全 文 ：植物生理学通讯 第 45卷 第 9期，2009年 9月 895
收稿 2009-06-29 修定 　2009-07-28
资助 四川省重点学科建设项目(SZD0 419 )。
* 通讯作者(E-mail: yyy_525553@163.com; Tel: 0835-2889643)。
毛蕊铁线莲的组织培养与植株再生
袁迎燕*, 石大兴, 王米力, 任雅君, 徐霞, 汪静, 郝玉立
四川农业大学林学院, 四川雅安 625014
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Clematis lasiandra Maxim.
YUAN Ying-Yan*, SHI Da-Xing, WANG Mi-Li, REN Ya-Jun, XU Xia, WANG Jing, HAO Yu-Li
College of Forestry, Sichuan Agricultural University, Ya’an, Sichuan 625014, China
1 植物名称 毛蕊铁线莲(Cl ema t is l as i and ra
Maxim.), 别名小木通、丝瓜花。
2 材料类别 带芽茎段、节间和叶片。
3 培养条件 诱导培养基: (1) MS+6-BA 0.5 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.05+3%蔗糖; (2) MS+6-BA 0.5+
NAA 0.1+2,4-D 0.1+3%蔗糖; (3) MS+6-BA 2.0+NAA
0.1+3%蔗糖。增殖分化培养基: (4) MS+6-BA 1.0+
NAA 0.1+3%蔗糖; (5) MS+6-BA 2.0+NAA 0.1+
2,4-D 0.01+3%蔗糖; (6) MS+6-BA 2.0+NAA 0.05+3%
蔗糖。生根培养基: (7) 1/4 MS+NAA 0.5+0.1%活
性炭+15%蔗糖。所有培养基均附加 0.6%琼脂粉,
pH 5.8~6.0, 培养温度为(25±2) ℃, 光照强度为
30~40 mmol·m-2·s-1, 光照时间为14 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 毛蕊铁线莲的幼嫩枝条用自
来水冲洗 2~3 h。在超净工作台上用 70%乙醇浸
泡 10 s, 转入 0.1%升汞溶液消毒(其中茎段和叶片
的处理时间分别为 5 min和 3 min), 最后用无菌水
冲洗 5~6次。剪取幼嫩带芽茎段、叶片和节间接
种。
4.2 愈伤组织及芽的诱导 将带芽茎段接种在培养
基(1)上, 接种 7 d后, 腋芽开始萌动, 20 d后长成
1~2 cm高的小芽苗, 每个节上有 1~2个侧芽, 诱导
率可达 90%。将叶片接种在培养基(2)上, 接种 10
d 后, 叶片缺口处开始产生浅绿色愈伤组织, 20 d
时诱导率可达 80%以上。将节间接种在培养基(3)
上, 接种 10 d 后, 节间两端膨大且缺口处开始产生
黄绿色至绿色愈伤组织, 30 d时诱导率可达 83%。
4.3 继代增殖与不定芽的诱导 将带芽茎段诱导的
有效芽转移到培养基(4)上进行增殖培养, 20~30 d
可增殖一代, 增殖系数约为 3。将叶片和节间诱导
的绿色愈伤组织先接种到培养基(5)上进行增殖, 增
殖 20~30 d后转移到培养基(6)上诱导分化, 继代
2~3次后愈伤组织开始分化出黄绿色的小芽丛。
4.4 生根壮苗 将苗高≥3 cm的健壮小苗转移到培
养基(7)上进行生根培养。10 d后开始生根, 30 d
时的根最长可达 6 cm, 每棵苗最多有 7条根, 生根
率为 86 %。
4.5 炼苗移栽 将生根苗放在室温下培养 3 d, 揭开
封口膜后于室内再培养3 d, 取出生根苗, 洗去根部
培养基, 移栽到温室中, 育苗基质为珍珠岩、蛭石
和腐殖土(1:1:2), 湿度保持在 85%以上, 10 d时开
始有新叶长出, 30 d时的成活率为 75%。
5 意义与进展 毛蕊铁线莲为毛茛科铁线莲属攀援
草质藤本植物(王文采 1980), 其枝叶呈扶苏状, 花
型奇特, 呈钟状, 花萼紫红色, 有香气, 攀援能力较
强, 是垂直绿化和地被的优良植物。野生毛蕊铁线
莲主要靠种子繁殖, 但种子小, 成熟后随风飘散难
以采收, 种子结实率低。本文采用组织培养技术,
可在短期内得到大量整齐一致的苗, 对毛蕊铁线莲
的种质资源保护以及开发利用可能有一定的参考价
值。铁线莲属植物中有些物种的组织培养已有报
道(倪新和马毓 1984; 泽仁旺姆等 2002; 张启香等
2007; 张涛等2008), 但毛蕊铁线莲的组织培养和植
株再生的报道尚未见。
参考文献
倪新, 马毓(1984). 红花铁线莲(Clematis coccinea)的组织培养.
植物学通报, 2 (2-3): 71~73
王文采(1980). 中国植物志. 北京: 科学出版社, 74~75
泽仁旺姆, 尼珍, 潘多(2002). 西藏甘青铁线莲的再生植株. 西藏
科技, (9): 61
张启香, 方炎明, 吕梅, 陈娜(2007). 铁线莲 ‘Multi-Blue’不定芽及
体细胞胚发生的初步研究. 园艺学报, 34 (2): 465~468
张涛, 周琼, 张丽琼, 屈国胜, 廖咸康(2008). 重瓣铁线莲愈伤组织
诱导研究. 安徽农业科学, 36 (22): 9402, 9542
DOI:10.13592/j.cnki.ppj.2009.09.025