全 文 ：收稿日期:2005-08-08;　修订日期:2006-02-25
作者简介:何　羽(1978-),男(汉族),贵州黔西人 ,现任毕节地区药品检
验所药师 ,学士学位 ,主要从事药品检验和质量标准研究工作.
高效液相色谱法测定金钱草颗粒中槲
皮素和山奈素的含量
何　羽 , 薛朝金
(贵州省毕节地区药品检验所　551700)
摘要:目的 建立用高效液相色谱(HPLC)法测定金钱草颗粒中槲皮素和山奈素含量的方法。方法 采用 Da lian E lite Hy-
persil ODS2 5 μm(200 mm ×4. 6 mm)柱 ,以甲醇-0. 4%磷酸溶液(45∶55)为流动相;流速:1. 0 m l m in-1;检测波长为 360
nm。柱温:30℃。结果 该法线性关系良好 , 槲皮素平均回收率为 101. 2%, RSD为 1. 14%;山奈素平均回收率为 100. 1%,
RSD为 1. 33%。结论 该方法简便 、准确 、重现性好 ,可用于该制剂的质量控制和评价。
关键词:金钱草颗粒;　槲皮素;　山奈素;　含量测定;　高效液相色谱法
中图分类号:R284. 2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)06-0955-01
Determ ination ofQuercetin and Kaempferol in Herba Lysmi achiae Granules byHPLC
HE Yu , XUE Chao-jin
(B ijieD istrict Institute forDrug Control,B ijie 551700, Ch ina)
Abstract:Objec tive To estab lish an H PLC me thod for the determ ination of querce tin and kaempfe ro l in He rba Ly simachiae
G ranu les.M ethods Da lian E lite Hypersil ODS2 5μm(200 mm ×4. 6 mm)co lum n was used. The m ob ile phase w as m e thano l -
0. 4% pho spho ric acid so lution(45∶55). The flow ra te w as 1. 0 m l m in-1;The de tection wave leng th w as 360 nm;The co lumn
tem pe ra ture was 30℃. Resu lts The linea r re lation w as good . The average recove ry o f querce tin wa s 101. 2% w ith RSD =
1. 14%;The average recovery o f kaem fe ro l was 100. 1% w ith RSDw as 1. 33%. Conclu sion The m e thod is simp le, accura te and
w ith a good reproduc ibility and can be used for the quality con tro l of the g ranules.
Key words:Herba Ly simachiae G ranules;　Querce tin;　Kaem pfero l;　Determ inatim;　HPLC
　　金钱草颗粒为单味药制剂 ,具有清利湿热 , 通淋消肿的功效。
用于热淋 , 沙淋 ,尿涩作痛 , 黄疸尿赤 ,痈肿疔疮 , 毒蛇咬伤 , 肝胆
结石 , 尿路结石等症的治疗。所含的槲皮素和山奈素为主要有效
成分。本方收载于《国家中成药标准汇编》(中成药地方标准上
升国家标准部分内科 、肝胆分册 )标准中无含量测定方法 , 不利
于制剂的质量控制。本文参考有关文献 [ 1 , 2] , 采用 HPLC法测定
金钱草颗粒中槲皮素和山奈素的含量 ,分离度好 , 回收率高 ,能有
效控制金钱草颗粒的含量。
1　仪器与试药
1. 1　仪器 美国W aters1525高效液相色谱仪 、 2487双波长紫外
检测器 , B reeze色谱工作站 , AY-120电子天平 (日本岛津公司 ),
AB265-S电子天平(日本岛津公司)。
1. 2　试药 槲皮素对照品(购自中国药品生物制品检定所 , 批号
100081-200406,含量 97. 3%, 120℃干燥 4 h后使用);山奈素对
照品(购自中国药品生物制品检定所 , 批号:110861-200304), 样
品由重庆某药厂提供 (批号:040509, 040603, 040401);甲醇为色
谱纯 , 水为重蒸馏水 ,其他试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　对照品溶液的制备 精密称取 120℃干燥 4 h的槲皮素对
照品 10. 41 mg,置 100 m l容量瓶中 ,加 80%甲醇溶解并稀释至刻
度 , 摇匀 ,即得(每毫升含槲皮素 101. 289 3 μg)。精密称取山奈
素对照品 10. 25 mg,置 100 m l容量瓶中 , 加 80%甲醇溶解并稀释
至刻度 , 摇匀 ,即得(每毫升含山奈素 102. 5μg)。作为对照品储
备液。
2. 2　样品溶液的制备 取本品 10袋的内容物 , 混匀 ,研细 ,精密
称取 1 g,置锥形瓶中 ,精密加 80%甲醇 50 m l,称定重量 ,超声 30
m in,放冷 , 再称定重量 ,用 80%甲醇补足减失的重量 , 滤过 , 精密
量取续滤液 25 m l, 精密加入盐酸 5m l,置 90℃水浴中加热水解 1
h,取出 ,迅速冷却 , 转移置 50 m l容量瓶中 ,用 80%甲醇稀释置刻
度 , 摇匀 ,即得。
2. 3　色谱条件与系统适应性实验 采用十八烷基硅烷键合硅胶
填充色谱柱;以甲醇-0. 4%磷酸溶液(45∶55)为流动相;流速 1. 0
m l m in-1;检测波长为 360 nm。理论板数以槲皮素峰计算大于
6 000,主峰与相邻杂质峰之间的分离度大于 1. 5。结果见图 1。
2. 4　线性关系考察 分别精密吸取槲皮素对照品储备液 1. 0
m l, 分别置 10, 25, 50, 100, 200 m l容量瓶中 ,各精密加入山奈素对
照品储备液 5. 0 m l, 加 80%甲醇稀释至刻度 , 摇匀 , 制成系列混
合对照品溶液。按上述色谱条件分别进样测定 ,以峰面积积分值
A为纵坐标 ,以槲皮素和山奈素的浓度 C(μg m l-1)为横坐标 , 其
标准曲线回归方程和线性范围结果见表 1。
表 1　各组分的回归方程和线性范围
回归方程 相关系数 r 线性范围 m /ng
槲皮素 A=3. 602 7×104C+6. 319 3×103 0. 999 8 5. 064 ～ 101. 289
山奈素 A=3. 839 3×104C +2. 796 6×104 0. 999 9 25. 625 ～ 512. 500
2. 5　精密度实验 精密量取上述对照品溶液 10 μl, 重复进样 5
次 , 按上述色谱条件测定 ,槲皮素和山奈素峰面积积分值的 RSD
分别为 0. 50%和 0. 61%。
2. 6　重复性实验 分别取同一批号(批号:040509)样品各 5份 ,
照 2. 2样品溶液的制备和测定方法进行测定 , 结果槲皮素的平均
含量为 0. 042%, RSD为 1. 02%, 山奈素的平均含量为 0. 168%
RSD为 0. 52%。
2. 7　稳定性实验 取同一批号的供试品溶液(批号:040509), 每
隔 2 h进样 1次(10 μl), 共进样 6次 , 按上述色谱条件分别测定 ,
结果槲皮素和山奈素的 RSD分别为 1. 24%和 1. 55%, 表明供试
品溶液在 12 h内稳定。
2. 8　空白实验 按处方比例及工艺 , 制备缺金钱草的阴性制剂 ,
再按供试品溶液制备方法制备不含金钱草的阴性对照品溶液 , 进
样 10μl测定。结果阴性对照品溶液分别在与槲皮素和山奈素
对照品相同保留时间位置未见有相同保留时间的吸收 ,说明辅料
对本方法测定槲皮素和山奈素的含量无干扰。见图谱 1 - c。
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LISH IZHEN M EDIC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 6 时珍国医国药 2006年第 17卷第 6期
2. 9　加样回收率实验 取已知含量的样品 (批号:040509)内容
物适量 , 精密称定 , 分别精密加入槲皮素对照品溶液 (101. 289 3
μg m l-1)2. 0 m l和山奈素对照品溶液 10. 0 m l, 按照供试品溶液
制备项下的方法制备 ,依法测定 , 计算回收率。结果见表 2 ～ 3。
a-　　　　　　 b-　　　　　　 c-　　　　　
图 1　样品溶液高效液相色谱图
表 2　槲皮素回收率测定结果
样品重
m /g
样品含量
m /mg
加入量
m /mg
测得量
m /mg
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
1. 000 8 0. 420 3 0. 202 6 0. 625 9 101. 5
1. 003 3 0. 421 4 0. 202 6 0. 622 8 99. 4
1. 004 7 0. 422 0 0. 202 6 0. 626 5 100. 9 101. 2 1. 14
1. 001 8 0. 420 8 0. 202 6 0. 628 5 102. 5
1. 001 2 0. 420 5 0. 202 6 0. 626 6 101. 7
表 3　山奈素回收率测定结果
样品重
m /g
样品含量
m /mg
加入量
m /mg
测得量
m /mg
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
1. 002 1 1. 683 5 1. 025 2. 707 5 99. 90
1. 002 8 1. 684 7 1. 025 2. 694 8 98. 55 100. 1 1. 33
1. 002 7 1. 684 5 1. 025 2. 714 5 100. 49
1. 002 2 1. 683 7 1. 025 2. 730 5 102. 13
1. 011 5 1. 699 3 1. 025 2. 718 8 99. 46
2. 10　样品测定 取 3批样品 , 按上述测定方法进行测定 ,以外标
峰面积法计算样品的含量 ,结果见表 4。
表 4　样品含量测定结果 mg g-1
批号 　　 山奈素 槲皮素 山奈素 +槲皮素 平均值
040401 (1) 0. 042 8 0. 164 4 0. 207 2(2) 0. 042 3 0. 168 8 0. 211 1 0. 209 2
040509 (1) 0. 042 1 0. 170 4 0. 212 5
(2) 0. 041 8 0. 167 9 0. 209 7 0. 211 1
040603 (1) 0. 043 5 0. 158 3 0. 201 8(2) 0. 043 8 0. 163 2 0. 207 0 0. 204 4
3　讨论
3. 1　 本实验样品溶液的制备是参照《中国药典》2005年版Ⅰ 部
金钱草含量测定项下供试品溶液制备的方法 , 因本样品为颗粒
剂 , 因此把回流 1 h改为超声 30 m in, 经试验证明该法提取效果
较好 , 干扰成分较少。
3. 2　 试验中以文献 [ 1]提供的色谱条件为基础 , 改变流动相的
比例 , 通过试验摸索 , 金钱草颗粒中各组分能够实现较好的分离 ,
证明该条件适合金钱草颗粒的含量测定。
3. 3　 本文建立的方法简便 , 专属性及重复好 ,结果准确可靠 , 可
用于该制剂的质量控制与分析。
参考文献:
[ 1 ] 　国家药典委员会. 中国药典 , Ⅰ 部 [ S] . 北京:化学工业出版社 ,
2005:152.
[ 2 ] 　国家药品监督管理局.国家药品标准汇编中成药地方标准上升国
家标准 口腔 肿瘤儿科分册 [ S] . WS-11446(ZD-1446) - 002.
收稿日期:2005-08-01;　修订日期:2006-02-12
作者简介:束雅春(1976-),女(汉族),江苏南京人 ,现任江苏省中医医院
药剂科中药师 ,学士学位 ,主要从事中药制剂及研究工作.
克感停热颗粒解热抗炎作用的实验研究
束雅春 1 , 许惠琴2 , 时　艳 2
(1.江苏省中医医院 ,江苏 南京　210029;　2. 南京中医药大学药学院 ,江苏 南京　210029)
摘要:目的 研究克感停热(KGTR)颗粒的解热 、抗炎作用。方法 通过内毒素所致家兔发热 、干酵母所致大鼠发热观察
其解热作用;通过巴豆油致小鼠耳廓肿胀及 0. 6%醋酸(HAC)致毛细血管通透性增加的炎症模型观察其抗炎作用。结果
KGTR颗粒能明显减轻致热家兔和大鼠的发热反应 , 亦能显著抑制致炎小鼠的耳廓肿胀及小鼠毛细血管通透性的增加。
结论 KGTR颗粒有明显的解热 、抗炎作用。
关键词:克感停热颗粒;　解热;　抗炎
中图分类号:R285. 5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)06-0956-02
The Expermi ental Research of KGTR Granules on Antipyretic and Anti-
in flammatory Action
SHU Y a-chun1 , XU H ui-qin2 , SH IY an2(1. Department ofPharmacy of J iangsu TCM Hospital, Nanjing 210029, Ch ina;2. Department of Pharmacolo-
gy, Pharmacy College ofNan jingUn iversity of TCM , Nanjing 210029 , China)
Abstract:Objective To investiga te the antipy re tic and an ti - inflamm a to ry action o f the KGTR g ranules. Methods The fever
anima l models w ere induced by intravenous injection o f endo tox in on rabbits and subcutaneous injec tion of m icro zym e on ra ts, the
anima lm ode ls o f acu te inflamm ation w ere m ade by using c ro ton m ix tu re to cau se swe lling o f the auric le o f m ice and injecting
0. 6%HAC to cause inc rease o f pe rm eability capillary ve sse l o fm ice abdom inal cavity. R esults The KGTR g ranu les can decrease
feb rile reaction of the rabbits and ra ts induced by py rogens, inh ibit sw elling of the auric le and increase o f pe rmeability capillary
ve sse l o f m ice induced by ph log istic reagents significantly. Conclu sion The KGTR g ranu les has obv ious antipy re tic and anti - in-
flamm atory action.
Key words:KGTR granu le s;　Antipy re tic ac tion;　An ti - inflamm a to ry action
　　流感是由流感病毒引起的一种发病率高 , 流行广泛 , 传播迅
速的急性呼吸道传染病。经过多年的研究 ,国际上已研制出一些
药物防治流感 ,如金刚烷胺 、金刚乙胺等 ,但这些合成药物有不同
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 6期 LISH IZHEN MED IC INE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 6