全 文 :江西野生白花凤仙花组培快繁技术研究
廖忠明1,李丹丹1,张付远1,钟晓红1,刘良源2
(1.江西环境工程职业学院,江西赣州 341000;2.江西省林业有害生物防治检疫局,江西南昌 330077)
摘要 [目的]建立江西野生白花凤仙花组培快繁体系。[方法]选取江西野生白花凤仙花具有顶芽或腋芽的茎段为外植体,诱导芽体
萌发,进行快繁培养。通过试验对比分别筛选出诱导芽分化和诱导生根的最佳培养基。[结果]不同激素水平对江西野生白花凤仙花组
培苗的生长有显著影响。其中最适宜的诱导培养基为 MS + 6-BA 0. 5 mg /L + NAA 0. 1 mg /L;最适宜的生根培养基为 IBA 0. 6 mg /L
+ NAA 1. 0 mg /L;江西野生白花凤仙花组培快繁的最佳基本培养基是 MS培养基。[结论]为江西野生白花凤仙花种质资源保存和优质
种苗的工厂化生产提供技术参考。
关键词 凤仙花;组织培养;快繁技术
中图分类号 S604. 3 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2015)25 -030 -01
Tissue Culture and Rapid Propagation Technique of Jiangxi Wild White Impatiens balsamina
LIAO Zhong-ming,LI Dan-dan,ZHANG Fu-yuan et al (Jiangxi Environmental Engineering Vocational College,Ganzhou,Jiangxi
341000)
Abstract [Objective]The aim was to establish tissue culture and rapid propagation technique of Jiangxi wild white Impatiens balsamina.
[Method]Selecting Jiangxi wild white Impatiens balsamina with crown or axillary bud stem as the explant,rapid propagation cultivation was
done. Through experiment contrast respectively,the best medium that induce bud differentitation and induce rooting were selected. [Result]
The results showed that different hormone levels on the growth of wild white Impatiens balsamina in Jiangxi had a significant effect. One of the
most appropriate induction medium was MS + 6-BA 0. 5 mg /L + NAA 0. 1 mg /L;The optimum rooting medium was IBA 0. 6 mg /L + NAA
1. 0 mg /L;The best medium for Jiangxi wild white Impatiens balsamina seed micropropagation was MS.[Conclusion]The study provided tech-
nical reference for germplasm resources preservation and good quality seedlings factory production of Jiangxi wild white Impatiens balsamina.
Key words Impatiens balsamina;Tissue culture;Rapid propagation
作者简介 廖忠明(1968 -) ,男,江西南康人,教授,从事植物栽培类
研究。
收稿日期 2015-07-10
白花凤仙花(White Impatiens balsamina)原记载特产四川
峨眉山,生于海拔 1 000 m 以下沟边或小溪边潮湿草地。凤
仙花科仅有水角属(Hydrocera BI)和凤仙花属(Impatiens L)
2个属,全世界有 900 余种。主要分布于亚洲热带和亚热带
及非洲,少数种在欧洲,亚洲温带地区及北美洲也有分布。
水角属为单种属,产于印度和东南亚,凤仙花属是本科中最
大的属。我国 2 属均产,已知有 220余种[1]。
2012 年江西省科技支撑计划项目“野凤仙分子生物学
研究与市场开发”(20112BBF60048)课题组在江西省宜春市
铜鼓县大沩山实地考察时发现一种凤仙花属植物,并拍摄生
境,采回标本,经查对确认为白花凤仙花[2],该种在此以前尚
未有报道,系江西新记录。其植株紧密,花朵大,颜色鲜艳,
生长快且整齐,珍稀奇特,适合盆栽及绿化使用。由于种质
资源较少,致使生产受到制约;同时常规的栽培方式易引起
植物种质退化,繁殖系数降低及感染病毒、病害等问题。而
组培快繁具有提高苗木质量,使品种纯化,繁殖系数高,繁殖
速度快等优点。笔者通过对江西野生白花凤仙花组培快繁
研究,以期为江西野生白花凤仙花种质资源保存和优质种苗
的工厂化生产提供技术参考。
1 材料与方法
1. 1 试验材料 将江西省宜春市铜鼓县大沩山野生白花凤
仙花移植至江西环境工程职业学院温室内,待其长出新枝
后,剪去带有顶芽和腋芽的茎段,去掉叶片,先用自来水冲洗
40 min,再用洗洁精清洗表面浮尘。在无菌条件下用 75%乙
醇消毒 10 s,无菌水冲洗 2次,0. 1%氯化汞消毒 3 ~5 min,再
用无菌水冲洗 5 次。将处理好的材料切成约 2cm 并带有 1
个芽的茎段接种到预先配制好的培养基上进行培养。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 不同基本培养基对江西野生白花凤仙花诱导和生根
的影响。将灭菌好的带有顶芽和腋芽的白花凤仙花茎段接
种到不同基本培养基内,基本培养基分别为 MS、1 /2MS、
1 /4MS,琼脂 0. 7 %,白砂糖 2. 5%,附加激素,pH 5. 8 左右,
121 ℃高温灭菌 20 min。培养温度(25 ±2)℃,光照 1 500 ~
2 000 lx,光照时间 8 h /d。
1. 2. 2 不同浓度激素对江西野生白花凤仙花诱导分化的影
响。将灭菌好的带有顶芽和腋芽的白花凤仙花茎段接种到
诱导培养基内,培养基为 MS + 6-BA 2. 0 ~ 4. 0 mg /L + NAA
0. 3 ~0. 8 mg /L,琼脂 0. 7%,白砂糖 2. 5%,pH 5. 8 左右,121
℃高温灭菌 20 min。培养条件同“1. 2. 1”。通过改变 6-BA
和 NAA 的浓度,共为 6 个处理(每个处理接种 3 瓶,每瓶接
种 5个芽) ,筛选最佳的诱导分化培养基配方。
1. 2. 3 不同浓度激素对江西野生白花凤仙花生根的影响。
不定芽伸长至 3 ~ 5 cm时,自基部切下,接种到生根培养基
上,培养基为 MS + NAA 0. 1 ~ 2. 0 mg /L + IBA 0. 2 ~ 0. 6
mg /L,培养基均加入琼脂粉 0. 7%,pH6. 0 左右,共设 8 个处
理,每处理接种 15瓶,每瓶接种 15株,培养条件同“1. 2. 1”,
以筛选最佳的生根培养基。
1. 3 统计标准 分化率 =分化茎段数 /接种段数 ×100%
增殖倍数 =分化不定芽数量 /接种数
生根率 =生根苗数 /接种段数 ×100%
(下转第 132页)
责任编辑 李占东 责任校对 况玲玲安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2015,43(25):30,132
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.25.151
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75 -87.
(上接第 30页)
2 结果与分析
2. 1 不同培养基对江西野生白花凤仙花诱导分化和生根的
影响 由表 1 可知,以 MS 培养基诱导效果最佳,1 /2MS 次
之,1 /4MS效果最差。芽繁殖倍率:MS培养基最高可达 5. 02
倍,比 1 /4MS培养基高 51. 5%。苗的生长高度:MS培养基的
苗生长量比 1 /2MS 培养基提高了 21. 2%,比 1 /4MS 培养基
提高了 13. 0%。根的条数:3种培养基的影响结果差异不明
显,因此,使用 MS培养基时不宜减量。
2. 2 不同浓度激素对江西野生白花凤仙花诱导分化的影
响 由表 2可知,培养 15 d 时,7 种处理有些开始分化出不
定芽,30 d 后 7个处理中以处理②6-BA 2. 0 mg /L + NAA 0. 4
mg /L为最佳,分化出的不定芽为丛生状,且多达 81 个小芽,
生长粗壮,分化率达 93%,增殖倍数 4。其次是处理③6-BA
3. 0 mg /L + NAA 0. 5 mg /L,不定芽总数 89 个,生长粗壮,分
化率达100%,增殖倍数5. 4,但芽较细弱。表明,芽的诱导和
分化与 6-BA、NAA 浓度有密切关系,一定量的 6-BA、NAA 对
不定芽的诱导和分化有促进作用。
表 1 不同培养基对江西野生白花凤仙花诱导分化和生根的影响
培养基
诱导分化率
%
芽繁殖倍数
倍
最高苗均值
cm
每株苗发根
均数
MS 95 5. 02 4. 85 1. 9
1 /2 MS 83 4. 10 3. 82 2. 0
1 /4MS 56 3. 00 4. 22 1. 8
表 2 不同浓度激素对江西野生白花凤仙花诱导分化的影响
处理 培养基∥mg /L 接种数∥芽 分化数 不定芽总数∥个 分化率∥% 增殖倍数 生长状况
① 6-BA2. 0 + NAA0. 3 15 13 45 87 3. 5 细
② 6-BA2. 0 + NAA0. 4 15 15 81 93 4. 0 粗壮
③ 6-BA3. 0 + NAA0. 5 15 14 89 100 5. 4 较细
④ 6-BA3. 0 + NAA0. 6 15 13 48 87 3. 7 细
⑤ 6-BA4. 0 + NAA0. 7 15 12 43 80 3. 6 细弱
⑥ 6-BA4. 0 + NAA0. 8 15 12 60 80 5. 0 粗壮
2. 3 不同浓度激素对江西野生白花凤仙花生根的影响 由
表 3可知,培养 20 d 时,8 种处理有些开始分化出不定芽并
开始生根,60 d 后 8个处理中以处理⑦IBA 0. 6 mg /L + NAA
1. 0 mg /L的效果最佳,生根率最高,根数最多,根长最长,苗
和根长势最好,其次是处理⑥ IBA 0. 6 mg /L + NAA 0. 5
mg / L。表明,根的生长和苗的增殖与IBA、NAA浓度有密切
表 3 不同浓度激素对江西野生白花凤仙花生根的影响
处理 培养基∥mg /L
生根率
%
平均根数
根
平均根长
cm
生长状况
① IBA0. 2 + NAA0. 1 87 1. 9 1. 5 细弱
② IBA0. 2 + NAA0. 2 100 2. 8 1. 8 细
③ IBA0. 2 + NAA0. 4 100 3. 2 2. 5 较粗壮
④ IBA0. 2 + NAA0. 8 100 3. 0 2. 3 中等
⑤ IBA0. 6 + NAA0. 1 93 2. 5 1. 7 细
⑥ IBA0. 6 + NAA0. 5 100 3. 8 2. 8 粗壮
⑦ IBA0. 6 + NAA1. 0 100 4. 0 3. 1 粗壮
⑧ IBA0. 6 + NAA2. 0 100 3. 1 2. 4 中等
注:接种数为 15株。
关系,IBA、NAA 的浓度比例对生根和苗的增殖影响较大。
3 结论与讨论
该研究结果表明,江西野生白花凤仙花诱导分化与生根
的最佳基本培养基为 MS培养基;诱导分化效果最佳培养基
为 MS +6-BA 2. 0 mg /L + NAA 0. 4 mg /L,分化出的不定芽为
丛生状,且达 81个小芽,生长粗壮,分化率达 93%,增殖倍数
4;生根培养效果最佳培养基为 MS + IBA 0. 6 mg /L + NAA
1. 0 mg /L,生根率最高,根数最多,根长最长,苗和根长势最
好。目前对凤仙花的组培研究较少,而白花凤仙花尚未见报
道。该试验材料于 2012 年在江西首次发现,该研究对于该
野生资源的保护与利用具有一定的推动作用。
参考文献
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[2]《江西植物志》编辑委员会.江西植物志:第二卷[M].北京:中国科学技
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231 安徽农业科学 2015 年