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凤仙花中槲皮素和山奈酚的薄层色谱鉴别



全 文 :凤仙花中槲皮素和山奈酚的薄层色谱鉴别
侯文欣,魏红立,方新平,徐利亚,孟宪磊 (邢台市食品药品检验所,河北邢台 054000)
摘要 [目的]建立凤仙花药材中槲皮素、山奈酚的提取方法,对凤仙花药材中槲皮素、山奈酚进行薄层鉴别。[方法]采用羧甲基纤维
素钠硅胶 G 板分离凤仙花药材中槲皮素、山奈酚成分。[结果]供试品色谱在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点,可用于鉴别
凤仙花中的槲皮素和山奈酚。[结论]薄层色谱方法简便、专属性强、重现性好,可用于凤仙花药材的鉴别。
关键词 凤仙花;槲皮素;山奈酚;薄层色谱;鉴别
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2015)34 -146 -02
Identification of Quercetin and Kaempferol in Impatiens balsamina L. by TLC
HOU Wen-xin,WEI Hong-li,FANG Xin-ping et al (Xingtai Institute for Food and Drug Control,Xingtai,Hebei 054000)
Abstract [Objective]To develop a specific method for the identification of quercetin and kaempferol in Impatiens balsamina L. by using thin-
layer chromato-graphy (TLC). [Method]Quercetin and kaempferol were identified using plates of CMC-Na silica gel G. [Result]In the chro-
matography of the sample,the same-colored speckles appeared at the corresponding position of the reference compounds. [Conclusion]TLC is
simple,good reproducibility and specificity. It can be used for the identification of Impatiens balsamina L.
Key words Impatiens balsamina L.;Quercetin;Kaempferol;TLC;Identification
基金项目 河北省食品药品监督管理局食品药品安全科技项目
(PT2014041)。
作者简介 侯文欣(1984 - ) ,女,河北邢台人,医药工程师,硕士,从事
食品药品检测。
收稿日期 2015-10-31
凤仙花为凤仙花科植物凤仙(Impatiens balsamina L.)的
干燥花[1],尚未被《中国药典》收载,凤仙花具有祛风除湿、活
血定痛功效,含有香豆素类、黄酮类等多种化学成分,其中槲
皮素和山奈酚是其主要的黄酮化合物[2]。槲皮素有抗炎、抗
氧化、抗癌和抗突变等多种功能[3],山奈酚具有止咳祛痰和
消炎等作用[4 -5],具有很高药用价值。该试验考察了不同溶
剂、不同提取方法提取槲皮素及山奈酚,并尝试不同展开剂
和薄层板比较,最终确定了用于凤仙花中槲皮素及山奈酚的
简捷、快速、分离效果好的薄层色谱鉴别方案,为凤仙花的质
量控制提供了可靠依据。
1 材料与方法
1. 1 材料 凤仙花(采于河北邢台将军墓) ;槲皮素对照品
(中国食品药品检定研究院,批号 100081 - 200907) ;山奈酚
对照品(中国食品药品检定研究院,批号 110861 - 200808) ;
电子天平(sartorius BS210S) ;超声波清洗机(昆山市超声仪
器有限公司) ;硅胶 G 薄层色谱板(青岛海洋化工厂) ,羧甲
基纤维素钠硅胶 G(天津思利达科技有限公司) ,高效硅胶 G
(青岛市基亿达硅胶试剂厂) ;试剂均为国药集团化学试剂有
限公司生产,均为分析纯。
1. 2 样品制备 取凤仙花药材,粉碎,取粉末 0. 5 g,加甲醇
-稀盐酸(4∶ 1)20 ml,超声处理 30 min,滤过,滤液加水 20
ml,用乙酸乙酯振摇提取 3次,每次 20 ml,合并乙酸乙酯液,
蒸干,残渣加甲醇 3 ml溶解,作为供试品溶液。
1. 3 对照品溶液制备 取槲皮素和山奈酚对照品,加甲醇
分别制成浓度为 0. 2和 1 mg /ml的溶液,作为对照品溶液。
1. 4 色谱方法 照薄层色谱法(中国药典 2010年版一部附
录 VI B)试验,分别吸取上述样品及对照品溶液各 2 μl,分别
点于同一羧甲基纤维素钠硅胶 G 薄层板上,以三氯甲烷 -
乙酸乙酯 -甲酸(10∶ 3∶ 1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以
2%三氯化铝乙醇溶液,置紫外光灯(365 nm)下检视。
2 结果与分析
由图 1可见,供试品色谱在与对照品色谱相应位置上显
相同颜色的斑点。表明该方法方便、快捷,斑点圆整、清晰,
分离效果佳,可作为凤仙花中槲皮素及山奈酚的鉴别方法。
注:2为槲皮素对照品;4 为山奈酚对照品;1、3、5、6、7 为凤仙花
样品。
图 1 凤仙花 TLC鉴别图谱
3 讨论
3. 1 提取方法的比较 该试验尝试了多种提取方法:①以
甲醇 -稀盐酸(4∶ 1)为溶剂,超声处理 30 min,滤过,滤液加
水 20 ml,用乙酸乙酯振摇提取 3次,每次 20 ml,合并乙酸乙
酯液,蒸干,残渣加甲醇 3 ml溶解;②以甲醇为溶剂超声处理
30 min,滤过,滤液浓缩;③以乙醇为溶剂超声处理 30 min,滤
过,滤液浓缩;④以硼酸饱和的水溶液为溶剂,回流 1 h,滤
过,滤液加稀盐酸调 pH至 2 ~ 3,用石油醚(60 ~ 90 ℃)振摇
提取 3次,每次 25 ml,弃去石油液,用乙醚振摇提取 3 次,每
责任编辑 黄小燕 责任校对 况玲玲安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2015,43(34) :146 - 147
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.34.054
次 25 ml,合并乙醚液,挥干,残渣加甲醇 1ml 使溶解。比较
上述 4种提取方法(图 2)发现,以方法①所得色谱图斑点清
晰、圆整,指纹斑点丰富,分离效果佳。
注:a.方法①;b.方法②;c.方法④。S1为槲皮素,S2为山奈酚,1 ~5为样品。
图 2 各种提取方法的凤仙花 TLC色谱图
3. 2 展开剂的比较 试验选用了甲苯 -甲酸乙酯 -甲酸(5
∶ 4∶ 1) (图 3a)、甲苯 -乙酸乙酯 -甲酸(5∶ 4∶ 1) (图 3b)、三氯
甲烷 -乙酸乙酯 -甲酸(10∶ 3∶ 1) (图 1) ,结果发现,以三氯
甲烷 -乙酸乙酯 -甲酸(10∶ 3∶ 1)为展开剂分离的效果最好。
注:a.甲苯 -甲酸乙酯 -甲酸(5∶ 4∶ 1) ;b.甲苯 -乙酸乙酯 -甲酸
(5∶ 4∶ 1)。S1为槲皮素,S2为山奈酚,1 ~5为样品。
图 3 选用不同展开剂的凤仙花 TLC色谱图
3. 3 不同薄层板的比较 试验考察了青岛海洋化工厂硅胶
G板(图 4a)、青岛市基亿达硅胶试剂厂硅胶 G板(图 4b)、天
津思利达科技有限公司羧甲基纤维素钠硅胶 G板(图 1) ,结
果发现,利用羧甲基纤维素钠硅胶 G板的分离效果最好。
注:a.青岛海洋化工厂硅胶 G板;b.青岛市基亿达硅胶试剂厂硅
胶 G板。S1为槲皮素,S2为山奈酚,1 ~5为样品。
图 4 不同薄层板下的凤仙花 TLC色谱图
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