全 文 ：表２　秋水仙碱贴剂透皮释药拟合 Ｈｉｇｕｃｈｉ方程参数（ｎ＝３）
Ｔａｂ　２　Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｏｆ　ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｉｎｅ　ｐａｔｃｈｅｓ　ｉｎ
ｔｈｅ　ｆｉｔｔｉｎｇ　Ｈｉｇｕｃｈｉ　ｅｑｕａｔｉｏｎ（ｎ＝３）
贴剂类型 体外透皮方程 ｒ
Ｊ
／μｇ·ｃｍ－２·ｈ－１）
Ｑｓ
／μｇ·ｃｍ－２
含１０％月桂氮芯卓
酮醇质体贴剂
Ｑ＝４．２６０ｔ１／２
＋６．１８３
０．８８６　９　 ４．２６±０．１８　 ４．０３±０．１２
含５％月桂氮芯卓
酮醇质体贴剂
Ｑ＝３．９１８ｔ１／２
＋４．７９３
０．９３３　５　 ３．９２±０．１２　 ３．６４±０．０９
不含月桂氮芯卓
酮醇质体贴剂
Ｑ＝２．６４１ｔ１／２
＋５．６７６
０．８９９　４　 ２．６４±０．１６　 ２．９４±０．１２
不含醇质体贴剂 Ｑ＝２．０８１ｔ
１／２
＋３．４４３
０．９２１　３　 ２．０８±０．１０　 １．６４±０．０８
小分子药物。文献［６］报道与秋水仙碱普通脂质体
相比，其醇质体粒径较小，包封率高，结构稳定，有更
好的柔性，可进入皮肤深层，显著提高药物透皮率，
是经皮给药良好的药物载体。
　　本课题组早期研究制备的秋水仙碱醇质体为药
物载体，不能直接应用于临床，故制成该药醇质体的
凝胶剂型［３］。本实验又制备了该药醇质体的压敏胶
贴剂，改善了凝胶剂经皮给药时易沾染衣物、剂量不
易控制以及长期给药暴漏时易影响稳定性的缺点。
该贴剂按文献［５］中正交优化的压敏胶处方，同时验
证了与该药醇质体组合后贴剂的实际初粘力和持粘
力，均符合中国药典２０１０年版的要求。
该贴剂以压敏胶骨架为载体、涂布法制备后，室
温放置２０　ｍｉｎ，以利于贴剂中该药醇质体与压敏胶
骨架材料更好的接触、匀化，还有利于药物混合溶液
与背衬层聚和保护层的充分复合，消除涂布时可能
形成的空缺和不平整；５０℃干燥２０　ｍｉｎ，有利于贴
剂成型。本实验考察了不同温度和时长贴剂中溶剂
损失的问题，发现室温放置２０　ｍｉｎ、５０℃干燥２０
ｍｉｎ条件较适宜，仅有很少量醇溶剂损失，这可能是
压敏胶骨架结构包裹药物载体，在一定程度上阻止
了溶剂大量挥发。因此，不影响醇质体药物载体的
基本构成。
为降低异丙醇对皮肤较大的刺激性，实验用刺
激性较低的乙醇代替异丙醇制备醇质体，但乙醇过
敏者须慎用，结果对醇质体包封率的降低影响较小，
包封率在５５％以上，醇质体含药为３．５０　ｍｇ·ｍＬ－１。
贴剂在离体皮肤扩散时，由于含药量有限，随着药物
逐渐释放，贴剂中药量降低，药物浓度梯度也随之减
小，其透皮释药速率符合 Ｈｉｇｕｃｈｉ方程，这说明贴剂
中骨架型基质可有效控制药物释放过程。由图２，３
可见，不含醇质体贴剂在４８　ｈ内药物累积释放率为
４４．２９％，而不含月桂氮芯卓酮与含５％，１０％月桂氮
芯卓酮的醇质体药物累积释放量分别为６２．６９％，
８０．２９％，８５．１４％，药物透皮释放量明显增加（Ｐ＜
０．０５），同样，后三者的药物累积释放速率也明显增
加（Ｐ＜０．０５），上述结果说明醇质体对药物起到了
和月桂氮芯卓酮类似的透皮吸收促进作用。同时，本
实验选择预试透皮率差异明显的５％和１０％月桂氮
芯卓酮，结果证明增加该贴剂中月桂氮芯卓酮用量可提
高药物透皮释放速率（Ｐ＜０．０５），且１０％月桂氮芯卓
酮处方的透皮率提高作用最好，但月桂氮芯卓酮用量
较大时会使皮肤有红肿、疼痛等刺激作用［７］，具体用
量需进一步结合药理等考察。
参考文献：
［１］　药迅快递．ＦＤＡ批准秋水仙碱用于治疗急性痛风和地中海热
［Ｊ］．临床合理用药杂志，２００９，２（１７）：１７．
［２］　曹茂堂，侯均，谢腾芳，等．复方秋水仙碱凝胶剂的制备及临床
观察［Ｊ］．中国医院药学杂志，２００７，２７（１０）：１４４５．
［３］　杨飞，李芳，焦海胜，等．秋水仙碱醇质体凝胶的制备及质量控
制［Ｊ］．中国药房，２００９，２０（１）：５０－５２．
［４］　杨效宇，赵佩，李兰兰，等．两种秋水仙碱醇质体的制备及评价
［Ｊ］．中国药学杂志，２０１０，４５（１１）：８４４－８４８．
［５］　刘星言．川芎嗪醇质体控释贴片的研究［Ｄ］．长沙：中南大学，
２００９．
［６］　杨飞，李芳，焦海胜，等．秋水仙碱醇质体的制备及体外经皮渗
透研究［Ｊ］．中国药学杂志，２００９，４４（５）：３４９－３５２．
［７］　崔福德．药剂学［Ｍ］．６版．北京：人民卫生出版社，２００８：４７２．
［收稿日期］２０１１－１０－２８
［基金项目］国家自然科学基金项目（编号：３０８７０２５６）　［作者简介］谢长，男，硕士，电话：１５２７１８６１３７８，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉｅｃｈａｎｇ１９８６１００８＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
［通讯作者］刘焱文，男，教授，博士生导师，电话：０２７－８８９２０８３４，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｗｌｉｕ２００８＠１６３．ｃｏｍ
高效液相色谱波长切换法测定菝葜有效部位中４种指标成分的含量
谢长１，沈婵娟１，廖鹏程１，陈树和１，２，邹鹏程３，叶晓川１，刘焱文１　 （１．湖北中医药大学中药资源与中药复方教育部
重点实验室，湖北 武汉４３００６１；２．湖北省中医院药学部，湖北 武汉 ４３００６１；３．湖北人福药业股份有限公司，湖北 咸宁
４３７０００）
［摘要］　目的：建立 ＨＰＬＣ波长切换法同谱测定菝葜有效部位中落新妇苷、黄杞苷、白藜芦醇和槲皮素４种指标成分的含量
测定方法。方法：采用高效液相色谱法，Ｋｒｏｍａｓｉｌ　１００－５Ｃ１８（２５０　ｍｍ×４．６　ｍｍ，５μｍ）色谱柱，以乙腈－０．１％磷酸水溶液为流动
相进行梯度洗脱，流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温３０℃，多波长切换时间序列采样：０～４５　ｍｉｎ为２９０　ｎｍ；４５～５７　ｍｉｎ为３０３　ｎｍ；５７
·９２９·中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１２期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｎ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１２
DOI:10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2012.12.003
～８０　ｍｉｎ为３７０　ｎｍ。结果：落新妇苷在０．０３７～０．３７０μｇ、黄杞苷在０．０１１～０．１１０μｇ、白藜芦醇在０．３０２～３．０２０μｇ和槲皮
素在０．０４２～０．４２０μｇ范围内与峰面积呈良好的线性关系（ｎ＝６）；４种成分的平均加样回收率分别为９７．３２％，９７．５５％，９８．
３３％，９７．１２％；ＲＳＤ分别为１．７％，２．１％，１．５％，１．９％。结论：本法简便、准确，所测结果稳定、重现性好，可用于菝葜有效部
位的质量控制。
［关键词］　菝葜有效部位；落新妇苷；黄杞苷；白藜芦醇；槲皮素；波长切换法
［中图分类号］Ｒ９２７．２　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３（２０１２）１２－０９２９－０４
ＨＰＬＣ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｓｗｉｔｃｈｉｎｇ　ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｆｏｒ　４　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｉｎｄｅｘ　ｃｏｍ－
ｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｓｍｉｌａｘ　ｃｈｉｎａ　Ｌ．
ＸＩＥ　Ｃｈａｎｇ１，ＳＨＥＮ　Ｃｈａｎ－ｊｕａｎ１，ＬＩＡＯ　Ｐｅｎｇ－ｃｈｅｎｇ１，ＣＨＥＮ　Ｓｈｕ－ｈｅ１，２，ＹＥ　Ｘｉａｏ－ｃｈｕａｎ１，ＬＩＵ　Ｙａｎ－ｗｅｎ１
（１．Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ　Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ａｎｄ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｈｕｂｅｉ　Ｗｕｈａｎ　４３００６１，
Ｃｈｉｎａ；２．Ｈｕｂｅｉ　Ｐｒｏｎｖｉｎｉｃａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｕｂｅｉ　Ｗｕｈａｎ　４３００６１，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａｎ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｓｗｉｔｃｈｉｎｇ　ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ
ｆｏｒ　ａｓｔｉｌｂｉｎ，ｅｎｇｅｌｉｔｉｎ，ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ，ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ４　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｉｎｄｅｘ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ａｑｕｅｏｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　Ｓｍｉｌａｘ　ｃｈｉｎａ　Ｌ．ＭＥＴＨＯＤＳ
Ｔｈｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｗａｓ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｏｎ　Ｋｒｏｍａｓｉｌ　Ｃ１８（４．６　ｍｍ×２５０　ｍｍ，５μｍ）ｃｏｌｕｍｎ．Ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｗａｓ　ｃｏｍｐｏｓｅｄ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｉ－
ｔｒｉｌｅ　ａｎｄ　０．１％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｗｉｔｈ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ｓｅｔ　ａｔ　１．０　ｍＬ·ｍｉｎ－１，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
ｗａｓ　３０℃，Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｓ：０－４５　ｍｉｎ，２９０　ｎｍ；４５－５７　ｍｉｎ，３０３　ｎｍ；５７－８０　ｍｉｎ，３７０　ｎｍ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒ
ｒａｎｇｅｓ　ｏｆ　ａｓｔｉｌｂｉｎ，ｅｎｇｅｌｉｔｉｎ，ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ，ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｗｅｒｅ　０．０３７－０．３７０，０．０１１－０．１１０，０．３０２－３．０２０，０．０４２－０．４２０μｇ，ｒｅ－
ｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｗｅｒｅ　９７．３２％，９７．５５％，９８．３３％，９７．１２％．ＲＳＤ　ｗｅｒｅ　１．７％，２．１％，１．５％，１．９％，ｒｅｓｐｅｃ－
ｔｉｖｅｌｙ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　Ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｒａｐｉｄ，ａｃｃｕｒａｔｅ　ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ　ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ，ｗｈｉｃｈ　ｉｓ　ｈｅｌｐｆｕｌ　ｔｏ　ｃｏｎｔｒｏｌ
ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｓｍｉｌａｘ　ｃｈｉｎａ　Ｌ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｓｍｉｌａｘ　ｃｈｉｎａ　Ｌ．；ａｓｔｉｌｂｉｎ；ｅｎｇｅｌｉｔｉｎ；ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ；ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ；ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｓｗｉｔｃｈｉｎｇ
　　菝葜为百合科（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ）植物菝葜（Ｓｍｉｌａｘ
ｃｈｉｎａ　Ｌ．）的干燥根茎，具有消肿镇痛、活血化淤、祛
风利湿等作用［１］。菝葜为我国传统中药，２０１０年版
中国药典将落新妇苷、黄杞苷作为其含量测定指标。
以菝葜药材为原料制备的金刚藤胶囊是中药大品
种，为湖北福人药业公司的主导产品，治疗妇科炎症
疾患，疗效显著，单品种已连续１２年产值过亿元，
２０１０年更是达到了１．７亿元，为了从源头控制金刚
藤胶囊的质量，保证其临床疗效，本文采用 ＨＰＬＣ
波长切换技术［２－４］，建立了菝葜有效部位中落新妇
苷、黄杞苷、白藜芦醇、槲皮素［５－８］多指标同谱测定的
含量测定方法，以期更全面地评价菝葜药材的质量。
１　材料
高效液相色谱仪（Ａｇｉｌｅｎｔ　１１００），ＢＰ－２１１Ｄ型
十万分之一分析天平（德国Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司）；超声清
洗器（上海科导超声仪器有限公司）；日立 Ｕ－３０１０
紫外可见双光束分光光度计。
落新妇苷对照品、黄杞苷对照品、白藜芦醇对照
品均购自天津马克生物技术有限公司（批号依次为
ＰＣＭ－ＴＦＬ－００１，ＰＣＭ－ＴＦＬ－００２，ＰＣＭ－０－００６）；槲皮
素对照品（中国药品生物制品检定所，批号１００８１－
２００４０６１）；菝葜提取物由本实验室提供；乙腈、甲醇
为色谱纯，磷酸为分析纯，水为注射用水。
２　方法与结果
２．１　色谱条件　色谱柱：Ｋｒｏｍａｓｉｌ　１００－５　Ｃ１８（２５０
ｍｍ×４．６　ｍｍ，５μｍ）；柱温３０℃；流动相：乙腈－
０．１％磷酸，梯度洗脱见表１；流速：１．０　ｍＬ·ｍｉｎ－１；
检测波长：０～４５　ｍｉｎ为２９０　ｎｍ；４５～５７　ｍｉｎ为３０３
ｎｍ；５７～８０　ｍｉｎ为３７０　ｎｍ；进样量为１０μＬ。对照
品及样品色谱图见图１。
表１　梯度洗脱流动相条件
Ｔａｂｌ　１　Ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｒａｔｉｏ　ｉｎ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ
时间／ｍｉｎ 乙腈（Ｖ／Ｖ，％） ０．１％磷酸（Ｖ／Ｖ，％）
０　 １２　 ８８
１５　 １５　 ８５
３０　 １７　 ８３
４４　 １９　 ８１
６０　 ２１　 ７９
６６　 ２３　 ７７
８０　 ２５　 ７５
２．２　溶液的制备
２．２．１　对照品溶液　精密称取落新妇苷、黄杞苷、
白藜芦醇和槲皮素对照品适量，加甲醇制成质量浓
度分别为０．０７４，０．０２２，０．６０４，０．０８４　ｍｇ·ｍＬ－１混
合对照品溶液。
２．２．２　菝葜提取物供试液［９］　取菝葜提取物０．８
ｇ，精密称定，置１００　ｍＬ具塞锥形瓶中，精密加入甲
·０３９· 中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１２期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｎ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１２
图１　ＨＰＬＣ图谱
Ａ．混合对照品；Ｂ．样品；１－落新妇苷；２－黄杞苷；３－白藜芦醇；４－槲皮
素
Ｆｉｇ　１　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ　ｏｆ　ｍｉｘｅｄ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ（Ａ）ａｎｄ
ｓａｍｐｌｅ（Ｂ）
１－ａｓｔｉｌｂｉｎ；２－ｅｎｇｅｌｉｔｉｎ；３－ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ；４－ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ
醇１００　ｍＬ，加塞，精密称定，超声提取３０　ｍｉｎ，放置
至室温，再精密称定，用甲醇补足减失的质量，摇匀，
滤过，精密吸取续滤液５０　ｍＬ，水浴蒸干，残渣用甲
醇定容至１０　ｍＬ量瓶中，即得。
２．３　线性关系的考察　分别精密吸取上述对照品
溶液０．５，１，２，３，４，５　ｍＬ至１０　ｍＬ量瓶中，用甲醇
稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述溶液各１０μＬ，注
入高效液相色谱仪，测定。以进样量（Ｘ，μｇ）为横坐
标，峰面积（Ｙ）为纵坐标进行线性回归，结果见表２。
表２　组分的线性回归方程和相关系数
Ｔａｂ　２　Ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｅｑｕａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ
ｏｆ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ
化合物 回归方程 ｒ 线性范围／μｇ
落新妇苷 Ｙ＝２　９３６　Ｘ－２．７０４　９　 ０．９９９　７　 ０．０３７～０．３７０
黄杞苷 Ｙ＝３　４４８．９　Ｘ－１．８１３　４　 ０．９９９　７　 ０．０１１～０．１１０
白藜芦醇 Ｙ＝７　３７７．４　Ｘ＋１７．３０５　 ０．９９９　８　 ０．３０２～３．０２０
槲皮素 Ｙ＝＝３　９８４．３　Ｘ－１．６４８
５
０．９９９　６　 ０．０４２～０．４２０
２．４　精密度试验　取混合对照品溶液２．５　ｍＬ至
１０　ｍＬ量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。精密吸取
上述溶液各１０μＬ，按“２．１”项所述色谱条件，连续
进样５次，测定落新妇苷、黄杞苷、白藜芦醇和槲皮
素峰面积，ＲＳＤ分别为２．０％，２．３％，１．５％，１．７％。
２．５　稳定性试验　取同一供试品溶液，分别于０，
２，４，６，８，１２　ｈ各进样１０μＬ，结果落新妇苷、黄杞
苷、白藜芦醇和槲皮素峰面积的ＲＳＤ分别为１．９％，
２．５％，１．６％，１．８％，表明供试品溶液在制备后１２
ｈ内稳定。
２．６　重复性试验　取同一批菝葜提取物６份（批号
０９０３２０），每份０．８　ｇ，精密称定，按“２．２．２”项下方法
制备供试品溶液，精密吸取１０μＬ进样，分别进行测
定。结果落新妇苷、黄杞苷、白藜芦醇和槲皮素峰面
积的ＲＳＤ分别为２．１％，２．７％，１．９％和２．１％，表明
该法重复性好。
２．７　加样回收率试验　取同一批菝葜提取物６份
（批号０９０３２０，其中落新妇苷、黄杞苷、白藜芦醇和
槲皮素的含量分别为０．４３８　３，０．１１８　０，３．９３７，
０．５１５　６　ｍｇ·ｇ－１），每份０．４　ｇ，精密称定，置圆底烧
瓶中，精密加入落新妇苷对照品２　ｍＬ（浓度为
０．０８８　７　ｍｇ·ｍＬ－１）、黄杞苷对照品０．５　ｍＬ（０．０９５　６
ｍｇ·ｍＬ－１）、白藜芦醇对照品１．５　ｍＬ（１．０６　ｍｇ·
ｍＬ－１）、槲皮素对照品０．６　ｍＬ（０．３５１　ｍｇ·ｍＬ－１）
于圆底烧瓶中，按“２．２．２”项下方法制备供试品溶
液，按“２．１”项下所述色谱条件分别进行测定，采用
标准曲线法测得加入对照品后供试品溶液中落新妇
苷、黄杞苷、白藜芦醇和槲皮素的含量，并计算加样
回收率及相对标准偏差，结果见表３。
表３　加样回收试验结果（ｎ＝６）
Ｔａｂ　３　Ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ（ｎ＝６）
化合物
含量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
平均回
收率／％
ＲＳＤ
／％
落新妇苷 ０．１７６　８　 ０．１７７　４　 ０．３４９　４　 ９７．３２　 １．７
黄杞苷 ０．０４７　６　 ０．０４７　８　 ０．０９４　１　 ９７．６４　 ２．０
白藜芦醇 １．５８８　 １．５９０　 ３．１５２　 ９８．３４　 １．５
槲皮素 ０．２０７　９　 ０．２１０　６　 ０．４１２　５　 ９７．１２　 １．９
２．８　样品的测定　取菝葜提取物３批，每批２份，
每份０．８　ｇ，精密称定，按“２．２．２”项下方法制备供试
品溶液，按“２．１”项下所述色谱条件分别进行测定，
采用外标法计算供试品溶液中落新妇苷、黄杞苷、白
藜芦醇和槲皮素的含量，结果见表４。
表４　菝葜提取物中４种成分的含量测定结果（ｍｇ·ｇ－１，ｎ＝
３）
Ｔａｂ４　Ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　４　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ａｑｕｅｏｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ
Ｓｍｉｌａｘ　ｃｈｉｎａ　Ｌ．（ｍｇ·ｇ－１，ｎ＝３）
０９０３２０　 ０９０５２２　 ０９０５２５
落新妇苷 ０．４４９　 ０．４５５　 ０．４３８
黄杞苷 ０．１２３　 ０．１２７　 ０．１１４
白藜芦醇 ３．９３７　 ４．１３１　 ３．７９２
槲皮素 ０．４９４　 ０．５１６　 ０．４７８
３　讨论
本实验采用紫外－可见分光光度计分别对４种
成分在２００～６００　ｎｍ波长范围内进行全波长扫描，
得到落新妇苷、黄杞苷、白藜芦醇和槲皮素的最大吸
收波长分别为２９１，２９０，３０３，３７０　ｎｍ。故本文采用
波长切换法，此种方法可以提高检测器灵敏度，减少
样品中相应成分的干扰峰，使测定更加准确。
本实验分别考察了甲醇－水、乙腈－水、乙腈
－０．１％磷酸水等多种系统，结果表明乙腈－０．１％磷
酸水洗脱系统对４个指标性成分色谱峰的分离度较
好，故选用该系统作为含量测定的流动相。
本实验建立了 ＨＰＬＣ波长切换法同谱测定菝
葜有效部位中落新妇苷、黄杞苷、白藜芦醇和槲皮素
４种指标成分的含量测定方法。本方法灵敏度高，
·１３９·中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１２期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｎ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１２
重复性好，可靠性强，可全面评价菝葜药材的质量，
进一步完善了２０１０年版中国药典收载的菝葜药材
质量标准中含量测定的方法。因此，本文建立的含
量测定方法为再版中国药典修订菝葜药材质量标准
提供了参考依据。
参考文献：
［１］　中国药典．一部［Ｓ］．２０１０：２９０．
［２］　林丽丽，张振秋，赖静怡，等．ＲＰ－ＨＰＬＣ波长切换技术同时测
定黄连、枳实药对中４种指标成分含量［Ｊ］．辽宁中医杂志，
２０１１，３８（２）：３３３－３３５．
［３］　李玉恒，张振秋，赖静怡，等．ＨＰＬＣ波长切换技术同时测定萸
连片中７种成分含量［Ｊ］．药物分析杂志，２０１１，３１（２）：３７１－
３７４．
［４］　王冰，张振秋，孙艳涛，等．ＨＰＬＣ切换波长法同时测定升麻中
５种成分的含量［Ｊ］．药物分析杂志，２０１１，３１（２）：３９１－３９３．
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［７］　宋传旺，刘佳佳，段承刚，等．槲皮素对ＬＰＳ延迟中性粒细胞自
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量［Ｊ］．中国药房，２０１０，２１（３５）：３３１２－３３１３．
［收稿日期］２０１１－１１－２２
［基金项目］湖北省重大科技攻关专项“现代透皮制剂技术研究及雷公藤内酯微乳凝胶剂开发”（编号：２００６ＡＡ３０４Ａ０７）　［作者简介］姜霞，
女，药师，Ｅ－ｍａｉｌ：１０８５３３３２５０＠ｑｑ．ｃｏｍ　［通讯作者］刘卫，男，博士，教授，研究方向：纳米载药系统、现代制剂技术、生物医用高分子材料，电
话：０２７－８７７９２１４７，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｌｉｕ＠ｍａｉｌ．ｈｕｓｔ．ｅｄｕ．ｃｎ
辅酶Ｑ１０纳米结构脂质载体的制备及皮肤靶向性评价
姜霞１，陈思渊２，刘卫２　 （１．武汉体育学院医院，湖北 武汉４３００７９；２．华中科技大学生命科学与技术学院药物研究所，湖
北 武汉４３００７４）
［摘要］　目的：研制辅酶Ｑ１０纳米结构脂质载体（Ｑ１０－ＮＬＣ），并对其皮肤靶向性进行评价。方法：采用高压微射流技术制备
Ｑ１０－ＮＬＣ，运用响应面设计优化处方，并对其理化性能、稳定性及体外释放行为进行表征；采用Ｆｒａｎｚｅ扩散池法评价 Ｑ１０－
ＮＬＣ体外透皮性能。结果：通过响应面设计得到Ｑ１０－ＮＬＣ优化处方，按照优化处方制备的Ｑ１０－ＮＬＣ粒径为１５１．７　ｎｍ，多分
散指数（ＰＤＩ）０．１４４，Ｚｅｔａ电位－４４．１　ｍＶ，载药量２．５１％，包封率１００％；２４　ｈ光照后，Ｑ１０－ＮＬＣ中Ｑ１０含量下降５．５９％，显著
低于乳剂和乙醇溶液中Ｑ１０的光解量；体外药物释放表明，Ｑ１０－ＮＬＣ具有明显的缓释行为；体外透皮吸收实验结果显示，
Ｑ１０－ＮＬＣ的药物皮肤滞留量为Ｑ１０乳剂的１０．１１倍。结论：Ｑ１０－ＮＬＣ可有效提高Ｑ１０的稳定性，延长其作用时间，实现Ｑ１０
皮肤靶向给药。
［关键词］　辅酶Ｑ１０；纳米结构脂质载体；响应面设计；高压微射流技术；皮肤靶向给药
［中图分类号］Ｒ９４　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３（２０１２）１２－０９３２－０５
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｅｐｉｄｅｒｍａｌ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｏｆ　Ｑ１０－ｌｏａｄｅｄ　ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ　ｌｉｐｉｄ　ｃａｒｒｉｅｒｓ
ＪＩＡＮＧ　Ｘｉａ１，ＣＨＥＮ　Ｓｉ－ｙｕａｎ２，ＬＩＵ　Ｗｅｉ　２（１．Ｓｃｈｏｏｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｗｕｈａｎ　Ｓｐｏｒｔｓ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｕｂｅｉ　Ｗｕｈａｎ４３００７９，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈｕａｚｈｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈｕｂｅｉ　Ｗｕｈａｎ　４３００７４，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｐｒｅｐａｒｅ　ｃｏｅｎｚｙｍｅ　Ｑ１０　ｌｏａｄｅｄ　ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ　ｌｉｐｉｄ　ｃａｒｒｉｅｒｓ（Ｑ１０－ＮＬＣ）ａｎｄ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅｉｒ
ｓｔａｂｉｌｉｔｙ，ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｄｒｕｇ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｐｒｏｆｉｌｅ　ａｎｄ　ｅｐｉｄｅｒｍａｌ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｑ１０－ＮＬＣ　ｗａｓ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｈｉｇｈ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ　ｍｉ－
ｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｗｉｔｈ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｄｅｓｉｇｎ．Ｑ１０－ＮＬＣ　ｗａｓ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ　ｂｙ　ＰＣＳ，ＴＥＭ，
ＤＳＣ　ａｎｄ　ＰＸＲＤ．Ｔｈｅ　ｓｋｉｎ　ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｑ１０－ＮＬＣ　ｗａｓ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　Ｆｒａｎｚ　ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ　ｃｅｌ．Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｐｒｏｆｉｌｅ，ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ
ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｌｉｇｈｔ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｂｙ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｄｅｓｉｇｎ．
Ｔｈｅ　ｓｉｚｅ　ｏｆ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　Ｑ１０－ＮＬＣ　ｗａｓ　１５１．７　ｎｍ，ＰＤＩ　０．１４４，Ｚｅｔａ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ－４４．１　ｍＶ，ｄｒｕｇ　ｌｏａｄｉｎｇ　２．５１％，ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ　ｅｆｆｉ－
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Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｓｋｉｎ　ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｓｔｕｄｙ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ　ｕｐｔａｋｅ　ｏｆ　Ｑ１０　ｉｎ　ｅｐｉｄｅｒｍａｌ　ｏｆ　Ｑ１０－ＮＬＣ　ｗａｓ　１０．１１　ｔｉｍｅｓ　ｏｖｅｒ
Ｑ１０　ｅｍｕｌｓｉｏｎ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　Ｑ１０－ＮＬＣ　ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ　ａ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｅｐｉｄｅｒｍａｌ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ　ａｎｄ　ｇｏｏｄ　ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ
ｌｉｇｈｔ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ，ｗｈｉｃｈ　ｗａｓ　ｐｒｏｖｅｄ　ｔｏ　ｂｅ　ａ　ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ　ｃａｒｒｉｅｒ　ｆｏｒ　ｔｏｐｉｃａｌ　ｄｅｌｉｖｅｒｙ　ｏｆ　Ｑ１０．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：ｃｏｅｎｚｙｍｅ　Ｑ１０；ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ　ｌｉｐｉｄ　ｃａｒｒｉｅｒｓ；ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｄｅｓｉｇｎ；ｈｉｇｈ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ　ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ；
·２３９· 中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１２期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｎ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１２