全 文 ：183
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(收稿日期:2014 － 03 － 05)
(修回日期:2014 － 04 － 08)
作者单位:250011 济南，山东中医药大学(钱芳芳);250011 济
南，山东中医药大学附属医院(张长林)
通讯作者:张长林，主任药师，电子信箱:szyzcl@ sina． com
HPLC法测定华东菝葜中薯蓣皂苷元的含量
钱芳芳 张长林
摘 要 目的 建立华东菝葜药材中成分薯蓣皂苷元的含量测定方法。方法 采用 ZOＲBAX SB － C18(4． 6mm × 250mm ×
5μm)色谱柱，乙腈 －水(90∶ 10)为流动相，检测波长为 203nm，流速为 1ml /min，柱温为 30℃。结果 薯蓣皂苷元在 40． 08 ～
400. 80μg /ml浓度范围内与峰面积呈良好线性关系，相关系数 r = 0． 9997，样品回收率为 97． 56%，ＲSD = 0． 59%(n = 6)。结论
该方法简便、准确，结果稳定，可用于华东菝葜中薯蓣皂苷元的测定。
关键词 高效液相;华东菝葜;薯蓣皂苷元;含量测定
［中图分类号］ Ｒ9 ［文献标识码］ A
Determination of the Diosgenin in Smilax Sieboldii Miq by HPLC． Qian Fangfang，Zhang Changlin． Shandong University of Traditional
Chinese Medicine，Shandong 250011，China
Abstract Objective To establish a mothod for determination of diosgenin in Smilax sieboldii Miq． Methods The method was a-
dopted for the determination with ZOＲBAX SB － C18(4． 6mm × 250mm ×5μm)as chromatographic column，acetonitrile － water (90∶ 10)
as mobile phase;the wavelength was 203nm． The flow rate was 1． 0ml /min and the column temperature was at 30℃ ． Ｒesults Ｒange of
diosgenin were 40． 08 － 400． 80μg /ml (r = 0． 9997)，with average recoveries of 97． 56%(n = 6) ，ＲSD = 0． 59% ． Conclusion The
method is simple，accurate and stable，which could be used for the quality control of Smilax sieboldii Miq．
Key words HPLC;Smilax sieboldii Miq;Diosgenin;Content determination
华东菝葜 Smilax sieboldii Miq．为百合科植物，以
干燥根及根茎入药，具有祛风除湿，通络止痛之功效，
用于治疗风湿筋骨疼痛，疔疮肿毒，偏头疼等症，为
《山东省中药材标准》(2002 版)所收载，作威灵仙使
用［1］。目前药理研究发现华东菝葜具有免疫系统活
性、抗肿瘤作用和心血管系统作用等［2 ～ 4］。华东菝葜
化学成分主要有皂苷、鞣质、树脂及大量淀粉等。薯
蓣皂苷元是其主要有效成分，药理作用主要表现在抗
肿瘤、调节血脂、抗血小板聚集及对心脑血管作用等
方面［5 ～ 14］。目前有关华东菝葜药材的质量控制方法
尚未见报道，本实验以薯蓣皂苷元为指标，利用高效
液相色谱法进行含量测定，为华东菝葜药材的质量控
制提供一定依据。
仪器与方法
1．仪器:1260 型高效液相色谱仪 (美国安捷伦公司)，
1260 型二极管阵列检测器(美国安捷伦公司)，1260 型 DAD
色谱工作站(美国安捷伦公司)，SK5200H 型超声波清洗仪
(上海科导仪器有限公司)，电热恒温水浴锅(北京市永光明
医疗仪器有限公司)，CP2250 型电子分析天平(奥豪斯国际贸
易有限公司);薯蓣皂苷元对照品(购自成都普瑞法科技开发
·38·
医学研究杂志 2014 年 9 月 第 43 卷 第 9 期 ·论 著·
有限公司，批号 14031005，供含量测定用)，乙腈为色谱纯，其
他化学试剂均为分析纯。本实验所用药材均有山东中医药大
学生药学实验室徐凌川教授鉴别为百合科植物华东菝葜，产
地分别为安徽、四川及陕西省，现保存于山东中医药大学第一
附属医院药学部实验室。
2．色谱条件:色谱柱:ZOＲBAX SB － C18(4． 6mm × 250mm
×5μm);流动相:乙腈 －水(90∶ 10);波长:203nm;流速:1ml /
min;柱温:30℃;进样量:10μl。理论塔板数按薯蓣皂苷元计
算不低于 3000。在此条件下，华东菝葜提取物供试品中著蓣
皂苷元色谱与其他色谱峰可达基线分离(图 1、图 2)。
图 1 薯蓣皂苷元对照品 HPLC色谱图
图 2 华东菝葜药材 HPLC色谱图
* 薯蓣皂苷元
3．溶液制备:(1)对照品溶液的制备:精确称取薯蓣皂苷
元对照品 10． 02mg，置于 25ml 容量瓶，加乙腈定容至刻度线，
备用。(2)供试品溶液的制备:取本品粉末(过二号筛)约
10g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醇适量，浸渍过夜，加热
回流至提取液近无色，回收溶剂至约100ml，加盐酸16ml，加热
回流水解 2h，冷却，石油醚(60 ～ 90℃)萃取 4 次，每次 20ml，
合并萃取液，回收溶剂至干，残渣加乙腈溶解并转移至 10ml
容量瓶中，加乙腈至刻度，摇匀、滤过，取续滤液即得。
结 果
1．线性关系考察:取薯蓣皂苷元对照品，精密称
定，制成 40． 08、80． 16、160． 32、240． 48、400． 80μg /ml
浓度的溶液，按本文“色谱条件”项下色谱方法，分别
注入高效液相色谱仪测定，以进样量为横坐标(X)，
峰面积为纵坐标(Y)，绘制标准曲线，计算得回归方
程:Y =5． 8127X +24． 084，相关系数 r = 0． 9997，结果
表明，薯蓣皂苷元在 40． 08 ～ 400． 80μg /ml 范围内其
浓度与峰面积呈良好线性关系。
2．精密度实验:取同一浓度对照品溶液，按本文
“色谱条件”项下色谱方法测定，进样 10μl，连续进样
6 次，以峰面积计算，结果薯蓣皂苷元峰面积的 ＲSD
为 0． 81%，表明高效液相仪器精密度良好。
3．稳定性实验:制备供试品溶液，分别在 0、2、6、
12、20、24h 时，按本文“色谱条件”项下色谱方法测
定，分别进样 10μl，以峰面积计算，结果薯蓣皂苷元
峰面积的 ＲSD为 0． 4%，表明薯蓣皂苷元样品溶液在
24h内稳定。
4．重现性实验:取样品，按照供试品溶液制备方
法，平行制备 5 份，按本文“色谱条件”项下色谱方法
测定，以峰面积计算含量，结果薯蓣皂苷元峰面积的
ＲSD为 0． 45%，表明此方法重现性符合要求。
5．加样回收率实验:准确称取已知含量的样品，精
密加入一定量的薯蓣皂苷元对照品，同时制备 6 份，按
本文“色谱条件”项下色谱方法测定，结果见表 1。
表 1 薯蓣皂苷元加样回收试验结果(n = 6)
样品含量
(mg)
加入量
(mg)
测得值
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
ＲSD
(%)
0． 16 0． 1602 0． 3131 95． 57
0． 158 0． 1602 0． 3081 93． 7
0． 159 0． 1602 0． 3134 96． 38 95． 13 1． 19
0． 159 0． 1602 0． 3127 95． 94
0． 16 0． 1602 0． 3102 93． 76
0． 161 0． 1602 0． 3139 95． 44
6．样品含量测定:按供试品制备方法制备样品溶
液，按“色谱条件”项下色谱方法测定，每次进样
10μl，重复 3 次，记录峰面积，用外标法计算含量，结
果见表 2。
表 2 样品含量测定
省份 含量(%) ＲSD(%)
安徽省 0． 02502
0． 02523 0． 4
0． 02519
四川省 0． 02312
0． 0232 0． 9
0． 02281
陕西省 0． 02987
0． 03025 1． 2
0． 03059
讨 论
1．提取方法的选择:参考文献［15 ～ 17］，对提取
方法进行考察。预实验时比较了先用乙醇提取、后用
盐酸水解法和先用盐酸水解法、后用石油醚萃取法及
两相溶剂直接水解提取等方法，结果发现先用乙醇提
取，再用盐酸水解，最后石油醚萃取的方法最有利于
本药材供试品溶液的制备，且测定的薯蓣皂苷元含量
·48·
·论 著· J Med Ｒes，Sep 2014，Vol． 43 No． 9
较高(安徽、四川及陕西省产华东菝葜中薯蓣皂苷元
含量分别高于 0． 025、0． 023 及 0． 029。而前两种方法
测定 3 个产地华东菝葜中薯蓣皂苷元的含量均低于
0． 020)。
2．流动相的选择:在选择流动相的过程中，曾采
用甲醇 －水、甲醇 － 0． 1%磷酸水等不同流动相系统
等度洗脱，但分离效果均不理想。经反复实验后，发
现乙腈 －水(90∶ 10)等度洗脱薯蓣皂苷元色谱峰峰
形较好，保留时间合适，故选用乙腈 －水等度洗脱。
近年来，对华东菝葜药材中薯蓣皂苷元含量测定
的研究尚未见报道，本研究建立了该药材中薯蓣皂苷
元的测定方法，为华东菝葜药材的质量控制提供参考
依据，且本方法简便、准确，结果稳定。应用建立的
分析方法，对安徽、四川和陕西省 3 个产地的华东
菝葜样品进行进行了分析，结果发现，陕西产的华
东菝葜所含薯蓣皂苷元的含量在 3 批样品中最高。
华东菝葜在抗肿瘤、抗炎及免疫系统等方面具有显
著的疗效，因此可以对陕西产华东菝葜进行系统研
究，以期开发抗肿瘤和免疫系统等方面疾病的新
药。
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(收稿日期:2014 － 04 － 11)
(修回日期:2014 － 05 － 13)
作者单位:430060 武汉大学人民医院重症医学科
通讯作者:周青山，博士，副教授，主任医师，电子信箱:elishanxiu@ sina． com
脓毒症相关性脑病在 ICU发生的危险因素分析
冯丽芝 周青山
摘 要 目的 探讨重症监护病房中脓毒症患者并发脓毒症相关性脑病(sepsis － associated encephalopathy)的流行病学特
点及危险因素。方法 回顾性分析 2012 年 9 月 ～ 2013 年 9 月笔者医院 ICU收治 220 例脓毒症患者的临床资料，比较发生 SAE
组与非 SAE组患者的年龄、性别构成、病死率、住院时间、住 ICU 时间、病原学资料、血常规、电解质、肝肾功能、血气、APACHEII
评分。结果 脓毒症相关性脑病的发生率为 39． 55%，两组患者的住院时间、住 ICU 时间、G －及 G +菌检出率、WBC、K +、TBIL、
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医学研究杂志 2014 年 9 月 第 43 卷 第 9 期 ·论 著·