全 文 ： 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2012, 47 (9): 1237−1242 · 1237 ·



真菌诱导子对滇重楼中次生代谢产物甾体皂苷的影响
周 浓 1, 2, 张德全 2, 孙 琴 3*, 姜 北 2, 黄志超 2
(1. 重庆三峡学院生命科学与工程学院, 重庆 404000;
2. 大理学院药学院, 云南 大理 671000; 3. 泸州医学院药学院, 四川 泸州 646000)
摘要: 为了研究比较接种和不接种丛枝菌根 (AM) 真菌对滇重楼根茎中甾体皂苷类成分的影响, 通过室温
盆栽接种试验, 采用高效液相色谱法测定并比较收获滇重楼根茎中甾体皂苷类成分的差异。结果显示, 不同 AM
真菌对滇重楼根茎中次生代谢产物甾体皂苷的影响存在差异。AM 真菌诱导子处理后, 没有改变滇重楼根茎的化
学背景, 但能部分提高其根茎中化学成分的含量。实验结果表明, AM 真菌与滇重楼之间具有选择性, 根内球囊
霉是最适宜滇重楼接种的优良菌种。
关键词: 滇重楼; AM 真菌; 甾体皂苷; 次生代谢; 指纹图谱
中图分类号: R931 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (2012) 09-1237-06
Effects of fungal elicitors on the secondary metabolite steroidal
saponin in Paris polyphylla var. yunnanensis
ZHOU Nong1, 2, ZHANG De-quan2, SUN Qin3*, JIANG Bei2, HUANG Zhi-chao2
(1. College of Life Science and Engineering, Chongqing Three Gorges University, Chongqing 404000, China; 2. College of
Pharmacy, Dali University, Dali 671000, China; 3. College of Pharmacy, Luzhou Medical College, Luzhou 646000, China)

Abstract: To compare the effects of inoculated or non-inoculated with arbuscular mycorrhizal (AM) fungi
on the steroidal saponin component in root of Paris polyphylla var. yunnanensis. By pot experiments, steroid
saponin component in root of P. polyphylla var. yunnanensis was determined and compared by HPLC. The
results showed there was difference in the effects of different AM fungal on the secondary metabolite steroid
saponin in P. polyphylla var. yunnanensis. After elicitors treatment, AM fungal did not change the chemical
backgrounds of P. polyphylla var. yunnanensis, but can improve partly the content of chemical compositions in
roots. In conclusion, there was selectivity between AM fungal and P. polyphylla var. yunnanensis. Glomus
intraradices was the most appropriate strain for inoculation P. polyphylla var. yunnanensis.
Key words: Paris polyphylla var. yunnanensis; arbuscular mycorrhizal fungi; steroidal saponin; secondary
metabolites; fingerprint

重楼是西部地区占据产业化利用主导地位、最
具代表性和全局影响力的药用植物资源之一[1]。滇重
楼为百合科植物云南重楼 (Paris polyphylla Smith

收稿日期: 2012-02-03; 修回日期: 2012-03-19.
基金项目: 云南省科技厅科研项目 (2011FB081); 重庆市高校创新团
队建设计划项目 (201040); 四川省教育厅科研项目
(09ZA176); 四川省中医药管理局科研项目 (2010-89).
*通讯作者 Tel / Fax: 86-830-3162291, E-mail: sdy-0502@126.com
var. yunnanensis (Franch.) Hara) 的干燥根茎, 被《中
国药典》(2010 年版一部) 规定为中药重楼的原植物
之一[2]。作为重要的清热解毒药, 目前国家药品标准
中有 65 个品种使用了重楼, 为云南白药、季德胜蛇
药、宫血宁胶囊等的主要原料之一, 是在中药组方中
应用范围较大、使用频率较高的中药品种之一[3, 4]。
其主要活性成分是甾体皂苷类化合物, 具有较强的
抗肿瘤、止血、镇痛、镇静、免疫调节等生物活性[5]。
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目前已出现严重的资源危机, 导致重楼资源面
临枯竭的威胁, 但引种驯化中仍存在自然繁殖效率
低、生长缓慢、栽培技术不成熟、病虫害严重等突出
问题[6−8], 严重威胁到以其为原料的医药工业的生存
与发展, 这种资源枯竭对重楼相关产业的打击将是
毁灭性的。因此, 目前及今后一段时期内如何通过一
定的人工栽培技术有效控制与提高药材质量, 将是
药用植物栽培工作者的当务之急和热点问题, 从而
实现重楼资源规模化再生, 达到开源节流, 减轻人类
需求对自然资源的压力。
丛枝菌根真菌 (arbuscular mycorrhizal fungi,
AMF) 侵染植物根系形成的植物根系与真菌的互惠
共生体, 参与植物的许多生理代谢过程, 研究表明,
AM 真菌在提高植物的抗性、诱导宿主植物某些代谢
产物的形成、促进植物生长、改善土壤等方面发挥着
重要的作用[9−12]。滇重楼能形成典型的重楼型 AM,
且对 AM 真菌具有较强依赖性[4]。前期研究发现丛枝
菌根对滇重楼的甾体皂苷含量有较大影响[13, 14], 通
过人工接种 AM 真菌提高甾体皂苷含量是一种新的
尝试, 而人工栽培条件下 AM 真菌对滇重楼化学成
分的影响未见报道。为此, 本研究通过室温盆栽接种
试验, 研究 9 种 AM 真菌对滇重楼生长中化学成分的
影响, 探讨甾体皂苷类化合物的组成和相对比例的
变化程度与 AM 真菌品种之间的关系, 以期进一步
阐明 AM 真菌与寄主植物之间的相互选择性, 筛选
促进滇重楼生长的优良共生菌种, 旨在为实现菌根
技术在滇重楼栽培中的应用提供理论依据, 为提高
人工栽培滇重楼的内在质量提供科学依据。

材料与方法
仪器与试药 Agilent 1100 型高效液相色谱仪
(美国Agilent公司); DM-BA300-B生物显微镜 (Motic);
SMZ-168 体视显微镜 (Motic); FZ102 型微型植物试
样粉碎机 (北京中兴伟业仪器有限公司); KL-UP-
UV-20 型超纯水机 (成都康宁实验专用纯水设备);
350 目标准检验筛 (浙江上虞市肖金筛具厂)。
重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ和Ⅶ对照品 (购自中国食品
药品检定研究院, 批号分别为 111590-200402、111591-
200402、111592-200402、111593-200402, 供含量测
定用); 色谱用乙腈购自德国 Merck 公司, 其他试剂
均为分析纯。水为二次蒸馏水, 用前经 0.45 μm 微孔
滤膜过滤。
AM 真菌选自北京市农林科学院植物营养与资
源研究所“丛枝菌根真菌种质资源库 (BGC)”;
“根友”牌阿密蔻菌根由上海弘升科技发展有限公
司惠赠, 见表 1。
滇重楼新鲜根茎来源于云南省大理花甸坝药材
场种植基地苗圃的同一批样品, 样品由大理学院药
学院生药学教研室周浓副教授鉴定为百合科植物云
南重楼 (Paris polyphylla var. yunnanensis) 的根茎。
接种方法及栽培管理 供试土壤由购于大理市
花鸟市场的林下腐殖土与当地砂壤土按照 3∶1 比例
混合, 风干过筛, 在 121 ℃高压灭菌锅内灭菌 2 h。采
用室温盆栽方法, 设接种 9 个 AM 真菌 (AM 组) 和
不接种 (CK 组) 共 10 种处理, 每处理 2 个重复, 每
重复 1 盆, 栽种滇重楼 3 株, 见表 1。将花盆用 10%
次氯酸钠溶液消毒 15 min 后, 每盆装灭菌土 3.0 kg。
2010 年 2 月 14 日, 选择大小一致的滇重楼根茎,
每株层施 AM 菌剂 15 mL。生长期间按常规管理, 定
期浇水、护理。2010 年 12 月 12 日收获滇重楼植株
的根茎和根, 根样清水洗净后剪成 1 cm 长根段置于
FAA固定液中固定, 根茎于室内风干; 根际土样风干
后装入塑料袋中于 4 ℃冰箱保存。
指标测定 采用曲利本蓝染色法进行 AM 真菌
的侵染率测定[15], 采用周浓等[4]所用的方法进行菌
根侵染强度测定 , 采用湿筛倾析-蔗糖离心法进行

Table 1 Inoculation test plan of arbuscular mycorrhizal fungi
Treatment Formal name BGC number Resource platform number
CK CK groups
Gi Glomus intraradices BGC AH01 1511C0001BGCAM0030
Ga Glomus aggregatum BGC HK02D 1511C0001BGCAM003
Geb Glomus eburneum BGC HK02C 1511C0001BGCAM0039
Ds Diversispora spurcum BGC SD03A 1511C0001BGCAM0047
Gm Glomus mosseae BGC YN05 1511C0001BGCAM0013
Gv Glomus versiforme BGC GD01C 1511C0001BGCAM0031
Get Glomus etunicatum BGC GZ03C 1511C0001BGCAM0046
Gt Glomus tortuosum BGC NM03A 1511C0001BGCAM0001
Amykor AMYKOR AM AMykor Produktions GmbH & Co. KG

周 浓等: 真菌诱导子对滇重楼中次生代谢产物甾体皂苷的影响 · 1239 ·


孢子密度测定[16]。滇重楼根茎中 4 种重楼皂苷含量
采用中国药典 (2010 年版 一部) 重楼药材项下含量
测定方法进行测定[2], HPLC 指纹图谱分析采用周浓
等[17]所用的方法进行测定。
数据分析 采用 SPSS17.0 软件进行数据统计与
分析, LSD 法进行多重比较。

结果
1 不同 AM 真菌对滇重楼根际 AMF 生态特征的影
响
由表 2可知, 对照组侵染率平均值为 98.85%, 说
明滇重楼根系在实验接种前已经具有侵染。接种 9
种 AM 真菌与对照组相比, 不同 AM 真菌对滇重楼
侵染率无显著性差异, 只是不同 AM 真菌对滇重楼
根系的侵染强度不同, 但部分 AM 组 (Gm、Gv 和
Amykor 组) 与 CK 组的孢子数丰度存在显著性差异,
表明不同AM真菌对该植物根系的侵染能力存在差异。

Table 2 The AMF ecologic characteristics of Paris polyphylla
var. yunnanensis rhizosphere with or without AM fungi. *P <
0.05 vs CK
Treatment Infection rate/%
Spore density
(piece/g)
Infection
intensity
CK 98.850 ± 0.354 5.050 ± 0.354 ++
Gi 98.650 ± 0.636 5.350 ± 1.202 +++
Ga 98.100 ± 0.707 6.600 ± 2.263 +++
Geb 99.500 ± 0.424 7.550 ± 0.071 ++
Ds 98.650 ± 0.071 6.350 ± 1.202 +++
Gm 99.000 ± 0.283 7.850 ± 1.768* +++
Gv 99.050 ± 0.212 7.750 ± 0.495* +++
Get 98.500 ± 0.141 7.200 ± 0.424 ++
Gt 99.000 ± 0.707 6.950 ± 1.485 ++
Amykor 99.000 ± 0.566 8.100 ± 0.424* +++

2 不同 AM 真菌对滇重楼根茎中甾体皂苷类成分的
影响
分别取不同处理后的滇重楼药材, 依据周浓等[17]
所用方法中的色谱条件、供试品溶液制备方法进行测
定, 记录其 93 min 色谱图。
2.1 共有峰的标定和确认 将 46批滇重楼药材的色
谱数据导入国家药典委员会颁布的“中药色谱指纹
图谱相似度评价系统 2.0 版”软件, 设定匹配模板,
进行谱峰多点校正, 并生成对照指纹图谱, 结果见图
1～2。在测定的 46 批药材中, 图谱显示约有 60 个色
谱峰, 其中 32 个共有峰为 46 批样品共有, 确定为特
征指纹峰, 依次编号。为了尽可能了解滇重楼指纹图
谱中各成分的结构信息, 根据同一化合物相同色谱
分离条件下保留时间相同、紫外光谱图一致的原则,
共指认出 4 个化合物的色谱峰, 分别是重楼皂苷Ⅶ
(峰号: 10, 保留时间: 10.766 min)、重楼皂苷Ⅵ (峰号:
11, 保留时间: 15.637 min)、重楼皂苷Ⅱ (峰号: 14, 保
留时间: 28.324 min) 和重楼皂苷Ⅰ (峰号: 15, 保留
时间: 29.163 min)。为了用数字统一标定不同滇重楼
药材的指纹图谱特征, 选定供试品溶液指纹图谱中
的重楼皂苷Ⅰ (S) 为参照峰, 计算各共有色谱峰的相
对保留时间和相对峰面积。
由图 1、图 2 可见, CK 组与不同 AM 真菌组滇重
楼根茎中甾体皂苷类指纹图谱的主要峰群的整体图
貌基本一致, 在峰数上无显著性差异, 只是丰度有些
差别, 说明滇重楼经 AM 真菌诱导处理后, 并没有引
起其化学成分的根本改变, 这为 AM 真菌诱导子处
理滇重楼根茎的安全性提供了保证。
由 32 个共有色谱峰的相对保留时间和相对峰面
积可知 (表略), 相对保留时间的RSD较小 (0.00%～
0.09%), 而相对峰面积的 RSD 差异较大 , 最高达
101.50%。这一结果表明, 接种不同 AM 真菌的滇重
楼, 其甾体皂苷类化学成分含量发生了显著性的变
化, 改变了原有次生代谢物质的特异性积累。
2.2 相似度评价 采用国家药典委员会颁布的“中
药色谱指纹图谱相似度评价系统 2.0版”软件进行数
据处理 : 以相关系数 (中位数) 代表其相似度 , 与
CK 组和 AM 组生成的对照指纹图谱 (共有模式) 比
较, 46 批滇重楼药材的相似度见表 3。
由表 3 可见, 滇重楼接种和不接种 AM 真菌的对
照图谱之间的相似度有一定差异, 各处理组的相似
度平均值均在 0.90 以上, 说明接种不同 AM 真菌对
滇重楼药材所含化学成分的组成和比例有不同程度
的变化, 但没有造成滇重楼根茎甾体皂苷类成分的
变异, 进一步说明 AM 真菌用于滇重楼栽培生产具有


Figure 1 HPLC fingerprint of standard Paris polyphylla var.
yunnanensis
· 1240 · 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2012, 47 (9): 1237−1242



Figure 2 HPLC fingerprint of 46 batchs of Paris polyphylla var. yunnanensis

Table 3 Impacts on peak mass ratio of steroid saponin in Paris
polyphylla var. yunnanensis with or without AM fungi. *P <
0.05 vs CK, ΔP < 0.05, ΔΔP < 0.01 vs Gi
Treatment
Total peak area
of con-steroidal
saponins ×103
Peak area of
four chonglou
saponins ×103
Similarity
CK 61.86 ± 4.94Δ 22.48 ± 3.51Δ 0.910 ± 0.042
Gi 75.30 ± 17.51* 29.31 ± 7.54* 0.903 ± 0.053
Ga 56.31 ± 11.85ΔΔ 22.68 ± 2.20Δ 0.948 ± 0.006
Geb 52.90 ± 2.93Δ 20.59 ± 0.45Δ 0.954 ± 0.023
Ds 55.37 ± 4.50Δ 21.01 ± 0.12Δ 0.962 ± 0.009
Gm 57.14 ± 12.76ΔΔ 20.67 ± 1.43ΔΔ 0.931 ± 0.029
Gv 56.92 ± 11.74ΔΔ 22.98 ± 9.52Δ 0.901 ± 0.132
Get 53.51 ± 7.80ΔΔ 20.69 ± 0.60ΔΔ 0.949 ± 0.022
Gt 58.03 ± 6.27ΔΔ 20.41 ± 0.98ΔΔ 0.944 ± 0.052
Amykor 55.64 ± 6.86ΔΔ 22.96 ± 1.91Δ 0.917 ± 0.065

理论上的可行性。
2.3 共有峰峰面积的比较 无论是采用相关系数还
是矢量夹角余弦来计算相似度, 它们比较的只是色
谱指纹图谱的整体相似 , 并没有考虑提取物的
“量”的不同[18]。因此采用化学模式识别 (主成分
分析) 的方法, 以滇重楼HPLC色谱指纹图谱中的 32
个共有峰峰面积与称样量比值 (简称峰质比) 的总
和为指标, 考察滇重楼中 32 个主要化学成分含量在
不同 AM 组和 CK 组滇重楼根茎中的变化; 同时对重
楼皂苷Ⅶ、Ⅵ、Ⅰ、Ⅱ的峰质比在不同 AM 组和 CK
组中的变化进行考察, 见表 3。
由表 3 可见, Gi 组滇重楼中总甾体皂苷量和 4 种
重楼皂苷量显著大于 CK 组和其他 AM 组 (P < 0.05)。
与 CK 组比, Ga、Gv 和 Amykor 组滇重楼中 4 种重楼
皂苷量分别提高了 0.88%、2.24% 和 2.14%, 但 3 个
处理间无显著性差异。在 32 个共有峰下, Gi 组有 23
个、Ds 组有 11 个、Gm 组和 Gt 组各有 9 个、Amykor
组有 8 个、Gv 组有 7 个成分的色谱峰峰面积积分值
高于 CK 组, 但 Ga 组和 Get 组各有 3 个、Geb 组仅
有 2 个成分的色谱峰峰面积积分值高于 CK 组, 存在
显著性差异。结果表明, 在人工栽培过程中, AM 真菌
的加入可以使部分人工栽培的滇重楼品质更优, 该
结果从化学成分角度为滇重楼人工栽培方法的选择
提供了初步依据。
2.4 不同 AM 真菌对滇重楼根茎中重楼皂苷含量的
影响 由表 4 可知, 9 种 AM 真菌侵染所导致的丛枝
菌根形成, 均影响了滇重楼根茎中甾体皂苷的代谢。
与 CK 组比, 多数菌根苗根茎的重楼皂苷含量明显提
高, 也有差异不明显或降低的; Gi 组滇重楼中 4 种重
楼皂苷Ⅶ、Ⅰ和总含量显著大于 CK 组和其他 AM 组,
但重楼皂苷Ⅵ仅与 Gm、Gv、Get、Gt 和 CK 组有显
著性差异, 重楼皂苷Ⅱ仅与 Gv 组有显著性差异 (P <
0.05)。因此, 总体上看根内球囊霉、聚丛球囊霉、沾
屑多样孢囊霉和阿密蔻菌根侵染形成丛枝菌根有利
于提高滇重楼根茎中重楼皂苷的含量, 摩西球囊霉
和地表球囊霉则影响不大, 而象牙白球囊霉、幼套球
囊霉和扭形球囊霉却降低了滇重楼根茎中重楼皂苷
的含量。

讨论
AM 真菌通过侵染形成菌根对药用植物次生代
谢产物的影响有明显的种属差异, 植物与 AM 真菌
之间的共生关系具有一定的相互选择性[19]。本实验
周 浓等: 真菌诱导子对滇重楼中次生代谢产物甾体皂苷的影响 · 1241 ·


Table 4 Impacts on content of saponin in root of Paris polyphylla var. yunnanensis with or without AM fungi. *P < 0.05, **P < 0.01 vs
CK, ΔP < 0.05, ΔΔP < 0.01 vs Gi
Treatment Chonglou saponinⅦ/% Chonglou saponinⅥ/% Chonglou saponinⅡ/% Chonglou saponinⅠ/% Total/%
CK 0.139 8 ± 0.005 4ΔΔ 0.015 8 ± 0.003 2Δ 0.084 2 ± 0.001 2 0.271 7 ± 0.040 3ΔΔ 0.511 5 ± 0.039 3ΔΔ
Gi 0.186 7 ± 0.060 0** 0.020 8 ± 0.005 2* 0.092 3 ± 0.026 4 0.451 4 ± 0.190 5** 0.749 4 ± 0.194 6**
Ga 0.136 5 ± 0.013 4Δ 0.017 7 ± 0.004 8 0.081 3 ± 0.006 7 0.320 1 ± 0.089 6Δ 0.555 6 ± 0.091 1Δ
Geb 0.127 5 ± 0.018 6Δ 0.015 4 ± 0.005 2 0.082 9 ± 0.003 2 0.249 0 ± 0.009 3Δ 0.474 7 ± 0.026 0Δ
Ds 0.139 4 ± 0.000 8Δ 0.016 6 ± 0.002 8 0.084 8 ± 0.000 1 0.253 5 ± 0.001 4Δ 0.544 3 ± 0.068 6Δ
Gm 0.140 1 ± 0.008 4Δ 0.012 5 ± 0.004 4ΔΔ 0.083 4 ± 0.005 2 0.254 2 ± 0.014 2ΔΔ 0.510 3 ± 0.069 5ΔΔ
Gv 0.116 4 ± 0.048 7ΔΔ 0.014 9 ± 0.005 2Δ 0.068 9 ± 0.033 7Δ 0.302 6 ± 0.158 5Δ 0.502 8 ± 0.232 8Δ
Get 0.139 4 ± 0.010 7Δ 0.014 6 ± 0.001 9Δ 0.082 4 ± 0.002 6 0.251 4 ± 0.004 4ΔΔ 0.487 7 ± 0.015 7ΔΔ
Gt 0.136 1 ± 0.007 3ΔΔ 0.015 4 ± 0.003 2Δ 0.082 2 ± 0.003 9 0.246 7 ± 0.012 2ΔΔ 0.480 3 ± 0.023 2ΔΔ
Amykor 0.131 0 ± 0.019 6ΔΔ 0.017 8 ± 0.002 2 0.079 1 ± 0.011 3 0.295 8 ± 0.098 0Δ 0.523 6 ± 0.122 1ΔΔ

结果表明, 滇重楼能与 AM 真菌形成良好的互惠共
生关系, 接种 AM 真菌能够部分提高菌根侵染强度
和孢子密度, 接种 AM 真菌后均能显著改变滇重楼
根茎的化学成分含量和组成比例, 不同菌根真菌对
不同甾体皂苷的影响有所差异, 根内球囊霉是最适
宜滇重楼接种的优良菌种, 提示在大田施加 AM 菌
剂的实际应用中, 需要考虑不同 AM 真菌与植物之
间的选择性, 为进一步在大田条件下筛选高效菌种
奠定了基础。
由于实际栽培中, 根茎繁殖是滇重楼的主要繁
殖方法之一, 往往无法实现有效灭菌, 所以本实验模
拟大田条件, 对滇重楼根茎不做灭菌处理。部分重复
存在个别滇重楼死亡的现象, 实验研究以实际存活
个体数进行计算。因不同植株同一采收期的化学成分
有所差异, 本实验采用单株滇重楼采样与分析, 以减
少实验误差。
实验期间未发现 AM 真菌处理对滇重楼甾体皂
苷类成分造成显著影响, 显然, 目前观察到的只是丛
枝菌根形成对滇重楼次生代谢影响的一些表观现象,
而丛枝菌根真菌在侵染滇重楼以及与其建立共生关
系的过程中与滇重楼次生代谢的关系是错综复杂的,
需要更为深入的实验观察来洞察其关系实质, 而这
对于更深刻地理解滇重楼与环境的互作本质是非常
必要的。故下一步的研究目标应是选取优势菌种, 采
用多种 AM 真菌混接来达到提高滇重楼品质的目的,
继续测定多年生菌根化苗的化学成分含量变化, 从
菌根学、生理生化、基因表达等不同层次系统研究由
滇重楼-土壤-AM 真菌组成的根际微生态系统中不
同单元间相互作用、相互依赖的内在规律性, 探讨
AM 真菌未知生态学功能及对滇重楼品质影响的过
程、机制和物质基础, 从 AM 真菌的角度对滇重楼品
质科学内涵进行诠释, 为 AM 真菌在滇重楼人工栽
培中的应用研究提供指导。
References
[1] Zhang CY, Zhao TZ. Strategy and its key technology for
resource regeneration of plants in Paris L. [J]. Chin Tradit
Herb Drugs (中草药), 2009, 40: 319−323.
[2] Chinese Pharmacopoeia Commission. Phamacopoeia of
the People’s Republic of China (中华人民共和国药典) [S].
2010 ed. Part I. Beijing: China Medical Science Press,
2010: 243−244.
[3] Zhu YJ, Chen SL, Yao H, et al. DNA barcoding the medicinal
plants of the genus Paris [J]. Acta Pharm Sin (药学学报),
2010, 45: 376−382.
[4] Zhou N, Xia CL, Jiang B, et al. Arbuscular mycorrhizae in
Paris polyphylla var. yunnanensis [J]. China J Chin Mater
Med (中国中药杂志), 2010, 34: 1768−1772.
[5] Wu SS, Gao WY, Duan HQ, et al. Advances in studies
on chemical constituents and pharmacological activities of
Rhizoma Paridis [J]. Chin Tradit Herb Drugs (中草药), 2004,
35: 344−347.
[6] Yang YH, Yan J, Liu JY, et al. Investigation on root rot of
Paris polyphylla var. yunnanensis and study on the major pests
[J]. J Chin Med Mater (中药材), 2009, 32: 1342−1346.
[7] Meng FY, Wang LY, Feng CQ, et al. Advances in introduction
and domestication of Paris polyphylla var. yunnanensis [J].
Chin Tradit Herb Drugs (中草药), 2005, 36: 1102−1104.
[8] Liu XB, Zhang H, Yong ZP, et al. Isolation and identification
of steroidal saponins of Paris polyphylla Smith var. pseudo-
thibetica [J]. West China J Pharm Sci (华西药学杂志), 2010,
25: 508−511.
[9] Xiao WJ, Yang G, Chen ML, et al. AM and its application in
plant disease prevention of Chinese medicinal herbs cultivation
[J]. China J Chin Mater Med (中国中药杂志), 2011, 36:
252−257.
· 1242 · 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2012, 47 (9): 1237−1242

[10] Ceng Y, Guo LP, Sun YZ, et al. AM and its application in TCM
cultivation [J]. World Sci Technol Mod Tradit Chin Med (世界
科学技术-中医药现代化), 2007, 9: 83−87.
[11] Guo LP, Huang LQ, Jiang YX, et al. Soil deterioration during
cultivation of medicinal plants and ways to prevent it [J].
China J Chin Mater Med (中国中药杂志), 2006, 31: 714−717.
[12] Zhao X, Yan XF. Effects of arbuscylar mycorrhizal fungi on
plant secondary metabolism [J]. Chin J Plant Ecol (植物生态
学报), 2006, 30: 514−521.
[13] Zhou N, Zou L, Wang GZ, et al. Primary explore to relation of
arbuscular mycorrhizae and its secondary metabolite steroidal
saponin in Paris polyphylla [J]. Chin J Exp Tradit Med Form
(中国实验方剂学杂志), 2010, 16: 85−88.
[14] Duan YT, He ZJ, Liang SW, et al. Study on correlations
between total saponins content in rhizome or mycorrhizal
infection rate of Pairs polyphylla var. yunnanensis and soil
factors [J]. China J Chin Mater Med (中国中药杂志), 2011,
36: 3091−3095.
[15] Philips JM, Hayman DS. Improved procedures for clearing
and attaining parasitic and vesicular mycorrhizal fungi for
rapid assessment of infection [J]. Trans Br Mycol Soc, 1970,
55: 158−161.
[16] Gerdemann JW. Relation of a large soil-borne spore to
phytomycetous mycorrhizal infections [J]. Mgcologia, 1955,
47: 619−632.
[17] Zhou N, Duan BZ, Xia CL, et al. Research on changing
regulation of ingredients in Paris polyphylla var. yunnanensis
at different growth [J]. Chin J Exp Tradit Med Form (中国实
验方剂学杂志), 2011, 17: 70−73.
[18] Dong L, Zhang CY, Chen SL. HPLC-UV-ELSD characteristic
figure and chemical pattern recognition of Panacis Quinquefolii
Radix [J]. Acta Pharm Sin (药学学报), 2011, 46: 198−202.
[19] Monzon A, Azcon R. Relevance of mycorrhizal fungal origin
and host plant genotype to inducing growth and nutrient uptake
in Medicago species [J]. Agric Ecosys Environ, 1996, 60:
9−15.