全 文 :DOI:10. 13463 / j. cnki. cczyy. 2014. 06. 011
金钱草提取物对阿霉素肾病大鼠血脂
及凝血功能的影响
冯 梅,汪 洋
(安徽中医药高等专科学校,安徽 芜湖 241000)
摘要:目的 观察金钱草提取物对阿霉素肾病血脂、凝血功能的影响,进一步对其疗效作出客观的评价。方
法 将雄性 SD大鼠 6O只,随机分为 6组:空白对照组、模型对照组、激素对照组、激素加中药低剂量组、激素加中
药中剂量组、激素加中药高剂量组。检测尿蛋白定量、血脂及出凝血时间。结果 金钱草提取物对尿蛋白升高有
抑制作用;激素加金钱草低、中、高剂量组 Tch水平较激素组明显降低、而对 TG、LDL的作用中、低剂量组不明显,
高剂量组降低较明显;激素加金钱草提取物高剂量组 TT、PT、APTT 较单纯激素治疗组明显延长(P < 0. 05),FIB
含量明显减少。结论 金钱草提取物对阿霉素肾病大鼠有调节脂质代谢紊乱,改善凝血的作用。
关键词:金钱草提取物;阿霉素肾病;血脂;出凝血时间
中图分类号:R285. 5 文献标志码:A 文章编号:2095 - 6258(2014)06 - 0992 - 03
基金项目:安徽中医药高等专科学校校级科研项目(ZRKX1026)。
作者简介:冯 梅(1976 -) ,女,硕士,主治医师,主要从事中西医结合肾病研究。
Extract of lysimachia christinae hance on the serum lipids and blood coagulation
function of rats with adriamycin nephropathy
FENG Mei,WANG Yang
(Anhui College of Traditional Chinese Medicine,Wuhu 241000,Anhui Province,China)
Abstract:Objective To observe the effect of extract of Lysimachia christinae Hance on the serum lipids and blood co-
agulation function of rats with adriamycin nephropathy,in order to make a further evaluation of the efficacy of the extract
objectively.Methods 60 male SD rats were randomly divided into six groups:control group,model group,
hormone
4 小结
本实验结果证明,在脑梗死大鼠神经功能缺损改
善、促进缺血半暗带吸收、降低脑含水量上采用“益
气活血化瘀”法方剂补阳还五汤具有显著效果,并优
于单纯的“活血化瘀”法方剂。应用“益气活血化瘀”
法方剂能成功促进内源性 NSC 增殖、分化及参与病
损的修复,并优于单纯的“破血化瘀”法方剂。本实
验结果,进一步支持了中医“益气活血化瘀”治法的
治疗作用,为临床应用提供了科学依据。
参考文献:
[1]Reynolds B A,Weiss S. Generation of neurons and astrocytes
from isolated cell of the adult mammalian central nervous sys-
tem[J]. Science,1992,255(5052) :1707.
[2]熊方令,高宜录.内源性神经干细胞修复中枢神经系统损
伤的策略[J].基础医学与临床,2010,30(10) :1105-1108.
[3]苏晓慧,孔祥英,庞宗然,等.补阳还五汤对大鼠局灶性脑
缺血后神经干细胞迁移的影响[J]. 中国实验方剂学杂
志,2012,18(6) :159-162.
[4]谢静红.补阳还五汤治疗急性缺血性脑卒中气虚血瘀证
30 例[J].河南中医,2011,31(2) :188-189.
[5]刘柏炎,蔡光先,林琳,等.补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺
血后神经干细胞影响的初步研究[J]. 中国临床康复,
2004,8(22) :4532-4533,4672. (收稿日期:2014 - 09 - 10)
—299—
第30卷第6期
2014年 12 月
长 春 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1. 30
12,2014
group,low-dose group of hormone plus the extract,medium-dose group of hormone plus the extract and high-dose
group of hormone plus the extract,detecting their urinary protein excretion,serum lipids and bleeding and clotting
time. Results Extract of Lysimachia christinae Hance can inhibit the increase of the urinary protein excretion,and
the level of Tch in the low-,medium-and high-dose groups hormone plus the extract is decreased significantly com-
pared with that in the hormone group,and no obvious effect is found on the level of TG and LDL in low-and medium-
group of hormone plus the extract,while obvious decrease of that in the high-dose group is found. TT,PT and APTT are
significantly prolonged in the high-dose group of hormone plus the extract,with a decreased level of FIB,compared
with that in the hormone group(P < 0. 05). Conclusion Extract of Lysimachia christinae Hance can regulate the dis-
order of lipid metabolism and improve the blood coagulation in rats with adriamycin nephropathy.
Key words:extract of lysimachia christinae hance;adriamycin nephropathy;serum lipids;bleeding and clotting time
金钱草为报春花科植物过路黄的干燥全草,其
化学成分主要为黄酮类。药理研究[1]表明,金钱草
总黄酮对血栓形成有一定的抑制作用。本研究通过
制备阿霉素(adriamycin,ADR)肾病大鼠模型,研究金
钱草提取物对其血脂、出凝血时间的影响,初步探讨
其对阿霉素肾病大鼠的保护作用。
1 材料与方法
1. 1 实验材料
1. 1. 1 药物和试剂 金钱草提取物:金钱草购自安
徽中医药高等专科学校附属中医院,取金钱草饮片粗
粉,用 10 倍量 70%乙醇浸泡 1 h,回流提取 3 次,提
取液回收乙醇,减压浓缩,干燥,得率 9. 8%。阿霉素
由浙江海正药业股份有限公司生产(批号:国药准字
H33021980)。泼尼松片:上海信谊药厂有限公司生
产(批号:国药准字 H31020675)。
1. 1. 2 实验动物 SD雄性大鼠 60 只,SPF 级,体质
量(200 ± 10)g,由南京青龙山实验动物中心提供(许
可证号:SOXK苏 2009-0001)。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 动物造模 采用改良的肾病模型造模法,每
只鼠分 2 次经尾静脉注射阿霉素;第 1 次注射按
4 mg /kg体质量,时隔 1 周,第 2 次注射按 3. 5 mg /kg
体质量。试验采用在不同时间点 24 h 尿蛋白定量与
正常组相比较是否明显升高,确定造模是否成功。
1. 2. 2 分组及给药 60只大鼠适应性喂养 5 d 后,随
机分为空白组、模型组、泼尼松组、泼尼松加金钱草低
剂量组、泼尼松加金钱草中剂量组,泼尼松加金钱草高
剂量组,每组 10只。空白及模型对照组,大鼠每日自
由饮自来水,实验组及激素组于 2 次造模后第 2 周开
始给药,治疗组泼尼松按 10 mg /(kg·d)给药,将泼尼
松研成粉末,溶于蒸馏水 2 mL,每日早晨顿服。金钱
草提取物低、中、高剂量组分别按 300,600,900 mg /(kg
·d) (分别相当于金钱草生药约3,6,9 g /kg)溶于蒸馏
水灌胃,第 2 次注射阿霉素 1 周后,各组开始灌胃给
药,1次 /d,用药均为 3周,中药和西药时间间隔 1 h。
1. 2. 3 检测指标及方法
1. 2. 3. 1 一般情况 大鼠的一般活动、精神、体质
量、皮毛、饮食、二便等情况。
1. 2. 3. 2 24 h尿蛋白测定 分别于第 2 次注射阿霉
素后第 7,14,21,28 天用代谢笼收集大鼠 24 h 尿液,
采用磺柳酸法测定大鼠 24 h尿蛋白定量 1 次。
1. 2. 3. 3 血清生化指标 实验结束时将大鼠麻醉
后,剖开腹腔,经腹主动脉取血约 5 mL /只。用日本
产 oLYMPUS AU640 全自动生化分析仪检测胆固醇
(CHo) ,三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)。采用
德国美创 Coatron 1800 全自动血凝分析仪,检测大鼠
凝血酶原时间(PT) ,凝血酶时间(TT) ,部分凝血活
酶时间(APTT)和纤维蛋白原(FIB)。
1. 3 统计学处理 数据经 SPSS 11. 0 软件处理,以
均数 ±标准差(珋x ± s)表示,多组间比较采用单因素方
差分析。
2 实验结果
2. 1 大鼠的一般情况 2 次注射阿霉素 2 h后,部分
大鼠出现粉红色小便,随后 2 周内饮食及饮水量明显
减少,精神低靡,活动减少,脱毛,消瘦,腹泻等表现,3
周后饮食增加,精神好转,但四肢及阴囊水肿明显。
空白组前后除体质量明显增加外没有明显变化。在
2 次造模后 1 周内模型组、激素组、高剂量各有 2 例
大鼠死亡,低、中剂量组各有 3 例死亡。大鼠死亡前
多有腹泻及眼角、口周出血症状。1 周后各组均无死
亡记录。
2. 2 各组大鼠不同时间段尿蛋白定量比较 见表 1。
—399—
第30卷第6期
2014 年 12 月
长 春 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1. 30
12,2014
表 1 各组大鼠不同时间段尿蛋白定量的比较(珋x ± s,n = 10) mg /24 h
组 别 7 d 14 d 21 d 28 d
空白组 8. 26 ± 2. 45 8. 58 ± 1. 91 9. 03 ± 2. 67 8. 92 ± 2. 51
模型对照组 7. 66 ± 2. 60 98. 53 ± 13. 25## 187. 60 ± 34. 22## 301. 72 ± 64. 23##
激素对照组 8. 85 ± 1. 59 82. 15 ± 24. 68## 121. 34 ± 17. 25##△ 147. 26 ± 28. 75##△△
激素 +中药低剂组 7. 89 ± 2. 39 85. 37 ± 19. 19## 115. 37 ± 22. 01##△ 128. 83 ± 13. 21##△△▲
激素 +中药中剂组 8. 05 ± 1. 54 90. 10 ± 15. 96## 106. 52 ± 16. 88##▲ 119. 33 ± 25. 46##△△▲
激素 +中药高剂组 7. 79 ± 2. 26 89. 62 ± 19. 28## 101. 98 ± 18. 24△△▲ 89. 68 ± 22. 12##△△▲▲☆★
注:与空白组比较,##P < 0. 01;与模型对照组比较,△P < 0. 05,△△P < 0. 01;与激素对照组比较,▲P < 0. 05,▲▲P < 0. 01;与中药低剂量组
比较,☆P < 0. 05;与中药中剂量组比较,★P < 0. 05
2. 3 末次给药后各组大鼠血脂水平比较 见表 2。 2. 4 末次给药后各组大鼠出凝血时间比较 见表 3。
表 2 末次给药后各组大鼠血脂水平的比较(珋x ± s,n = 10) mmol /L
组 别 Tch TG LDL
空白组 1. 64 ± 0. 15 0. 69 ± 0. 11 0. 58 ± 0. 27
模型对照组 4. 47 ± 0. 50##☆★ 5. 40 ± 0. 63## 1. 49 ± 0. 48##
激素对照组 4. 12 ± 0. 76##☆★ 4. 91 ± 3. 11## 1. 54 ± 0. 52##
激素 +中药低剂组 2. 85 ± 0. 77##△▲▲ 4. 62 ± 3. 34## 1. 47 ± 0. 36##
激素 +中药中剂组 2. 83 ± 0. 82##△▲▲ 4. 97 ± 1. 64## 1. 41 ± 0. 21##
激素 +中药高剂组 2. 62 ± 0. 63##△▲▲ 3. 20 ± 1. 03##△ 0. 98 ± 0. 44##△▲▲☆★
注:与空白组比较,#P < 0. 05;与模型对照组比较,△P < 0. 05;与激素对照组比较,▲▲P < 0. 05,与中药低剂量组比较,☆P < 0. 05;与中药中
剂量组比较,★P < 0. 05
表 3 末次给药后各组大鼠出凝血时间比较(珋x ± s,n = 10)
组 别 TT /s PT /s APPT /s FIB /(g /L)
空白组 30. 85 ± 2. 01 14. 56 ± 0. 98 22. 85 ± 2. 72 2. 21 ± 0. 88
模型对照组 21. 03 ± 2. 87#☆★ 13. 33 ± 0. 96# 17. 59 ± 3. 22# 3. 65 ± 1. 88#
激素对照组 20. 96 ± 1. 97#☆★ 15. 80 ± 1. 30#△ 16. 46 ± 1. 83# 4. 28 ± 0. 72#
激素 +中药低剂组 21. 02 ± 2. 31# 16. 86 ± 1. 12#△ 17. 86 ± 3. 63# 2. 82 ± 0. 71△▲
激素 +中药中剂组 24. 26 ± 3. 15#△▲ 18. 80 ± 1. 86#△△▲☆ 18. 99 ± 1. 41# 2. 36 ± 1. 88△▲
激素 +中药高剂组 27. 22 ± 2. 03#△▲ 18. 84 ± 2. 45#△△▲☆ 19. 98 ± 2. 04#△△▲☆ 2. 18 ± 0. 84△△▲★
注:与空白组比较,#P < 0. 05;与模型对照组比较,△P < 0. 05,△△P < 0. 01;与激素对照组比较,▲P < 0. 05;与中药低剂量组比较,
☆P < 0. 05;与中药中剂量组比较,★P < 0. 05
3 讨论
阿霉素诱导的肾病综合征模型已广泛应用于肾
脏病的研究中,并成为肾病研究的重要手段。其机制
是利用含醌的蒽环抗生素,在肾脏内代谢还原为半醌
型自由基,后者与氧反应产生活性氧,诱发肾小球上
皮细胞脂质过氧化反应,破坏滤过膜结构和功能,产
生蛋白尿[2-3]。先前的单次高剂量的给药方法容易导
致实验大鼠的死亡,参照文献及研究成员的经验积
累,研究采用改良的肾病模型造模法,每只鼠分两次
经尾静脉注射阿霉素的方法,降低了造模的病死率,
而且也具备了肾病综合征的临床特点。
本研究采用随机分组、对照的实验方法,模拟临
床治疗过程,通过以上实验数据可知金钱草提取物对
肾病大鼠尿蛋白、血脂特别是胆固醇的升高有抑制作
用,且能改善治疗大鼠的凝血功能[4-5]。而其降脂、改
善凝血的功能是否与金钱草总黄酮提取物具有松弛
血管平滑肌、降低血小板聚集率以及对抗血栓形成的
作用有关[1,6],有待进一步研究。
参考文献:
[1]薄锋,袁玲,张永和.金钱草总黄酮提取物的抗血栓作用研
究[J].长春中医药大学学报,2007,23(2) :10-11.
[2]孙章松,周海燕,王永明,等.肾病综合征高凝状态的相关
因素及治疗[J].浙江中西医结合杂志,2002,12(10) :628-
629.
[3]叶任高.内科学[M]. 5 版. 北京:人民卫生出版社,2002:
532.
[4]顾丽贞,张百舜,南继红,等.四川大金钱草与广金钱草抗
炎作用的研究[J].中药通报,1988,13(7) :40-42,63.
[5]董良飞,高云涛,杨益林,等.金钱草提取物体外清除活性
氧及抗氧化作用研究[J]. 云南中医中药杂志,2006,27
(3) :47-48.
[6]高学敏,钟赣生.临床中药学[M].石家庄:河北科学技术
出版社,2006:476.
(本栏责任编辑:张海洋 收稿日期:2014 - 04 - 21)
—499—
第30卷第6期
2014 年 12 月
长 春 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1. 30
12,2014