全 文 ：黑龙江农业科学２０１５（３）：１２０～１２２
Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
ＨＰＬＣ法测定滇桂艾纳香中原儿茶酸
和原儿茶醛的含量
蒋冰清，罗盛东
（广西万寿堂药业有限公司，广西 南宁５３０２１９）
摘要：为了测定壮药材滇桂艾纳香中原儿茶酸和原儿茶醛的含量，利用高效液相色谱法测定６批壮药滇桂艾
纳香药材原儿茶酸和原儿茶醛的含量。结果表明：原儿茶酸、原儿茶醛分别在５．００８～２５．０４０及５．３４４～
２６．７２０μｇ·ｍＬ－
１范围内呈现良好的线性关系；原儿茶酸和原儿茶醛平均回收率分别为９８．６１％和９８．０７％，
ＲＳＤ分别为１．４４％和１．９９％。
关键词：高效液相色谱；滇桂艾纳香；原儿茶酸；原儿茶醛
中图分类号：Ｒ２８４．１　文献标识码：Ａ　文章编号：１００２－２７６７（２０１５）０３－０１２０－０３　ＤＯＩ：１０．１１９４２／ｊ．ｉｓｓｎ１００２－２７６７．２０１５．０３．０１２０
收稿日期：２０１４－１１－２８
第一作者简介：蒋冰清（１９８４－），女，广西壮族自治区兴安县
人，助理工程师，从事中成药及中药材的有效成分提取及质
量分析研究。Ｅ－ｍａｉｌ：２７４４９４１３０＠ｑｑ．ｃｏｍ。
　　滇桂艾纳香为菊科植物滇桂艾纳香［Ｂｌｕｍｅａ
ｒｉｐａｒｉａ（Ｂｌ．）ＤＣ．］的干燥全草，主要生长在广西
西北地区及云南东南部［１］。其具有活血、止血、利
水的功效，用于经期提前、产后血崩、产后浮肿、不
孕症及阴疮等病的治疗。其标准在广西壮族自治
区的《壮药质量标准》（第一卷）未见有含量测定，
本文利用高效液相色谱对滇桂艾纳香中原儿茶酸
和原儿茶醛含量进行测定。
１　材料与方法
１．１　材料
供试原儿茶酸（批号１１０８０９－２００６０４）对照品
购自中国药品生物制品检定所。原儿茶醛对照品
购自中国药品生物制品检定所（批号１１０８１０－
２００５０６）。供试仪器有 Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色
谱仪；ＢＰ２１１Ｄ型电子分析天平；ＰＳ－６０ＡＬ超声波
清洗仪（４０ｋＨｚ，３６０Ｗ）；甲醇、冰醋酸为色谱纯，
其它试剂均为分析纯。
１．２　方法
１．２．１　对照品制备　精密称取原儿茶酸对照品
６．２６ ｍｇ、原儿茶醛对照 ６．６８ ｍｇ，分别置于
２５ｍＬ容量瓶中，用甲醇摇匀，定容，作为原儿茶
酸、原儿茶醛对照品储备液；分别精密量取上述储
备液原儿茶酸５ｍＬ、原儿茶醛２ｍＬ，置５０ｍＬ容
量 瓶 中，摇 匀，定 容，即 得 含 原 儿 茶 酸
２５．０４μｇ·ｍＬ－
１和原儿茶醛１０．６８８μｇ·ｍＬ－
１的混
合对照品溶液。
１．２．２　供试品溶液制备　取滇桂艾纳香药材粗
粉约５ｇ，精密称定，加水２００ｍＬ，浸泡３０ｍｉｎ，煎
煮３次，每次１．５ｈ，滤过，合并滤液，滤液浓缩至
约４０ｍＬ，用稀盐酸调ｐＨ２～３［３］，用乙醚萃取４
次（２０、１５、１５、１５ｍＬ），合并乙醚液，置于盛有２ｇ
无水硫酸钠的锥形瓶中静置１５ｍｉｎ，分取乙醚
液，蒸干，残渣加甲醇溶解，并转移至１０ｍＬ容量
瓶中，摇匀，定容，用０．４５μｍ的滤膜滤过。
１．２．３　色谱条件　依利特ＯＤＳ　Ｃ１８色谱柱（４．６ｍｍ×
２５０ｍｍ；５μｍ）；流动相由甲醇（Ａ）和１％冰醋酸
（Ｂ）组成［２］；进行梯度洗脱，在０～６ｍｉｎ，１０％甲
醇洗脱，６～１２ｍｉｎ，１５％甲醇洗脱，１０～２０ｍｉｎ，
１５％甲醇洗脱，２０～２５ｍｉｎ，４５％甲醇洗脱，２５～
４５ｍｉｎ，４５％甲醇洗脱。检测波长为２８０ｎｍ，流
速１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温２５℃。在此条件下分别吸
取对照品溶液、供试品溶液各１０μＬ注入液相色
谱仪。对照品采用外标法计算。
１．２．４　线性关系考察　分别吸取对照品储备液
１．０、２．０、３．０、４．０和５．０ｍＬ，置于２５ｍＬ容量瓶
中，甲醇定容，摇匀。再分别吸取上述溶液各
１０μＬ，注入液相色谱仪中，测定原儿茶酸和原儿
茶醛的峰面积。
１．２．５　精密度试验　吸取原儿茶酸和原儿茶醛
的混合对照品溶液１０μＬ，注入液相色谱仪中进
行测定，平行测定５次。
１．２．６　稳定性试验　吸取同批滇桂艾纳香药材
制成的供试品溶液１０μＬ，注入液相色谱仪中，分
别于０、２、４、８和１２ｈ进行测定，平行测定５次。
１．２．７　重复性试验　取同批滇桂艾纳香药材粗
０２１
３期 　　蒋冰清等：ＨＰＬＣ法测定滇桂艾纳香中原儿茶酸和原儿茶醛的含量
粉５份，每份约５ｇ，精密称量，制备供试品溶液，
按上述色谱条件测定原儿茶酸及原儿茶醛的
含量。
１．２．８　加样回收试验　取同一批次的滇桂艾纳
香粗粉（原儿茶酸含量６１．２２μｇ·ｇ－
１、原儿茶醛含
量３２．２７μｇ·ｇ－
１）约２．５ｇ，共５份，分别加入５ｍＬ
２５．０４μｇ·ｍＬ－
１原儿茶酸对照品，５ｍＬ原儿茶醛
对照（１０．６８８μｇ·ｍＬ－
１），按１．２．２方法制得供试
品溶液，并按此色谱条件测定原儿茶酸、原儿茶醛
的含量，计算加样回收率。
２　结果与分析
２．１　色谱条件的选择
根据文献资料可知［１］，原儿茶酸的最大吸收
波长为２５６ｎｍ，而原儿茶醛的最大吸收波长为
２８０ｎｍ。为了原儿茶酸和原儿茶醛的峰都能检
测到，故本试验采用２８０ｎｍ作为检测波长。在
此色谱条件可将供试品溶液中原儿茶酸、原儿茶
醛与其它成分峰分离，图谱见图１与图２。
图１　对照品的 ＨＰＬＣ的色谱图
Ｆｉｇ．１　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　ＣＫ
２．２　线性关系考察
以对照品溶液浓度为横坐标，分别以原儿茶
酸、原儿茶醛峰面积积分值为纵坐标，制得标准曲
线，回归方程分别为：Ｙ＝１６．３６２　Ｘ－０．５２，Ｒ２＝
０．９９９　７（ｎ＝５）；Ｙ ＝４９．３１７　Ｘ＋７．４３，Ｒ２ ＝
０．９９９　４（ｎ＝５），原儿茶酸和原儿茶醛线性范围分
别为５．００８～２５．０４０和５．３４４～２６．７２０μｇ·ｍＬ－
１
有良好的线性关系。
图２　供试品的 ＨＰＬＣ的色谱图
Ｆｉｇ．２　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅｓ
２．３　精密度分析
原儿茶酸、原儿茶醛峰面积的平均值分别为
４１１．３和５４５．４；ＲＳＤ分别为０．７０％和０．９７％（ｎ＝
５），表明仪器精密度良好。
２．４　稳定性分析
原儿茶酸、原儿茶醛峰面积的平均值分别为
５０５．７和８２２．９；ＲＳＤ分别为０．９８％和０．５９％（ｎ＝
５），表明样品溶液在１２ｈ内具有较好的稳定性。
２．５　重复性检验
原儿茶酸和原儿茶醛的平均含量分别为
６１．２２和３２．２７μｇ·ｇ－
１，ＲＳＤ 分别为０．５３％和
０．６９％（ｎ＝５），表明该方法重现性较好。
２．６　加样回收结果分析
由表１可知，原儿茶酸、原儿茶醛平均加样回
收率分别为９８．６１％和９８．０７％，ＲＳＤ 分别为
１．４４％和１．９９％（ｎ＝５）。
表１　加样回收率结果分析
Ｔａｂｌｅ　１　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｎ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ
称样量／ｇ
Ｓａｍｐｌｅ
ｗｅｉｇｈｔ
原儿茶酸Ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ 原儿茶醛Ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｌｄｅｈｙｄｅ
取样量／ｍｇ
Ｓａｍｐｌｅ
ｗｅｉｇｈｔ
加入量／ｍｇ
Ａｄｄｉｔｉｏｎ
ｗｅｉｇｈｔ
实测量／ｍｇ
Ｍｅａｓｕｒｅｄ
ｗｅｉｇｈｔ
回收率／％
Ｒｅｃｏｖｅｒｙ
取样量／ｍｇ
Ｓａｍｐｌｅ
ｗｅｉｇｈｔ
加入量／ｍｇ
Ａｄｄｉｔｉｏｎ
ｗｅｉｇｈｔ
实测量／ｍｇ
Ｍｅａｓｕｒｅｄ
ｗｅｉｇｈｔ
回收率／％
Ｒｅｃｏｖｅｒｙ
２．５０１２　 ０．１５３１　 ０．１２５２　 ０．２７５５　 ９７．７６　 ０．０８０７１　 ０．０５３４４　 ０．１３４２　 １００．０９
２．５０１９　 ０．１５３２　 ０．１２５２　 ０．２７６８　 ９８．７２　 ０．０８０７３　 ０．０５３４４　 ０．１３４１　 ９９．８７
２．５０５１　 ０．１５３４　 ０．１２５２　 ０．２７８０　 ９９．５２　 ０．０８０８４　 ０．０５３４４　 ０．１３２０　 ９５．７３
２．５０４４　 ０．１５３３　 ０．１２５２　 ０．２７８９　 １００．３２　 ０．０８０８２　 ０．０５３４４　 ０．１３２４　 ９６．５２
２．５０２７　 ０．１５３２　 ０．１２５２　 ０．２７４３　 ９６．７３　 ０．０８０７６　 ０．０５３４４　 ０．１３３２　 ９８．１３
２．７　样品含量测定
由表２可知，６批壮药滇桂艾纳香药材含量
测定中原儿茶酸的最高含量达到７９．７５ｍｇ·ｇ－１，
最低含量是５５．６７ｍｇ·ｇ－１，而原儿茶醛的最高含
１２１
　　　　　黑　龙　江　农　业　科　学 ３期
量达到３６．１２ｍｇ·ｇ－１，最低含量是２７．３５ｍｇ·ｇ－１。
结果表明，不同产地的壮药滇桂艾纳香药材中原
儿茶酸和原儿茶醛的含量差异也较大。
表２　供试品原儿茶酸和原儿茶醛含量测定结果
Ｔａｂｌｅ　２　Ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ
ａｌｄｅｈｙｄｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅｓ
产地
Ｏｒｉｇｉｎａｌ
原儿茶酸／
（ｍｇ·ｇ－１）
Ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ
ａｃｉｄ
ＲＳＤ／％
原儿茶醛／
（ｍｇ·ｇ－１）
Ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ
ａｌｄｅｈｙｄｅ
ＲＳＤ／％
田阳
Ｔｉａｎｙａｎｇ
７９．７５　 １．０９　 ３６．１２　 ２．１０
凌云
Ｌｉｎｇｙｕｎ
６６．１７　 １．２７　 ３２．５８　 １．９６
百色
Ｂａｉｓｅ
５８．４９　 １．０４　 ２９．５４　 １．５７
田林
Ｔｉａｎｌｉｎ
６３．１８　 ０．９４　 ３０．６６　 １．６２
靖西
Ｊｉｎｇｘｉ
６２．０３　 １．６３　 ３１．８１　 １．２８
龙州
Ｌｏｎｇｚｈｏｕ
５５．６７　 １．１７　 ２７．３５　 １．４８
３　结论与讨论
水提取液浓缩后，用乙酸乙酯、乙醚及水饱和
正丁醇等溶剂萃取，进样分析，乙醚萃取的峰好一
些，在ｐＨ２～３的酸性条件下，用乙醚萃取提取完
全，峰型好。故本法采用稀盐酸调ｐＨ２～３后，乙
醚萃取进行前处理。选择甲醇∶冰醋酸∶水＝１０∶
９０∶１，甲醇∶１％冰醋酸＝９０∶１０，甲醇∶水＝２０∶８０，
用冰醋酸调ｐＨ２．８；结果表明，０～６ｍｉｎ，１０％
甲醇洗脱，６～１２ ｍｉｎ，１５％ 甲醇洗脱，１０～
２０ｍｉｎ，１５％甲醇洗脱，２０～２５ｍｉｎ，４５％甲醇洗
脱，２５～４５ｍｉｎ，４５％甲醇洗脱，作为流动相进行
洗脱，得到分散度好的色谱峰，供试品中原儿茶酸
与原儿茶醛的分离度也较高。
本试验建立了 ＨＰＬＣ测定壮药材滇桂艾纳
香中原儿茶酸和原儿茶醛的色谱条件，并对该测
定方法进行了方法验证。结果表明，该法线性关
系良好，回收率、精密度高，重复性良好，具有准
确、灵敏的特点，可作为壮药材滇桂艾纳香质量控
制与评价的方法之一。
参考文献：
［１］　王治平，杨珂，孟祥平，等．ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定滇桂艾纳香中
原儿茶酸与原儿茶醛的含量［Ｊ］．中药材，２００５，１５（５）：
３９３－３９４．
［２］　郑维兵．ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定急支糖浆中原儿茶酸和原儿茶醛
的含量［Ｊ］．儿科药学杂质，２０１０，１６（４）：５１－５２．
［３］　邢俊波，王朝红．ＨＰＬＣ法测定肺炎平胶囊中原儿茶酸和原
儿茶醛的含量［Ｊ］．中国实验方剂杂质，２００８（３）：８－１２．
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　Ａｃｉｄ　ａｎｄ　Ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ
Ａｌｄｅｈｙｄｅ　ｉｎ　Ｂｌｕｍｅａｅ　ｒｉｐａｒｉａｅ　ｂｙ　ＨＬＰＣ
ＪＩＡＮＧ　Ｂｉｎｇ－ｑｉｎｇ，ＬＵＯ　Ｓｈｅｎｇ－ｄｏｎｇ
（Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｍｅｄｉｃ　Ｔｏｐ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ　Ｌｉｍｉｔｅｄ，Ｎａｎｎｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｘｉ　５３０２１９）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｄｅｖｅｌｏｐ　ａｎ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｒｏｔｏｃａｔｏｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｌｄｅｈｙｄｅ　ｉｎ
Ｄｉａｎｇｕｉ＇ａｉｎａｘｉａｎｇ，ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｌｄｅｈｙｄｅ　ｏｆ　Ｂｌｕｍｅａｅ　ｒｉｐａｒｉａｅ　ｆｒｏｍ　ｓｉｘ　ｏｒｉｇｉｎ　ｗｅｒｅ
ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＨＬＰＣ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ　ｈａｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ
５．００８～２５．０４μｇ，ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｌｄｅｈｙｄｅｔｈｅ　ｈａｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　５．３４４～２６．７２μｇ，ｔｈｅ　ｒｅ－
ｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９８．６１％ａｎｄ　９８．０７％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ＲＳＤ　ｗａｓ　１．４４％ａｎｄ　１．９９％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＨＬＰＣ；Ｂｌｕｍｅａｅ　ｒｉｐａｒｉａｅ；ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｃｉｄ；ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ　ａｌｄｅｈｙｄｅ
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