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黔产艾纳香药材质量研究



全 文 :4 讨论
通过查阅大量资料发现,目前尚缺乏输卵管妊娠动物模型的
报道。由于小鼠输卵管细而长,在卵巢包囊完整的情况下,不会
发生腹腔妊娠[2],因此我们以正常孕鼠的模型模拟宫外孕。
输卵管妊娠的临床研究中通常以血清 HCG的检测作为临床
观察的指标。孕激素在胚胎的发育过程中起到了重要的作用,能
够维持胚胎的正常生长、发育,有研究证明,异位妊娠输卵管粘膜
中可见孕激素受体的表达[3],因此,在本实验中对治疗前后血清
孕酮浓度进行检测,对于预测保守治疗结局具有一定的指导意
义,同时提示治疗过程可能是通过抑制孕酮的分泌影响妊娠的发
展。
MTX作为抗癌的化疗药物,通过拮抗四氢叶酸的生成干扰
DNA的合成,抑制滋养细胞分裂、阻止胚胎发育而致胚胎死亡,
其临床疗效确切,但是胃肠道反应较重,部分病人有畏惧心理,因
而依从性不高。中药治疗副作用较小、安全性好,因此患者不会
产生心理障碍,从而提高了依从性。临床观察表明,止血止痛作
用明显优于 MTX,杀胚、降 HCG作用与 MTX 没有差异[4]。本实
验中,各实验组对小鼠早期妊娠、血清孕酮含量的抑制作用对药
物的临床疗效提供了一个有力的支撑。
从本实验结果可以看到,低剂量组的效果优于中高剂量组。
对此,笔者尚不能给出合理的解释,一方面,有可能随着剂量的增
加反而抑制了孕酮的表达,另一方面可以对量效关系以及疗程做
更深入的研究。同时,下一步将对治疗后效果进行评估,即对治
疗后正常宫内孕、再孕率进行研究,为两种治疗方式提供更全面
的实验比较。
参考文献:
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收稿日期:2012-02-14; 修订日期:2012-05-28
基金项目:贵州省黔南州科技局资助项目( No.黔南科合药 2010 字 01 号)
作者简介:夏稷子( 1964-) ,女( 汉族) ,四川自贡人,现任贵州省黔南州食
品药品检验所副主任药师,学士学位,主要从事药品检验研究工作.
黔产艾纳香药材质量研究
夏稷子1,赵 智2,邓言欢1,安 军1,朱华祥1
(1.贵州省黔南州食品药品检验所 558000; 2.贵州省黔南州食品药品监督管理局 558000)
摘要:目的 建立艾纳香药材质量控制新标准提供科学依据。方法 采用薄层色谱法对艾纳香进行定性鉴别,同时测定其
水分、灰分、酸不溶性灰分和挥发油含量。结果 建立了艾纳香药材薄层色谱定性鉴别方法,并提出了艾纳香药材中水
分、灰分、酸不溶性灰分的限度以及挥发油含量的定量标准。结论 研究结果可为建立健全黔产艾纳香药材的质量控制
标准提供新的技术平台和科学依据。
关键词:艾纳香; 薄层色谱; 检查; 挥发油含量
DOI标识:doi: 10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 09. 059
中图分类号:R284. 2 文献标识码:B 文章编号:1008-0805( 2012) 09-2244-02
艾纳香为菊科艾纳香属植物艾纳香 Blumea balsamifera (L.)
DC.的新鲜或干燥地上部分,临床上可用于风寒感冒、寒湿泻痢、
风湿痹通、跌打伤痛等,具有开窍醒神、清热止痛的功效[1]。该
药收载于《贵州省中药材、民族药材质量标准》(2003 年版) ,但
质量标准中只有性状鉴别一项[1]。本课题组在前期已完成艾纳
香挥发性成分的气相色谱指纹图谱、指标成分含量测定及显微结
构研究的基础上,进一步对其进行薄层色谱、挥发油含量及水分、
灰分、酸不溶性灰分限度等分析,为建立健全合理、简便、可控的
艾纳香药材质量控制标准,提供新的技术平台和重要基础性资
料。
1 仪器与材料
1. 1 仪器与试药 AG135 电子天平(上海 METTLER TOLEDO 公
司) ;箱式电阻炉(天津泰斯特仪器有限公司) ;薄层层析用硅胶
G板(青岛海洋化工集团公司)。左旋龙脑对照品(中检所,批
号:110881 - 200706) ;艾纳香对照药材(贵州省中医药研究院中
药研究所) ;所用试剂均为分析纯。
1. 2 供试样品 艾纳香样品共 14 批,分别来自贵州、广西、云南
三省 14 个地区,经贵阳中医学院何顺志教授鉴定为菊科艾纳香
属植物艾纳香 Blumea balsamifera (L)DC,样品采用干燥的叶和
嫩枝,采集时间均为 2010 年 11 月中旬。样品号及样品来源
见表 1。
表 1 艾纳香样品来源
样品号 样品来源 样品号 样品来源
S1 贵州省罗甸县班仁乡 S8 贵州省罗甸县八总乡
S2 贵州省罗甸县龙坪镇 S9 贵州省罗甸县沟亭乡
S3 贵州省望谟县 S10 贵州省罗甸县沫阳乡
S4 贵州省罗甸县茂进镇 S11 贵州省荔波县
S5 贵州省罗甸县红水河乡Ⅰ S12 贵州省赤水县
S6 贵州省罗甸县罗暮乡 S13 云南省楚雄县
S7 贵州省罗甸县红水河乡Ⅱ S14 广西自治区天鹅县
2 方法与结果
2. 1 薄层鉴别 取本品粉末 1 g,加乙醚 5 ml,密塞,超声处理 30
min,取上清液作为供试品溶液。另取艾纳香对照药材 1 g,同法
制成对照药材溶液。再取左旋龙脑对照品加乙醚制成每毫升含
1 mg的溶液作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液及对照药材
溶液各 5 μl、对照品溶液 1 μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠
为粘合剂的硅胶 G薄层板上,以环己烷 -氯仿 -醋酸乙酯(9∶ 1
∶ 2)为展开剂,展开、取出、晾干,喷以 1%香草醛硫酸溶液,在
105℃加热至斑点显色清晰。结果表明,14 批艾纳香样品与对照
药材及对照品比较,均在相应位置出现特征性的艾纳香 Rf 值斑
点,但斑点大小、色泽深浅、形状边际各有不同,表明不同产地艾
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 9 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 9
纳香在左旋龙脑组分分布上差异不大,但在成分的比例和含量上
有所差别(图 1)。
A:1 - 7 分别为样品 S1、S2、S3、S4、S5、S6、S7,
8 为对照药材,9 为左旋龙脑对照品
B:10 - 16 分别为样品 S8、S9、S10、S11、S12、S13、S14,
17 为对照药材,18 为左旋龙脑对照品
图 1 艾纳香药材薄层色谱图
2. 2 检查
2. 2. 1 水分测定 依照《中国药典》2010 年版(Ⅰ部)水分测定法
(附录Ⅸ H 第 2 法)进行测定。测定数据及结果见表 2。
2. 2. 2 总灰分 依照《中国药典》2010 年版(Ⅰ部)总灰分测定法
(附录Ⅸ K)进行测定。测定数据及结果见表 2。
2. 2. 3 酸不溶性灰分 依照《中国药典》2010 年版(Ⅰ部)总灰分
测定法(附录Ⅸ K)进行测定。测定数据及结果见表 2。
2. 3 挥发油含量测定 依照《中国药典》2010 年版(Ⅰ部)挥发油
测定法(附录 X D 乙法)进行测定。测定数据及结果见表 2。
表 2 艾纳香药材检查项及挥发油含量测定 %
样品 水分 总灰分 酸不溶性灰分 挥发油
S1 10. 27 8. 06 0. 85 2. 98
S2 8. 50 7. 07 0. 37 3. 81
S3 9. 48 8. 30 0. 84 3. 07
S4 8. 94 8. 13 1. 43 3. 31
S5 12. 03 7. 71 0. 64 3. 81
S6 11. 33 6. 60 1. 04 3. 95
S7 12. 03 6. 70 0. 35 4. 12
S8 9. 47 8. 81 1. 54 2. 96
S9 9. 21 7. 70 0. 16 3. 20
S10 9. 06 7. 75 0. 33 3. 20
S11 8. 64 7. 95 0. 49 3. 41
S12 11. 06 7. 86 0. 54 3. 17
S13 9. 94 7. 75 0. 55 3. 19
S14 9. 86 7. 64 0. 63 3. 86
n = 3
3 讨论
本研究应用薄层色谱分析,考察了用石油醚、醋酸乙酯、无水
乙醇、乙醚等不同溶剂提取,分别以石油醚 -醋酸乙酯(4∶ 1)、
石油醚 -甲苯 -丙酮(10∶ 8∶ 0. 5)、环己烷 -氯仿 -无水乙醇
(7∶ 3∶ 1)、环己烷 -氯仿 -醋酸乙酯(9∶ 1∶ 2)等不同系统展
开[2],结果发现,以乙醚为提取溶剂,以环己烷 -氯仿 -醋酸乙
酯(9∶ 1∶ 2)为展开剂,斑点分离度最好、显色最清晰。本研究
还对不同来源的薄层板、薄层条件(温度和湿度)进行了考察,结
果表明薄层色谱层析在不同的色谱板上重现性好,且受实验温湿
度影响较小。该方法简便易行,专属性强,展开时间短,可用作艾
纳香药材的首选定性鉴别方法。依照检查实验结果我们认为,以
平均含量的 ± 20%规定各指标成分的含量限度,艾纳香药材中水
分应不高于 15. 0%;总灰分应不高于 10. 0%;酸不溶性灰分应不
高于 2. 0%;挥发油含量(以干燥品计算)应不低于 2. 5%。
本研究检查中的水分、灰分、酸不溶性灰分和挥发油,是《中
国药典》所规定的鉴定中药材的常规内容。通常认为,水分、挥
发油含量较高时,灰分、酸不溶性灰分含量较低,反之亦然。由于
艾纳香以挥发性物质为主要功能性成分[3],因此运用既规范又
简便的方法,测定药材中水分、灰分、酸不溶性灰分和挥发油含量
的多少,对于粗略判断艾纳香药材的质量高低,无疑有着十分重
要的实用意义。本实验结果表明,贵州罗甸红水河地区所产艾纳
香水分和挥发油含量最高,灰分和酸不溶性灰分含量最低,其次
为罗甸沫阳、罗甸龙坪、广西天鹅,是十几个地产艾纳香中品质较
为优良者。其他一些地区所产艾纳香,有的尽管挥发油成分含量
较丰足,但灰分特别是酸不溶性灰分含量亦较高,是否与含有其
他有害成分如重金属等有关,有待进一步研究。
艾纳香的生产程序是从叶片和嫩枝中提取艾粉(粗加工
品) ,再精炼成冰片和艾纳香油,其药品质量和经济效益取决于
有效成分含量和生药产量[4]。但长期以来,对黔产艾纳香药材
的质量标准缺乏系统性研究,对其质量控制也只有性状鉴别一
项,更无利用气相色谱、薄层色谱、显微观察法及常规检查等技术
研究艾纳香药材 GC 指纹图谱、左旋龙脑含量测定、水分灰分酸
不溶性灰分限度,以及挥发油含量和艾纳香茎叶组织的显微结构
研究。我们的系列研究成果在许多方面填补了上述工作的空白,
其中应用薄层色谱、常规检查及显微观察法等常规简易技术,检
测艾纳香药材中水分、灰分、酸不溶性灰分限度,以及挥发油含量
和艾纳香茎叶组织的显微结构,可作为基层产地一般性必检项
目;而利用气相色谱等技术,测定艾纳香药材 GC指纹图谱、左旋
龙脑含量等,则可作为药检院所监测性检查项目,这些研究结果
为建立健全合理、简便、可控的黔产艾纳香药材质量新标准,改进
艾纳香种植、鉴定技术,促进艾纳香资源产业可持续性发展,提供
了新的技术平台和具有开创性意义的重要资料。
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