全 文 :科技园地 Academic Field
8 PR ACT ICA L FORES TRY TECHNOLOGY
二★★七年
第七期 林业实用技术
蜘蛛兰组织培养快繁技术研究
田英翠 杨柳青 曹受金
(中南林业科技大学 长沙 410004)
*基金项目:湖南省林业厅科技项目。
[摘要] 在组织培养中 ,以蜘蛛兰
品种为试材 ,以鳞茎为外植体 ,研究
不同激素浓度对其直接诱导再生植
株的影响 。结果表明:MS +2 mg/ L
6-BA +2 mg/L NAA 是直接诱导鳞
茎再生植株的最好组合 , 而 LS +1
mg/L 6-BA +2 mg/L NAA 是直接
诱导鳞茎再生植株的理想培养基。
[关键词] 蜘蛛兰 组织培养 6-
BA NAA
蜘蛛兰(Hymenoca ll issalisb)
属石蒜科水鬼蕉属的球根花卉 。形
如蜘蛛 ,花型别致奇特 ,花姿素丽 ,
不仅可作盆栽来装饰庭院 ,布置廊
下 、窗前 、会场 ,也可在温暖地区作
布置花境的材料或在草地 、灌木前
丛植 ,其观赏价值及经济价值都较
高 。但目前由于蜘蛛兰的生产周期
较长 ,其分球繁殖系数低 ,一些珍贵
品种繁殖比较困难 ,不利于蜘蛛兰
的种植及应用。因此 ,我们在相关
研究[ 1 ~ 6] 的基础上进行组织培养研
究 ,对推动其快速繁殖及生产具有
重要意义。
1 材料与方法
1.1 材料
试材由长沙市鸿飞花卉公司提
供 的 优 良 品 种 蓝 花 蜘 蛛 兰
(H.calathina)。
1.2 研究方法
采集蜘蛛兰鳞茎 ,用 70%的酒
精和 0.1%的氯化汞消毒获得无菌
材料。以 MS 为基本培养基 ,用 6-
BA 单因子 ,将 6-BA 浓度分别设为
1 mg/ L 、2 mg/ L 、3 mg/L 、4 mg/ L 、
5 mg/ L 、6 mg/ L 、7 mg/L 、8 mg/ L 、
9 mg/L 、10 mg/L 、15 mg/L 、20 mg/
L 等 12 个不同处理;采用 6-BA 配
合 NAA双因子 ,仍以 MS 为基本培
养基将 NAA 浓度固定为 2 mg/ L ,
6-BA浓度分别为 1 mg/L 、1.5 mg/
L 、2 mg/ L 、2.5 mg/L 、3 mg/L 组合
5个不同处理;将 NAA 浓度固定为
1 mg/ L ,6-BA浓度分别为 1 mg/ L 、
1.5 mg/ L 、2 mg/ L 、2.5 mg/L 、3
mg/L 组合 5 个不同处理;以 LS 为
基本培养基 ,将 NAA 浓度固定为 2
mg/L , 6-BA 浓度分别为 1 mg/ L 、
1.5 mg/ L 、2 mg/ L 、2.5 mg/L 、3
mg/L 组合 5 个不同处理;将 NAA
浓度固定为 1 mg/L , 6-BA 浓度分
别为 1 mg/ L 、1.5 mg/L 、2 mg/ L 、
2.5 mg/L 、3 mg/L 组合 5个不同处
理;采用 NAA 配合 6-BA 双因子 ,
以 LS 为基本培养基 ,将 6-BA 浓度
固定为 1 mg/L ,NAA浓度分别为 1
mg/L 、1.5 mg/L 、2 mg/ L 、2.5 mg/
L 、3 mg//L 组合 5 个不同处理;以
MS 为基本培养基 ,将 6-BA 浓度固
定为 2 mg/ L , NAA 浓度分别为 1
mg/L 、1.5 mg/L 、2 mg/ L 、2.5 mg/
L 、3 mg/ L 组合 5 个不同处理 。以
上各试验 ,附加 3%的蔗糖 , 5 g/L
的琼脂粉 ,调节 pH 值至 5.0 ~ 6.0 ,
光照强度为 700 ~ 1 000 lx ,每日光
照时间 12 h 左右 ,温度为 23±2 ℃
的环境条件下进行培养定期检查并
统计结果。
2 结果与分析
2.1 6-BA 直接诱导再生植株
2.2.1 6-BA 单因子直接诱导再生
植株 从表 1 可看出 ,用单因子 6-
BA 诱导效果很不理想 , 浓度在 1
mg/L ~ 4 mg/L 之间时 , 诱导率在
10%左右 ,当浓度大于 5 mg/L 时 ,
10 d培养基变黑 , 20 d 培养基黑色
加深 , 不能继续诱导分化不定芽。
30 d后自然枯萎。总之 ,用 6-BA 单
因子直接诱导再生植株不可取 。
表 1 6-BA(单因子)对鳞茎诱导
再生植株的影响
浓度 诱导不定
诱导
率序 叶数 叶长
号 (mg/ L) 芽/个 / % /个 /cm
1 1 2.0 10.2 2.3 2.5
2 2 2.5 12.7 2.6 2.0
3 3 1.9 8.2 2.4 2.1
4 4 1.8 3.9 0.7 0.8
5 ~ 12 5 ~ 12 0 0
2.2.2 6-BA 配合 NAA 双因子直
接诱导再生植株 从表 2 可以看
出 , 以 MS 为基本培养基 , 固定
NAA浓度 2 mg/L 不变 ,随着 6-BA
浓度增加 , 诱导不定芽数 、诱导率 、
叶数 、叶长也逐渐增加 。其中 , MS
+2 mg/LNAA +2mg/ L6-BA 组合
诱导不定芽数5.9个 、诱导率 90.2%、
叶数 2.16 个 、叶长 4.78cm ,效果最
好;固定 NAA 浓度 1 mg/L 不变 ,
增加 6-BA浓度 ,诱导效果同样逐渐
增 加 , MS + 1 mg/ L NAA +2
mg/L 6-BA组合诱导效果最好 ,诱导
率达 88.6%。在表 2试验数据的基
础上 ,针对蜘蛛兰的特性 ,调节基本
培养基 ,以 LS 为基本培养基 ,由表
3可见 ,固定 NAA 浓度 2 mg/L 不
变 ,增加 6-BA 浓度 ,其中 , LS +2
mg/LNAA +2 mg/L 6-BA 组合诱
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PR ACTICAL FOR ES TRY TECHNOLOGY 9
二★★七年
第七期 林业实用技术
表 2 6-BA配合 NAA(双因子)对鳞茎诱导再生植株的影响
处理 基本 NAA 6-BA 不定 诱导率 叶数 叶长
序号 培养基 (mg / L )(mg / L) 芽数/个 / % /个 / cm
1 1.0 2.7 57.6 1.13 1.97
2 1.5 3.6 62.6 1.18 3.76
3 2.0 2.0 5.9 90.2 2.16 4.78
4 2.5 3.9 70.7 1.87 3.50
5 MS 3.0 3.4 69.2 1.84 3.20
6 1.0 2.1 54.3 1.08 1.78
7 1.5 3.0 67.5 1.15 2.10
8 1.0 2.0 4.6 88.6 1.17 2.50
9 2.5 3.5 74.2 1.21 3.20
10 3.0 3.7 73.6 1.54 3.10
表 3 6-BA配合 NAA(双因子)对鳞茎诱导再生植株的影响
处理 基本 NAA 6-BA 不定 诱导率 叶数 叶长
序号 培养基 (mg / L )(mg / L) 芽数/个 / % /个 / cm
1 1.0 3.5 64.5 1.29 3.65
2 1.5 4.9 84.3 1.73 3.79
3 2 2.0 11.9 91.6 2.15 4.67
4 2.5 7.8 79.6 2.07 4.52
5 LS 3.0 7.2 73.2 1.98 4.25
6 1.0 5.6 67.3 1.58 4.12
7 1.5 7.5 88.4 2.17 3.95
8 1 2.0 14.6 93.7 2.36 4.67
9 2.5 9.0 81.2 2.01 4.21
10 3.0 8.6 80.3 2.06 4.32
表 4 NAA配合 6-BA(双因子)对鳞茎诱导再生植株的影响
处理 基本 6-BA NAA 诱导不定 诱导率 叶数 叶长
序号 培养基 (mg / L )(mg / L) 芽数/个 / % /个 / cm
1 1.0 3.7 62.5 1.25 3.68
2 1.5 5.6 78.6 1.78 3.89
3 LS 1.0 2.0 11.2 91.8 2.35 4.97
4 2.5 8.1 85.4 2.17 4.32
5 3.0 7.6 84.6 1.94 4.29
表 5 NAA配合 6-BA(双因子)对鳞茎诱导再生植株的影响
处理 基本 6-BA NAA 不定 诱导率 叶数 叶长
序号 培养基 (mg / L )(mg / L) 芽数/个 / % /个 / cm
1 1.0 2.7 56.9 4.3 4.80
2 1.5 3.3 69.8 5.2 5.87
3 MS 2 2.0 5.9 93.6 6.8 7.81
4 2.5 3.9 77.5 5.3 5.90
5 3.0 3.7 76.3 5.2 5.89
导 不 定 芽 数 11.9 个 、诱 导 率
91.6%、叶数 2.15 个 、叶长 4.67
cm , 效果最好;固定 NAA 浓渡
1 mg/ L不变 ,随着 6-BA 浓度增加 ,
可以得出 , LS +1 mg/ LNAA +2
mg/L 6-BA 是直接诱导蜘蛛兰再生
植株的最佳组合 。诱导率最高达
93.7%。
2.2 NAA 直接诱导再生植株
2.2.1 NAA 配合 6-BA 双因子直
接诱导再生植株 从表 4 可以看
出 ,以 LS 为基本培养基 ,固定 6-BA
浓度 1 mg/ L不变 ,而当增加生长素
NAA 浓度时 , LS+2 mg/L N AA +
1 mg/ L 6-BA 组合诱导不定芽数
11.2个 、诱导率 91.8%、叶数 2.35
个 、叶长 4.97 cm ,效果很好。
2.2.2 NAA 配合 6-BA 双因子对
鳞茎诱导再生植株 调整基本培养
基 LS 为MS ,固定6-BA 浓度2 mg/
L 不变 , 随着 NAA 浓度增加 ,诱导
不定芽数 、诱导率 、叶数 、叶长也逐
渐增加 ,其中 ,MS+2 mg/ L NAA+2
mg/L 6-BA 组合诱导不定芽数 5.9
个 、诱导率 93.6%、叶数 6.8个 、叶长
7.81 cm ,效果最好(见表 5)。
3 小结
通过以上各试验可以得出 ,在组
织培养的过程中 ,以鳞茎为外植体 ,6-
BA和 NAA不同浓度对蜘蛛兰直接
诱导再生植株的影响非常大 ,以 MS
为基本培养基时 ,6-BA 单因子直接
诱导再生植株 ,浓度不超过 5 mg/ L。
6-BA和 NAA 双因子以不同浓度配
合时 , MS +2 mg/L 6-BA +2 mg/ L
NAA是直接诱导鳞茎再生植株的最
好组合 , 而 LS +1 mg/L 6-BA +2
mg/L NAA是直接诱导鳞茎再生植
株的理想培养基。
参考文献
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