全 文 ：中西医结合研究 2009年 12月第 1卷第 6期　Research o f Integrated Traditional Chinese and Western Medicine 2009 December Vol.1 No.6
文章编号:1674-4616(2009)06-0281-04 · 实验研究 ·
＊卫生厅资助课题[ No.鄂卫发 2006(63)]
■通讯作者 , C orresp onding author , E-mai l:shenlin hb@yahoo.com.cn
葫芦巴提取物对肾病综合征大鼠肾损伤的保护作用＊
卢芙蓉　　秦　铀　　沈　霖■ 　　刘建国　　熊鹏程
华中科技大学同济医学院附属协和医院中西医结合科 ,武汉　430022
　　摘要　目的　观察葫芦巴总皂苷改善阿霉素诱导的肾病综合征大鼠肾脏损伤的作用 。方法　30
只 SD雄性大鼠随机分为对照组 、模型组和治疗组 ,每组 10只 。采用一次性尾静脉注射盐酸阿霉素 ,制
备肾脏损伤模型 ,分别在治疗第 0 、1 、2 、3和 4周检测大鼠 24 h尿蛋白排泄量。治疗 4周后 ,各组大鼠
处死后取双肾称重 ,计算肾重指数;肾组织行苏木精-伊红染色 ,光镜下观察形态学改变;并取血检测血
清总蛋白(TP)、清蛋白(A LB)、血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、血糖(BG)、总胆固醇(TC)和三酰甘
油(TG)。结果　从治疗第 1 ～ 4周 ,治疗组和模型组 24 h 尿蛋白排泄量明显高于对照组(P 均 <
0.01),而治疗组明显低于模型组(P 均<0.01);治疗结束后 ,治疗组与模型组肾重指数 、TC 和 TG 均明
显高于对照组(P 均<0.05),而治疗组上述指标均明显低于模型组(P 均<0.05);模型组 TP 和 ALB
明显低于对照组(P 均<0.05),而治疗组上述指标均明显高于模型组(P 均<0.05);肾组织苏木精-伊
红染色显示 ,模型组出现明显的病理形态学改变 ,而治疗组病理损害明显减轻 。结论　葫芦巴总皂苷对
阿霉素肾病大鼠肾脏损伤具有明显的保护作用。
　　关键词　葫芦巴总皂苷;　阿霉素肾病;　肾病综合征
Protective Effect of Trigonella Foenum-graecum L Total Saponins on Kidney
Injury in Adriamycin-induced Nephropathy Rats
LU Furong ,QIN You , SHEN Lin■ ,et al
Depar tment of Integrated T raditional Chinese and Western Medicine ,Union Hospital ,
Tongj i Medical College , Huazhong University of Science and Technology ,Wuhan 430022
　　Abstract　Objective　To observe the improving ef fect of t rigo nella foenum-g raecum L total saponins(TFGs)
on kidney injury in adriamycin-induced nephropathy rat s.Methods　Thirty SD male rat s were randomly divided in-
to control group ,model g roup and t reatm ent g roup , 10 rat s in each g roup.The models of adriamy cin-induced ne-
phropathy w ere set up by tail vein injection o f dox orubicin hy drochloride.24 h urine pro tein was detected before
t reatment as well as in the 1st , 2nd , 3rd and 4th week.Af ter 4 w eeks t reatm ent , the rat s w ere sacrif iced and the
kidney s w ere collected for weight measuring and H-E staining.Meanw hi le , tot al serum protein(TP), serum albu-
min(ALB), serum creatinine(SCr), blood urea ni trogen(BUN), blood g luco se(BG), tot al cholesterol(TC)and t ri-
g lyceride(TG)w ere observed.Results　From the 1st w eek to the 4th w eek , 24 h urine protein in model and t reat-
ment g roup w as signif icant ly increased compared to contro l g roup(P<0.01 , respectively), and 24 h urine protein in
t reatment g roup was markedly low er than that in model group(P<0.01 , respectively).Af ter the treatment , the ra-
tio of kidney w eig ht to body weight , TC and TG in model group w ere all s tatis tically higher than those in cont ro l
group(P<0.05 , respectively), and the above indexes in t reatment group w ere all remarkably lower compared with
the model g ro up(P <0.05 , respectively).M oreover , TP and ALB in model g roup were significantly low er than
those in cont rol group(P <0.05 , respectively), and the above indexes in treatment g roup remarkably increased
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compared w ith model group(P<0.05 , respectively).H-E staining show ed that obvious patho lo gical lesion was
presented in model g roup , and the lesion was amelio rated in t reatment group.Conclusion　TFGs has desirably pro-
tect ive ef fect on adriamy cin-induced nephropathy.
　　Key words　Trig onella foenum-g raecum L total saponins;Adriamycin-induced nephropathy;Nephroti c syn-
drome
　　肾病综合征临床表现为大量蛋白尿 、低蛋白血
症 、浮肿和高脂血症 。目前治疗以糖皮质激素和免疫
抑制剂为主 ,虽然有一定近期疗效 ,但停药后容易复
发 ,且副作用较大。而中药对肾病综合征的治疗显示
出一定的优势 。中药葫芦巴及其提取物具有多种药
理作用 ,包括降低血糖 、调节血脂和抗肿瘤等[ 1] 。最
近有研究者在临床研究中观察到葫芦巴的活性成分
葫芦巴总皂苷 ,可以明显改善 2型糖尿病患者胰岛素
抵抗[ 2] 。近年来有研究报道 ,葫芦巴还具有保护糖尿
病肾病肾损伤的作用[ 3] 。本研究利用阿霉素肾毒性
作用制备肾病综合征模型 ,观察葫芦巴总皂苷对肾脏
是否具有保护作用 ,现报道如下。
1　材料与方法
1.1　实验动物
清洁级 SD大鼠 30 只 ,雄性 ,3 月龄 ,体重 180 ～
200 g ,购自同济医学院实验动物中心 。动物房饲养每
笼 5只 , 24 h 换垫料 1次 ,自由摄取水和食物 ,温度
(24±2)℃,相对湿度(45±3)%,光照时间固定 ,每天
昼夜各 12 h。
1.2　动物模型和实验分组
所有大鼠按随机原则分为对照组 、模型组和治疗
组 ,每组 10只。适应性饲养 1周后 ,模型组和治疗组
按 Bertani[ 4] 方法制备阿霉素肾病模型 ,在非麻醉下一
次性尾静脉注射盐酸阿霉素(浓度为2 mg/ml ,法玛西
亚有限公司)6 mg/kg ,对照组注射等量生理盐水作为
对照 。造模后 1 d ,对照组和模型组给予生理盐水 2
ml灌胃 ,治疗组给予葫芦巴总皂苷(四川省中药研究
所提供)8 g/(kg ·d)灌胃 ,每天 1次 ,连续给药 4周。
1.3　24 h尿蛋白定量
分别在治疗第 0 、1 、2 、3和 4周 ,将大鼠置于代谢
笼内收集 24 h尿量 ,采用磺柳酸法测定各时间点24 h
尿蛋白排泄量。
1.4　血清生化指标测定
完成治疗后 ,腹腔静脉采血 。采用全自动生化分
析仪检测血清总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、血肌酐
(SCr)、尿素氮(BUN)、血糖(BG)、总胆固醇(TC)和
三酰甘油(TG),所有检测均在本院检验科完成 。
1.5　标本采集肾脏病理检查
治疗完成后 ,大鼠采用苯巴比妥钠 400 mg/kg-麻
醉 ,取双肾称重 ,计算肾重指数[ 双肾重量(mg)/大鼠
体重(g)] 。肾组织行苏木精-伊红染色 ,光镜下观察肾
小球形态结构及间质改变。
1.6　统计学处理
采用 SPSS 10.0软件包进行统计处理 ,计量资料
用 x±s表示 ,组间比较采用方差分析 ,组间两两比较
采用 LSD法 ,以 P<0.05为差异有统计学意义 。
2　结果
2.1　一般情况
造模后第 4天 ,模型组和治疗组大鼠喜卧少动 ,
精神萎顿 ,体毛杂乱 ,晦暗无泽 。第 7天起出现腹部 、
睾丸和下肢水肿 ,部分大鼠尾部溃烂 。实验过程中 ,
无一例大鼠死亡。
2.2　葫芦巴总皂苷对阿霉素大鼠 24 h尿蛋白的影响
0周时 3组大鼠 24 h 尿蛋白排泄量无明显差异
(P>0.05);第 1周开始 ,模型组和治疗组均明显高于
对照组(P 均<0.01),但治疗组明显低于模型组(P
均<0.01);随着时间变化 ,模型组尿蛋白不断增高 ,
在第 4周达到最大值(388.5±120.3)mg/24 h;而治
疗组在第 2周达到最大值(180.2±52.3)mg/24 h
后 ,此后逐渐下降 ,在第 4周达(132.6±80.9)mg/24
h 。见图 1。
图 1　三组大鼠治疗过程中 24 h 尿蛋白排泄量的比较
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2.3　葫芦巴总皂苷对阿霉素大鼠肾重指数和血生化
指标的影响
　　模型组和治疗组大鼠肾重指数均明显高于对照
组(P<0.01或 P <0.05),但治疗组明显低于模型组
(P<0.01);模型组和治疗组大鼠 TP 和 ALB 明显低
于对照组(P 均<0.05),而治疗组 TP 和 A LB明显高
于模型组(P <0.05或 P <0.01);模型组和治疗组大
鼠 TC和 TG明显高于对照组(P均<0.05),而治疗组
TC和 TG 明显低于模型组(P 均<0.05);三组大鼠
BUN 、SCr和BG无明显变化(P 均>0.05)。见表 1。
表 1　治疗后三组大鼠肾重指数和血清生化指标测定值的比较( x±s)
组别 肾重指数(mg/ g) TP(g/ L) ALB(g/ L) TC(mmol/ L) TG(mmol/ L) BG(mmol/ L)BUN(mmol/ L) SCr(μmol/ L)
对照组 12.98±1.30 74.19±4.61 35.47±1.52 1.38±0.25 0.32±0.51 9.87±0.41 11.01±1.88 65.4±4.11
模型组 19.44±1.89＊＊ 42.55±3.77＊＊ 25.05±1.28＊＊ 4.69±1.21＊＊ 1.87±0.50＊＊ 8.22±2.59 9.93±1.03 59.2±8.69
治疗组 15.25±1.75＊△△ 62.82±7.11＊△ 28.16±1.21＊△△ 3.65±1.02＊＊△ 0.67±0.14＊△ 8.57±2.90 10.5±1.44 61.3±4.02
　　与对照组比较＊P<0.05 , ＊＊P<0.01;与模型组比较△P<0.05 , △△P<0.01
2.4　葫芦巴总皂苷对阿霉素大鼠肾组织病理改变的
影响
　　对照组大鼠肾组织未见明显异常改变;模型组大
鼠可见肾小球及内皮细胞轻度肿胀 ,肾小管上皮细胞
空泡样变 ,管腔内有大量蛋白管型 ,包曼氏囊腔变窄 ,
间质区可见大量炎症细胞浸润;治疗组大鼠上述病理
改变与模型组相比 ,均明显减轻。见图 2 。
A:对照组;　B:模型组;　C:治疗组
图 2　肾脏组织病理改变(苏木精-伊红染色 , ×400)
3　讨论
阿霉素所致肾病综合征的发病机制尚不明确 ,目
前认为是阿霉素及其代谢产物通过损伤肾小球上皮
细胞 ,促使脂质过氧化物及自由基大量形成 ,导致肾
小球滤过膜分子屏障和电荷屏障受损 ,从而引起蛋白
尿的发生[ 5] 。阿霉素所致肾病与人肾病综合征病理
改变极其相似 ,是肾脏损伤的经典模型之一[ 4] 。在本
研究中 ,SD大鼠在注射阿霉素后 ,出现大量蛋白尿 、
低蛋白血症和血脂紊乱等病理生理改变 。并且 ,肾组
织切片观察发现 ,肾小球内皮细胞肿胀 ,包曼氏囊腔
变窄 ,肾小管上皮细胞呈空泡样变 ,管腔内大量蛋白
管型形成 ,间质区可见炎症细胞浸润。以上结果与文
献报道相似[ 6] ,提示造模成功 。
中药葫芦巴为豆科植物葫芦巴(T rig onella foe-
num-g raecum)干燥成熟种子 , 药典记载葫芦巴具有
“温润阳 ,逐寒湿”的功效 。现代药理研究显示 ,葫芦
巴粗提物及其活性成分具有多种生物学功效[ 1] 。有
前期研究发现 ,葫芦巴总皂苷联合磺脲类降糖药可明
显降低继发性失效的 2 型糖尿病患者血糖水平 ,同时
显著改善胰岛素抵抗[ 7] 。在本研究中 ,通过组织切片
观察发现 ,葫芦巴总皂苷可明显改善阿霉素大鼠肾脏
病理改变 。Thakran等[ 3] 发现 ,在糖尿病大鼠模型中 ,
葫芦巴可以通过控制血糖 ,对糖尿病肾病有一定治疗
作用 。而本研究显示 ,葫芦巴总皂苷对肾脏的保护效
应 ,并不依赖于其降糖作用 ,可直接对阿霉素肾病产
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生治疗作用。
肾病综合征由于肾小球滤过膜分子屏障和电荷
屏障受损 ,导致蛋白丢失 ,形成蛋白尿 。因此 ,减少尿
蛋白排泄成为改善肾损伤的主要目标之一[ 8] 。在本
研究中 ,笔者观察到葫芦巴总皂苷从第 1周开始 ,即
明显减少 24 h 尿蛋白排泄量 ,并且随着治疗时间延
长 ,对尿蛋白的作用越来越明显 ,提示葫芦巴总皂苷
可改善阿霉素所致的肾小球滤过膜的损伤。肾病综
合征患者脂质代谢紊乱 ,对病程和预后的影响已经受
到高度重视。临床使用糖皮质激素时 ,虽然可以减少
尿蛋白排泄 ,但加重脂质代谢紊乱。而研究报道 ,葫
芦巴本身具有调节脂肪代谢的作用[ 9] 。在本研究中
观察到 ,葫芦巴总皂苷还可以改善肾病综合征模型的
脂质紊乱 ,该效应可能是葫芦巴改善肾损伤的重要途
径之一。
总之 ,本研究首次发现 ,葫芦巴提取物葫芦巴总
皂苷具有保护阿霉素所致肾损伤的作用 ,这为葫芦巴
治疗肾病提供了一定的实验依据。但葫芦巴总皂苷
属于一类混合物 ,成分复杂 ,葫芦巴总皂苷中具体哪
种或者哪几种成分对肾损伤具有治疗作用 ,尚需进一
步深入研究。
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