全 文 ：0 5 中阅民族 医药杂志 0 210 年 2月第 2期
高效液相色谱法测定短尾铁线莲中榭皮素的含量△
任文检 , 白图稚 2 常福厚 2 ’
( 1
. 内蒙古 自治区医院 , 内蒙古 呼和浩特 01 0 1;7 2 . 内蒙古 医学院药学院药理学 , 内蒙古 呼和浩特 01 X() 59 )
摘 要 : 目的 :测定短尾铁线莲中拚皮素的含量 。 方法 : 采用 高效液相 色谱法 , K or alnS 让( 25 0~ x 4
.
6~
,
5脚 ) 色讲柱 , 甲醉 :
0
.
4 %磷酸 ( 62 : 38) 为流动相 , 流速为 1 . 0耐而;n 检测波长 3印unr 。 结果 : 拼皮素浓度在 21 . 5闻血 一 63 . 12 闻d 范围之间与
峰面积线性关 系良好 , r = 0 .更珍6 。 拚皮素平均回收率为 101 . 7% , RS D 二 1 . 73 % 。 结论 : 采用高效液相 色语法测定短尾铁线
莲中拼皮素的含量具有分离效果好 、 简便 、 结果准确 的优点 。
关键词 :短尾铁线莲 ;拼皮素 ; 高效液相 色语法 ;含量测定
中圈分类号月刁为 1 . 2 文献标识码 :B 文章编号 : 11】拓 一 68 1以20 10) m 一 以万O一 m
短尾铁线莲为毛莫科植物短尾铁线莲 公翰刀山台 6蒯 i- 摇匀 ,即得 。
c山川边口 DC
. 的地上部分。 蒙文名为 “ 奥 日雅木格 ” , 收载于
《中华医学百科全书 》 (蒙医分卷 ) 、 《内蒙古植物药志》中 。
具有清热 ,止泻 ,止痛 ; 主治肝热 、 肺热 、 肠刺痛 ,热泻等作
用 〔’ 〕 。 其中懈皮素是其有效成分 ,本文建立了以高效液相
色谱测定短尾铁线莲中懈皮素含量的方法 , 以控制蒙药材
短尾铁线莲的质量 。
1 实验材料及仪器设备
1
.
1 仪器 :依利特 U’V 一 23 0 + 高效液相色谱仪 。
1
.
2 实验材料 :短尾铁线莲来自内蒙古蛮汗山 、五一水库 、
小井沟 ,经内蒙古医学院药学院生药学教研室庞秀生教授
鉴定为毛蓖科植物短尾铁线莲 日动以臼 6川庇以以山“ DC . 的
地上部分。 方法学考察中均采用小井沟所采集到的样品 。
懈皮素对照品中国药品生物制品检定所提供 (批号 : 1X( X) 81
一 2X( 冲肠 ) ; 甲醇为色谱纯 , 磷酸 、 盐酸等试剂均为分析纯 ,
水为双蒸水 。
2 方法与结果
2
.
1 色谱条件 : 色谱柱 : K or m as il ( 25 o ln l x 4 . 6~ , 5脚 ) , 流
动相 : 甲醇 : 0 . 4 %磷酸 (印 : 40 ) ;流速 : 1 . 0 n通/而 ;n 检测波长 :
3印 unr ;进样量为加川。 以此条件 ,懈皮素能与其它成分达
到较好分离效果 。 结果见图 1 、 图 2o
2
.
2 对照品溶液的配制 :取 120 ℃干燥 4 小时的榭皮素对
照品 4 . 3 gm ,精密称定 ,置 l od 容量瓶中 ,加甲醇至刻度 , 摇
匀 ,即得 (每 1而 中含棚皮素 0 . 43 1gm ) 。
2
.
3 供试品溶液的制备 :取本品 19 ,过 65 目筛 ,精密称定 ,
加无水乙醇 16 d , 9% 盐酸 4 d , 加热 回流 2 次 , 每次 30 分
钟 ,抽滤 ,合并滤液 ,置 50 d 容量瓶中 ,加 9 %盐酸至刻度 ,
△ 内蒙古医学院蒙药现代化研究重大项 目资助 (陇心田5 Z 0B 10)
作者简介 : 任文栓 ( 1% 3 , 男 , 汉族 ) , 内蒙古土左旗人 , 主管药
师 , 从事中药学研究 。
通讯作者 : c h an 画 @ is na . ~
图 2 短尾铁线莲 1刃四刃 图谱
2
.
4 标准曲线的制备 :精密吸取 0 . 5 、 0 . 75 、 1 、 1 . 25 、 1 . 5d
对照品溶液分别置于 10 d 容量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 。
分别吸取 20 川注人高效液相色谱仪 ,记录峰面积 。 以对照
品溶液浓度为横坐标 ,对照品峰面积为纵坐标 ,进行线性回
归 ,标准线性回归方程为 Y 二 10 .翻X 一 312 . 39 , : 二 0 . 望刃 6 0
结果浓度在 21 . 5 尸g/ d 一 63 . 12 1止g /血 范围内呈 良好的线性
关系 。
2
.
5 精密度实验 :取供试品溶液 ,重复进样 5 次 ,记录峰面
积并计算 ,结果搬皮素的平均含量为 1 . 827 8m岁g , RS D 为
1
.
89 %
。
2
.
6 稳定性实验 : 取短尾铁线莲供试品溶液在 O 、 0 . 5 、 1 . 0 、
1
.
5
、
2
.
0
、
2
.
5
、
3
.
0
、
4
.
0
、
5
.
0
、
6
.
0
、
7
.
0
、
8
.
0泞 . 0 小时分别进样
20 川 ,记录峰面积 ,结果 RS D 为 0 . 79 % ,表明栅皮素在 9 小
DOI : 10. 16041 /j . cnki . cn15 -1175. 2010. 02. 034
20 10年 2月第 2期 中闯民族 医药杂志 5 1
时内保持稳定 。
2
.
7 重复性实验 : 取小井沟供试品 5份 , 各约 19 ,精密称
定 ,分别按样品提取方法提取 、 测定 ,结果栅皮素平均含量
为 2戏珍7 n娜 g , RS D 为 1 . 05 % 。
2
.
8 加样回收率实验 :取小井沟供试品 5 份 , 各约 0 . 59 ,精
密称定 , 分别加人栅皮素标准品溶液 ( 0 . 383 m岁d ) 2 . 6耐 ,
按供试品溶液的方法处理并测定含量 ,计算加样回收率 ,结
果见表 1 。 搬皮素平均回收率为 101 . 7 % , RS D 为 1 . 73 % ,
结果表明本方法准确可靠 。
表 1 样品中拱皮寮含 l 加样回收实验结果
取样量 样品含量 加人量 实测含量 回收率 平均 咫D样品号
( g ) (州 g ) (飞) (州 g ) ( % ) (% ) (肠 )
1 0
.
5() 17 0
.肠 8 3 0 .卯5 8 1 . 货义11 卯 . 8 1
2 0
.
5加 8 0 . 叭无5 0 .卯5 8 1 .肠35 卯 . 73
3 0
.
503 6 0
.
97 19 0
.卯 5 8 2 .加 36 103 . 20 10 1 . 7 1 . 7 3
4 0
.
505 2 0
.
97 5() 0
.卯 5 8 1 .卯83 102 . 36
5 0
.
5工 5 0 .肠 9 8 0 .卯 5 8 2 . X() 1 1 103 . 17
表 2 样品含且测定结果
供试品来源 含量 (州动 平均含量 (耐 g )
蛮汗 ilJ 0 . 87 63 0 . 86 10
0
. 时5 6
五一水库 1 .肠 7 3 1 . 68 18
1
. 石% 5
小井沟 1 . 9 84 3 1 . 9 8 15
1
.
97 86
2
.
9 样品含量测定 :取 10 个批次的样品各 2 份 ,每份约
or g
, 精密称定 ,按 “ 供试品溶液的制备 ” 项下操作 , 取 20 闪注
人高效色谱仪 , 以色谱条件测定 ,计算懈皮素的含量 ,结果
见表 2o
3 讨 论
中药成分的提取多采用冷浸渗流法 、煎煮法 、 有机溶剂
加热回流提取法 ,但提取的效果不尽相同 。 曾采用在酸条
件用 乙醇提取一次的方法 ,结果不太理想 。 本实验采用在
酸条件下用 乙醇提取 2 次 ,滤液加甲醇定容后进行色谱分
析的方法 ,本法与上述其它方法比较提取较完全 ,而且操作
简便 。 有作者曾对短尾铁线莲中齐墩果酸的含量进行测
定 2t] 。 而采用高效液相色谱法对短尾铁线莲中的栅皮素进
行测定 ,尚未见报道 。 本文作者曾用高效液相色谱法测定
蒙药黄花铁线莲中搬皮素的含量也获得很好的结果 3)t 。 本
研究同时建立了蒙药材紫短尾线铁线蓬的质量控制标准 。
实验结果显示 ,采用高效液相色谱法测定搬皮素的含量 ,结
果准确 ,重现性好 ,为蒙医药的临床应用提供了更为有效的
检测方法 。
参考文献
〔1〕朱亚民 . 内蒙古植物药志 (第一卷 )【M 〕. 呼和浩特 : 内蒙
古人民出版社 , 2X( X) . 3弘 .
〔2 〕吴萍 ,魏全嘉 ,徐达宇 ,等 . 青海产藏药“ 叶 芒 ” 的质量研
究〔J〕. 青海医学院学报 , 2X() 5 , 26 (2) : 107 一 1伪 .
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铁线莲中拼皮素的含童 〔J〕. 时珍国药 , 2X( 刃 , 20 (4 ) : 9 1
一 9 12
.
2X( 为年 12 月 24 日收稿
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.
7%
,
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.
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