全 文 ：北方园艺２０１６（０７）：８５～８８ ·生物技术·
第一作者简介：李利霞（１９８３－），女，硕士，助理研究员，现主要从事
药用植物资源利用与种子种苗繁育和悬浮细胞培养等研究工
作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｉｌｋｔｒｅｅｄｒｅａｍ＠１２６．ｃｏｍ．
基金项目：贵州省中药现代化科技产业研究开发专项资助项目
（ＺＹ字［２０１２］３００５号）；贵阳市科技计划资助项目（２０１２ＨＫ－２０９－
３７）。
收稿日期：２０１５－０７－２７
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１６０７０２２
濒危植物珠子参愈伤组织诱导因素分析
李 利 霞，李 婷 婷，朱 虹，孙 长 生，刘 雪 兰，赵 厚 涛
（贵阳药用植物园，贵州 贵阳５５０００２）
摘 要：以珠子参节、节间和越冬芽萌发后的叶、根为试材，研究了不同消毒方法、外植体、植
物生长调节剂及培养条件等对珠子参愈伤组织诱导的影响，以期获得愈伤组织诱导的最佳方法。
结果表明：最佳消毒方法是７５％酒精消毒１５ｓ后，越冬芽、节和节间分别加０．２％氯化汞消毒５、
１５、１５ｍｉｎ；节间为愈伤组织诱导最适宜外植体；２，４－Ｄ ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ ０．１ｍｇ／Ｌ对节间诱导愈伤
组织效果最好，诱导率为９６．６７％；以ＭＳ为基础培养基添加浓度为５ｇ／Ｌ的琼脂较适宜愈伤组织
的诱导；温度２５℃、光周期２４ｈ／ｄ、光照强度６ ２００ｌｘ的条件有利于愈伤组织的诱导。
关键词：珠子参；组织培养；愈伤组织
中图分类号：Ｓ ５６７．５＋３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１６）０７－００８５－０４
珠子参（Ｐａｎａｘ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ Ｃ．Ａ．Ｍｅｙ．ｖａｒ．ｍａｊｏｒ
（Ｂｕｒｋ．）Ｃ．Ｙ．Ｗｕ ｅｔ Ｋ．Ｍ．Ｆｅｎｇ）属五加科人参属植物，
为１９７７年起历版《中华人民共和国药典》收录药材珠子
参的基源植物之一。其根茎有较高的药用价值［１］，叶可
作“参叶”使用，具有清热、消炎、镇静及镇痛等功效［２］。
现代研究表明珠子参的主要化学成分为多种皂苷类［３］；
药理方面具有抗肿瘤［４］、保护心脑血管系统［５－６］、抗炎镇
痛［７］、抗疲劳等活性［８］。
商品珠子参主要源自野生资源，但其野生资源已难
以满足市场需求。此前对珠子参的研究主要集中在化
学成分、药理活性和资源分布方面，对其组织培养方面
的研究较少。现通过筛选不同的消毒方法、外植体、植
物生长调节剂及培养条件等对珠子参愈伤组织诱导进
行了详细的研究，以期获得优质的珠子参愈伤组织，为
利用植物细胞培养技术生产次生代谢产物和建立高频
率植株再生体系研究提供一定的技术依据。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
供试珠子参引自云南省丽江市三朵阁镇高山植
物园。
１．２ 试验方法
１．２．１ 不同消毒方法的效果比较 将珠子参越冬芽、节
（根茎珠状膨大部位）和节间（节与节之间细长的部分），
用洗洁精浸泡１５ｍｉｎ，清水冲洗干净。材料置于超净工
作台上用７５％酒精和０．２％氯化汞不同的组合处理后，
无菌水冲洗５～６遍。将节间切割成１ｃｍ长的小段，节
削去表皮，切成小块，芽剥去芽被，接种到 ＭＳ空白培养
基，每个处理３０个材料，温度（２５±１）℃，暗培养１０ｄ后
统计污染率。
１．２．２ 不同外植体和植物生长调节剂对珠子参愈伤组
织诱导的影响 将空白培养后的节、节间及越冬芽萌发
形成无菌苗的叶和须根分割后，接种到诱导愈伤组织的
培养基上，每个处理重复３０个外植体，温度（２５±１）℃、
光照强度约４ ０００ｌｘ、光周期１２ｈ／ｄ，培养３０ｄ统计诱
导率。
表１ 诱导愈伤组织培养基
Ｔａｂｌｅ １ Ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｍｅｄｉｕｍ
处理 基础培养基 浓度Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ／（ｍｇ·Ｌ－１）
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ Ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉｕｍ ２，４－Ｄ ＫＴ
ＣＫ ＭＳ ０ ０
１ ＭＳ １．０ ０．１
２ ＭＳ １．０ １．０
３ ＭＳ ２．０ ０．１
４ ＭＳ ２．０ １．０
５ ＭＳ ３．０ ０．１
６ ＭＳ ３．０ １．０
７ ＭＳ １．０ ０
８ ＭＳ ２．０ ０
９ ＭＳ ３．０ ０
１０ ＭＳ ４．０ ０
１１ ＭＳ ５．０ ０
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·生物技术· 北方园艺２０１６（０７）：８５～８８
１．２．３ 不同培养条件对珠子参愈伤组织诱导的影响
选取空白培养１０ｄ未污染的节间，转入植物生长调节剂
为２，４－Ｄ ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ ０．１ｍｇ／Ｌ的诱导培养基中，研
究不同基础培养基、琼脂浓度和光照强度对愈伤组织诱
导的影响。每个处理接种２１瓶，温度（２５±１）℃、光周期
１２ｈ／ｄ。将节间接入选出的培养基，置于不同温度和光
周期的人工气候箱（光照强度约２ ５００ｌｘ）中培养，研究
不同温度和光周期对珠子参愈伤组织诱导的影响。诱
导率（％）＝（形成愈伤组织的外植体数／（接种的外植体
数－污染外植体数））×１００，污染率（％）＝（污染瓶数／接
种瓶数）×１００。
表２ Ｌ９（３３）正交实验的因素与水平
Ｔａｂｌｅ ２ Ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ Ｌ９（３３）
水平
Ｌｅｖｅｌ
因素Ｆａｃｔｏｒ
Ａ培养基类型 Ｂ琼脂浓度 Ｃ光照强度
Ｍｅｄｉｕｍ ｔｙｐｅ Ａｇａｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ／（ｇ·Ｌ－１） Ｌｉｇｈｔ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ／ｌｘ
１ ＭＳ ５ ２ ４００
２ １／２ＭＳ ７ ４ ０００
３ Ｂ５ ９ ６ ２００
１．３ 数据分析
试验数据采用Ｅｘｃｅｌ和ＳＰＳＳ １６．０软件进行处理分析。
２ 结果与分析
２．１ 不同的消毒方法的效果
由表３可知，０．２％氯化汞在珠子参外植体消毒过
程中起主要作用，消毒时间越长，消毒效果越好；氯化汞
消毒之前先用７５％酒精消毒１５ｓ可以稍微改善消毒效
果。３种外植体均采自地下，带有大量泥沙，污染率比较
高，节间由于表面比较光滑，较易消毒，污染率最低为
１３．３３％，而节的表面粗糙，消毒困难，污染率较高。越冬
芽幼嫩为避免外植体死亡，应选择较短的消毒时间。综
上所述，最佳消毒方法是７５％酒精消毒１５ｓ后，越冬芽、
节和节间分别加０．２％氯化汞消毒５、１５、１５ｍｉｎ。
表３ 不同消毒处理对外植体的影响
Ｔａｂｌｅ ３ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｎ ｅｘｐｌａｎｔｓ
外植体
Ｅｘｐｌａｎｔ
消毒时间
Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ
７５％酒精／ｓ ０．２％ＨｇＣｌ２／ｍｉｎ
接种数
Ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ ｎｕｍｂｅｒ
／个
污染率
Ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ
／％
越冬芽 ０ ５ ３０ ４０．００
Ｗｉｎｔｅｒ ｂｕｄ １５ ５ ３０ ３３．３３
０ ５ ３０ ７３．３３
０ １０ ３０ ３６．６７
节 ０ １５ ３０ ２６．６７
Ｋｎｏｂ １５ ５ ３０ ７０．００
１５ １０ ３０ ３３．３３
１５ １５ ３０ ２３．３３
０ ５ ３０ ６６．６７
０ １０ ３０ ２６．６７
节间 ０ １５ ３０ １６．６７
Ｉｎｔｅｒｎｏｄｅ １５ ５ ３０ ５０．００
１５ １０ ３０ ２３．３３
１５ １５ ３０ １３．３３
２．２ 不同外植体和植物生长调节剂对珠子参愈伤组织
诱导的影响
由表４可知，珠子参的不同外植体都不同程度的诱
导出了愈伤组织，诱导率最高达到了９０％以上。不同外
植体所需的植物生长调节剂的配比是不同的。因为节
间诱导率最高，且全年都可取材，消毒方便，所以节间是
珠子参愈伤组织诱导的最适宜外植体。
从表４还可以看出，２，４－Ｄ在珠子参愈伤组织诱导
过程中起了主要的作用，ＫＴ起了辅助促进作用。外植
体在没有添加２，４－Ｄ的培养基上会褐化死亡；在只添加
２，４－Ｄ的培养基上也可以诱导出愈伤组织，只是诱导率
稍低，愈伤组织长势稍差；在同时添加２，４－Ｄ和ＫＴ的培
养基上，愈伤组织诱导效果最好。
表４ 不同外植体愈伤组织形成情况
Ｔａｂｌｅ ４ Ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｃａｌｕｓ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ
外植体
Ｅｘｐｌａｎｔ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
接种数
Ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ ｎｕｍｂｅｒ／个
诱导率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ／％
愈伤组织描述
Ｃａｌｕｓ ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ
叶片
Ｌｅａｆ
０ ３０ ０．００ 死亡
１ ３０ ７６．６７ 块较小、松软、淡绿
２ ３０ ９０．００ 块较大、松软、淡绿
３ ３０ ８３．３３ 块大、松软、淡绿
４ ３０ ７６．６７ 块较大、松软、淡绿
５ ３０ ７６．６７ 块较大、松软、淡绿
６ ３０ ８６．６７ 块较小、松软、淡绿
根
Ｒｏｏｔ
０ ３０ ０．００ 死亡
１ ３０ ６０．００ 块较大、松软、白色
２ ３０ ６６．６７ 块较大、松软、白色
３ ３０ ６６．６７ 块较大、松软、白色
４ ３０ ８６．６７ 块较大、松软、白色
５ ３０ ９０．００ 块较大、松软、白色
６ ３０ ８６．６７ 块较大、松软、白色
节间
Ｉｎｔｅｒｎｏｄｅ
０ ３０ ０．００ 死亡
１ ３０ ８３．３３ 块较大、松软、黄白色
２ ３０ ８０．００ 块较大、松软、黄白色
３ ３０ ９６．６７ 块大、松软、黄白色
４ ３０ ８０．００ 块较大、松软、黄白色
５ ３０ ８３．３３ 块较大、松软、黄白色
６ ３０ ９０．００ 块较大、松软、黄白色
７ ３０ ８３．３３ 块较大、松软、黄白色
８ ３０ ９０．００ 块较大、松软、黄白色
９ ３０ ９３．３３ 块较大、松软、黄白色
节
Ｋｎｏｂ
０ ３０ ０．００ 死亡
１ ３０ ７６．６７ 块较小、松软、黄白色
２ ３０ ８３．３３ 块较小、松软、黄白色
３ ３０ ７０．００ 块较小、松软、黄白色
４ ３０ ６６．６７ 块较小、松软、黄白色
５ ３０ ９３．３３ 块较大、松软、黄白色
６ ３０ ８３．３３ 块较小、松软、黄白色
７ ３０ ９０．００ 块较大、质硬、黄白色
８ ３０ ７３．３３ 块较大、松软、黄白色
９ ３０ ７６．６７ 块较大、松软、黄白色
１０ ３０ ８３．３３ 块较大、松软、黄白色
１１ ３０ ８０．００ 块较大、松软、黄白色
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北方园艺２０１６（０７）：８５～８８ ·生物技术·
注：ａ．越冬芽萌发生成的珠子参无菌幼苗；ｂ．叶片；ｃ．根；ｄ．节；ｅ、ｆ．节间。
Ｎｏｔｅ：ａ．Ｔｈｅ ｏｖｅｒｗｉｎｔｅｒｉｎｇ ｂｕｄｓ ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ ｐｌａｎｔｓ ｏｆ Ｐａｎａｘ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ ｖａｒ．ｍａｊｏｒ；ｂ．Ｌｅａｆ；ｃ．Ｒｏｏｔ；ｄ．Ｋｎｏｂ；ｅ，ｆ．Ｉｎｔｅｒｎｏｄｅ．
图１ 珠子参不同外植体诱导出的愈伤组织
Ｆｉｇ．１ Ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｆｒｏｍ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｏｆ Ｐａｎａｘ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ ｖａｒ．ｍａｊｏｒ
２．３ 不同培养条件对珠子参愈伤组织诱导的影响
由表５可知，培养基类型、琼脂浓度和光照强度对
珠子参愈伤组织诱导均有影响，但仅仅简单比较百分率
不能准确确定影响珠子参愈伤组织诱导的各因素的主
次顺序。表６结果表明，Ｃ的极差最大，Ａ次之，Ｂ最小。
因此，参试的３个因素对珠子参愈伤组织诱导的主次关
系为Ｃ＞Ａ＞Ｂ，即光照强度＞培养基类型＞琼脂浓度。
分析３个因素各水平间差异的显著性，由表７可知，３
个因素的Ｆ值均小于Ｆ０．０５，说明差异不显著，因三者
的自由度相同，由Ｆ值确定其主次关系为Ｃ＞Ａ＞Ｂ。
根据表６中各因素的平均值可以看出，培养基类型Ａ１
水平为最好，琼脂浓度Ｂ１水平为最好，光照强度Ｃ３水
平为最好。所以３个因素的理论最佳组合是Ａ１Ｂ１Ｃ３，
即ＭＳ＋５ｇ／Ｌ琼脂浓度＋６ ２００ｌｘ光照强度。
表５ 珠子参诱导愈伤的Ｌ９（３３）实验结果
Ｔａｂｌｅ ５ Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｐａｎａｘ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ ｖａｒ．
ｍａｊｏｒｉｎ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ Ｌ９（３３）
试验号
Ｔｅｓｔ Ｎｏ．
因素
Ｆａｃｔｏｒ
Ａ Ｂ Ｃ
接种数
Ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ
ｎｕｍｂｅｒ／个
出愈时间
Ｃａｌｕｓ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ
ｔｉｍｅ／ｄ
诱导率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ／％
综合表现
Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ
ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ
１ １ １ １ ２１ ６ ８０．００ ＋＋＋＋
２ １ ２ ２ ２１ ８ ７０．００ ＋＋＋＋
３ １ ３ ３ ２１ １１ ８５．００ ＋＋＋＋
４ ２ １ ３ ２１ ６ ７８．９５ ＋＋＋＋
５ ２ ２ １ ２１ ６ ６６．６７ ＋＋
６ ２ ３ ２ ２１ ９ ６６．６７ ＋＋
７ ３ １ ２ ２１ ９ ７０．５９ ＋＋
８ ３ ２ ３ ２１ ９ ７８．９５ ＋
９ ３ ３ １ ２１ ７ ３８．４６ ＋
注：“＋”越多表示生长情况越好，下同。
Ｎｏｔｅ：Ｔｈｅ ｍｏｒｅ‘＋’ｉｎｄｉｃａｔｅ ｔｈｅ ｂｅｔｔｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｓｉｔｕａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｓａｍｅ
ｂｅｌｏｗ．
表６ 珠子参愈伤组织诱导的直观分析
Ｔａｂｌｅ ６ Ａｕｄｉｏ－ｖｉｓｕａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｆｏｒ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ
Ｐａｎａｘｊａｐｏｎｉｃｕｓｖａｒ．ｍａｊｏｒ
因素和
Ｔｏｔａｌ ｏｆ ｔｈｅ ｆａｃｔｏｒｓ
Ａ Ｂ Ｃ
平均值
Ａｖｅｒａｇｅ ｖａｌｕｅ
Ａ Ｂ Ｃ
Ｋ１ ２３５．００ ２２９．５４ １８５．１３ ｘ１ ７８．３３ ７６．５１ ６１．７１
Ｋ２ ２１２．２８ ２１５．６１ ２０７．２６ ｘ２ ７０．７６ ７１．８７ ６９．０９
Ｋ３ １８８．００ １９０．１３ ２４２．８９ ｘ３ ６２．６７ ６３．３８ ８０．９６
Ｒ ４７．００ ３９．４１ ５７．７７ Ｒ′ １５．６７ １３．１４ １９．２６
表７ 珠子参愈伤组织诱导率方差分析
Ｔａｂｌｅ ７ Ｖａｒｉａｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｆｏｒ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ
Ｐａｎａｘｊａｐｏｎｉｃｕｓｖａｒ．ｍａｊｏｒ
因素
Ｆａｃｔｏｒ
偏差平方和
Ｖａｒｉａｎｃｅ
自由度
Ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｆｒｅｅｄｏｍ
Ｆ值
Ｆｖａｌｕｅ
Ｆ０．０５（２，２）
培养基类型 Ｍｅｄｉｕｍ ｔｙｐｅ ３６８．３０５ ２ １．２３４ １９．００
琼脂浓度Ａｇａｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ２６６．２９５ ２ ０．８９２
灯管数Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｌａｍｐ ｎｕｍｂｅｒ ５６６．３６９ ２ １．８９８
误差Ｅｒｒｏｒ ２９８．４２４ ２
由表８可知，３０℃时节间出愈时间晚，只有个别可以
产生愈伤组织，诱导率仅为１４．２９％；２０℃时诱导率较高，
表８ 不同温度、光周期对节间诱导
愈伤组织的影响
Ｔａｂｌｅ ８ Ｅｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｐｈｏｔｏｐｅｒｉｏｄ ｏｎ
ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｔｅｒｎｏｄｅ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
温度
Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
／℃
光周期
Ｐｈｏｔｏｐｅｒｉｏｄ
／（ｈ·ｄ－１）
出愈时间
Ｃａｌｕｓ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ
ｔｉｍｅ／ｄ
诱导率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ
／％
综合表现
Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ
ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ
１ ２０ ０ １４ ９０．４８ ＋＋
２ ２０ １２ １５ ８５．７１ ＋＋
３ ２０ ２４ １５ ９５．２４ ＋＋＋
４ ２５ ０ １５ ９０．４８ ＋＋＋
５ ２５ １２ １５ ８５．７１ ＋＋＋＋
６ ２５ ２４ １５ １００．００ ＋＋＋＋
７ ３０ ０ ０．００
８ ３０ １２ ０．００
９ ３０ ２４ ２４ １４．２９ ＋
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·生物技术· 北方园艺２０１６（０７）：８５～８８
但产生的愈伤组织的质量一般、生长缓慢，２５℃时诱导
率和愈伤组织质量俱佳，故珠子参愈伤组织诱导的最佳
温度为２５℃。光周期为２４ｈ／ｄ时，诱导率为１００．００％，且
诱导出的愈伤组织的质量最好。
３ 讨论
珠子参是少数民族传统用药，疗效确切，近年来药
理研究证明珠子参具有广泛的药理活性。目前，珠子参
资源难以满足需求，开展组织培养研究是今后维持珠子
参商品供应和进行深入研究的有效途径。
该研究以珠子参的叶、根、节和节间为外植体诱导
愈伤组织，几种外植体都比较容易诱导出愈伤组织，节
间取材消毒方便且诱导率最高达９６．６７％，所以节间更
适合作为外植体诱导愈伤组织。外植体的获取方式对
愈伤组织的诱导有很大影响。张昱［９］以叶为外植体没
有诱导出愈伤组织；柴瑞娟等［１０］以叶为外植体，诱导率
也仅有６．７％；该试验以叶为外植体，诱导率达到了
９０％。该试验通过从越冬芽萌发生成的无菌植株上获
取叶片，避免了消毒过程对叶片的损伤，且叶片幼嫩，所
以叶片保持了较高的再生能力。该试验首次以根为外
植体诱导出了愈伤组织，诱导率也达到了９０％。
该试验结果表明，２，４－Ｄ在珠子参愈伤组织诱导过
程中起了主要的作用，ＫＴ起了辅助促进作用。不同的
外植体需要２，４－Ｄ和ＫＴ的浓度略有不同；柴瑞娟等［１０］
使用的愈伤组织诱导培养基为 ＭＳ＋２，４－Ｄ ２．０ｍｇ／Ｌ＋
６－ＢＡ ０．２ｍｇ／Ｌ；张昱［９］优选出的培养基为 ＭＳ＋２，４－Ｄ
２．０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ １．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
１．０ｍｇ／Ｌ。可见２，４－Ｄ在珠子参愈伤组织诱导过程中是
必不可少的，其它激素的不同可能与试验材料不同有关。
该试验对适合珠子参愈伤组织诱导的培养条件和
培养基类型进行了比较详细的研究，结果表明，以ＭＳ为
基础培养基添加浓度为５ｇ／Ｌ的琼脂，在温度为２５℃、
光周期为２４ｈ／ｄ、光照强度为６ ２００ｌｘ的条件下培养有
利于愈伤组织的诱导。
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Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｆａｃｔｏｒｓ ｏｎ Ｃａｌｕｓ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｐａｎａｘ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ ｖａｒ．ｍａｊｏｒ
ＬＩ Ｌｉｘｉａ，ＬＩ Ｔｉｎｇｔｉｎｇ，ＺＨＵ Ｈｏｎｇ，ＳＵＮ Ｃｈａｎｇｓｈｅｎｇ，ＬＩＵ Ｘｕｅｌａｎ，ＺＨＡＯ Ｈｏｕｔａｏ
（Ｇｕｉｙａｎｇ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｂｏｔａｎｉｃａｌ Ｇａｒｄｅｎ，Ｇｕｉｙａｎｇ，Ｇｕｉｚｈｏｕ ５５０００２）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ ｋｎｏｂｓ，ｉｎｔｅｒｎｏｄｅ ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ，ｒｏｏｔｓ ｏｆ ｗｉｎｔｅｒ ｂｕｄｓ ｏｆ Ｐａｎａｘ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ ｖａｒ．ｍａｊｏｒａｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｍａｔｅｒｉａｌ，
ｔｈｅ ｅｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ，ｅｘｐｌａｎｔｓ，ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ａｎｄ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｎ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｔｏ ｆｉｎｄ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｂｅｔｔｅｒ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗａｓ １５
ｓｅｃｏｎｄｓ ｗｉｔｈ ７５％Ｃ２Ｈ５ＯＨ，ｔｈｅｎ ５ｍｉｎｕｔｅｓ ｗｉｔｈ ０．２％ ＨｇＣｌ２ｆｏｒ ｗｉｎｔｅｒ ｂｕｄ，ｂｕｔ １５ｍｉｎｕｔｅｓ ｆｏｒ ｋｎｏｂｓ ａｎｄ ｉｎｔｅｒｎｏｄｅ．
Ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｎｏｄｅ ｗａｓ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｅｘｐｌａｎｔ ｆｏｒ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ９６．６７％ ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｗｉｔｈ ２，４－Ｄ
２．０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ ０．１ｍｇ／Ｌ ｆｏｒ ｉｎｔｅｒｎｏｄｅ．Ｔｈｅ ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈ ａｇａｒ ５ｇ／Ｌ ｗａｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｌｕｓ．Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ
ｏｆ ｔｈｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ２５℃，ｔｈｅ ｐｈｏｔｏｐｅｒｉｏｄ ｏｆ ２４ｈ／ｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｌｉｇｈｔ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ ｏｆ ６ ２００ｌｘ ｗａｓ ｂｅｎｅｆｉｃｉａｌ ｆｏｒ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｐａｎａｘ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ ｖａｒ．ｍａｊｏｒ；ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ；ｃａｌｕｓ
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