全 文 ：一步分离和纯化 ,克服了药材容易凝聚 、焦化等弊
病 。作为中药提取的新工艺 ,具有良好的应用前
景 〔9、 10〕。但超声过程中会产生热量 ,故应注意超声
器内水溶液的温度 ,以免影响得率。
传统的数理统计方法往往采用正交设计或均匀
设计 ,可同时考虑几种因素 ,寻求最佳因素水平组
合 ,但它不能在给出的整个区域上找到因素和响应
值之间的一个明确的函数表达式 ,即回归方程 〔11〕 ,
从而无法找到整个区域上因素的最佳组合和响应值
的最优值。响应面分析方法是通过中心组合实验研
究几种实验因素间交互作用的一种回归分析方法 ,
具有实验次数少 、周期短 ,求得的回归方程精度高等
优点 ,并从图形方面分析寻求最优实验考察因素值 。
目前 ,国内对紫苏属植物的开发主要集中在药
典记载品紫苏上 ,且资料背景相对齐全。而白苏作
为民间常用药材 ,至今未被药典收载 ,其主要有效成
分黄酮类化合物具有较强的抗氧化 、抗衰老 、清除和
抑制自由基等作用〔3〕 ,日本等东南亚国家已着手作
为天然化妆品原料大力开发。而浙江省白苏分布广
泛 、资源丰富 ,具有极大的市场开发和应用前景 。本
实验研究通过响应面分析 ,确定了白苏的超声提取
最佳工艺 ,可为工业化大生产提供科学的依据 。
参 考 文 献
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(2007-06-05收稿)
利用活性部位指纹图谱筛选驱虫斑鸠菊提取工艺
于鲁海 ,李燕菊 ,孙　力 ,尚　靖 ,徐建国
(新疆维吾尔自治区人民医院临床药学研究所 ,新疆乌鲁木齐 830001)
　　摘要　目的:以活性部位指纹图谱为模板 , 探讨建立驱虫斑鸠菊提取工艺的可行性。 方法:采用正交实验设
计 , 以活性部位的 HPLC指纹图谱色谱峰的变化为指标 , 应用多指标实验公式评分法考察提取工艺条件。结果:驱
虫斑鸠菊的最佳提取工艺为 ,加入 10倍量水 ,浸泡 1h,煎煮 1h,共 3次。结论:所选工艺条件具有科学 、简单 、实用
的特点。
关键词　驱虫斑鸠菊;正交实验;HPLC指纹图谱;多指标实验;公式评分法;提取工艺
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2007)12-1589-03
ApplicationofFingerprintofActivePartonExtractionTechniques
forVernoniaanthelmintica
YULu-hai, LIYan-ju, SUNLi, SHANGJing, XUJian-guo
(TheClinicalMedicalInstituteofXinjiang, Urumqi830001, China)
Abstract　Objective:ToprobeintofeasibilityofextractiontechniquesforVernoniaanthelminticausingHPLCfingerprintofactive
partasmodel.Methods:Theextractiontechniqueswerestudiedbymulti-indextestexperimentformulaevaluationandorthogonalde-
·1589·中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 12期 2007年 12月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2007.12.039
sign, whichtookchangeofpeakareainHPLCfingerprintofactivepartforVernoniaanthelminticaasindices.Results:Theoptimum
extractingprocedurewasasfolows:using10timesvolumeofwaterforeachtime, soakingonehourandthenboilingforthreetimes
sustainingonehoureach.Conclusion:Itisscientific, simpleandapplicable.
Keywords　Vernoniaanthelimintica;Orthogonaldesign;HPLCfingerprint;Multi-indextest;Experimentformulaevaluation;
Extractiontechnique
　　驱虫斑鸠菊 (VernoniaanthelminticaWild.)为
菊科一年生草本植物 ,在中国新疆 、巴基斯坦 、印度
等地已有数百年的使用历史 ,是新疆维吾尔医的习
用药材 。作为药用部位的驱虫斑鸠菊成熟果实 ,具
有清除异常粘液质 、驱虫 、消肿 、散寒止痛的作用 ,用
于治疗寒湿性胃痛 、肝病 、白癫风等症 〔1〕。经药效
筛选 ,发现其治疗白癫风的可能活性部位 ,并建立了
驱虫斑鸠菊活性部位的 HPLC指纹图谱 ,其中以活
性成分紫铆素为参照物。本实验采用正交实验设
计 ,以其活性部位的 HPLC指纹图谱色谱峰峰面积
的变化作为考察指标 ,通过多指标实验公式评分法
探讨驱虫斑鸠菊提取工艺 。
1 　材料和仪器
驱虫斑鸠菊成熟果实采自新疆阿克苏地区扎木
台乡 ,经北京医科大学药学院天然药物教研室艾铁
民教授鉴定 ,为菊科植物驱虫斑鸠菊 (Vernoniaan-
thelminticaWild.);紫铆素对照品(自制 ,纯度大于
99.0%);乙腈为色谱纯 ,其余试剂均为分析纯。
Agilent1100高效液相色谱仪 (美国安捷伦公
司);电子天平(德国 Sartorius)。
2 　方法与结果
2.1 　色谱条件 　色谱柱:ZORBAXSB-C18(4.6
mm×250 mm, 5 μm);流动相:乙腈 -0.02 mol/L磷
酸盐缓冲液梯度洗脱;流速:1.0 ml/min;检测波长:
280nm;柱温:室温;进样量:20μl。
2.2 　工艺优选　以水为提取溶媒 ,根据预试结果 ,
设计正交实验 ,从所获样品的 HPLC指纹图谱中根
据指定的色谱峰对数据进行提取 、处理 ,并将处理后
数据按多指标实验公式评分法进行评定 ,对提取工
艺进行优化 。见表 1。
　表 1 　因素水平
因素水平 浸泡时间 A(h) 溶媒量 B(ml/g) 提取时间 C(h) 提取次数 D(次)
1 2 6 1 1
2 1 8 1.5 2
3 0 10 2 3
　　供试液制备:称取驱虫斑鸠菊成熟果实 9份 ,每
份约 10 g,按 L9 (34)正交表的条件分别进行提取 ,
过滤 ,合并滤液 ,适当浓缩或稀释 ,定容至 100 ml,离
心 ,取上清液备用。
2.3　数据处理　用多指标实验公式法 〔2〕进行数据
处理 。以 Xij表示第 i次实验中第 j个指标的测定值
(即 Xij表示正交实验的第 i次实验的色谱图中第 j
个色谱峰峰面积值 ,其中在正交实验各次实验的色
谱图中所选定的色谱峰是根据活性部位指纹图谱而
确定的 ,它们相对应的色谱峰的相对保留时间是一
致的), i=1, 2, … , n;j=1, 2, … , k。首先以各指标
的最大值(即各色谱图中同一相对保留时间的各色
谱峰中峰面积值最大者)作为参照 ,对同一指标各
数据进行标准化处理 , Dij表示第 j个指标下的第 i
个测定值的标准化数据 。
Dij=100×Xij/(Xj)max [ 1]
　　再按各指标的重要程度和各组数据的相对标准
差确定加权系数。以 SDj表示第 j个指标下 Dij的标
准差 ,以 RSDj表示第 j个指标的相对标准差 ,则根
据各指标相对标准差赋权为 RSD/RSDj,其中 RSD
为指定指标(参照物紫铆素)的相对标准差;根据各
指标的重要程度赋权为 Ej,由于不能确定各组分对
药效的贡献大小 ,故认为指纹图谱中的各个色谱峰
(群)所代表的各组分(群)都很重要 ,均设为 1。结
合各指标的重要程度和各组数据的相对标准差确定
的权重系数为:
Fj=Ej×RSD/RSDj [ 2]
j=1, 2, … , k
因此 ,多指标实验公式为:
Pi=΢(Fj×Dij)/΢Fj　i=1, 2, … , n;j=1, 2, … , k [ 3]
[ 3]式计算所得的兼顾各指标综合效应的公
式 ,得分越大越好。结果见表 2 ,方差分析见表 3。
直观分析表明:在所选因素水平范围内 ,按多指
标实验公式评分法判定 ,提取次数对驱虫斑鸠菊指
纹图谱所指定的 9个色谱峰 (群)峰面积变化影响
最大 ,其余依次为溶媒量 、浸泡时间和提取时间。以
因素 C为误差项进行方差分析 ,结果表明:因素 D
为主要影响因素(P<0.01),其次为因素 B和因素
A。综合考虑 ,选择最佳提取条件为 A2B3C1D3 ,即加
10倍量水 ,浸泡 1 h,煎煮 1 h,共 3次 。
3　讨论
中药化学成分的组成和作用机理均较复杂 ,依
靠单一指标进行工艺优化所获物质组分未必能达到
·1590· 中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 12期 2007年 12月
　表 2 　多指标试验公式分析
No. 因素A B C D P值
1 1 1 1 1 0.497
2 1 2 2 2 0.812
3 1 3 3 3 0.867
4 2 1 2 3 0.817
5 2 2 3 1 0.584
6 2 3 1 2 0.846
7 3 1 3 2 0.803
8 3 2 1 3 0.858
9 3 3 2 1 0.631
k1 2.177 2.117 2.201 1.711
k2 2.246 2.254 2.260 2.461
k3 2.292 2.344 2.254 2.543
R×3 0.115 0.227 0.059 0.831
　表 3 　公式评分方差分析表
因素 离均差平方和 自由度 均方 F值 P值
A 0.0023 2 0.0011 3.244 0.2356
B 0.0087 2 0.0044 12.393 0.0747
D 0.1396 2 0.0698 198.62 0.005
误差(C) 0.0007 2 0.0004
按中医理论指导的用药目的。中药活性部位指纹图
谱的建立可能实现对其物质组分的全面控制 ,若能
构建正确合理的谱效关系 ,则以所建立的指纹图谱
作为中药活性物质工艺筛选的引导对象 ,所得物质
可能更符合中医整体观念下的用药目的 ,因此利用
所建立的指纹图谱作为分析对象进行工艺筛选所获
物质组成可能比单一指标筛选所获物质更能保证中
药临床使用的有效性。
以指纹图谱为指标进行驱虫斑鸠菊制备工艺筛
选 ,根据筛选制备工艺时各阶段的目的不同 ,考察指
标的侧重点有所不同。如在提取条件的筛选中 ,指
纹图谱所反映的色谱峰越大越好 ,此时较少考虑提
取条件对指纹图谱未反映的色谱峰的影响 ,但在后
续的纯化处理阶段 ,在尽量减少与指纹图谱色谱峰
一致的色谱峰峰面积损失的前提下 ,主要考虑指纹
图谱未反映色谱峰的消除 ,以达到采用驱虫斑鸠菊
制备工艺的产品 HPLC图谱与活性部位的指纹图谱
尽量吻合的目的。
本实验利用现有条件建立的指纹图谱 ,未必能
全面反映活性部位的物质基础 ,但以其指纹图谱所
反映的色谱峰(群)作为观察对象对驱虫斑鸠菊提
取工艺进行筛选 ,在实际应用中应具有一定的借鉴
意义 。
参 考 文 献
[ 1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国
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[ 2] 韩可勤 , 杨静化 ,刘晓东 .药学应用概率统计.南京:东
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(2007-04-19收稿)
基金项目:湖北省自然科学基金创新群体项目(2006ABC014);武汉工程大学校长基金(2006038)＊通讯作者:池汝安(1959-), 男 , 汉族 , 博士 ,现任湖北省 “楚天学者 ”计划特聘教授 , 主要从事分离科学与技术研究工作;Tel:027-
87194500;E-mail:rac@mail.wit.edu.cn。
微波辅助提取土茯苓总黄酮
刘　俊 ,黄少伟 ,张越非 ,池汝安＊
(武汉工程大学化工与制药学院　湖北省新型反应器与绿色化学工艺重点实验室 ,湖北武汉 430073)
　　摘要　目的:筛选土茯苓总黄酮提取的优化工艺。方法:应用微波辅助提取技术 , 通过单因素和正交实验考察
提取时间 、微波功率 、乙醇浓度 、固液比和提取温度对土茯苓总黄酮提取率的影响。结果:提取土茯苓总黄酮的优
化工艺条件为:提取时间 5 min,微波功率 600W,乙醇浓度 60%, 固液比 1∶30,提取温度 80℃。结论:优化后的工艺
稳定 , 微波辅助提取土茯苓总黄酮提取率高 、时间短。按照优化后工艺条件实验 , 土茯苓总黄酮提取率 、总黄酮得
率和粗黄酮粉中总黄酮含量分别为 93.2%、2.66%和 32.6%。
关键词　微波辅助提取;土茯苓;总黄酮
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2007)12-1591-05
·1591·中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 12期 2007年 12月