鼠 40只 , 随机分为 4组 , 分别为模型组 、 TSPJ
低剂量组 [ 80mg/ (kg· d)] 、 TSPJ高剂量组 [ 320mg/
(kg· d)] , 阿司匹林组 [ 250mg/ (kg· d)] , 每组 10只。
各组灌胃 6天 (模型组给等量生理盐水), 于末次给药 1h
后 , 将所有小鼠右耳前后两面均匀涂抹二甲苯 0.02ml,
60min后脱颈椎处死 , 用 8mm直径打孔器 , 分别在同一部
位打下圆耳片 , 用分析天平称两耳片的重量 , 以左右耳重
量差异作为肿胀度 , 并计算肿胀抑制率 [ 3-4] 。肿胀抑制率
=(模型组耳肿胀度 -给药组耳肿胀度)/模型组耳肿胀
度 ×100%。
统计学处理:采用 SPSS10.0统计软件包 , 计量指标以
均数 ±标准差 ( x±s)表示 , 各组间差异采用单因素方差
分析。结果见表 1。
表 1 各组对二甲苯所致小鼠耳肿胀的抑制作用 ( x±s)
组别 n 肿胀度 (mg)肿胀抑制率 (%)
模型组 10 13.94±0.94 -
阿司匹林组 10 7.63±0.77** 45.27
TSPJ低剂量组 10 11.98±10.89 14.06
TSPJ高剂量组 10 6.89±1.05** 50.57
与模型组相比, **P<0.01。
2.2 对 CFA诱导大鼠足肿胀的抑制作用
取大鼠 40只 , 于右后足跖皮内无菌注射 CFA0.1ml诱
导大鼠足肿胀模型。造模完成后 , 随机分为模型组 、 TSPJ
低剂量组 [ 50mg/ (kg· d)] 、 TSPJ高剂量组 [ 200mg/
(kg· d)] 、 白芍总苷组 [ 50mg/ (kg· d)] , 每组 10只。
CFA致炎后第 14天各给药组开始灌胃给药 (模型组给等量
生理盐水), 共 7天。从致炎后第 12天开始 , 每隔 3天测
量大鼠左 、 右足容积 , 计算足肿胀率 [ 3-4] 。足肿胀率 =
(致炎后足容积值 -致炎前足容积值) /致炎前足容积值 ×
100%。
统计学处理同 2.1。结果:致炎后 18h, 造模各鼠右
后足肿胀达峰值 , 且色红 , 皮温高 。持续 3天后逐渐减
轻 , 8天后再度肿胀 。继发病变于 12天左右出现 , 表现
·7·2008年第 30卷第 4期 湖北中医杂志
为注射对侧左后足的肿胀 、 前肢脚的肿胀 、 尾部结节 、
眼部红斑等 。动物一般情况:精神低迷 , 食欲差 , 部分
大鼠出现体重减轻 , 行动较困难 , 提示造模成功 。 灌胃
给药后 4天左右 (致炎后第 18天), TSPJ高剂量组对右
后原发性关节炎足肿胀表现出明显的抑制作用 (P<
0.01);给药后 7天 (致炎后第 21天), 对左后继发性
关节炎足肿胀也有明显抑制作用 (P<0.01)。 见表
2、 表 3。
表 2 各组对大鼠右后原发性关节炎足肿胀率的影响 ( x±s)
组别 n
致炎后不同时间右后足肿胀率 (%)
12d 15d 18d 21d
模型组 10 54.58±6.86 50.04±13.95 46.77±3.50 45.10±11.83
白芍总苷组 10 50.23±6.36 46.43±11.38 36.55±3.71** 32.54±8.15**
TSPJ低剂量组 10 50.21±8.14 49.64±8.75 42.13±3.87 36.60±2.29*
TSPJ高剂量组 10 49.41±5.88 46.00±9.36 30.41±7.52** 21.73±6.95**
与模型组相比 , *P<0.05, **P<0.01。
表 3 各组对大鼠左后继发性关节炎足肿胀率的影响 ( x±s)
组别 n
致炎后不同时间左后足肿胀率 (%)
12d 15d 18d 21d
模型组 10 23.74±2.12 24.65±3.21 24.05±3.15 23.68±3.77
白芍总苷组 10 24.75±2.94 23.83±2.58 18.51±2.24* 12.38±2.03**
TSPT低剂量组 10 25.20±3.96 25.04±4.15 23.13±3.01 19.37±3.02*
TSPJ高剂量组 10 25.38±4.08 23.59±3.64 18.76±2.69* 10.22±2.15**
与模型组相比 , *P<0.05, **P<0.01。
3 讨论
现代药理研究表明 , 竹节参主要活性成分为皂苷类 ,
尚含少量挥发油 、 多糖和氨基酸等 , 对中枢神经系统 、 免
疫系统 、 心血管系统具有广泛且稳固的药理作用。竹节参
在临床上多用于治疗类风湿关节炎 , 临床研究发现竹节参
复方制剂对类风湿关节炎有较好的治疗作用。陈龙全等研
究发现复方竹节参片有明显的抗炎 、 镇痛作用 , 如对小鼠
耳廓二甲苯致肿有明显抑制作用 , 使用小鼠热板仪观察可
见其提高了小鼠的痛阈 , 还可减少 0.5%冰醋酸所致的扭
体次数 [ 5] 。同时发现 , 复方竹节参片能提高 SOD活性 ,
抑制自由基导致的炎症过程 , 清除或减少 LPO的产物
MDA的含量 [ 6] 。 而目前尚未对其抗炎物质基础进行研
究 。
本研究采用从竹节参中提取的总皂苷成分 , 选用常
见的急慢性炎症模型 , 考察竹节参总皂苷抗炎作用 。结
果显示 , TSPJ高剂量组与模型组比较 , 可显著抑制二甲
苯所致的小鼠耳肿胀 (P<0.01), 显著抑制 CFA大鼠
原发性 、 继发性足肿胀 (P<0.01)。 本实验采用的 CFA
诱导大鼠足肿胀模型 , 是研究药物治疗类风湿性关节炎的
常用模型 , 说明 TSPJ同时对类风湿关节炎有一定治疗作
用。本课题组利用比色法测定竹节参中总皂苷含量在 16%
以上 , 利用 RP-HPLC法测定竹节参中齐墩果烷型皂苷含
量在 6%以上 , 可见总皂苷中齐墩果烷型皂苷含量丰富。
综合文献报道 , 发现齐墩果烷型皂苷具有显著的抗炎活性 ,
因此深入研究竹节参皂苷抗炎活性成分和机制将是以后研
究的重点。
参考文献:
[ 1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典.一部 [ M] .北
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北京:人民卫生出版社 , 2002. 529.
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[ 5] 陈龙全 , 袁德培.复方竹节参片镇痛 、 抗炎作用的实验研
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[ 6] 陈龙全.复方竹节参片治疗类风湿性关节炎的作用机制
[ J] .中国中医药信息杂志 , 2003, 10 (9):27-30.
(收稿日期:2007-11-20 编辑:林 飞)
·8· 湖北中医杂志 2008年第 30卷第 4期