全 文 ：收稿日期:2005 —03 —20
修订日期:2005 —04 —30
蜘蛛兰的组织培养
张宏志 , 唐前瑞 , 龙岳林 , 王昭静 , 解检清
(湖南农业大学园艺园林学院 , 湖南 长沙　410128)
摘　要:本试验以蜘蛛兰叶片为外植体 , 研究了蜘蛛兰愈伤组织诱导和芽分化的最适 NAA和 6 —BA 的浓度组合以及
诱导生根的最适NAA 浓度。结果表明:①愈伤组织诱导最适培养基为MS+NAA 1mg L+6-BA 2mg L;②愈伤组
织诱导芽分化最适培养基为MS+NAA 1mg L+6-BA 2.5 mg L;③诱导生根的最适 NAA浓度为 1 mg L。
关键词:蜘蛛兰;组织培养;愈伤组织
中图分类号:S 682.2+9　　　文献标识码:A　　　文章编号:1003 —5710(2005)03 —0022 —02
The tissue culture of Hymenocallis salisb
ZHANG Hong-zhi , TANG Qian-rui , LONG Yue-lin , WANG Zhao-jin , XIE Jian-qing
(Gardening College ,Hunan Agriculture Univ., Changsha 410128 , China)
Abstract:The experimentation test on the leaf of Hymenocallis salisb as explant.In order to test out the best density of NAA added 6-BA for
the callus induction and bud differentiation , and best density of NAA for radication induction.The results showed that:①The best culture me-
dium of tissue induction was MS+NAA1mg L+6 —BA2mg L;②The best culture medium of bud differentiation induction was MS+NAA1mg
L+6 —BA2.5 mg L;③The best density NAA for radication induction was 1 mg L.
Key Words:Hymenocallis salisb;tissue culture;callus
　　蜘蛛兰(Hymenocallis salisb)属石蒜科水鬼蕉属的球根花
卉。因其叶姿健美 , 花型别致奇特 , 不仅可作盆栽来装饰庭
院 ,布置廊下 、窗前 、会场观赏 , 也可在温暖地区作布置花境
的材料 , 或在草地 、灌木前丛植。其观赏价值及经济价值都
较高。但目前由于蜘蛛兰的生产周期较长 , 其分球繁殖系数
低 ,一些珍贵品种繁殖比较困难 , 这都不利于蜘蛛兰的种植
及应用。作者在相关研究[1 ～ 5] 的基础上 , 以 MS 为基本培养
基 ,对蜘蛛兰叶片愈伤组织的诱导 、芽的分化 、根的诱导等进
行了初步研究 ,以期为蜘蛛兰的生产 、科研提供参考依据。
1　材料与方法
1.1　材料
供试材料取自湖南农业大学观赏园艺 、园林教学基地内
生长健壮无病虫害的地栽蜘蛛兰 ,以幼嫩的叶片作为外植体。
1.2　方法
1.2.1　外植体的消毒　采回幼嫩叶片 , 先用自来水冲洗干
净 ,然后在超净工作台上用含 0.5%吐温 —80 的 0.1%氯化汞
溶液中浸泡 10～ 15 min , 取用无菌水冲洗 3 ～ 4 次 , 把消毒过
的叶片用无菌滤纸吸干后 ,放在灭过菌的培养皿里备用。
1.2.2　接种　接种前 15～ 30 min 启动超净工作台 ,工作台的
操作表面用 70%的乙醇灭菌。双手用肥皂洗净后再用 70%
乙醇拭擦 , 所使用的解剖刀 、镊子 、培养皿等也要事先经过高
温灭菌处理。将叶片切成 1 ～ 1.5 cm 长的小段 , 垂直接种到
各种培养基上 。在接种的过程中 ,每接种完一瓶材料后用酒
精棉球拭擦一下手指 , 所用的解剖刀 、镊子也必须经常的在
酒精灯上灼烧灭菌。冷却后用来切取接种材料。
1.2.3　培养基和培养条件　培养基以 MS(Murashige T.and
Skoog H., 1962)为基本培养基 , 附加各种不同浓度的植物激
素 , 蔗糖 30 g L , 琼脂7 g L, pH 值调至 5.0 ～ 6.0。培养温度恒
温 25.4 ℃,每天光照 12 h , 光强 700～ 800 lx。
2　结果与分析
2.1　不同消毒剂对外植体消毒杀菌效果的影响
对外植体采用不同的消毒剂和消毒方法后 ,试验结果表
明:升汞消毒最彻底 ,但清洗困难 ,如果在消毒时间上控制不
当 , 对材料会造成很大的伤害。在升汞中加入 2 滴酒精或吐
温 , 所用的时间短 ,并具有很好的灭菌效果 , 对材料的伤害也
较小 。
2.2　不同的 NAA 和6 —BA的浓度组合对蜘蛛兰叶片愈伤组
织诱导的影响
由表1 可以看出 ,当NAA 和6 —BA 的浓度都为0 时 ,愈伤
组织诱导率为 0;当 NAA 浓度为 0.5 , 6 —BA 的浓度在 1.5 ～
2.5 时 , 愈伤组织诱导率随 6 —BA浓度的升高而增加;当 NAA
浓度为1.0 , 6 —BA的浓度为 2.0时 , 愈伤组织诱导率最高 ,为
湖南林业科技　2005年第32卷第 3 期 研究报告　
93.3%。 当 NAA 浓度为 1.5 ～ 2.0 时 , 愈伤组织诱导率随
6 —BA浓度的升高而逐渐下降。
表1　不同激素组合对叶片愈伤组织诱导的影响
植物激素(mg L)
NAA 6 —BA
愈伤组织诱导率(%)
i ii iii
平均诱导率
(%)
0　 0　 0 0 0 0
0.5 1.5 74.1 35.1 60.3 56.5
0.5 2.0 78.1 39.1 64.4 60.5
0.5 2.5 78.5 39.1 68.3 62.0
1.0 1.5 63.8 78.1 68.1 70.0
1.0 2.0 94.6 91.1 94.3 93.3
1.0 2.5 90.0 70.9 90.0 83.6
1.5 1.5 85.3 78.0 68.1 77.1
1.5 2.0 82.5 68.5 58.6 69.9
1.5 2.5 60.8 78.1 70.0 69.6
2.0 1.5 68.1 75.4 54.7 66.0
2.0 2.0 62.1 75.3 52.4 63.3
2.0 2.5 78.4 47.1 56.7 60.7
2.3　愈伤组织在不同激素组合培养基上芽诱导情况
蜘蛛兰愈伤组织在不同激素组合培养基上诱导芽的结
果如表2。由表2 可知 ,蜘蛛兰愈伤组织在 MS 培养基上芽的
分化率随激素浓度的变化而不同。当 NAA 和 6 —BA 的浓度
为 0时 , 蜘蛛兰芽分化率为 0;当NAA的浓度在 0.5～ 1.0 时 ,
蜘蛛兰芽分化率随 6 —BA的浓度的升高而升高;当 NAA浓度
为 1.0 , 6 —BA的浓度为 2.5时 , 愈伤组织芽的分化率最高 ,为
84.6%;当NAA的浓度在1.5～ 2.0 时 ,蜘蛛兰芽分化率随6 —
BA浓度的升高而下降。
表 2　蜘蛛兰愈伤组织在不同激素组合培养基上芽诱导情况
激素浓度组合(mg L) 愈伤组织数 分化芽块数 分化率(%)
0.0 NAA+0.0 6 —BA 18 0　 0　
0.5 NAA+1.5 6 —BA 21 15 71.4
0.5 NAA+2.0 6 —BA 15 11 73.3
0.5 NAA+2.5 6 —BA 20 15 75.0
1.0 NAA+1.5 6 —BA 17 13 76.5
1.0 NAA+2.0 6 —BA 14 11 78.6
1.0 NAA+2.5 6 —BA 13 11 84.6
1.5 NAA+1.5 6 —BA 13 10 76.9
1.5 NAA+2.0 6 —BA 22 16 72.7
1.5 NAA+2.5 6 —BA 16 11 68.8
2.0 NAA+1.5 6 —BA 12 7 58.3
2.0 NAA+2.0 6 —BA 23 11 47.8
2.0 NAA+2.5 6 —BA 11 4 36.4
2.4　诱导芽在不同浓度 NAA上的生根情况
把蜘蛛兰叶片愈伤组织的诱导芽从基部剪断后接种于
不同 NAA浓度的 MS 培养基中 , 第 10 天观测并统计生根情
况 , 试验结果见表 3。 由表 3 可知 , 诱导芽在 NAA浓度为 0 、
0.5、1.0、 1.5 的培养基上培养生根率均可达 100 %,这可能
是蜘蛛兰体内含有较高浓度的生长素。而当 NAA 浓度为1.0
时 , 产生的根数最多 , 根的平均长度最长。
表 3　蜘蛛兰叶片愈伤组织诱导芽在不同浓度
NAA上的生根情况　　　　　　　　　　　
NAA浓度(mg L) 生根百分率(%) 平均根数(条)平均根长(cm)
0 100 5 2.5
0.5 100 7 2.8
1.0 100 9 3.2
1.5 100 8 3.0
3　小结与讨论
(1)在升汞中加入酒精或吐温 ,其功效是能够彻底清除
材料表面的绒毛 ,具有一定的渗透作用 ,因此灭菌效果较好 ,
对材料的伤害也较弱。
(2)通过试验可以看出 , 一般情况下 , 创伤有利于愈伤
组织的形成 ,愈伤组织一般先从切口处发生 , 所以创伤可能
有利于刺激愈伤组织的形成。 但也有不从切口产生愈伤组
织 , 所以诱导愈伤组织并不是唯一途径。
(3)由试验得知 ,不同激素组合对叶片愈伤组织诱导的
影响 ,不仅与其所组合的植物激素的浓度有关 , 也与植物激
素之间的浓度比有关 , 其诱导率在出现一个相对最高值后 ,
反而会随着浓度的升高而起抑制作用使其降低。
(4)由于条件的限制 ,对可能影响蜘蛛兰组培的其他因
子 , 如外植体采集时间 、培养温度 、糖的浓度及种类等还有待
进一步研究。
参考文献:
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