全 文 ：蝴蝶兰组织培养快速繁殖技术研究
朱志国 ,黄承钧 ,陶 陶 ,闻治江　(芜湖职业技术学院园林园艺系 ,安徽芜湖 241000)
摘要　[目的 ] 对蝴蝶兰的组织培养快速繁殖技术进行研究 ,为蝴蝶兰的批量生产提供参考。 [方法 ] 以蝴蝶兰嫩叶、茎尖、花梗侧芽为
外植体 ,进行蝴蝶兰原球茎诱导、增殖及试管苗生根的组织培养。 [结果] 结果表明 , MS+2.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA+200ml/L椰
乳是诱导蝴蝶兰原球茎形成的最佳培养基 ,茎尖诱导率达 81.37%;MS+1.0mg/LNAA+2.0mg/L6-BA是蝴蝶兰原球茎增殖的最佳
培养基 ,增殖系数达 9.62;1/2MS是蝴蝶兰生根培养的最佳培养基 ,生根率达 94.42%,且根生长最快最整齐。 [结论 ] 在生产上 , 可采
用试管苗生根继代培养的方法进行蝴蝶兰的快速繁殖。
关键词　蝴蝶兰;组织培养;快速繁殖
中图分类号　S682.31　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2009)30-14614-02
ResearchonTissueCultureandRapidPropagationofPhalaenopsisamabilis
ZHUZhi-guoetal　(DepartmentofLandscapeHorticulture, WuhuInstituteofOccupation＆Technology, Wuhu, Anhui241000)
Abstract　[ Objective] TheaimwastoresearchthetissuecultureandrapidpropagationofPhalaenopsisamabilis, andprovidereferencefor
batchproductionofPhalaenopsisamabilis.[ Method] Takingtenderleaves, theshoot-tipsandpedicellateralbudsasexplants, thecondi-
tionsoforiginalcorminduction, proliferationandrootingofPhalaenopsisamabiliswerediscussed.[ Result] Theresultshowedthattheopti-
mummediumforinducingthetenderprotocormofPhalaenopsisamabiliswasMS+2.0mg/L6-BA +1.0 mg/LNAA +200 ml/Lcoconut
milk, andtheinducementrateofshoot-tipwas81.37%.TheoptimummediumforprotocormproliferationofPhalaenopsisamabiliswasMS+
1.0mg/LNAA +2.0mg/L6-BA, andtheproliferationcoeficientwas9.62.TheoptimummediumforrootingofPhalaenopsisamabiliswas
MS, therootingratewas94.42%andtherootgrowthwasfastestandmostregular.[ Conclusion] Intheproduction, therapidpropagationof
Phalaenopsisamabilisshouldbemadebyusingtherootingsubculturemethodoftest-tubeseedlings.
Keywords　Phalaenopsisamabilis;Tissueculture;Rapidpropagation
基金项目　安徽省高校青年教师资助计划项目(2008jq1182)。
作者简介　朱志国(1976-),男 ,安徽肥西人 ,讲师 ,从事观赏植物繁育
与栽培方面的教学及科研工作。
收稿日期　 2009-03-17
　　蝴蝶兰(Phalaenopsisamabilis)属兰科蝴蝶兰属植物 ,是
当今国际花坛中的名花 ,具有体态轻盈 、花朵硕大 、花色秀
丽 、色泽丰富 、观赏期长等特色 ,被人们誉为 “洋兰皇后 ”,深
受全世界各国人民的喜爱 。蝴蝶兰属于单茎性气生兰 ,极少
发育侧枝 ,难以进行常规的无性繁殖 ,且其种子内不含胚乳 ,
自然条件下很难萌发 ,发芽率极低 ,因此 ,也难以利用种子进
行有性繁殖 [ 1] 。通过组织培养技术可以在短期内获得大量
蝴蝶兰幼小植株 ,且具有增殖率高 、速度快 、不受季节限制 、
可周年生产及容易去除病毒等优点 ,适应市场的大量需求 ,
也是工厂化育苗的重要途径 [ 2] 。笔者对蝴蝶兰的组织培养
快速繁殖技术进行研究 ,旨在为蝴蝶兰的批量生产提供参考。
1　材料与方法
1.1　材料　选取蝴蝶兰植株的嫩叶 、茎尖 、花梗侧芽作为外
植体。
1.2　方法
1.2.1　外植体灭菌 。将蝴蝶兰植株上的嫩叶 、茎尖以及花
梗侧芽剪下 ,清水洗净后用 75%乙醇消毒 40s、0.1% HgCl2
消毒 4 ～6 min后 ,再用无菌水洗净 ,待接种。
1.2.2　培养条件。以 White, MS, 1/2 MS和 B5为基本培养
基 ,附加不同浓度的细胞分裂素和生长素。基本培养基中添
加蔗糖浓度为 3%,琼脂为 6.00 g/L,活性炭为 1.00 g/L;pH
值为 5.60 ～ 5.80;培养温度为(25 ±1)℃;光照时间为 13
h/d;光照强度为 1 500 ～ 2 000 lx。
2　结果与分析
2.1　不同外植体对蝴蝶兰原球茎诱导率的影响　将蝴蝶兰
的嫩叶 、叶片 、花梗侧芽接种到 MS培养基上 ,每处理均为 30
瓶 ,每瓶接 4个外植体 ,重复 3次 ,结果见表 1。
表 1　不同外植体对蝴蝶兰原球茎诱导率的影响
Table1　EfectsofdifferentexplantsoninductionrateofPhalaenopsis
amabilisprotocorm %
培养基
Medium
外植体
Explant
消毒成活率
Disinfectionsurvivalrate
诱导率
Inductionrate
MS 茎尖　　 36.89 81.37
MS 叶片　　 18.16 66.02
MS 花梗侧芽 34.62 75.31
　　由表 1可知 ,在接种 45 d后 ,以茎尖作为外植体 ,消毒成
活率为 66.89%,原球茎诱导率为 81.37%;以花梗侧芽作为
外植体 ,消毒成活率为 34.62%,原球茎诱导率为 75.31%;而
以叶片作为外植体 ,消毒成活率为 34.62%,原球茎诱导率仅
为 36.02%。随着诱导时间的延长 ,花梗侧芽切口长出的原
球茎仍继续生长 ,但长势缓慢。
2.2　不同基本培养基对蝴蝶兰茎尖原球茎诱导率的影
响　切取蝴蝶兰的茎尖分别接种到 1/2 MS、MS、White、B5培
养基上 ,培养容器为小型罐头瓶 ,每瓶 5块 ,重复 5次 , 30 d
后统计数据 ,结果见表 2。诱导率 =形成原球茎外植体数 /接
种外植体数 ×100%;诱导系数 =形成原球茎总数 /形成原球
茎外植体数。
表 2　不同基本培养基对蝴蝶兰茎尖原球茎诱导的影响
Table2　EfectsofdifferentbasicmediumoninductionofPhalaenopsis
amabilisstemtipprotocorm
培养基类型Mediumtype
激素浓度∥mg/LHormoneconcentration
6-BA NAA
椰乳浓度∥ml/LCoconutmilkconcentration
诱导率∥%Inductionrate
诱导系数Inductioncoeficient
1/2MS 2.0 1.0 200 60 2.12
MS 2.0 1.0 200 72 2.20
White 2.0 1.0 200 54 1.95
B5 2.0 1.0 200 58 2.23
责任编辑　陈秀晨　责任校对　傅真治安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2009, 37(30):14614-14615
　　由表 2可知 ,在激素浓度相同条件下 , MS培养基对蝴蝶
兰茎尖原球茎诱导效果最佳 ,诱导率达 72%,诱导系数为
2.20。此外 ,茎尖在 4种培养基上培养 20 d时 ,茎尖基部开
始出现不规则状突起 ,淡黄色 ,表面光滑 ,约 30 d时 ,原球茎
开始出现 ,淡黄色 ,表面密被白色短绒毛。
2.3　不同培养基对蝴蝶兰增殖的影响　将初代培养且生长
正常的蝴蝶兰原球茎转移到增殖培养基上。每个处理 5瓶 ,
每瓶 5块 ,重复 3次 , 30 d后统计数据 ,结果见表 3。增殖系
数 =增殖原球茎总数 /增殖外植体数。
表 3　不同培养基对蝴蝶兰原球茎增殖的影响
Table3　EffectsofdifferentmediumonmultiplicationofPhalaenopsis
amabilisprotocorm
编号
Code
培养基
Medium
增殖系数
Multiplication
coeficient
1 MS+NAA0.50mg/L+6-BA2.00mg/L 8.36
2 MS+NAA1.00mg/L+6-BA2.00mg/L 9.62
3 MS+NAA2.00mg/L+6-BA2.00mg/L 6.79
4 MS+NAA0.50mg/L+6-BA3.00mg/L 7.47
5 MS+NAA1.00mg/L+6-BA3.00mg/L 7.23
6 MS+NAA2.00mg/L+6-BA3.00mg/L 7.79
7 MS+NAA0.50mg/L+KT0.10mg/L 6.82
8 MS+NAA1.00mg/L+KT0.10mg/L 7.14
9 MS+NAA2.00mg/L+KT0.10mg/L 6.53
10 MS+NAA0.50mg/L+KT0.20mg/L 6.81
11 MS+NAA1.00mg/L+KT0.20mg/L 4.49
12 MS+NAA2.00mg/L+KT0.20mg/L 7.87
13 MS+NAA0.50mg/L+KT0.50mg/L 5.35
14 MS+NAA1.00mg/L+KT0.50mg/L 5.64
15 MS+NAA2.00mg/L+KT0.50mg/L 6.12
16 MS+NAA0.50mg/L+KT1.00mg/L 3.88
17 MS+NAA1.00mg/L+KT1.00mg/L 5.34
18 MS+NAA2.00mg/L+KT1.00mg/L 4.92
　　由表 3可知 , 2号培养基的原球茎增殖系数最高 ,达
9.62, 16号最差 ,仅为 3.88。 6-BA对蝴蝶兰原球茎增殖的影
响比 KT效果好;当 KT浓度大于 0.20 mg/L,原球茎增殖系
数明显下降 。当 6-BA浓度为 2.00 mg/L时 , NAA浓度为
0.50 ～ 1.00 mg/L效果最好。
2.4　不同培养基对蝴蝶兰生根的影响　待芽长至 4 ～ 6 cm
时 ,截取生长一致的无菌苗幼苗接入不加任何激素的 1/2
MS、MS、White、B5培养基上 ,每个处理 30瓶 ,每瓶 1株 ,重复
3次。 10d后统计数据 ,结果见表 4。
　　由表 4可知 ,在 1/2MS培养基上根生长较快 ,生根率达
94.6%,平均根长为 0.86 cm,根长势粗壮 ,数量多;而在
White培养基上 ,生根率仅为 89.17%,平均根长仅为 0.62
cm,且长势较弱 ,数量较少 。B5、MS培养基的生根情况处于
中间状态。
表 4　不同基本培养基对蝴蝶兰生根的影响
Table4　EfectsofdifferentbasicmediumonPhalaenopsisamabilis
rooting
培养基类型
Mediumtype
生根率∥%
Rootingrate
根数量∥个
Numberofroots
根长度∥cm
Rootlength
根粗度
Rootrichness
White 89.17 3.60 0.62 一般B5 90.83 4.00 0.77 较粗MS 92.49 4.10 0.84 较粗
1/2MS 94.42 4.30 0.86 粗壮
3　结论与讨论
(1)蝴蝶兰原球茎的诱导主要受外植体 、培养基和培养
条件等因素的共同影响 ,其中 ,外植体最难以控制 ,这与外植
体本身的生长发育和生理生化状态有关 [ 3] 。因此 ,对外植体
的筛选是组培中较关键的技术。蝴蝶兰组织培养过程中 ,采
用同样培养基处理时 ,茎尖比叶片 、花梗侧芽作为外植体效
果较好 。
(2)在激素浓度相同条件下 , 1/2 MS、MS、White、B5作为
基本培养基均能诱导出原球茎 ,但 MS效果最好 ,且诱导的原
球茎数量多 ,密度大。
(3)以 MS作为基本培养基对蝴蝶兰原球茎进行增殖培
养 ,激素浓度为 NAA1.00 mg/L和 6-BA2.00mg/L时 ,增殖
效果最好。
(4)蝴蝶兰生根过程中 ,在 1/2MS培养基上根生长最
快 ,生根率可达 94.42%,根长可达 0.86 cm,长势最粗壮 ,数
量最多 ,说明低浓度的盐分有利于侧根发生。
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