全 文 ：气相色谱法测定菝葜中薯蓣皂苷元含量
刘　杨1　王永庆2　邱宁婴3　何　华3　刘静涵3
1江苏省疾病预防控制中心　(南京　210009)　　2南京医科大学第一附属医院　(南京　210029)
3中国药科大学　(南京　210009)
　　摘　要:目的　建立菝葜中薯蓣皂苷元的含量测定方法。方法　程序升温气相色谱法 , CP Sil 5CB 熔融石英毛细管柱 ,
FID检测器。结果　薯蓣皂苷元在 0.20～ 5.0 μg范围内具有良好的线性关系 , r=0.9998 ,测定方法平均回收率为 97.20%。结
论　本方法有较高的灵敏度和回收率 ,可用于菝葜中薯蓣皂苷元的含量测定。
关键词:菝葜;薯蓣皂苷元;气相色谱法
中图分类号　R927.2　　　文献标识码　A　　　文章编号　1007-306(2004)04-14-02
Determination of Diosgenin in Smilax china by GC
Liu Yang
1 , Wang Yong-qing2 , Qiu Ning-ying3 , He Hua3 , Liu Jing-han3
Jiangsu Provincial Center for Disease Control and Prevention　(Nanjing　210009)
The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University 　(Nanjing　210029)
China Pharmaceutical University 　(Nanjing　210009)
　　Abstract:Object　To establish a method for determination the content of diosgenin in Smilax china.Method　A programmed tempera-
ture gas chromatography with CP Sil 5CB capillary column was used , applying of FID detector.Result　The calibration curve was linear in the
range of 0.20-5.0μg with r=0.9998 and the recovery was 97.20%.Conclusion　The mothod is accuracy , sensitive and simple , it can be
used for determination of diosgenin in Smilax china.
Key words:Smilax china;Diosgenin;GC
　　菝葜(Smilax china L.)又名金刚藤 ,为百合科菝
葜属植物 ,分布于华东 、中南 、西南等地。传统医学认
为其根茎具有药用价值 ,有抗锥虫 、利尿解毒 、祛风利
湿 、解毒散瘀[ 1]的功效。经现代药理学的初步研究 ,
证明有一定的抗炎镇痛及抗肿瘤作用。薯蓣皂苷元
为菝葜属植物中已报道的几种主要甾体皂苷的苷
元[ 2] ,因此可通过测定薯蓣皂苷元的含量对菝葜药材
的质量进行控制。目前薯蓣皂苷元的定量分析方法
主要有库仑滴定法[ 3] 、分光光度法[ 4] 、薄层扫描法[ 5] 、
气相色谱法[6]及高效液相色谱法[7]等 ,而菝葜中薯蓣
皂苷元的测定 ,目前尚未见报道。本实验研究了菝葜
药材中薯蓣皂苷元的气相色谱测定方法 ,取得满意结
果 ,可为药材质量控制提供可行依据。
1　仪器和试剂
岛津GC-9A气相色谱仪;C-R3A 色谱数据处理
机;FID检测器;OPGU-500S 氢气发生器;十万分之
一电子天平(Mettler AE240);高纯氮;薯蓣皂苷元对
照品(中国药科大学刘静涵教授提供 ,纯度 98%)。
2　方法和结果
2.1　色谱条件
色谱柱:熔融石英毛细管柱 30 m×0.32 mm×
0.25 μm;固定相:CP Sil 5CB(极性相当于 ov-1);程
序升温;检测器温度:300 ℃;载气流量:0.4 L/min;
分流比:20∶1;灵敏度:Range=10 1, att=1;进样量:
4μl;纸速:3 mm/min 。
2.2　样品溶液的制备
精密称取干燥的菝葜药材适量 ,粉碎至中粉 ,加
1.5 mol/L 盐酸水溶液在沸水浴中水解 4 h ,过滤去
除酸液 ,并将药材用水洗至中性 ,烘干后置索氏提取
器中用石油醚提取 9 h ,提取液蒸除石油醚 ,所得残
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江苏药学与临床研究　　2004年第 12 卷第 4 期
DOI :10.13664/j.cnki.pcr.2004.04.006
渣用甲醇定容。
2.3　标准曲线及线性范围
精密称取薯蓣皂苷元对照品 62.5 mg ,置于50 ml
容量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 ,作为贮备液。
分别吸取薯蓣皂苷元贮备液0.4 、2、4 、6、10ml ,置于10
ml容量瓶中 ,以流动相溶解并稀释至刻度 。按上述
色谱条件分别进样 4μl(n=2),用色谱数据处理机记
录峰面积 ,以样品浓度为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,进
行线性回归 ,得标准曲线为:Y =36882X-447.71(r=
0.9998),线性范围:0.20μg ～ 5.0μg 。
2.4　进样精密度试验
按对照品溶液的制备项下操作 ,配制成一定浓
度的标准溶液 ,连续进样 5次 ,每次 20μl ,测得各次
峰面积积分值 ,计算得 RSD 为 2.1%, 表明仪器稳
定 ,进样精密度良好 。
2.5　供试品溶液稳定性实验
按供试品溶液的制备项下操作 ,配制成一定浓
度的供试品溶液 ,分别于 0 、2 、4 、8 、12 h进样 ,峰面积
积分值 RSD 为 2.7%,隔天进样 1次 ,共 5天 , RSD
为2.8%,说明供试品溶液在 5日内是稳定的 。
2.6　重复性试验
精密称取同一批样品 ,按上述供试品溶液的制
备项下操作 ,配制成高 、中 、低 3种不同浓度的样品
溶液各 3 份 ,定容至 2 ml。进样测定 , RSD分别为
2.5%、2.7%、3.0%,表明高 、中 、低浓度的样品含量
测定重复性良好 。
2.7　回收率试验
分别称取已知含量的菝葜药材样品 ,精密加入
等量的薯蓣皂苷元对照品 ,按供试品溶液的制备方
法制备高 、中 、低 3种不同浓度的样品溶液各 3份 ,
定容至 10 ml。依次进样 ,回收率分别为 98.75%、
96.29%、95.96%, RSD 分别为 4.2%、1.4%、2.3%。
2.8　样品测定
分别精密称取 10批菝葜药材 ,按上述供试品溶
液的制备方法制备样品溶液 ,依上述 GC方法操作 ,
测定结果见表 1 ,色谱图见图 1。
表 1　含量测定结果
批次 1 2 3 4 5
含量(%) 0.004274 0.004268 0.004117 0.004161 0.004962
批次 6 7 8 9 10
含量(%) 0.004838 0.004711 0.004731 0.004715 0.004870
3　讨　论
3.1　由于菝葜药材中薯蓣皂苷元含量偏低 ,杂质干
扰大 ,一般的填充型气相色谱柱难以达到分离要求 ,
图 1　薯蓣皂苷元对照品(A)和样品(B)的 GC 色谱图
＊为薯蓣皂苷元
而需采用毛细管柱 。比较非极性的 CP Sil 5CB 固定
液及中等极性的 CP Sil 19CB固定液 ,发现前者更适
宜本样品分离。
中药材成分复杂 ,杂质较多 ,需采取程序升温方
法 。因样品沸点较高 ,为使尽快出峰 ,需要较高的最
终柱温 ,综合考虑以 280 ℃为宜。初始柱温和升温
速率分别在 230 ℃～ 260 ℃和 1 ℃/min ～ 15 ℃/min
之间选择 ,经反复实验表明 ,初始柱温 250 ℃、升温
速率10 ℃/min条件下 ,样品分离良好 。
3.2　通过对 GC 法各方面进行考察 , 其精密度 、稳
定性 、准确性等指标均能符合要求 ,且有较高的专属
性和灵敏度 ,说明 GC 法可用于测定菝葜药材中薯
蓣皂苷元的含量。
3.3　菝葜中多种甾体皂苷为其主要活性成分 ,而薯
蓣皂苷元为菝葜中几种主要甾体皂苷的母核皂苷
元 ,因此可通过测定薯蓣皂苷元的含量对菝葜药材
的质量进行控制。
参 考 文 献
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社 , 1977:1966.
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法[ J] .药学学报 ,1981 , 16:39-43.
4　陈战国 ,耿　征 ,刘谦光 ,等.薯蓣皂甙元的分光光度法测定[ J] .
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6　陶　莉 ,达晖宁 ,达世禄.盾叶薯蓣中薯蓣皂甙元的气相色谱测
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(收稿日期:2004-01-08)
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江苏药学与临床研究　　2004年第 12 卷第 4 期