全 文 ：表 2　9例住院患者服药后的血药浓度
Tab 2　The plasma concentr ation of 9 pa tients af te r or al ad-
ministration o f clozapine and ziprasidone
编号 性别 服药量 /mg d- 1 实测浓度 /μg L- 1氯氮平 齐拉西酮 氯氮平 齐拉西酮
1 男 100 40 176. 9 69. 2
2 女 75 40 112. 7 96. 3
3 男 175 20 259. 6 41. 5
4 男 150 20 175. 1 65. 7
5 女 125 40 267. 6 118. 2
6 女 150 20 327. 7 61. 4
7 男 300 20 586. 3 77. 2
8 男 150 40 134. 2 82. 1
9 女 125 20 221. 5 87. 6
[作者简介] 杨安金 ,副主任中药师,电话:0791-7117158 , E-m ail:y anganjin16@ 163. com
收峰 ,因此选择 254 nm 为检测波长。本实验采用的方法具
有操作简单 、成本低廉等特点;绝对回收率>70%, 相对回收
率接近 100%, 日内 、日间精确度 RSD均<10%, 符合临床药
动学试验指导原则关于生物样品分析方法的基本要求 ,结果
可靠。
在本实验过程中曾分别使用乙醚 、正乙烷 、醋酸乙酯和
三氯甲烷为提取剂 ,提取率都达不到要求。而且单采用醋酸
乙酯提取时血浆容易出现乳化现象 , 后发现醋酸乙酯与二氯
甲烷(80∶20)作提取剂 , 提取率较理想 , 且避免了血浆乳化。
采用此混合提取剂一次提取 ,后用甲醇定容进行紫外色谱分
析 ,所取血浆仅为1 . 0 mL , 进样量 15 μL 便达到实验要求 , 既
提高了灵敏度又减少了样品杂质 ,保证色谱柱能进行大量样
品的连续分析。
在临床精神科 , 对于难治性的精神分裂症或情感障碍 ,
单一用药往往很难控制患者症状 , 而采用联合用药 , 治疗效
果显著。抗精神病药物治疗窗往往相对较窄 , 不良反应大 ,
因此对它们进行“治疗药物监测(TDM)” , 寻找疗效最佳 、不
良反应最轻的适宜血药浓度 ,具有积极的临床意义。虽然氯
氮平血药浓度与患者临床用药剂量呈显著正相关 , 但从病例
资料来看也存在一定程度上的个体差异 , 单一患者的治疗剂
量不一定适用于所有患者 , 应密切监控其血药浓度 , 做到用
药剂量个体化[ 1] 。氯氮平与齐拉西酮单个药物的 TDM 国
内已有报道[ 5 ,7] ,相比之下 ,本实验建立同时测定人血浆中氯
氮平与齐拉西酮浓度的方法 , 并应用临床检测 , 方法学的实
用性更好;另外 , 国外有报道同时测定氯氮平与齐拉西酮等
几种抗精神病药物的方法[ 8] ,但在动物体内进行 , 与本实验
方法并无可比性。
参考文献:
[ 1] 　刘向荣 ,刘文 ,戴迎春 ,等. 高效液相色谱法同时测定人血清中
氯氮平 、奋乃静和氟哌啶醇浓度[ J] .中国医院药学杂志 , 2010 ,
30(22):1917-1919.
[ 2] 　S tahl SM , Shayegan DK. Th e psychopharmacology of zip rasi-
done:receptor-binding p ropert ies and roalw orld peychiatic p rac
-t ice[ J] . J C lin Psy chiat ry , 2003 , 164(Suppl 19):6-12.
[ 3] 　H ow ard H , Prakash C , S eeger TF. Ziprasidone hydrochloride
[ J] . Drugs of the Future , 1994 , 19:560-563.
[ 4] 　Miceli J J , Wilner KD , Hansen RA , et a l . S ingle and mu ltiple
dos e p harm acokinetics of ziprasidone under n on-f asting condi-
t ions in heal thy male volu nteers[ J] . Briti sh J Clin Ph armacol ,
2000 , 49(supp1 1):5-13.
[ 5] 　吴岚 , 朱军 , 刘伟忠. 高效液相色谱法测定人血浆中氯氮平浓
度[ J] . 医药导报 , 2008 , 27(4):386-388.
[ 6] 　Mercolini L , Bugamelli F , Kenndler E , et a l . Sim ultaneous de-
t ermination of the ant ipsychotic drug s levomep rom azine and
clozapine and th eir m ain metabolit es in human plasm a by a
HPLC-UV m ethod wi th solid-phase ext raction[ J] . J Ch rom a-
t ogr B Analyt Technol Biomed Life S ci , 2007 , 846(1-2):273-
480.
[ 7] 　何海霞 , 周远大 , 唐竞. 高效液相色谱法测定人血浆中齐拉西
酮浓度[ J] . 药物分析杂志 , 2006 , 26(6):752-754.
[ 8] 　Zhang G , Terry AV J r , Bartlet t MG. Liquid chromatog raphy /
tandem mas s spect romet ry method for the sim ultaneous deter-
minat ion of olanzapine , ri speridone , 9-h ydroxyrisperidone ,
clozapine , haloperidol and ziprasidone in rat plasma[ J] . Rapid
Comm un Mass Spect rom , 2007 , 21(6):920-928.
[ 9] 　Zhang G , T erry AV Jr , Bartlet t MG. Simu ltaneous determina-
t ion of fi ve ant ipsy chotic drugs in rat p lasma by high perform-
ance liquid chromatog raphy wi th ult raviolet detect ion [ J] . J
Ch romatogr B Analy t Tech nol Biomed Life Sci , 2007 , 856(1-
2):20-28.
[ 10] 刘伟忠 , 陈清霞 , 石红梅. 高效液相色谱法测定人血浆中舍吲
哚浓度[ J] .中国医院药学杂志 2010 , 30(18):1570-1572.
[收稿日期] 2010-12-21
高效液相色谱法同时测定长托菝葜中
落新妇苷和黄杞苷的含量
杨安金1 ,孙栋梁2 ,郭晓秋2 ,吴蜀瑶1 　(1 . 江西中医学
院 ,江西 南昌 330004;2 .江西中医学院附属医院 ,江西 南昌
330006)
[ 摘要] 　目的:建立同时测定长托菝葜药材中落新妇苷和黄
杞苷的 HPLC 测定方法。 方法:采用 Waters SUNfireT M
ODS(4 . 6 mm×250 mm , 5μm)柱 ,以甲醇-水-磷酸溶液(35∶
65∶0. 1) 为流动相 , 流速 1. 0 mL min- 1 ,柱温 35 ℃, 检测波
长为 290 nm。结果:落新妇苷和黄杞苷分别在 0 . 0510 ～
1 . 020 μg , 0 . 0580 ～ 1. 160 μg 范围内呈良好的线性关系 , 落
新妇苷和黄杞苷对照品平均加样回收率分别为 101 . 21%
(RSD=1 . 16%)和99 . 36%(RSD=1 . 35%)。结论:建立的方
法可用于长托菝葜药材的质量控制。
[ 关键词] 　长托菝葜;落新妇苷;黄杞苷;高效液相色谱法
[ 中图分类号] R954　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-5213
(2011)11-0946-03
　　长托菝葜 Smilax f erox Wall. ex Kunth. 的干燥根茎收
载于《四川省中草药标准》1987 年版“萆薢”项下收载品种 ,
味甘 、酸 , 性平 , 归肝肾经 。具有祛风利湿 , 解毒消肿之功
效[ 1] 。本品由于外形上与商品药材菝葜非常相似 , 并且块
根较大 , 又称为“大菝葜” , 在民间与菝葜药材等同入药 , 并
作为菝葜的一个重要习用品种。为了寻找其有效成分 , 阐
明药效物质基础 , 建立长托菝葜药材的多指标质量控制标
准 ,更有效地控制长托菝葜药材质量 , 笔者对长托菝葜根茎
进行了化学成分研究 ,分离得到一系列二氢黄酮苷类成分 ,
946 中国医院药学杂志 2011年第 31卷第 11期 Chin H osp Pharm J , 2011 Jun , Vol 31 , No. 11
其中落新妇苷和黄杞苷为其中所得量较大的成分[ 2] 。二氢
黄酮苷类成分是菝葜其抗炎 、镇痛的活性成分[ 3] , 周艳林
等[ 4]也用 H PLC 测定了菝葜属 4 种植物中落新妇苷的含
量 ,中国药典 2010 年版菝葜项下“含量测定”也是使用落新
妇苷和黄杞苷[ 5] , 考虑到长托菝葜在民间等同菝葜入药 , 故
建立以落新妇苷和黄杞苷作为定量指标的测定方法 , 对建
立长托菝葜药材质量标准并用于控制其质量有重要意义。
1　材料
Water s2695高效液相色谱仪 , Wate rs996 二极管矩阵检
测仪 , Empowe r色谱工作站 , C18色谱柱(Waters SUNfireT M
ODS 250 mm×4 . 60 mm , 5 μm , Wate rs 公司);落新妇苷 、黄
杞苷对照品(自制 , 纯度>98%,归一化法);长托菝葜药材采
自江西泰和 ,经江西中医学院中药鉴定教研组葛菲教授鉴定
为长托菝葜 Smi la x. f erox Wall . ex Kunth 的干燥根茎。甲
醇 、乙腈(色谱纯);水为超纯水;磷酸(分析纯)。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件　色谱柱为 Wate rs S UN fireTM ODS 柱(4 . 6
mm×250 mm , 5 μm), 流动相:甲醇-水-磷酸(35∶65∶0. 1),流
速:1 . 0 m L min- 1 ,柱温:35 ℃, 检测波长:290 nm。 上述色
谱条件下 ,对照品及样品的 HPLC 色谱图见图 1。
图 1　对照品及样品的 HPLC色谱图
A.落新妇苷和黄杞苷对照品;B.样品;1-落新妇苷;2-黄杞苷
Fig 1　HPLC Ch rom atograms of reference and sample
A. as tilbin and engeletin;B. sam ple;1-ast ilbin;2-engeletin
2. 2　对照品溶液的制备　精密称取置五氧化二磷干燥器中
干燥至恒重的落新妇苷 、黄杞苷适量 , 加甲醇制成每 1 mL 分
别含 20 μg 的混合溶液 ,即得。
2. 3　供试品溶液的制备　取本品粉末(过 2 号筛)约0 . 5 g ,
精密称定 ,置具塞锥形瓶中 , 精密加入甲醇 50 m L , 密塞 ,摇
匀 ,称定 , 超声(功率 250 W ,频率 40 kHz)提取 45 min ,放冷 ,
称定 ,用甲醇补足减失的质量 , 摇匀 ,滤过 , 取续滤液 ,即得。
2. 4　线性关系的考察　取落新妇苷(0. 102 0 g L- 1)及黄杞
苷(0 . 116 0 g L - 1)的对照品混合溶液 , 吸取上述混合溶液
0 . 5 , 1 , 2 , 3 , 5 mL 置 10 m L 量瓶中 , 加甲醇至刻度 , 摇匀 ,即
得。吸取上述各溶液分别进样 10 μL , 按含量测定项下的方
法对该标准溶液进行测定 , 记录落新妇苷和黄杞苷的峰面
积 ,以进样量为纵坐标(Y), 其峰面积为横坐标(X), 分别绘
制标准曲线。 落新妇苷进样量在0 . 0510 ～ 1. 020 μg 的范围
内标准曲线回归方程为:Y =4. 469×10-7 X +0 . 031 91(r=
0 . 999 7),黄杞苷进样量在0 . 0580 ～ 1. 160 μg 的范围内标准
曲线回归方程为:Y = 5. 906 × 10- 7 X - 0 . 002 22( r =
0 . 999 7),线性关系良好 , 符合要求。
2. 5　精密度试验　精密吸取同一批供试品溶液 , 连续进样 6
次 ,测定峰面积 , 落新妇苷和黄杞苷峰面积的 RSD 分别为
0 . 65%和0 . 30%。
2. 6　稳定性试验　称取长托菝葜(江西泰和)药材粉末(过 2
号筛)约0 . 5 g , 精密称定 , 按“2 . 3”项下方法制备供试品溶
液 ,分别于 0 , 1 , 3 , 6 , 12 , 18 , 24 h 内连续进样分析 ,测得落新
妇苷 、黄杞苷含量的 RSD 分别为 1. 51%和 1 . 20%。结果表
明处理后的供试品溶液在室温放置 24 h 内稳定。
2. 7　重复性试验　称取同批号的长托菝葜药材粉末(过 2
号筛)约0 . 5 g共 6 份 ,精密称定 , 按“ 2. 3”项下方法制备供试
品溶液 ,测得落新妇苷和黄杞苷平均含量分别为1 . 18 mg
g -1和2 . 68 mg g - 1 , RSD分别为0 . 56%和 0. 30%。
2. 8　加样回收率　精密称取已知含量的长托菝葜粉末 9 份
(落新妇苷含量为 1. 18 mg g - 1 , 黄杞苷含量为 2 . 68 mg
g -1),每份约 0. 25 g , 分别置具塞锥形瓶中 , 每 3 份一组 , 分
别精密加入质量浓度为0 . 258 4 , 0 . 320 5 , 0 . 380 6 g L - 1的
落新妇苷对照品溶液各1. 0 m L;再分别依次加入精密计量的
质量浓度为0 . 443 8 , 0 . 552 6 , 0 . 658 2 g L - 1黄杞苷对照品
溶液各1 . 0 mL ,挥干甲醇 , 按“ 2 . 3”项下的操作制备供试品溶
液 ,测定含量并计算回收率。本方法中落新妇苷和黄杞苷对
照品平均加样回收率分别为 101 . 21%(RSD 为 1 . 16%)和
99. 36%(RSD 为1. 35%), 回收率良好 ,符合规定要求。结果
见表 1。
2. 9　不同产地长托菝葜样品含量测定结果　按“ 2. 3”项下
方法处理测定不同产地长托菝葜中落新妇苷和黄杞苷的含
量 ,测定结果见表 2。
3　讨论
采用高效液相色谱法同时测定了长托菝葜药材中落新
妇苷和黄杞苷的含量 ,为长托菝葜这味民间习用药材质量控
制提供了依据。不同产地长托菝葜中落新妇苷和黄杞苷的
含量总和平均为1. 01 mg g -1以上 , 考虑到产地 、贮存条件 、
取样均一性等因素的原因 , 含量限度宜下浮 20%, 故其含量
限度宜设在0. 80 mg g -1为宜。
表 1　落新妇苷和黄杞苷加样回收率
Tab 1　Recovery o f astilbin and enge letin
编号 样品质量
/g
含量 /mg 加样量 /m g 检测量 /mg 回收率 /% 平均回收率 /% RSD /%
N E N E N E N E N E N E
1 0. 250 5 0. 295 6 0.671 3 0. 258 4 0. 443 8 0. 558 3 1. 121 7 101. 67 101. 48
2 0. 250 7 0. 295 8 0.671 9 0. 258 4 0. 443 8 0. 561 1. 112 3 102. 62 99. 24
3 0. 256 2 0. 302 3 0.686 6 0. 258 4 0. 443 8 0. 566 5 1. 134 102. 24 100. 81
4 0. 242 8 0. 286 5 0.650 7 0. 320 5 0. 552 6 0. 604 2 1. 185 99. 13 96. 69
5 0. 240 2 0. 283 4 0.643 7 0. 320 5 0. 552 6 0. 606 8 1. 190 7 100. 89 98. 98 101. 21 99. 36 1. 16 1. 35
6 0. 239 8 0. 283 0 0.642 7 0. 320 5 0. 552 6 0. 608 1. 1939 101. 42 99. 75
7 0. 229 4 0. 270 7 0.614 8 0. 380 6 0. 658 2 0. 653 9 1. 266 5 100. 69 99. 01
8 0. 224 2 0. 264 6 0.600 9 0. 380 6 0. 658 2 0. 654 1 1. 254 5 102. 35 99. 31
9 0. 231 8 0. 273 5 0.621 2 0. 380 6 0. 658 2 0. 653 8 1. 272 8 99. 91 98. 99
注:N代表落新妇苷 , E代表黄杞苷
947 中国医院药学杂志 2011年第 31卷第 11期 Chin H osp Pharm J , 2011 Ju n , Vol 31 , No. 11
表2　不同产地长托菝葜中落新妇苷和黄杞苷的含量测定结
果
Tab 2 　Contents of astilbin and engeletin in Smilax f erox
from diffe rent a rea of g rowth
产地 采集时间
含量 /mg g - 1
落新妇苷
/m g g- 1
黄杞苷
/mg g -1
含量
/m g g- 1
江西泰和 20080902 0. 45 0. 65 1. 10
江西泰和 20080916 0. 36 0. 62 0. 98
江西泰和 20090503 0. 34 0. 58 0. 92
江西泰和 20090604 0. 36 0. 52 0. 88
江西赣州 20090701 0. 44 0. 54 0. 98
江西赣州 20091005 0. 46 0. 68 1. 14
湖北恩施 20091006 0. 32 0. 77 1. 09
贵州黄果树 20091103 0. 37 0. 66 1. 03
广西百色 20091107 0. 34 0. 66 1. 00
重庆万县 20091108 0. 42 0. 56 0. 98
　　本检测方法操作简单 ,重现性好;色谱分离时 , 在流动相
中加入适量的磷酸 , 能使相似组分有较好的峰形和分离度。
通过对0. 05%、0. 10%和0. 15%浓度的磷酸对含量测定影响
对比来看 ,磷酸浓度在 0. 05%时 , 落新妇苷和黄杞苷峰对称
因子比磷酸浓度0 . 10%时差 , 考虑到酸度本身对 ODS 柱子
的影响 ,选用磷酸浓度为0 . 10%较为适宜。
通过波长扫描 ,波长的微小变化不会对落新妇苷和黄杞
苷含量产生影响。落新妇苷和黄杞苷的最大吸收波长分别
为 292 nm 和 290 nm , 很接近 , 故选择 290 nm 作为测定波
长。
我们曾尝试用乙腈-水-磷酸(15∶85∶0. 1)这个流动相进
行过试验研究 ,由于其出峰时间较快 , 基线较为不平 , 对落新
妇苷和黄杞苷的含量测定有较大影响。
参考文献:
[ 1] 　四川省卫生厅.四川省中药材标准[ M] . 1987:229-231.
[ 2] 　杨安金 ,郭晓秋.长托菝葜化学成分研究[ J] . 中国中药杂志 ,
2010 , 35(17):2293-2294.
[ 3] 　舒孝顺 , 高中洪 , 杨祥. 菝葜乙酸乙酯提取物对大鼠和小鼠的
抗炎作用[ J] . 中国中药杂志 , 2006 , 31(3):239-242.
[ 4] 　周艳林 ,钟小清 ,严海 ,等. HPLC测定菝葜属 4种植物中落新
妇苷的含量[ J] . 中国中药杂志 , 2008 , 33(8):959-961.
[ 5] 　中国药典.一部[ S] . 2010:290.
[ 收稿日期] 2010-11-10
[作者简介] 戴助 ,男 ,本科 ,副主任药师 ,电话:0716-8113971 , E-m ail:daizh u- 1226@sina. com
阴道用塞克硝唑温敏型原位凝胶的研制
戴助 ,蒋学斌　(荆州市第一人民医院 , 湖北 荆州 434100)
[ 摘要] 　目的:以温敏性聚合物泊洛沙姆 407 和黏附性聚合
物羟丙基甲基纤维素为载体制备阴道用塞克硝唑温敏型原
位凝胶 ,使凝胶在阴道壁原位凝胶化并迅速黏附于黏膜表
面 ,延长药物在黏膜表面吸收时间 。方法:采用单因素考察
泊洛沙姆 407 浓度及药物对凝胶相变温度的影响 , 确定最佳
处方;采用冷法制备载塞克硝唑温敏型原位凝胶 , 考察凝胶
的流变学特性;采用紫外分光光度法测定原位凝胶中药物的
含量。结果:当泊洛沙姆 407 浓度为 20%时 ,载塞克硝唑温
敏型凝胶的胶凝相变温度为(31. 7±0 . 5)℃, 可满足阴道用
药后迅速相变为凝胶的条件 ,流变学行为显示塞克硝唑阴道
凝胶的黏度随温度的变化均呈 S 形曲线 , 相变温度与转子法
测得值相近。含量测方法在4. 99 ～ 24. 96 mg L - 1范围内线
性关系良好 ,平均回收率为98 . 47%, RSD 为2. 73%(n=6)。
结论:阴道用塞克硝唑温敏型原位凝胶制备工艺简单 , 能在
生理温度下迅速原位凝胶化 , 建立的含量测定方法简便可
靠。
[ 关键词] 　温敏;原位凝胶;塞克硝唑;阴道给药
[ 中图分类号] R954　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-5213
(2011)11-0948-03
　　阴道给药方式作为一种非侵入性的给药途径因具有局
部药物浓度大 ,不良反应小等优点广泛用于妇科感染性疾病
的治疗 ,其常用剂型包括栓剂 、片剂 、凝胶剂 、软膏剂 、洗剂
等。但常规阴道给药制剂因阴道的自身净化作用存在局部
作用时间短 ,药物需反复多次给药才能达到治疗效果。基于
泊洛沙姆的原位凝胶是一种具有快速温度响应行为和较强
黏附作用的水凝胶 , 其在低温时是低黏度流体 , 经阴道给药
后处于体温时 ,可迅速转变成一种三维网络结构 , 黏度迅速
增加 ,紧密黏着吸收部位定位于局部 , 延长药物滞留时间提
高药效[ 1] 。
塞克硝唑(Secnidazole)属于 5-硝基咪唑类药物 , 具有良
好的抗厌氧菌和抗滴虫作用 , 目前国内已有片剂 、胶囊剂和
注射剂上市。塞克硝唑与其他 5-硝基咪唑药物如甲硝唑 、替
硝唑相比 , 具有抗微生物活性较强 、半衰期长 、不良反应少
等特点 ,在治疗急性厌氧菌感染和滴虫阴道炎明显优于其同
类药物[ 2] 。本文以温敏性聚合物泊洛沙姆 407 和黏附性聚
合物羟丙基甲基纤维素(H PMC)为载体将塞克硝唑制成阴
道用凝胶剂 ,采用原位凝胶技术 , 使凝胶在阴道壁原位凝胶
化并迅速黏附于黏膜表面 , 延长药物在黏膜表面吸收时间 ,
提高药物疗效。
1　材料
紫外分光光度计(UV - 1901 , 北京普析通用);数字显示
黏度计(NDJ- 8S ,上海精密科学仪器有限公司)。塞克硝唑原
料及对照品(美国施瑞科技武汉有限公司 ,原料含量98 . 00%,
批号WH20080605;对照品含量为99. 05%, 批号 3B2 - 0220);
泊洛沙姆 407(P407)(德国巴斯夫公司);羟丙基甲基纤维素
(HPMC50)(日本信越);其他试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　塞克硝唑温敏型原位凝胶的制备　根据文献[ 3] 报道
和预实验确定采用泊洛沙姆 407 和黏附性聚合物羟丙基甲
基纤维素(HPMC50)为载体。以接近阴道生理环境的酸性
柠檬酸缓冲液为介质 ,采用冷法[ 3]制备塞克硝唑阴道用温敏
型原位凝胶。首先在 4 ℃下将 H PMC50(0 . 2%)缓慢加入到
柠檬酸缓冲液(0 . 1 mol L- 1 , pH 4. 0)中 , 温和搅拌至均匀;
然后加入泊洛沙姆 407 , 搅拌使其分散均匀 ,置于 4 ℃冰箱中
直至聚合物完全溶胀。将塞克硝唑(2. 5%)直接溶解于含有
0 . 2%H PMC 的泊洛沙姆 407 溶液中 , 温和搅拌至完全溶解 ,
得无色透明的塞克硝唑凝胶。
2. 2　原位凝胶相变温度的测定　采用搅拌子转动法测定相
变温度 , 将温敏凝胶溶液和搅拌子装入烧杯中 , 插入温度计
948 中国医院药学杂志 2011年第 31卷第 11期 Chin H osp Pharm J , 2011 Jun , Vol 31 , No. 11