全 文 ：第 1 6卷 第 2期 生物化学与生物物理学报
1 98 4年 3月 AT CB AI OC HI MI C A眺 玉红P OHY SI C么 S工N 工 A O
V l o
.
1 6
,
N o
.
2
M a r e h
,
1 9 84
羡葵皂试原对 Na 十 、 K 十一ATP 酶
抑制的动力学研究
胡维新 陈锐群 顾天爵
(上海第一 医学院生化教研室 )
摘 要
木文对获莫皂贰原抑制 N +a 、 K + 一 A T P 酶的动力学与机理进行了研究 , 并且与哇巴因的
抑制作用进行了比较 。 动力学研究表明获葵皂试原抑制 N +a 、 K 十一 A T P 酶 , 对底物 N +a 、 K +
均为混合性抑制剂 ; 而对 A T P 则为反竞争性抑制剂 。
观察了磷脂对哇巴因和获葵皂贰原抑制 N +a 、 K 十 一A T P 酶的影响 。 磷脂不影响哇巴因的
抑制作用 ; 但多种磷脂都不同程度地降低蒙葵皂贰原对 N +a 、 K + 一A T P 酶的抑制作用 。
获葵皂贰原是中药知母的成分 之一 , 有抑制 N +a 、 K 十一 A, T P 酶活性的作用 。 知母清
热泻火作用的机理 , 可能在于获葵皂贰原抑制 N +a 、 K + - A T P 酶活性 , 从而使体内产热下
降之故〔 , , 。
N +a
、
K 十一 A T P 酶广泛存在于动物细胞的细胞膜上 , 它在水解 A T P 的同时 , 能对抗
膜两侧的电化学梯度 , 将细胞内的 N +a 运到细胞外 , 而将细胞外的 K 十 运到细胞内 。 这种
N +a
、
K
十 的主动转运过程与细胞容量的维持 , 肾脏与肠道的吸收 , 以及神经和肌肉的兴奋
性有关 。 许多动物组织中糖与氨基酸的主动转运 , 也 依 赖 于凡十 和 K + 的适 当分 布。
A T p 水解时释放的能量 , 除用于维持上述生理过程外 , 一部分以热的形式 散 发 。 Na 十 、
K
十一 A T P 酶是基础代谢下产生热能的主要酶 , 因此 , 改变此酶的活性 , 不但可以改变上述
生理活动过程 , 而且也有可能调节机体产热 。
N a
十、
K
十一A T P 酶的作用机理有过不少的研究 。 下列反应过程已被广泛接受切 。
A江I P 、 Mg + 孙 A T P琴 E 一 P交艺 ) M g + _ K 十 _皿 一 卫 下下今 妞 + 尸i气任 ]
E ~ P 和 E 一 P 代表不同构象的磷酸化的酶 , 可以看出 , A T r 的水解 , 依赖 M g 十 十 、
N +a
、
K 十 的存在。 这些无机离子的浓度改变本身就可以影响酶的活性 。
已知有几种抑制剂 , 分别作用于不同步骤 , 如哇巴因及其它强心贰主要抑制依赖 K 十
的反应 (第 4 步 ) , 但在高浓度时也可抑制第 2 步 , 寡霉素等大环内醋抗菌素则抑制依赖
M g
十 十 的第 3 步反 应 , 利 尿酸 及 其 有 关 利 尿 药 主 要抑 制 依 赖 N +a 的第 2 步 反 应 。
K u n 了二0协 与 U m e az w a[ 用 报道倍半菇抗 癌 抗菌 素 从ke 才oc 砰初孤、 B 对 N +a 、 K 十一A T P
酶的抑制 , 不仅作用于上述有关反应步骤 , 而且与磷脂有竞争作用 , 在 N +a 、 K + 一A T P 酶
的抑制剂中 , 它是一种独特的抑制剂 。
本文就获莫皂贰原抑制 N +a 、 K 十液 T P 酶的动力学及其与磷脂的相互作用等方面进
本文 1 9 82 年 6 月 盛日收到 。
生物 化 学 与 生 物物理学报 1 6 卷
行了探讨 。 并且与哇巴因的作用进行了比较 。 获契皂贰原对 N +a 、 K 十一A T P 酶制剂中存
在的对硝基苯酚磷酸酶活性也有抑制作用 。
材 料 与 方 法
一 、 材料
获葵皂贰原一3月一半唬拍酸酷 (简称获葵皂贰原 )用文献 〔习 的方法制备。
哇巴因 , E . M er o k 公司产品 , A T P 二钠盐和组氨酸为上海东风试剂厂生产 。 磷脂酸
肌醇 、 磷脂酞 乙醇胺 、 磷脂酞胆碱 、 磷脂酞丝氨酸均系 B D H 产品 , 为氯仿一甲醇溶液 。 其
余试剂均为分析纯 。
对硝基苯酚磷酸盐 ( P N P )的制备 , 用对硝基苯酚与磷酸氯 (P O lC a) 在毗吮溶液中缩
合而成 。 合成时为淡黄色钡盐 。 应用时取一定量的对硝基苯酚磷酸钡溶于稀盐酸中 , 加
适量 I N 硫酸以沉淀钡 , 滤去 B a S O` 沉淀后 , 用 1万 T ir s 调节 p H 到 7 .氏 置棕色瓶中备
用 。
所有试剂都用全玻璃去离子重蒸水配制 。
二 、 万 a 十、 K 十一A T P 酶的提取与分离
根据 J O r g e o se 及 法明 略加修改 , 从兔肾外髓得到部分纯化的 N +a 、 K 十一A T P 酶制剂 ,
所有操作均在 O~ o4 C 进行 。
切开 肾脏 , 去掉皮质及内髓 、 得到暗红色的外髓组织 , 加入 1 0 倍量 (W / V ) 介质 (含
。 . 2 5 M 蔗糖 、 30 m万 组氨酸 , p H 7 .幻制备匀浆 , 将匀浆 6 , 0 0 9 离心 场 分钟收集上清 ,
上清再 30 , 0 0 9 离心扔 分钟 , 得到微粒体。 将微粒体悬浮于上述介质中 ( 6~ 6 xn g 蛋白
/m l)
, 分管置低温冰箱保存 。
微粒体在含有 E D T A Zm万 、 咪哇 5 0 m万 、 A T P 3 m M 、 SD S O , 56 m g / m l , p H 7 . 5 的
溶液中 , 2 。℃ 保温 4 5分钟 , 然后再在不连续蔗糖梯度液 (均含 25 m万 咪哇 、 l m形 E D T戊
p H 7
.
5 )中 , 1 4 0 , 0 0 0 9 离心 2 小时 , 得到的沉淀用 l m万 E D T A 、 2 5 m万 咪哇 ( p H 7 . 句溶
解 少 o℃ 保存 , 此即部分纯化的兔肾 aN + 、 K + - A T卫 酶制剂 。
.1 N 犷 、 K 十峨 T P 酶活性测 定 测定条件为 1 20 m M N a 0 1、 20 m M K CI 、 30 m M
组氨酸 、 3 m 叮 M g CI 。 、 3 m M A T卫 、 酶蛋白 3 ~ 4 ” g , p H 7 . 5 , 总反应体积 1 m l , 3俨C 顶
保温 1 0 分钟后 , 开始反应 10 ~ 1 5 分钟 。 加 5 0 界三氯醋酸 0 . 1 m l 停止反应 。 由于反应
体系中蛋 白质含量很低 , 故未除去蛋白质。 随后根据 R sk -e S u b bar ow 法 4[J 测定产生的
无机磷的量 。 不加哇巴因时的酶活性减去 I ln M 哇巴因存在 时 的酶 活 性 , 等 于 N +a 、
K 十认 T卫 酶的活性 。 不 同批的酶 比活性在 40 0 ~ 70 ” m ol e P i / m g 蛋白 /小时左右 。 在
实验条件下 , N +a 、 K + 一A T P 酶的活性与反应时间成直线关系 。
I ln M 哇巴因存在时的酶活性 , 即 M g + 一 A T P 酶活性 。
2
· 时峭基苯阶磷 酸酶 ( P N P 酶 )活性测 定 根据 F uj `协 等卿 方 法 测 得 , P N P 酶
活性计算与 N +a 、 K 十一 A T P 酶相 同 。
蛋白质含量用 L o w yr 法卿 测定 , 以牛血清白蛋白作为标准 。
3
. 磷脂含量测 定 将样品用氯仿一甲醇 ( 3 : 1 , V / V ) 抽提 3 、 5 次 , 在消化管内蒸
2期 获莫皂贰原对 N+a 、 K 十一 A T P酶抑制的动力学研究
干溶剂 , 再按 0五e n 等 71[ 方法消化并测无机磷含量 。 从表 1 可见 , 随着酶的不 断 纯 化 ,
N+a
、
K
十一 A T P 酶比活性不断提高 ; M g + 一 A T卫 酶和其它杂蛋白含量降低 ; 每毫克蛋白所
含的磷脂升高。
表 l 不同纯化阶段 A T 尸酶活性份和磷脂含量的比较
!
匀 蒸 } 微 粒 体 { 酶 制 “ ”
N +a
,
K 十一A T P 酶
M g 十 + 一人丁尸 酶
拼nT ol e 磷脂 /毫克蛋白
5 8
.
6
3 9
。
8
0
.
1 85 0
.
2 4 6
4 3 6
。
8
8
.
4
0
.
3 5
井
A 丁P 酶活性 召m ol e 无机磷 /毫克蛋白/小时 。
4
. 磷脂的处理 分别将上述四种磷脂 (见 “材料 ” 一节 )各取 石m gJ 去除溶剂后 , 加
o
.
l m l 无水 乙醇溶解 , 再加 动 m形 T ir s一 HCI ( pH 7 . 动 , 使体积 l m l , 即 5 肠 g 磷脂 /川 。
加入磷脂于反应体系后 , 所含的乙醇为 0 .肠~ 0 . 3 多, 此 乙醇浓度对酶活性没有影响。
实 验 结 果
一 、 抑制剂浓度与 N a + 、 K + 一 A T P 酶活性的关系
不同浓度的获葵皂贰原对兔肾 N +a 、 K 十一A T P 酶的抑制曲线 ( a ) 与哇巴因的抑制曲
; 。。仁 a( 了 / (。 )
ǎ蓄`习洲皿.近瓦
舀U世刁
r了一” J刀rù1一
n八“八曰ónù
。一`到己华谧
线 ( b )形状相似(图 lo) 在 l m皿 时都能达到最大抑制 。
从图 1 求出的半抑制浓度 位s o) J 哇巴因的 工5。 为 3 . 2 又
10
“ 7
M
, 获契皂贰原的 工5。 为 9 . o x 1-0 “ 皿 , N +a 、 K + -
A T卫 酶对孩莫皂贰原的敏感性比哇巴 因大约低 3 0倍
左右 。
二 、 底物浓度改变时 , 抑制剂对 N a + 、 K 十一A T P
酶活性的影响
1
. 钾 离子 浓度改变时 的 影 响 在 〔K 十〕改 变
时 , 哇巴因和获葵皂贰原对嘛十 、 K忆A T P 酶的抑制
作用 , 所得的数据根据 G ar a y - Gar ar 五a n 法〔印 处理 , 然
后再以 且a n e于W o lf 作图 , 两者呈现不同的动力学图
型 。
在不同 〔K 十」时 J 哇巴因对 N +a 、 K 十 - A T P 酶的抑
制为非竞争性抑制【图 2 ( a) 〕 , 而获葵皂贰原 对 N +a 、
K气A T P 酶的抑制为混合性抑制【图 2 (b) 〕 。
2
. 钠 离子浓度改变时的影响 将所得 的 数 据
用以上同样的方法处理并作图 , 结果如图 3 所示 。
从图 3 可见 , 两种抑制剂对 N +a 、 K + 一A T P 酶抑制
3 4 5 6 7 5 , 一 i。
一 10 9 : 。 〔抑制剂 〕M f
图 1 抑制剂浓度与 N+a 、 K “一 A T P
酶活性的关系
O : 哇巴因 , . : 蒙葵皂贰原 ; 水平线
以下为不受哇巴因抑制的 人 T P 酶活性。
反应介质 : 12 0 m M N a ol , 20 m 皿 K CI ,
3二卫 M g C I: , 3二皿 A T P , 30 nI 叮 H i.s
p H 7
.
5
。 从兔肾外髓质制备 N +a 、 K + -
A T p 酶制剂
的动力学图型也不相同 , 而与图 2 相似 。 不同 〔N +a 〕时 , 哇巴因对 N +a 、 K 十一A T P 酶的抑
制为非竞争性抑制 〔图 3 (a) 」, 而在此条件下获葵皂贰原对 N +a 、 K 十一 A T P 酶的抑制为混
生 物 化 学 与 生物 物 理学报 16 卷
2 3 4 5
〔 K + 〕 m M
0 1 2 3 4 5
( K
+ 〕m M
图 2 不同 K斗 浓度时 , 哇巴因和获莫皂贰原抑制
N a 十
、
K
十一 A T P 酶的 H~ s 一W co l f 图
(
a
) 火 一 火 , I K I O一 6 叮哇巴因 (b ) x 一 x , Z x l o 一 5叮 菠奖皂贰原
. 一一 , 对照 . 一 . , 对照
n、-A\、:卜/ 厂
8 1 0
〔N a 十 〕m M
1
.乞 18 8 10
〔N a 奋 〕m M
1 1 18
图 3 不同 N +a 浓度时 , 哇巴因和获葵皂贰原抑制
N +a
、
K
十一 A T P 酶的 H a n e s 一Wo lf 图
(
a
) 火一 只 , I X l o 一。皿 哇巴因 ( b ) 火一 x , 2 义 1 0 一 。皿装奖皂贰原
. 一 . , 对照 . 一 . , 对照
合 比抑制 [图 3 ( b )」。
3
.
A T P 浓度改变时 的影响 所得的数据以 H a n e s 一W o lf 作图 (图 4 ) , 可见哇巴
因对 A T P 为非竞争性抑制作用 [图 4 (a) 〕, 而获葵皂贰原则为反竞争性抑 制 作 用 【图
4 (b )〕 。
4
. 固 定或改 变 N a 十 /K 十 比例时的影响 M at s iu 等 91[ 认为 , Na 十 , K + 相互竞争同
一部位 , 相互抑制 。 故将 呱+/ K 十 比例保持恒定 , 以消除 Na + , K 十 间的相互抑制 。 本实
验把 N +a 与 K 十 的比例固定为 6 : 1 , 并用以上 同样的方法作图 (图句 , 可见哇 巴因对 N +a
(或 K 十 )为非竞争性抑制 , 与 M at o iu 等的结果一致 【图 5 ( a )〕, 获葵皂贰原对嘛十 (或 K 一卜 )
为棍合性抑制 [图 5 ( b) 〕。
N a
十
/ K
十 比例改变 , 如 N +a / K + 比例增大 , 即降低 K 十 浓度 , 哇巴因的抑制作用增加 ,
2 期 获葵皂贰原对 N a 十 、 K 十 一 A T P 酶抑制的动力学研究
。工x之ēd卜Vé
〔 A T P 〕 x 10 m M
图 4 不同 A T P 浓度时 , 哇 巴因和获莫皂试原抑制
N 犷 、 K + 一 A T P 酶的 H an es 一Wo l f 图
(
a
) 又 一 x , 1 又 1 0一 6 M 哇巴因 ( b ) 火一 x , Z x l o 一 5肛 装葵皂贰原
. 一 . , 对照 . -一 . , 对照
”、1之,妇之ē.。乙
12 24
( N a
+ 〕 m
24 3 6
〔 N a + 〕m M
4 8 6 00836M
图 5 N a ” / K + 比例恒定 (〔N+a 」/〔K + 〕一 6八 ) , 不同 N +a 浓度时 , 哇巴因和获莫皂试原
抑制 N a + 、 K + 一 A T P 酶的 H a n e s 一W o o lf 图
(
a
) x 一 x , l x 1 0一 6皿 哇巴因
. 一. , 对照
(b ) x 一 x , Z x l o 一 6皿 菠契皂贰原
. 一. , 对照
N扩 / K + 比例下降 , 即降低 N +a 浓度 , 哇巴因的抑制作用降低【图 6 ( a) 〕 。 N +a 促进哇巴
因对 N +a 、 K + 一A T P 酶的抑制 , 而 K 十 则拮抗哇巴因对 N +a 、 K 十认T P 酶的抑制 , 可见
N +a
、
K 十 的相互作用 , 对哇巴因抑制 N +a 、 K +峨T P 酶有很大的影响 。 但是不管 N +a /
K
+ 比例如何改变 , 对获葵皂贰原抑制 N +a 、 K + 一 A T P 酶的作用没 有 明显 的 影 响 【图
6 ( b ) 〕。 由此可见 , 哇巴 因与获莫皂贰原并不是结合在同一个部位发生抑制作用 。
5
. 哇 巴 因与获葵皂戒原抑制 N +a 、 K + 一A T P 酶的 动力学参数 见表 o2
三 、 磷脂对抑制剂抑制 N +a , K + 一A T P 酶活性的影响
反应体系中加入磷脂 , 可部分地减少获葵皂贰原对 N +a 、 K 忆A T P 酶的抑制作用 , 从
表 3 可见 , 磷脂酞肌醇 , 磷脂酞胆碱 , 磷脂酞 乙醇胺 , 磷脂酞丝氨酸都对获葵皂贰原的抑制
] 2 4 生物化 学 与 生物物理 学 报 1 6 卷
(
a
) (b )
ù
UOCénōó乙ō内J,口
铃令知澳橄
8060钓即
许众袱茶橄
2 3 4 5 0 1 2 飞 4 与 6 7 8 9 10
〔哇 巴因 〕 x 1 0` M 〔拨莫皂拭原〕 x l o` M
图 6 不同 N +a 、 K 十 比例对哇巴因和获莫皂试原抑制
汉 一 火 , N +a 1 20 m盯 K +5 m肛 O 一O , N a 十 6 m皿 K +2 。 m皿
N a +
、
K
+ 一 A T P 酶的影响
. 一 . , N+a 工Z o m万 K +2 o m叮
表 2 哇巴因与菠奕皂式原抑制 N Q十 、 K十一 A丁p 酶的动力学参数
}一一竺一里一兰一一}一望半澳一粤一车一兰一一-— {一生一笠兰卜一兰止一卜二一墨一卜一二匕一一1— 兰一一K 十 1 非竟争性 } 1 · 8 火 1 0一 “ 叮 } 混合性 } ” · I X I O一 ” 叮 1 “ X 工0一 ` M! 非竟争性 1 1 · S X l o一 “ 皿 1 混合性 { 1 · S X 王o一 ” 皿 1 1 · Z X l o一 ` 肛} 非竞争性 1“ · 5 X 1 0币皿 } 反竞争性 { } 1 · S X l o一 5皿沁 , + /K + (6/ 1 ) ` { 非竞争性 } 2 · 7 X l o币 M } 混合性 } 1 · 2 4 X l o一 ,蓝 } 1 · 3 X l o一 `叮双 +a /’CI 千 ( 6l/ )时的 万` 根据 D 立xo n作图求出 。
表 3 外加磷脂对哇巴因和获荚皂式原抑制 N Q十 、 K+ 一 A丁p 酶的影响
磷 脂 哇 巴 因 菠 契 皂 贰 原
活 性 抑 制 (% ) 活 性 抑 制 (% )
对照 1 29 6 5 。 9 5 6 8 5 。 2
磷脂酞肌醇 ( 1 0 微克 ) 1 1 3 7 0 . 0 1 0 9 7 1 . 3
磷脂酞胆碱 (1 0 微克 ) 1 3 1 6 5 . 4 1 6 2 5 7 . 4
磷脂醚乙醇胺 ( 10 微克 ) 1 2 3 6 7 . 3 1 4 9 6 1 . 0
磷脂酸丝氨酸 (1 。 o 微克 ) 1 1 6 69 . 2 且 6 6 9 . 4
注: 1 . 酶活性 : 召 m ol 。 无机磷 /毫克蛋白 /小时 。
2
. 未加抑制剂和磷脂时酶活性为 8 79 拜 m 。贻 P i/ 毫克蛋白 /小时 。
3
. 哇巴因与菠荚皂试原浓度分别为 5 x l于 6皿 和 s x 1 o一 `万。
作用有影响 , 其中以磷脂酞胆碱 、 磷脂酸乙醇胺的影响较显著 。 这些磷脂对哇巴因抑制
N +a
、
K
十一 A T P 酶的作用没有明显影响 。
从表 4 可见 , 磷脂酞乙醇胺的浓度 , 对获葵皂贰原抑制 N +a 、 K 十峨T P 酶活性的影响
是 , 随着磷脂浓度 的增加 , 抑制百分率下降 。 磷脂酞丝氨酸 、 磷脂酞胆碱 、 磷脂酞肌醇也
有相同的影响 , 结果与表 3 相一致 。 本实验条件下 , 这些磷脂都不能完全消除获葵皂贰原
对此酶活性的抑制作用 。
2 期 获莫皂试原对 N a+ 、 K +一 A T P 酶抑制的动力学研究
表 4 磷脂毓乙醉胺对菠奖皂式原抑制闪 Q + 、 K +一 A下尸酶的逆转作用
装 葵 皂试 原 磷 脂 酞 乙 醇 胺 活 性 抑 制
( M ) (召 g / m l ) 伽 m lo e P i/ m g 蛋白 /小时 ) ( % )
0 0 350 8 1
.
0
4 X 10
一 5 0 6 7 75 0
4 X 10
一 5 2 5 8 9 7 1
.
5
4 x 1 0
一 5 50 1 00 70
.
5
4 X I O
一 5 7 5 1 0 4 5 5
.
0
4 火 1 0一 5 10 0 1 58 54 . 4
4 X 1 0一 5 12 5 16 0 4 0
.
4
4 x 1 0
一 5 1 50 2 0 9
四 、 抑制剂对 P N P 酶活性的抑制作用
本文提取的 Na + 、 K +从 T P 酶制剂中 , 存在 r N P 酶活性 , 此酶活性同 N +a 、 K 十从 T P
酶活性一样 , 受哇巴因与获葵皂贰原的抑制。 但在 l m M 时 , 哇巴因能全部抑制 P N P 酶活
性 , 而获葵皂贰原则抑制 6 8 .石务 的酶活性 。 P N P 酶活性对获葵皂贰原的敏感性比 N a气
K
+ 一 A T P 酶活性为低 。
讨 论
知母是一种清热泻火药 , 临床上主要用于阴虚内热的患者 。 陈锐群等山 认为 , 阴虚内
热主要是体内 N +a 、 K 十一 A T P 酶活性过高的一种表现 , 知母中的获葵皂贰原能抑制此酶 ,
从而达到清热泻火的目的 。 本文我们对获葵皂贰原抑制 N +a 、 K 十一A T P 酶的动力学进行
了研究 , 并且与哇 巴因的作用进行了比较 。 在本实验中 , 哇 巴因抑制此酶的动力学与文献
相符叭 工。 , 。 从哇巴因与获葵皂贰原的结构比较中 (图 7) 可见 , 哇巴因抑制 N +a 、 K 十一A T F
酶的几个必需基团和结构 , 如 q ` 的 月一 OH , q : 的 庄不饱和内醋环 , C 3 的 月一 糖基及
C / D 环顺式连接比 ,翔 , 这些基团和结构 , 获葵皂贰原都没有或者不同 。 由于二者的结构
不同 , 因此获莫皂贰原对 Na 十 、 K 十峨T P 酶抑制的动力学图型不同于哇巴因 , 从而二者的
作用机理也不相同 。
根据本实验结果 , 获契皂贰原对 N +a 、 K + 一 A T P 酶的抑制 , 有以下几个特点:
(1 ) 对 A T P 为反竞争性抑制 。
C
一
H二 0 ,
图 7 哇巴因与获莫皂试原的结构比较
生物 化 学 与生 物物理 学 报 1 6 卷
( 2 )对 N a+ 、 K + 都是混合性抑制 , 抑制常数 (了户相近 , 而且均为 了` < 了 ; 。
(3 ) N +a /K
+ 比例改变 , 对获葵皂贰原的抑制作用无明显影响 。
从以上可以判断 , 获葵皂贰原不但作用于依赖 N +a 和依赖 K + 的步骤 , 而且对这两
个步骤有相同的亲和力 , 对 N +a 和 K + 无明显的选择性 。 哇巴因主要作用于依赖 K 十 的
步骤 , N +a 促进而 K 十 拮抗其抑制作用 。 所以 , 获葵皂贰原对 Na + 、 K 十一 A T P 酶的抑制机
理 可能 比哇 巴因还要复杂 。
磷脂对抑制剂抑制 N +a 、 K 十峨T P 酶活性的影响也进行了研究 。 从实验结果看 , 磷
脂对哇巴因抑制 N +a 、 K 十一 A T P 酶的作用无明显影响 , 磷脂则能明显地降低获葵皂贰原
对此酶活性的抑制 。 因此 , 上述动力学特点如何与磷脂的作用联系起来 , 以及磷脂是通过
什么方式影响获葵皂贰原对 N +a 、 K + - A T P 酶的抑制 , 尚有待进一步探讨 。
陈惠黎副教授曾对本工作提出许多宝贵意见 , 特此致谢 。
参 考 文 献
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仁7 」
t 吕」
陈锐群等: 知母皂贰原是 N a 十 , K 呼一 A T P 酶的抑制剂。 生物化 学与生物物理学报 , 19 8 2 , 14 , 1 5氏
K u n i rn o t。 , T
. 工Jo e : a w a , H . K i n o t i e s七u d i明 o n t h e i n h ib i t i o n o f (N a + , K + ) 一A T P a s o b y d i k et 0 0 0 r i o li n
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B 泊叻初乙. 价叩h脚 . 迸 c at , 1 9 7 3 , 31 8 , 78 .
J 。 : 一卿明。 , P . L . 工日。 l at 沁n o f (N +a , K +) 一 A T F as o . 皿 e仇。山 饥 E二 ,饥。吻 , , 19 74 , X 万X 刀 , 27 7 .
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