全 文 :凤仙花中槲皮素和山奈酚的薄层色谱鉴别
侯文欣,魏红立,方新平,徐利亚,孟宪磊 (邢台市食品药品检验所,河北邢台 054000)
摘要 [目的]建立凤仙花药材中槲皮素、山奈酚的提取方法,对凤仙花药材中槲皮素、山奈酚进行薄层鉴别。[方法]采用羧甲基纤维
素钠硅胶 G 板分离凤仙花药材中槲皮素、山奈酚成分。[结果]供试品色谱在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点,可用于鉴别
凤仙花中的槲皮素和山奈酚。[结论]薄层色谱方法简便、专属性强、重现性好,可用于凤仙花药材的鉴别。
关键词 凤仙花;槲皮素;山奈酚;薄层色谱;鉴别
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2015)34 -146 -02
Identification of Quercetin and Kaempferol in Impatiens balsamina L. by TLC
HOU Wen-xin,WEI Hong-li,FANG Xin-ping et al (Xingtai Institute for Food and Drug Control,Xingtai,Hebei 054000)
Abstract [Objective]To develop a specific method for the identification of quercetin and kaempferol in Impatiens balsamina L. by using thin-
layer chromato-graphy (TLC). [Method]Quercetin and kaempferol were identified using plates of CMC-Na silica gel G. [Result]In the chro-
matography of the sample,the same-colored speckles appeared at the corresponding position of the reference compounds. [Conclusion]TLC is
simple,good reproducibility and specificity. It can be used for the identification of Impatiens balsamina L.
Key words Impatiens balsamina L.;Quercetin;Kaempferol;TLC;Identification
基金项目 河北省食品药品监督管理局食品药品安全科技项目
(PT2014041)。
作者简介 侯文欣(1984 - ) ,女,河北邢台人,医药工程师,硕士,从事
食品药品检测。
收稿日期 2015-10-31
凤仙花为凤仙花科植物凤仙(Impatiens balsamina L.)的
干燥花[1],尚未被《中国药典》收载,凤仙花具有祛风除湿、活
血定痛功效,含有香豆素类、黄酮类等多种化学成分,其中槲
皮素和山奈酚是其主要的黄酮化合物[2]。槲皮素有抗炎、抗
氧化、抗癌和抗突变等多种功能[3],山奈酚具有止咳祛痰和
消炎等作用[4 -5],具有很高药用价值。该试验考察了不同溶
剂、不同提取方法提取槲皮素及山奈酚,并尝试不同展开剂
和薄层板比较,最终确定了用于凤仙花中槲皮素及山奈酚的
简捷、快速、分离效果好的薄层色谱鉴别方案,为凤仙花的质
量控制提供了可靠依据。
1 材料与方法
1. 1 材料 凤仙花(采于河北邢台将军墓) ;槲皮素对照品
(中国食品药品检定研究院,批号 100081 - 200907) ;山奈酚
对照品(中国食品药品检定研究院,批号 110861 - 200808) ;
电子天平(sartorius BS210S) ;超声波清洗机(昆山市超声仪
器有限公司) ;硅胶 G 薄层色谱板(青岛海洋化工厂) ,羧甲
基纤维素钠硅胶 G(天津思利达科技有限公司) ,高效硅胶 G
(青岛市基亿达硅胶试剂厂) ;试剂均为国药集团化学试剂有
限公司生产,均为分析纯。
1. 2 样品制备 取凤仙花药材,粉碎,取粉末 0. 5 g,加甲醇
-稀盐酸(4∶ 1)20 ml,超声处理 30 min,滤过,滤液加水 20
ml,用乙酸乙酯振摇提取 3次,每次 20 ml,合并乙酸乙酯液,
蒸干,残渣加甲醇 3 ml溶解,作为供试品溶液。
1. 3 对照品溶液制备 取槲皮素和山奈酚对照品,加甲醇
分别制成浓度为 0. 2和 1 mg /ml的溶液,作为对照品溶液。
1. 4 色谱方法 照薄层色谱法(中国药典 2010年版一部附
录 VI B)试验,分别吸取上述样品及对照品溶液各 2 μl,分别
点于同一羧甲基纤维素钠硅胶 G 薄层板上,以三氯甲烷 -
乙酸乙酯 -甲酸(10∶ 3∶ 1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以
2%三氯化铝乙醇溶液,置紫外光灯(365 nm)下检视。
2 结果与分析
由图 1可见,供试品色谱在与对照品色谱相应位置上显
相同颜色的斑点。表明该方法方便、快捷,斑点圆整、清晰,
分离效果佳,可作为凤仙花中槲皮素及山奈酚的鉴别方法。
注:2为槲皮素对照品;4 为山奈酚对照品;1、3、5、6、7 为凤仙花
样品。
图 1 凤仙花 TLC鉴别图谱
3 讨论
3. 1 提取方法的比较 该试验尝试了多种提取方法:①以
甲醇 -稀盐酸(4∶ 1)为溶剂,超声处理 30 min,滤过,滤液加
水 20 ml,用乙酸乙酯振摇提取 3次,每次 20 ml,合并乙酸乙
酯液,蒸干,残渣加甲醇 3 ml溶解;②以甲醇为溶剂超声处理
30 min,滤过,滤液浓缩;③以乙醇为溶剂超声处理 30 min,滤
过,滤液浓缩;④以硼酸饱和的水溶液为溶剂,回流 1 h,滤
过,滤液加稀盐酸调 pH至 2 ~ 3,用石油醚(60 ~ 90 ℃)振摇
提取 3次,每次 25 ml,弃去石油液,用乙醚振摇提取 3 次,每
责任编辑 黄小燕 责任校对 况玲玲安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2015,43(34) :146 - 147
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.34.054
次 25 ml,合并乙醚液,挥干,残渣加甲醇 1ml 使溶解。比较
上述 4种提取方法(图 2)发现,以方法①所得色谱图斑点清
晰、圆整,指纹斑点丰富,分离效果佳。
注:a.方法①;b.方法②;c.方法④。S1为槲皮素,S2为山奈酚,1 ~5为样品。
图 2 各种提取方法的凤仙花 TLC色谱图
3. 2 展开剂的比较 试验选用了甲苯 -甲酸乙酯 -甲酸(5
∶ 4∶ 1) (图 3a)、甲苯 -乙酸乙酯 -甲酸(5∶ 4∶ 1) (图 3b)、三氯
甲烷 -乙酸乙酯 -甲酸(10∶ 3∶ 1) (图 1) ,结果发现,以三氯
甲烷 -乙酸乙酯 -甲酸(10∶ 3∶ 1)为展开剂分离的效果最好。
注:a.甲苯 -甲酸乙酯 -甲酸(5∶ 4∶ 1) ;b.甲苯 -乙酸乙酯 -甲酸
(5∶ 4∶ 1)。S1为槲皮素,S2为山奈酚,1 ~5为样品。
图 3 选用不同展开剂的凤仙花 TLC色谱图
3. 3 不同薄层板的比较 试验考察了青岛海洋化工厂硅胶
G板(图 4a)、青岛市基亿达硅胶试剂厂硅胶 G板(图 4b)、天
津思利达科技有限公司羧甲基纤维素钠硅胶 G板(图 1) ,结
果发现,利用羧甲基纤维素钠硅胶 G板的分离效果最好。
注:a.青岛海洋化工厂硅胶 G板;b.青岛市基亿达硅胶试剂厂硅
胶 G板。S1为槲皮素,S2为山奈酚,1 ~5为样品。
图 4 不同薄层板下的凤仙花 TLC色谱图
参考文献
[1]河北省食品药品监督管理局.河北省中药饮片炮制规范[M].北京:学
苑出版社,2003:30.
[2]胡喜兰,韩照祥,刘玉芬,等.凤仙花不同提取物中山奈酚的测定[J].
分析实验室,2007,26(5):33.
[3]俞一心,戈升荣,王桂珍.槲皮素及其衍生物的药理作用研究进展
[J].中药材,2003,26(12):902.
[4]王晓飞,于玲,杜华霜,等.三白草中槲皮素的薄层色谱鉴别[J].中国
民族民间医药,2010(23):61.
[5]胡喜兰,程青芳,尹福军,等.凤仙花中山萘酚的提取、分离与纯化[J].
时珍国医国药,2010,21(4):
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
932 -933.
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[8]DONG S Y,HU Q,YANG Z,et al. An ionic liquid-based ultrasound assis-
ted dispersive liquid-liquid microextraction procedure followed by HPLC
for the determination of low concentration of phytocides in soil[J]. Micro-
chem J,2013,110:221 -226.
[9]VAZQUEZ M,VAZQUEZ P P,GALERA M M,et al. Ultrasound-assisted i-
onic liquid dispersive liquid-liquid microextraction coupled with liquid
chromatography-quadrupole-linear ion trap-mass spectrometry for simulta-
neous analysis of pharmaceuticals in wastewaters[J]. J Chromatogr A,
2013,1291:19 -26.
[10]YAN H Y,LIU B M,DU J J,et al. Ultrasound-assisted dispersive liquid-
liquid microextraction for the determination of six pyrethroids in river wa-
ter[J]. J Chromatogr A,2010,1217(32):5152 -5157.
[11]ARYAND M,BOZORGZADEH E,SHARIATI S,et al. Trace determina-
tion of linear alkylbenzene sulfonates using ionic liquid based ultrasound-
assisted dispersive liquid-liquid microextraction and response surface
methodology[J]. Anal Methods,2012,4(8):2272 -2277.
74143 卷 34 期 侯文欣等 凤仙花中槲皮素和山奈酚的薄层色谱鉴别