全 文 ：第 27卷 ,第 5期 光　谱　实　验　室 Vo l . 2 7 , No . 5
2 0 1 0年 9月 Chinese Journal of Spectroscopy Laboratory September, 2010
菝葜中薯蓣皂苷元提取工艺的研究①
① 浙江省科技厅新苗计划 ( 2008R40G2210062)
② 联系人 ,电话: ( 0574) 88222865;手机: ( 0) 13989383566; E-mail: linjianyuan@ yah oo. com. cn
作者简介:林建原 ( 1965— ) ,女 ,广西陆川市人 ,副教授 ,主要从事天然产物的提取及分析研究工作。
收稿日期: 2009-12-24;接受日期: 2010-01-29
林建原②　叶晓力a　汤琳晓　吴晓杰　程 晓
(浙江万里学院生物与环境学院　浙江省宁波市钱湖南路 8号　 315100)
a (杭州电子科技大学经贸学院金融研究所　杭州市下沙高教园区　 310029)
摘　要　探讨了索氏提取法提取菝葜中薯蓣皂苷元的提取工艺。通过单因素试验和正交试验 ,研究了
提取工艺对薯蓣皂苷元提取率的影响。在不同条件下 ,提取率不同。确定了最佳提取工艺参数为:甲醇浓度
为 50% ,固液比为 1∶ 10( g∶ mL) ,提取时间 2. 5h,提取次数 1次 ,薯蓣皂苷元得率为 0. 421mg /g。该方法简
便 ,可行。
关键词　菝葜 ;薯蓣皂苷元 ;索氏提取 ; 正交试验 ;提取工艺
中图分类号: O657. 32; R284. 2　　　文献标识码: A　　　文章编号: 1004-8138( 2010) 05-2029-03
1　引言
菝葜 ( Sm ilax )又名金刚藤 ,为百合科菝葜属植物 ,菝葜的根、茎、叶均可入药 ,尤以根茎入药最
为常见。根茎内主要富含薯蓣皂苷元 ,具有抗炎镇痛及抗肿瘤作用。薯蓣皂苷元 ,又名薯蓣皂素 ,有
独特的生物活性和药效 ,是合成甾体激素类药物重要的药源原料 [ 1]。薯蓣皂苷元的提取方法通常有
回流提取法、索氏提取法及超声波提取法等 [2 ]。 本实验采用索氏提取法提取菝葜中薯蓣皂苷元 ,通
过正交实验确定菝葜中薯蓣皂苷元的最佳提取工艺条件。研究表明 ,该方法操作简便、提取效率高。
2　实验部分
2. 1　材料
薯蓣皂苷元对照品 (南京替斯艾么中药研究所 ) ;菝葜根茎 (广东省 ) ;甲醇、高氯酸、石油醚 (沸
点 60— 90℃ )等试剂均为分析纯。 实验用水为重蒸水。
2. 2　仪器
TC-15套式恒温器 (海宁市新华医疗器械厂 ) ; AL104电子天平 (梅特勒 -托利多仪器上海有限
公司 ) ; HH-2数显恒温水浴锅 (常州国华电器有限公司 ) ; SC101-1型鼓风电热恒温干燥箱 (浙江嘉
兴市电热仪器厂 ) ; RE52-4旋转蒸发器 (上海沪西分析仪器厂有限公司 ) ; FW80高速万能粉碎机
(天津泰斯特仪器厂 ) ; S53紫外可见分光光度计 (上海棱光技术有限公司 )。
2. 3　实验方法
2. 3. 1　样品预处理
菝葜根茎于 80℃恒温干燥箱中干燥 ,再用万能粉碎机粉碎 ,过 100目筛后 ,备用。
2. 3. 2　标准溶液的制备
准确称取薯蓣皂苷元对照品 3. 90mg ,加甲醇溶液溶解并定容至 25mL容量瓶中 ,摇匀 ,配制成
浓度为 0. 156mg /mL溶液 ,放置备用 [3 ]。
2. 3. 3　吸收光谱的测定
准确吸取 0. 50mL标准溶液于10mL比色管中 ,挥干溶剂 ,加入高氯酸 5mL显色 ,置于 25℃水浴
中保温 25min,取出冷却至室温 [4 ]。 以高氯酸为空白对照 ,在紫外可见分光光度计上于 190— 600nm
范围内扫描 ,测得其最大吸收波长为 300nm。
3　结果与讨论
3. 1　校准曲线的绘制
准确移取不同体积系列标准溶液分别置于 10mL比色管中 ,水浴挥干溶剂 ,加入 5mL高氯酸显
色 ,与高氯酸空白一起置于 25℃水浴中保温 25min,取出冷却至室温。以试剂为空白 ,于波长 300nm
处 测定 吸光 度 ,所 得回 归方 程为: A = 0. 0877C + 0. 1577, r = 0. 9995,线 性 范围 为
0. 312— 3. 072mg /L。
3. 2　样品溶液的制备
准确称取 2. 0g菝葜粉末装滤纸包好 ,置于索氏提取器中 ,加入 50%甲醇 40mL。提取 2. 5h后 ,
回收甲醇至干 ,加入 2mol /L盐酸 20m L,置于沸水浴中水解 2h,冷却后用石油醚 ( 60— 90℃ )萃取 3
次 ,每次 20mL,萃取时间依次为 40、 30、 20min,合并萃取液 ,水洗至中性 ,将所得溶液置于旋转蒸发
仪 中旋转蒸发 ,回收石油醚 ,所得残渣用甲醇溶解、过滤 ,用甲醇定容于 25mL容量瓶中 ,此溶液为
样品溶液 [5 ]。
3. 3　正交试验设计
试验选用影响提取效率的溶剂浓度、提取时间、固液比、提取次数作为影响索氏提取的因素 ,并
选定各因素的水平 ,安排 L 9 ( 34 )正交试验 ,对索氏提取菝葜薯蓣皂苷元的条件进行优化。 结果见表
1、 2。
由实验结果可知 ,以薯蓣皂苷元得率作为考察指标 ,各因素影响程度大小依次为 A (甲醇浓度 )
> C (固液比 )> B (提取时间 )> D (提取次数 ) ,其中甲醇浓度对薯蓣皂苷元得率影响最大。确定最
佳提取工艺为 A1B3C2D1。
3. 4　样品分析
准确称取一定量菝葜样品 3份 ,按照上述正交试验结果优选的实验条件进行工艺提取 ,测定菝
葜中薯蓣皂苷元的得率 ,结果见表 3。
4　结论
菝葜中薯蓣皂苷元是由皂苷水解得到 ,因此水解是否彻底至关重要 ,正交试验得出用浓度为
50%的甲醇 ,固液比为 1∶ 10,浸提 1次 ,水浴加热提取 2. 5h,提取效果较佳。该提取方法为菝葜薯蓣
皂苷元的分离提取提供了一种可行途径 ,对进一步开发利用菝葜属植物资源有一定的研究意义。
表 1　因素水平
水平
因素
A
甲醇浓度 (% )
B
提取时间 (h )
C
固液比 ( g /m L)
D
提取次数 (次 )
1 50 1 1∶ 8 1
2 60 2 1∶ 10 2
3 70 2. 5 1∶ 12 3
2030 光谱实验室 第 27卷
表 2　正交试验结果
序号 A甲醇浓度 (% )
B
提取时间 ( h )
C
固液比 ( g /mL)
D
提取次数 (次 )
薯蓣皂苷元得率
( mg /g)
1 50 1 1∶ 8 1 0. 392
2 50 2 1∶ 10 2 0. 428
3 50 2. 5 1∶ 12 3 0. 413
4 60 1 1∶ 10 3 0. 378
5 60 2 1∶ 12 1 0. 369
6 60 2. 5 1∶ 8 2 0. 361
7 70 1 1∶ 12 2 0. 353
8 70 2 1∶ 8 3 0. 345
9 70 2. 5 1∶ 10 1 0. 397
K 1 0. 411 0. 374 0. 366 0. 386
K 2 0. 369 0. 381 0. 401 0. 381
K 3 0. 365 0. 390 0. 378 0. 379
R 0. 046 0. 016 0. 035 0. 007
表 3　样品分析
样品 薯蓣皂苷元得率 ( mg /g) 平均值 ( mg /g ) RSD(% )
1 0. 417
2 0. 426 0. 421 1. 1
3 0. 420
参考文献
[1 ]国家医药管理局中草药情报中心站编 .植物药有效成分手册 [M ].北京:人民卫生出版社 , 1986.
[2 ]吕金海 ,舒孝顺 ,高中洪等 .菝葜总皂苷元超声萃取研究 [ J ].中国中药杂志 , 2008, 25( 1): 34— 36.
[3 ]国家药典委员会 .中华人民共和国药典 [M ].北京:化学工业出版社 , 2005. 188.
[4 ]王俊 ,杨克迪 ,陈钧 .分光光度法测定薯蓣皂苷元 [ J ].分析试验室 , 2004, 23( 1): 73— 75.
[5 ]李惠芬 ,平渊 ,陈刚等 .高效液相色谱法和薄层色谱法测定重楼中薯蓣皂苷元的含量 [ J] .中草药 , 2003, 34( 2): 127— 129.
Study on Extracting Technique for Diosgenin from Smilax
LIN Jian-Yuan　 YE Xiao-Lia　 TANG Lin-Xiao　W U Xiao-Jie　 CHENG Xiao
(College of Biologic and Environmental Science, Zhejian g Wanl i University, Ningbo , Zhej ian g 315100, P. R .Ch ina )
a (S chool of Business and Commerce, Hang zhou Dianz i Un iversity, Hangzhou 310029,P . R. China )
Abstract　 Soxhlet ex t raction technique fo r diosgenin f rom Smilax was discussed. The
ef fection of operating condi tions on ex t raction rate w as studied acco rding to sing le facto r and
o rthogonal test. Under dif ferent condi tions, ex t raction ra te was dif ferent. The optimal condi tions
w ere achieved as fo llow s: 50% methano l, materials to so lv ent ratio 1∶ 10( g∶ m L) , ex t raction
time o f 2. 5h, ex t raction times o f 1 times. The content of dio sg enin was 0. 421mg /g under optimal
conditions. The method is simple and feasible.
Key words　Smilax ; Diosgenin; Soxhlet Ex t raction; Orthogonal Test; Ex t raction Tech nique
2031第 5期 林建原等:菝葜中薯蓣皂苷元提取工艺的研究