全 文 ：马先蒿无性系建立的研究
李冬雪，高 珂，宋诗迎，徐 娜，姜长阳
（辽宁师范大学 生命科学学院，辽宁 大连１１６０８１）
摘要：为满足马先蒿观赏栽培对种苗的需要，以生长点为材料，采用组织培养的方法，进行了愈伤组织诱导
与分化、试管苗的生根与生根继代增殖培养，以及移栽和定植的研究。结果表明：ＭＳ＋６－ＢＡ０．６ｍｇ·Ｌ－１
＋２，４－Ｄ１．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ０．３ｍｇ·Ｌ－１是生长点愈伤组织诱导和分化培养的理想培养基；１／３ＭＳ＋
ＡＢＴ２号１０ｍｇ·Ｌ－１是不定芽生根培养和试管苗生根继代增殖培养的理想培养基；试管苗移栽和定植的成
活率分别为９３．４％、９８．５％，定植的试管苗保持了马先蒿的植物学性状和观赏性状。
关键词：马先蒿；组织培养；无性系
收稿日期：２０１２－０５－１８
基金项目：辽宁省高等教育教学改革项目（编号：２００９０３０４）；辽宁师范大学教学改革项目（编号：ＬＳＪＧ２００９０１０８）资助
作者简介：李冬雪（１９９０—），女，辽宁鞍山人，辽宁师范大学生命科学学院学生。
通讯作者：姜长阳（１９５３—），男，辽宁大连人，教授，主要从事植物技术研究。
中图分类号：Ｏ６５７．３９ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１６７４－９９４４（２０１２）０７－００５３－０３
１ 引言
马先蒿（Ｐｅｄｉｃｕｌａｒｉｓ ｒｅｓｕｐｉｎａｔａ）属于玄参科，多年
生草本植物，生长于草地、林缘、湿草甸子、针叶林下、山
坡灌丛中和杂木林等环境中［１，２］，在我国的辽宁等地区
有分布［３］，近年来也有栽培［４］。马先蒿是一种药用植
物，具有多种药用价值［５］。近年来，有关园艺工作者在
对辽宁地区的野生植物进行调查研究时发现，分布于辽
宁南部的马先蒿，具有株型美观、花色美丽、花期较长、
抗逆性较强等特点，适于进行观赏栽培。但是，由于多
年来人们大量的采集药用，野生马先蒿的数量已很稀
少，难以通过直接挖取野生的植株进行观赏栽培。同
时，由于马先蒿在野生条件下结种数很少，也使其无法
通过采集的种子进行繁殖。为此，研究者采用组织培养
的方法建立马先蒿的无性系，以期满足人们栽培的需
要。虽然已有马先蒿研究的报道［６，７］，但迄今未见马先
蒿组织培养及无性系建立研究的报道。
２ 材料与方法
２．１ 材料
将大连甘井子区岔鞍山林下生长旺盛的马先蒿植
物采回实验室，作为研究材料。
２．２ 材料灭菌
参见王艳等［８］艾蒿研究的灭菌方法进行灭菌，即可
获得无菌嫩茎。
２．３ 培养条件
参见张卓等［９］山苦菜研究的培养条件进行培养研究。
２．４ 方法
２．４．１ 愈伤组织的诱导及分化
将无菌嫩茎切成长０．２～０．３ｃｍ的茎段（下称嫩
茎），将叶柄基部的生长点切成长０．１ｃｍ具有生长点的
茎段（下称生长点），将叶片切成边长０．３ｃｍ的块状（下
称叶片）后，接种于 ＭＳ＋６－ＢＡ０．６ｍｇ·Ｌ－１＋２，４－
Ｄ２．０ｍｇ·Ｌ－１和 ＭＳ＋６－ＢＡ０．６ｍｇ·Ｌ－１＋２，４－
Ｄ１．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ０．３ｍｇ·Ｌ－１两种培养基上，进行
不同材料愈伤组织的诱导培养试验。将获得的愈伤组
织在培养瓶内继续培养５０ｄ，观察愈伤组织的分化情
况。愈伤组织诱导培养试验重复２次，每种处理接种
１００个材料。
２．４．２ 生根培养
将以上由生长点诱导的愈伤组织分化培养的不定
芽从基部切下，接种到以１／３ＭＳ为基本培养基，附加不
同浓度的ＮＡＡ、ＩＡＡ、ＩＢＡ和ＡＢＴ２号（下称ＡＢＴ）生长
调节剂，进行不定芽的生根培养。不定芽生根培养试验
重复４次，每种处理接种１００个不定芽。
２．４．３ 试管苗移栽与定植
将进行着生根继代增殖培养的试管苗从培养瓶中
取出，置于底部有一层厚约０．２～０．４ｃｍ水层的搪瓷盘
中，在光照下炼苗２ｄ后，移栽到上层为６～７ｃｍ干净河
沙、下层为肥沃园土的温室苗床中，进行试管苗的移栽
试验。移栽试验重复３次，移栽株数分别为２００株、４００
株和６００株。
把移栽成活的试管苗于６月２０日和３０日，分２次
定植到大连市区的花坛上，２次共定植１ １００株。
３ 结果及分析
３．１ 不同材料、不同培养基对愈伤组织诱导和分化
的影响
培养４５ｄ统计，结果见表１。由表说明，以叶片为
材料，在两种培养基上均不能诱导培养出愈伤组织；以
生长点和嫩茎为材料，在两种培养基上都能诱导形成愈
伤组织，其中生长点的培养效果好于嫩茎。以生长点为
材料，不仅诱导率最高，而且培养的愈伤组织长势旺盛。
由对培养过程的观察可知，以生长点为材料，培养８～
１０ｄ，有的材料开始生长愈伤组织，之后，随着生长愈伤
３５
２０１２年７月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇｒｅｅｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ 第７期
组织数量的不断增加，愈伤组织也在不断地生长。初期
生长的愈伤组织为黄绿色，后来为由许多大小不等绿色
颗粒组成的半球状。把在两种培养基上由生长点和嫩
茎培养的愈伤组织继续培养４０ｄ，并对培养过程进行观
察统计。观察证明：由嫩茎培养的愈伤组织不分化；以
生长点为材料在 ＭＳ＋６－ＢＡ０．６ｍｇ·Ｌ－１＋２，４－
Ｄ２．０ｍｇ·Ｌ－１培养基上诱导培养的愈伤组织不分化，而
在 ＭＳ＋６－ＢＡ０．６ｍｇ·Ｌ－１＋２，４－Ｄ１．０ｍｇ·Ｌ－１＋
ＮＡＡ０．３ｍｇ·Ｌ－１培养基上培养的愈伤组织能分化出
不定芽。继续培养１０ｄ左右可见愈伤组织的上部分化
出绿色的芽点，随后，芽点逐渐生长为不定芽。继续培
养到４０ｄ时，平均每块愈伤组织上能分化出２．８个高
０．８ｃｍ左右的不定芽。不定芽具有４～６个叶片，呈绿
色，生长较旺盛。２次重复试验的结果基本一致。以上
结果说明，ＭＳ＋６－ＢＡ０．６ｍｇ·Ｌ－１＋２，４－Ｄ１．０ｍｇ·
Ｌ－１＋ＮＡＡ０．３ｍｇ·Ｌ－１培养基是马先蒿生长点愈伤组
织诱导和分化培养的理想培养基。
表１ 不同材料对愈伤组织诱导的影响
材料
类别
培养基／（ｍｇ／Ｌ）
接种
数量
愈伤组织
诱导率／％
愈伤组织
长势
嫩茎
生长点
叶片
嫩茎
生长点
叶片
ＭＳ＋６－ＢＡ０．６＋２，４－Ｄ２．０
ＭＳ＋６－ＢＡ０．６＋２，４－Ｄ２．０
ＭＳ＋６－ＢＡ０．６＋２，４－Ｄ２．０
ＭＳ＋６－ＢＡ０．６＋２，４－Ｄ１．０＋ＮＡＡ０．３
ＭＳ＋６－ＢＡ０．６＋２，４－Ｄ１．０＋ＮＡＡ０．３
ＭＳ＋６－ＢＡ０．６＋２，４－Ｄ１．０＋ＮＡＡ０．３
１００
１００
１００
１００
１００
１００
４６
６４
０
２９
５１
０
＋
＋＋
－
＋
＋＋
－
注：＋＋长势旺盛；＋长势一般；－为不生长。
３．２ 不同浓度调节剂对不定芽生根培养的影响
接种培养到３０ｄ时观察统计，结果见表２。在不加
生长调节剂的培养基上，不定芽不能生根；在附加４种
生长调节剂的培养基上，不定芽均能生根并生长为试管
苗；其中加ＡＢＴ１０ｍｇ·Ｌ－１的培养基上生根率最高，达
到了９６％，并且试管苗长势旺盛。观察表明，将不定芽
接种到附加ＡＢＴ １０ｍｇ·Ｌ－１的培养基上培养到４ｄ时
可见生长出白色的根原基，随后，生根数不断增加，根原
基很快生长为白色的根，培养到３０ｄ时生根率为９６％、
生根数为７．６条／株、株高４．１～５．３ｃｍ，并且试管苗长
势旺盛。把在１／３ＭＳ＋ＡＢＴ １０ｍｇ·Ｌ－１这种培养基上
生根培养的试管苗剪成长１．５ｃｍ左右、具有２个生长
点的不定芽，接种到相同的培养基上进行试管苗的生根
继代增殖培养，２８ｄ为一个生根继代培养周期，可培养
表２ 不同浓度生长调节剂对不定芽生根培养的影响
ＮＡＡ
／（ｍｇ／Ｌ）
ＩＡＡ
／（ｍｇ／Ｌ）
ＩＢＡ
／（ｍｇ／Ｌ）
ＡＢＴ
／（ｍｇ／Ｌ）
生根率
／％
试管苗
长势
０
０．３
０．６
０
０
０
０
０
０
０．
０
０
０．３
０．６
０
０
０
０
０
０
０
０
０
０．３
０．６
０
０
０
０
０
０
０
０
０
１０
２０
－
３９
２８
６８
４６－
３２
２１
９６
４１
－
＋
＋
＋
＋
＋
＋
＋＋
＋
注：＋＋长势旺盛；＋长势一般；－为不生长。
出一代与以不定芽为材料经过３０ｄ生根培养长势一致
的试管苗，生根率为９８．５％，每一代的增殖系数为２．９。
生根继代增殖培养连续培养了６代，其结果基本一致，４
次重复试验的结果也基本一致。以上结果说明：１／３ＭＳ
＋ＡＢＴ １０ｍｇ·Ｌ－１这种培养基是马先蒿不定芽生根培
养和试管苗生根继代增殖培养的理想培养基。
３．３ 试管苗移栽与定植
移栽８ｄ左右可见试管苗开始生长，３０ｄ时统计，分
别成活１８２株、３７３株和５６６株。共成活１ １２１株，平均
成活率为９３．４％，成活率较高。
定植后３０ｄ统计证明：共成活１ ０８２株，定植成活
率为９８．５％。这说明，在温室中移栽成活的试管苗，容
易定植成活。
对定值成活的试管苗的观察表明：定植成活的试管
苗不仅保持了野生马先蒿叶色浓绿，生长旺盛，根系约
为野生同龄植株的１．５倍，当年不开花、翌年７月中旬
开花、８月结果等植物学性状，还保持了株型美观、花色
美丽、花期较长、抗逆性较强等有利于观赏的特点。
４ 结语
本研究定植的马先蒿试管苗不仅保持了野生马先
蒿的植物学性状，而且还保持了株型美观、花色美丽、花
期较长、抗逆性较强等有利于观赏的特点。这一结果说
明：本研究所获得的试管苗可作为观赏栽培的种苗使
用，所建立的培养技术也为该物种种质保存奠定了技术
基础。
在本研究的试管苗生根继代增殖培养中，２８ｄ为一
个培养周期，每个培养周期的增殖系数为２．９。按照这
种繁殖速度，一株试管苗每年可以繁殖出２．９１３（约为９９
万）株试管苗。除掉各种不利因素影响，每年完全能保
证繁殖出５０万株试管苗，这种繁殖速度完全能满足栽
培对种苗的大量需求。
参考文献：
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科学出版社，１９７５：７１．
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版社，２００８：３９４．
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药学杂志，２００６，２１（３）：１４２～１４４．
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大学学报，２０１２，４２（２）：１８７～１９１．
４５
李冬雪等：马先蒿无性系建立的研究 植物研究
宁化县横坑切梢小蠹虫害大发生与气候因子分析
伍小兵
（福建省宁化县林业执法大队，福建 宁化３６５０００）
摘要：以福建省宁化县为例，调查研究了横坑切梢小蠹的生物学特性、危害规律，分析了其与气候因子的关
系，并探讨了对横坑切梢小蠹的防治方法。
关键词：横坑切梢小蠹；生物学特性；危害规律；气候因子；防治方法
中图分类号：Ｓ７６３．３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７４－９９４４（２０１２）０７－００５５－０３
１ 引言
横坑切梢小蠹是蛀干蛀梢害虫，以成虫和幼虫为害马
尾松。近年来，由于气候变暖、灾害性气候增加，出现了有
利于横坑切梢小蠹滋生蔓延的环境条件，影响着树木的生
长。当该小蠹虫虫口密度大时，会造成树皮被蛀光，像人
为剥皮一样露出木质部，致使树木枯死；新老成虫在补充
营养时会危害马尾松的枝梢，致使枝梢易折断。
２ 横坑切梢小蠹的生物学特性
横坑切梢小蠹在福建省宁化县１年发生１代。此
虫主要为害衰弱木和濒死木，有时也为害健康树。该虫
主要在树干中上至中下部的树皮内蛀道筑巢，咬蛀树干
的韧皮部、形成层，严重发生时树皮会被蛀光而露出木
质部，致使树木迅速枯死。
该虫以成虫在马尾松的嫩梢或土壤内越冬。越冬
成虫在翌年３月上旬聚集于松树上进行危害，它们咬蛀
树皮补充营养，并在树皮内蛀筑主坑道，主坑道为复横
坑道，从交配巢分出左右两条横坑，整条坑道略呈弧形，
两端稍向下弯曲。交配后的雌成虫在主坑道的两侧蛀
筑卵巢，１巢１卵，卵出现期为３月中旬至４月上旬，卵
期约为１０ｄ。孵化后的幼虫在主坑道两侧咬蛀子坑道，
子坑道短而稀，自主坑道的上、下方分出，子坑道多时会
出现交叉现象。幼虫出现期是３月下旬至４月中旬，幼
虫期为１４～１８ｄ，老熟幼虫在树皮内咬筑蛹室，并开始
化蛹。蛹出现期４月中旬至５月上旬，蛹期７～８ｄ。４
月下旬出现新一代成虫，羽化高峰期为５月初，新成虫
羽化后在树皮内停留２～３ｄ再蛀出，然后分散飞出，危
害当年新生的枝梢并补充营养，致使被危害的枝梢易折
断而枯死［１］。
３ 横坑切梢小蠹的危害规律
横坑切梢小蠹性喜阳光、高温、干旱，阳坡的树木比
阴坡的易先被危害，林缘的较林内的先受害，立地条件
差的较立地条件好的先受害，林内卫生条件良好的不易
发生。当受到其他病虫危害、干旱、低温冻害、森林火
灾、松脂采割等造成树木生长衰弱时，容易受到横坑切
梢小蠹的危害。采伐木、风折木、濒死木为横坑切梢小
蠹的繁殖提供了有利条件，是导致其大发生的基础。
４ 横坑切梢小蠹发生与气候的关系
高温、干旱的气候条件有利于横坑切梢小蠹的生长
繁殖。通过调查，连续几年的干旱气候可导致横坑切梢
小蠹的大发生，特别是整年气候干旱，翌年春季气温高、
降雨量少，致使松树生长受到影响，为横坑切梢小蠹的
入侵创造了好的条件，更容易引起该小蠹虫的爆发，其
收稿日期：２０１２－０５－１６
作者简介：伍小兵（１９６６—），男，福建宁化人，高级工程师，主要从事林业科技推广研究工作
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
。
Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｌｏｎｅ ｆｏｒ Ｐｅｄｉｃｕｌａｒｉｓ
Ｌｉ Ｄｏｎｇｘｕｅ，Ｇａｏ Ｋｅ，Ｓｏｎｇ Ｓｈｉｙｉｎｇ，Ｘｕ Ｎａ，Ｊｉａｎｇ Ｃｈａｎｇｙａｎｇ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ１１６０８１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｍｅｅｔ ｔｈｅ ｎｅｅｄ ｏｆ ｇｅｒｍｃｈｉｔｓ ｆｏｒ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｇｒｏｗｉｎｇ ｐｏｉｎｔｓ ｏｆ Ｐｅｄｉｃｕｌａｒｉｓ ａｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ
ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｔｏ ｄｏ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｉｓ ｍａｉｎｌｙ ａｂｏｕｔ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆ－
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＋２，４－Ｄ１．０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ０．３ｍｇ·Ｌ－１，ａｎｄ １／３ＭＳ＋ＡＢＴⅡ１０ｍｇ·Ｌ－１ ｉｓ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｒｏｏ－
ｔｉｎｇ ａｎｄ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｉｎｇ；ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ ａｎｄ ｓｔａｂｌｅ ｐｌａｎｔｉｎｇ ｉｓ ９３．４％ａｎｄ ９８．５％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅ－
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