全 文 ：药物分析杂志 h i C nJ h P~ A nl Z a仪拓 , 26 ( 9) 一 124 5 一
蒸发光散射法检测参数对齐墩果酸和菠莫皂昔元的影响
赵宇新` , 李曼玲 ,
( 1
. 国家药典委员会 ,北京 10( 刃 6 1 ;2 . 中国中医科学院中药研究所 ,北京 10 70 )
摘要 目的 :研究气体流速及漂移管温度对蒸发光散射检测器检测性能的影响。 方法 : 色谱条件为 No v al 犯 c k C I: 色谱柱 ( 4 . 6 nrI
xl 50 ~
,
5 卿 ) ,柱温 40 ℃ ,流动相为甲醇 一水 ( 95 : 5 ) ,流速 1. o mL · 而 n 一 ` 。 选择 E比D检测的峰面积 、基线值 、 噪音大小和信
噪比作为评价指标 ,测定在不同气体流速以及不同漂移管温度下齐墩果酸和菠葵皂昔元在 E岱 D 上的检测结果 。 结果 : E玲D 气
体流速及漂移管温度的设置对其检测性能的影响呈现一定的规律性 。 结论 : E玲D 的检测性能会受到检测参数的影响。
关键词 :蒸发光散射检测器 ;气体流速 ;漂移管温度
中图分类号 : 9R 17 文献标识码 : A 文章编号 : 02 54 一 17 93 { 2硬X巧 ) 09 一 124 5 一 03
T h e e fe
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( 1
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In s t iut
e Of C址 n e se M aet ir a M ed ic a , C hi na A e ad e m y Of C hi n e s e M ielt e以 cS ie n e e , B e ij in g lX() 7加 , C ih n a )
A b s t r a c t o bj e c it ve
: T o s t u d y th e e fe
e t s Of ht e par m
e te rs s u e h a s g a s fl ow art
e a n d d ir ft t u b e t e m P e ar tu re o n ht e
p e orf rm an
e e of E玲 D . M e t hod : hT e e h or m at o脚p h y w as p e orf rm e d o n t h e N o v a p a e k C l : e o l u m n ( 4 . 6 m m x 150
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,
5 林m ) , e o l u mn te m pe aurt
er w as 40 ℃ , t h e m o b i l e p h a s e w as m e ht o n al an d w at e r ( 95 : 5 ) iw t h fl ow aert w as 1
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t u b e t e m p e r a tu er s
.
W i t h i n t h e d e te e ti n g er s u l t
,
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C o cln ius
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m e t e sr of ESL D
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K盯 w o r ds : ESL D ; g a s fl o w ar t e ; d ir ft tu b e t e m p e r at u er
蒸发光散射检测器 ( E v a p o r a t iv e u hg t 一 S c at t e ir n g
D et ec ot r
,
E玲 D )是近年开始广泛应用于药物分析中
的一种质量型检测器 。 只要被检测组分的挥发性小
于流动相的挥发性 , 就可以在检测器上产生响应 。
尤其适用于分析街体 、皂昔以及糖类等无紫外吸收
或弱紫外吸收的成分川 。 关于 E岱 D 在实际中应用
的报道已有许多 ,但鲜见关于 ESL D 参数设置等影
响因素对检测性能影响的系统研究 。
气体流速 (压力 )和漂移管温度是 E岱 D 的主要
参数 。 漂移管温度直接决定着流动相在检测器中挥
发的完全性 ,而气体流速会对检测的灵敏度和检测
基线有重要的影响 。 为了研究参数设置对 E璐 D 检
测性能的影响规律 ,更好地指导 E巧 D 在实际中的
应用 。 拟选择气体流速和漂移管温度作为影响因
素 ,选择 E巧 D 的峰面积 、 基线值 、 噪音大小和信噪
比作为评价指标 ,对不同影响因素对 E此 D 检测性
能的影响进行系统的研究 。
1 仪器和材料
H P n o 高效液相色谱仪 (美国 ,安捷伦公司 ) ;
翻 et hc s o E玲 D (美国 , A l lt e e h 公司 ) ; T华叨 0 数据
处理软件 (北京 , 泰立化公司 ) ; H G A 一 50 0 空气发
生器 (北京 ,汇龙公司 ) ;齐墩果酸对照品和菠奠皂
昔元对照品由中国药品生物制品检定所提供 (供含
量测定用 ) ;试剂均为分析纯 ;水为自制高纯水 。
2 实验及方法
2
.
1 色谱条件 N o v a p ac k C ,: 色谱柱 ( 4 . 6 nu x
第一作者 介 l : ( 0 1 0 )“ 0 3 5 2 7 5
一 124 6一 药物分析杂志 h i Cn J h Parm An a l Z(X ) 6, 26 ( 9 )
150 m m
,
5 林m ) ,柱温 4 0 ℃ ,流动相为甲醇 一 水 ( 95
: 5 )
, 流速 1 . 0 m L · m i n 一 ’ 。 E巧D 检测 ,按实验要求
设定不同的检测参数 。
2
.
2 齐墩果酸和菠葵皂昔元对照品溶液的制备
分别精密称定齐墩果酸对照品 1 . 48 m g , 菠莫皂普
元对照品 1 . 17 m g ,分别置于 50 m L 量瓶中 ,用甲醇
溶解并定容至刻度 , 即得浓度为 0 . 0 30 m g · m L 一 ’ 的
齐墩果酸对照品溶液和浓度为 0 . 023 m g · m L 一 `的
菠莫皂昔元对照品溶液 。
2
.
3 空气流速对检测性能影响 选择 75 , 85 , 95 ℃
3 个漂移管温度 ,分别将空气流速设置为 1 . 6 , 1 . 8 ,
2
.
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,
2
.
2
,
2
.
4
,
2
.
6 L
·
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一 ’ , 将以上 2 个对照品溶
液分别进样 10 林L , 考察空气流速变化对 E玲 D检测
齐墩果酸和菠葵皂昔元检测结果中峰面积 、基线 、 噪
音大小和信噪比的影响 。 结果见图 1 一 4 。
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图 4 不同温度下气体流速变化对菠契皂昔元信噪比的影响
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一 ,
根据上述结果可以看出 , 空气流速的增加会使
ESL D 检测的峰面积降低 , 尤其是在 95 ℃较为明
显 ; 同时使检测基线的基准值降低 ,噪音减小 , 同样
在漂移管温度 95 ℃更为明显 ;空气流速的增大导致
信噪比呈不规则的缓慢增长趋势 。
2
.
4 漂移管温度对检测性能的影响 选择 2 . 6 ,
2
.
2
,
1
.
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一 ’ 3 个空气流速 , 分别将漂移管温
度设置为 7 5 ℃ 、 8 0 ℃ 、 85 ℃ 、 90 ℃ 、 9 5 ℃ 、 l 0() ℃ ,
将以上 2 个对照品溶液分别进样 10 协L , 考察漂移
管温度变化对 ESL D 检测齐墩果酸和菠葵皂普元检
测结果中峰面积 、 基线 、 噪音大小和信噪比的影响 。
结果见图 5 一 8 。
图 1 不同温度下气体流速变化对菠契皂昔元检测峰面积的影响
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图 5 不同气体流速下漂移管温度改变对齐墩果酸峰面积的影响
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图 2 不同温度下气体流速变化对齐墩果酸检测基线值的影响
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图 3 不同温度下气体流速变化对簇契皂昔元噪音的影响
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图 6 不同气体流速下漂移管温度改变对菠契皂昔元噪音的影响
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根据以上实验结果 ,在几个不同的气体流速下 ,
温度升高时 , E巧 D 检测峰面积稍有升高 ,在 90 ℃
之前影响不大 , 90 ℃之后升高较为明显 ;温度的升
高使噪音在 90 ℃之后急剧升高 ,在 90 ℃之前几乎
药物分析杂志 C h in J P h~ An al 20 (拓 , 2 6 ( 9) 一 1247 一
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图 7 不同气体流速下漂移管温度改变对齐墩果酸基线值的影响
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图 8 不同气体流速下漂移管温度改变对齐墩果酸信噪比的影响
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没有影响 ;温度的升高使基线缓慢升高 ;温度升高使
ELS D 检测的信噪比呈降低趋势 , 可能与噪音的升
高有关 。
3 结果和讨论
3
.
1 色谱柱流出液经过 E SL D 并使被检组分产生
响应是一个非常复杂的过程 ,受到多种因素的影响 。
根据 M en ge ir kn 等人提出的理论 〔’ 了, 对于轴心式的
雾化器 ,被分析物颗粒的大小处在米氏散射区域 。
散射光强度随着被检组分颗粒粒径的增大呈指数增
加 。 而被检组分的粒径直接受到气体流速的影响 ,
气体流速愈大 ,其在气溶胶体系中的粒径愈小 。 本
试验的结果也表明 , 随着气体流速的增大 , ESL D 检
测的峰面积 、基线基准值 、 噪音都呈现下降趋势 。 由
于噪音水平的下降较响应值的减小更为明显 ,所以
导致 s/ N 呈现不规则的上升趋势 。
3
.
2 在 E L s D 的实际应用过程中 , 检测器气体流速
的设定要考虑到多种因素的影响 。 流动相中高沸点
组分的比例越大 , 在漂移管温度增大的同时 ,气体流
速也要相应地增大 ;即使是对于同一配比的流动相 ,
流速不同 ,也会使最佳气体流速的大小有所区别 ;如
果流动相中含有挥发性的酸碱调节剂 ,需要在响应
空白流动相的基础上适当地增大气体流速 , 而增大
的幅度主要取决于酸碱调节剂的浓度和种类 。 笔者
个人认为 , 在检测的灵敏度允许的情况下 ,应该尽可
能地使气体流速偏大一些 ,这对获得良好的基线 , 减
少检测器平衡时间 , 都会有所帮助 。
3
.
3 有文献报道 ,漂移管温度对 E巧D 检测结果的
影响没有规律性〔’ J 。 但本实验的研究结果表明 , 漂
移管温度对 E巧 D 检测结果的影响呈现了一定的规
律性 。 通过实验结果不难发现 ,分别在 3 个不同的
气体流速下 ,随着漂移管温度的升高 ,检测结果中受
影响最为明显的是噪音值。 噪音值在 90 ℃之前变
化不明显 ,在 90 ℃之后噪音水平迅速上升 。 本实验
中所使用的流动相为 95 % 甲醇 ,可能是由于漂移管
温度超过 % ℃之后 ,大大超过了混合流动相的理论
沸点 ,致使柱后流出液在检测器中的气化更为剧烈 ,
致使噪音水平急剧升高。 由于受到噪音升高的影
响 ,相应地使被检组分的响应值和基线基准值升高 ,
由于响应值的升高幅度远远低于噪音的增大幅度 ,
所以信噪比呈下降趋势 。
3
.
4 根据检测器制造商提供的用户工作手册 ,漂移
管温度设定的理论值应为流动相中各组分的百分比
与各组分沸点乘积之和 。 本实验中所使用的流动相
为 95 % 甲醇 ,理论漂移管温度应为 67 ℃ ,但是在此
漂移管温度下 ,根本无法完成检测 ,可能是由于本实
验中所使用的 ESL D 使用了轴心式雾化器 ,柱后流
出液完全进人检测室 ,气化不完全所致 。 本实验中
85 ℃为最佳漂移管温度 ,此时 夕刀 最大 , 具有最佳
检测灵敏度 。 根据本实验的研究结果 , 实际应用中
的最佳漂移管温度根据流动相的组成不同 , 要或多
或少地高于漂移管理论温度 。 特别是在流动相流速
比较大的情况下 , 漂移管温度更要相应地升高 。
参考文献
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(本文于 2 0( 拓 年 6 月 12 日修改回 )