全 文 ：新疆大赖草胚性细胞系的建立
及植株再生
郝峥嵘 海热古力 · 阿布力获 王子霞 戚家华
( 新疆农科院核生所 , 乌鲁木齐 , 8 3 0 0 0 0)
摘 要 以 M s 和 c , 7培养墓对大赖草幼穗 、 子房 、 成熟胚 、 花药等外植体进行培
养 , 通过不 断改变培养基中的 2 , 4一 D 浓度 (2 . 0一 6 . 0 m g / l ) ,得列 了生长旺盛 、具 有高
度分化能力的胚性细胞 系。 将其转入 N T S 培养基进行分化培养 , 再生率达 98 % , 再生
植株为丛 苗状 , 无崎形苗和白苗 。
关键词 新疆大赖草 愈伤组织 胚性细胞系 再生植株
大 赖 草 ( L叮 机 。 。 、 。 , 。甜 。 ( L a m . ) 显好于 M s 。 不 同外植体的愈伤组织诱导率
T vz e l) 是我国仅产于新疆的多年生 植物 〔` 〕 ,
为小麦近缘种 ,具有丰产 、 穗大 、秆壮 、蛋 白质
含量高 、 植株分桑力强 、 根系发达 、 抗病虫害
能力强等特点 ,对小麦品种改 良具有特殊应
用价值 z[] 。 我们曾对其成熟胚 进行离体培
养s[] , 1 99 3 年又对其幼穗 、 子房 、 成熟胚 、 花
药进行培养 ,建立了胚性细胞系 , 并获得了再
生植株 。
1 方法
取大赖草 的成熟胚 、幼 穗 、 子房和花药
等 , 用 70 %的酒精消毒后 , 分别接种于诱导
培养基 (M s 和 e l : 附加 2 , 4一 D Z . o m g / l )上 ,
在黑暗条件下培养 ,再将诱导 出的愈伤组织
转 入继代 培 养基 ( M s 附 加 2 , 4一D .2 0一
6
.
0 m g / l
、
K T o
.
s m g / z ) 中黑 暗培 养 , 每隔
4一 6 周继代一次 ,其 间不断调整 2 , 4一D 浓度
及培养温度 ,直至出现胚性愈伤组织 。 之后将
其转入分化培养基 ( N T 、 附加 K T Z· 0 m g / 1、
xA A 1
.
0 m g / l ) 中 , 每 日光照 10一 12 h , 光强
1 60 0 x1
,温度 2 ℃ ,直至分化出绿苗 。
2 结果
2
.
1 愈伤组织的产生
成熟胚 、 幼穗 、 子房和花药在 M S 和 C 17
培养基上均可产生愈伤组织 ,但 c l 7的效果明
1 9 9 4 年 第 6 期
不同 ,愈伤组织质量也略有差异 ,其 中以幼穗
的诱导效果最好 。 (附表 )
附表 大赖草不 同外植体在 M s 和
c 17培养基上的诱导效果
外植体 培养基 接种块数 出愈时间 诱导率 愈伤质量类型 天 %
花药 C 一? 8 0 0 2 5一 3 0 1 . 3 8 疏松
成熟胚 · C x 7 45 2 6一 30 9 3 . 3 疏松
M S 30 2 8一 3 2 8 0 . 0
子房 C 17 2 2 6 0一 6 5 7 7 。 2 疏松
幼穗 C 17 3 7 7一 1 0 9 7 . 3 较紧密
M S 2 9 9一 1 2 9 3 . 1
诱导出的愈伤组织 , 大多数呈白色半透
明水溃状 , 较疏松 ,属非胚性愈伤组织 , 无分
化能力 (附图 1 ) 。 镜检发现 ,这种愈伤组织外
部多为伸长的空管状细胞 , 排列较松散 , 内部
细胞较小 , 结构较紧密 。
2
.
2 胚性细胞系的建立
将在诱导培养基上产生的愈伤组织去其
外层老化部分 , 取其较紧密部分置于含高浓
度 2 , 4一 D (6 . o m g l/ ) 的继代培养 基上培养 ,
一个月后 , 某些愈伤组织开始在局部形成鲜
黄色颗粒状愈伤组织 。 这种愈伤组织生长旺
盛 ,有很强的分化能力 , 是典型的胚性愈伤组
织 (附图 1 ) 。 此后根据愈伤组织的生长壮况
不断调整 2 , 4一D 浓度 ( 2 . 0一 6 . 0 m g八 ) ,并适
当提高温度 ,缩短继代时间 ,结果每种外枝体
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