全 文 ：— 26 — 现代中药研究与实践2014年第28卷第5期Chin Med J Res Prac,2014 Oct.Vol.28 No.5
收稿日期：2014-4-14
基金项目：国家中医药管理局行业科研专项 (201107009)
作者简介：余成龙，(1988-)，男，硕士研究生，研究方向为天然药物分析。
E-mail ：tianjindeyang1988@126.com。
* 通讯作者：宋良科，(1954-)，男，学士学位，副教授，研究方向为药用植
物资源与活性成分。E-mail ：songlk591@126.com。
藏药红花绿绒蒿中木犀草素的定性定量分析
余成龙，宋良科 *，吴蜀星，曹雨虹，李治昊
（西南交通大学生命科学与工程学院， 四川 成都 610031）
摘　要：目的　以红花绿绒蒿Meconopsis punicea Maxim. 黄酮类化学组分的定性定量分析为基础，
确定药材的主要指标性化学成分，为药材质量标准的制定奠定基础。方法　采用薄层色谱法确定红花绿
绒蒿中的主要化学组分；采用高效液相色谱外标法进行指标性化学成分的含量测定，以Chrompsuper C18
（4.6mm×250mm，5μm）为色谱柱，甲醇 -0.2% 磷酸溶液（60 ：40）为流动相，流速为 0.6ml·min-1，
检测波长为 349nm，柱温为 30℃。结果　薄层色谱法可检出木犀草素，木犀草素的回归方程为
Y=183250X+48493（R2=0.9995），木犀草素在 0.084μg ～ 0.84μg 范围内呈良好的线性关系，平均加样回
收率为 97.82%，RSD为 1.01%。结论　该定性定量分析方法稳定、重复性良好，可作为红花绿绒蒿药材质
量的评价方法之一，为进一步制定药材质量标准提供了依据。
关键词：红花绿绒蒿；薄层色谱法；高效液相色谱法；木犀草素
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2014)05-26-04
Identifi cation and Determination of Luteolin in Meconopsis punicea Maxim.
YU Cheng-long, SONG Liang-ke*, WU Shu-xing, CAO Yu-hong, LI Zhi-hao
(School of Life Science and Engineering, Southwest Jiaotong University, Chengdu,Sichuan, 610031)
Abstract: Objective The major indicative chemical constituent of Meconopsis punicea Maxim. was
confirmed based on the identification and determination of luteolin in Meconopsis punicea Maxim. Methods
The major chemical constituents were confirmed by the TLC method, the indicative chemical constituent was
determined by the HPLC method. The HPLC was confi rmed using Chrompsuper C18 column (4.6mm×250mm,
5μm) and methanol -0.2% orthophosphoric acid (60:40)as the mobile phase, the fl ow rate was 0.6ml·min-1, the
detection wavelength was 349nm , and the column temperature was 30℃. Results The luteolin was identifi ed
by the TLC method, the regression equation of luteolin was Y=183 250X+48 493 (R2=0.999 5), the linear range
of luteolin was 0.084μg～0.84μg, the average recovery was 97.82% with the RSD was 1.01%. Conclusion The
method is stable and iterative, the method can be used to evaluate the quality of Meconopsis punicea Maxim., the
method provides foundation for further research on the quality standard of Meconopsis punicea Maxim..
Key words : Meconopsis punicea Maxim.; TLC; HPLC; luteolin
红 花 绿 绒 蒿（Meconopsis punicea Maxim.） 为
罂粟科绿绒蒿属一年生草本植物。其藏药名为欧
贝玛保，主要分布于四川、青海、西藏等省区海拔
2800m ～ 4500m 的山坡、草甸等地。欧贝玛保始出
藏药典籍《晶珠本草》谓：“欧贝，清肝热、肺热 [1]。”
作为传统藏药材，常用于治疗发烧、肺结核、鼻出血
等疾病。目前红花绿绒蒿的研究主要局限在化学成分
方面 [2~6]，但其药材性状、主要有效指标性化学成分
的定性定量分析方法均未见报道。本实验选择四川省
主产地的 3个样地的 9批对口样本，采用薄层色谱法
确定其黄酮类化学组分中的指标性化学成分，在此基
础上采用高效液相色谱外标法进行定量分析，为红花
绿绒蒿药材质量标准的制定提供可靠依据。
1　仪器与试药
高效液相色谱仪（Waters2487 紫外检测器，
Waters515HPLC 泵），TU-1901 紫外分光光度计（北
京普析通用有限公司），Chrompsuper C18 色谱柱
（4.6mm×250mm，5μm），数显恒温水浴锅（上海
谷宁仪器有限公司），KQ220DB 数控超声波清洗仪
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（上海科导超声仪器有限公司）。甲醇为色谱纯，其
它试剂均为分析纯，水为超纯水，木犀草素 ( 中国药
品生物制品检定所，批号：110818-201004)。药材由
产地采集并由西南交通大学生命科学与工程学院宋
良科副教授鉴定为红花绿绒蒿（Meconopsis punicea
Maxim.），药材在每个产地采集 3批，洗净晾至 6成
干后置烘箱中 45℃烘干，用小型粉碎机粉碎，用二
号筛筛粉备用。
2　方法与结果
2.1　鉴别
2.1.1　性状鉴别　　本品黄褐色或绿褐色，多皱缩或
破碎。无主根，须根纤维状。基部具莲座状密被淡
黄褐色或棕褐色短分枝刚毛的宿存叶柄；叶柄明显，
长 6～ 14cm ；叶片展开后明显具 3条纵脉，倒披针
形或狭倒卵形，长 2～ 15cm，宽 1～ 3cm，先端急尖，
基部渐狭，边缘全缘，两面密被淡黄色或棕褐色短分
枝的刚毛；花葶多折断或弯曲并被棕黄色刚毛。花或
果单生于花葶顶端。萼片卵形密被刚毛；花瓣 4，有
时 5，多皱缩或破碎，完整花瓣展开后椭圆形，无毛，
长 2～ 6cm，宽 1～ 2cm，紫红色。子房密被淡黄色
刚毛，蒴果椭圆状长圆形密被刚毛或刚毛脱落无毛，
4～ 6 瓣自顶端微裂，种子具乳突。味微甘、涩，气
微芳香。
2.1.2　薄层色谱鉴别　　取不同产地红花绿绒蒿粉
末约 5g，加 95%乙醇 40mL，并用乙酸调节 PH至 4，
超声处理 45 min，滤过，滤液浓缩至近干，加 95%
乙醇 5mL 使溶解，静置，取上清液作为供试品溶液。
另取木犀草素对照品，加 95% 乙醇制成每 1mL 含
0.5mg 木犀草素的对照品溶液。将供试品溶液和对照
品溶液分别以苯 -乙酸乙酯 -甲酸（6：2：0.7）、苯 -
乙酸乙酯 -甲酸（8：2：0.9）、甲苯 -乙酸乙酯 -甲
酸（8：2：0.9）、甲苯 -乙酸乙酯 -甲酸（5：2：0.2）、
氯仿 - 甲醇 - 甲酸（20 ：2 ：0.5）、环己烷 - 乙酸乙
酯 -甲酸（8：5：0.5）六种溶剂系统为展开剂进行
点样展开，取出，用 1%三氯化铝乙醇溶液显色，晾
干并于紫外光灯（365 nm）下检视。结果表明以展开
剂苯 -乙酸乙酯 -甲酸（6：2：0.7）及展开剂环己
烷 -乙酸乙酯 -甲酸（8：5：0.5）展开的效果均较好，
Rf 值适中，出于对实验安全性及薄层鉴别适用性的
考虑，选择环己烷 -乙酸乙酯 -甲酸（8：5：0.5）
为展开剂。试验结果显示，供试品色谱中，在与对
照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点（见
图 1）。
1-3. 四川小金产红花绿绒蒿 4-6. 四川马尔康产红花绿绒蒿 7-9. 四川红原
产红花绿绒蒿 10. 木犀草素
图 1 木犀草素的 TLC图
Fig.1 TLC analysis of luteolin
2.2　木犀草素的HPLC 含量测定
2.2.1　水分测定　　根据 2010 年版《中国药典》附
录 XIH 水分测定法第一法（烘干法）测定（见表 1）。
表 1 水分测定结果
Tab.1 Determinnation results of water
序号 产地 水分（%） RSD(%)
1 四川小金 13.21 0.15
2 四川马尔康 13.76 0.06
3 四川红原 13.00 0.11
2.2.2　色谱条件　　Chrompsuper C18 色谱柱（4.6mm
×250mm，5μm）；流动相甲醇 -0.2% 磷酸溶液（60：
40）；流速 0.6mL·min-1 ；检测波长 349nm ；柱温
30℃；进样量 10μL；理论塔板数按木犀草素峰算应
不低于 4000。
2.2.3　对照品溶液的制备　　用电子天平重复两次
精密称取木犀草素对照品 2.1mg，置 50mL 容量瓶中
加甲醇至刻度，摇匀，即得每 1mL 含木犀草素对照
品 42μg 的对照品溶液。
2.2.4　供试品溶液的制备　　取药材粉末，精密称取
约 2g，置具塞锥形瓶中，精密加入纯甲醇 20mL，称
定重量，加热回流 1h，放冷，再称定重量，用甲醇
补足减失的重量，摇匀并滤过，取续滤液作为供试品
溶液，用 0.45μm有机微孔滤膜过滤后备用。
2.2.5　线性关系考察　　分别精密吸取对照品溶液
2.0，5.0，8.0，11.0，14.0，17.0，20.0μL，按上述色
谱条件依次进样，记录色谱图，测定峰面积。以进样
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量（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标绘制标准
曲线，得回归方程为Y=183250X+48493（R2=0.9995），
木犀草素在 0.084μg ～ 0.84μg 范围内呈良好的线性
关系（见图 2）。
图 2 木犀草素对照品标准曲线
Fig.2 The standard curve of luteolin
2.2.6　精密度试验　　分别精密吸取木犀草素对照
品溶液 12μL, 按上述色谱条件连续进样 6次，记录
木犀草素的峰面积，RSD 为 1.17%，表明仪器精密度
良好。
2.2.7　重现性试验　　取同一批药材的 6份样品，按
供试品溶液制备方法制备 6份供试品溶液，分别精密
吸取供试品 25μL，注入液相色谱仪，记录木犀草的
峰面积，计算木犀草素含量，RSD 为 1.46%，表明实
验方法的重复性良好。
2.2.8　稳定性试验　　取同一份供试品溶液，分别于
0，2，4，6，8，24h 注入液相色谱仪，测定木犀草
素峰面积，RSD为 1.07%，表明供试品溶液在 24h 内
稳定。
2.2.9　加样回收率试验　　采用加样回收法，取已知
含量的同一批样品 6份，每份约 1.0g，精密称定，分
别加入木犀草素对照品 1000μg，按供试品溶液制备
方法制备 6份供试品溶液，依上述色谱条件测定木犀
草素的含量，并计算加样回收率。结果平均加样回收
率为 97.82%，RSD为 1.01%（见表 2）
表 2 加样回收率试验结果（n=6）
Tab.2 Determinnation results of recovery (n=6)
序号 样品量（g）
加入量
（μg）
测出总量
（μg）
回收率
（％）
平均回收
率（％） RSD（％）
1 1.0663 1000 1161.0740 98.51 97.82 1.01
2 1.1245 1000 1180.2737 99.47
3 1.0876 1000 1147.3116 96.79
4 1.0045 1000 1137.5155 97.18
5 1.1870 1000 1170.6661 97.48
6 1.0549 1000 1149.1275 97.51
2.2.10 　样品木犀草素含量测定　　按供试品制备方
法制备供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液与不同
批次供试品溶液各25μL，注入液相色谱仪（见图3），
按干燥品计算出每批样品中木犀草素含量（见表 3）。
表 3 含量测定结果 (n=3)
Tab.3 Determination results of luteolin
序号 产地 木犀草素（%） RSD（%）
1 四川小金 0.0136 0.99
2 四川马尔康 0.0105 1.01
3 四川红原 0.0168 1.19
a. 对照品溶液 b. 供试品溶液 1. 木犀草素
图 3 木犀草素高效液相色谱图
Fig.3 The chromatograms of luteolin
3　小结与讨论
3.1　薄层色谱鉴别表明，红花绿绒蒿中黄酮类化合
物槲皮素、山奈酚与生物碱类的原阿片碱等均难以检
出。而以环己烷 -乙酸乙酯 -甲酸（8：5：0.5）为
展开剂，可检出木犀草素并得到良好的色谱对照图
谱，该法可作为红花绿绒蒿药材质量的定性评价方法
之一。
3.2　在建立木犀草素的 HPLC 含量分析方法的试验
中，将木犀草素对照品配制成一定浓度的溶液，用
紫外分光光度计在 210nm~400nm 波长下进行图谱扫
描，结果木犀草素的最大吸收波长为 349nm，故本
方法确定检测波长为 349nm ；经对木犀草素含量测
定相关文献的查阅，选用流动相为甲醇 -0.2% 磷酸
系统，重点对甲醇 -0.2% 磷酸的配比进行考察，分
别用甲醇 -0.2% 磷酸配比为 45 ：55、50 ：50、55 ：
45、60 ：40 的溶液考察其色谱分析效果，结果表明
甲醇 -0.2% 磷酸溶液在 60 ：40 的配比下，分离周期
较短、木犀草素的分离效果与峰形均较好，因此选定
甲醇 -0.2% 磷酸溶液（60 ：40）作为含量测定试验
的流动相。
3.3　木犀草素具有抗炎、抗病毒和抗菌的药理活性 [5]，
与红花绿绒蒿清热解毒、镇咳祛痰的功效基本一致，
可选择作为评价红花绿绒蒿药材质量的指标成分对其
进行质量控制。
3.4　本研究建立的 HPLC 含量分析方法表明，不同
产地红花绿绒蒿中木犀草素的含量波动范围不大，含
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量按干燥品计算不低于 0.01%。该法稳定、重复性良
好，可作为红花绿绒蒿药材质量控制的方法。
参考文献
[1]　帝玛尔·丹增彭措 . 晶珠本草 [M]. 西宁：青海人民出版社，1982 ：114.
[2]　吴海峰，宋志军，朱华结，等 . 藏药红花绿绒蒿的化学成分 [J]. 天然产
物研究与开发，2011，23（2）：202-207.
[3]　Yang Y C. Tibetan Medicines [M]. Xining ：Qinghai People’s Publishing
House，1991 ：465-468.
[4]　刘松渝，王宪楷 . 藏药红花绿绒蒿的化学成分研究 [J]. 中药通报，
1986，11（6）：40-42.
[5]　刘玉珊，高兰阳，王辉，等 . 红花绿绒蒿的研究现状 [J]. 现代园艺，
2012，21（6）：14.
[6]　张国林，李伯刚，周正质 . 红花绿绒蒿的非生物碱成分 [J]. 天然产物研
究与开发，1997，6（9）：4-6.
重庆金佛山对叶百部生物学特性观察
陈玉菡，刘　旭 *， 罗　川，杨　毅，刘正宇
（重庆市药物种植研究所， 重庆南川 408435）
摘　要：对叶百部为我国中医临床常用中药，主要靠野生资源供应，现野生资源越来越少。本文通过
对金佛山对叶百部的植物形态、物候期、块根、茎、叶、花、果的生长发育特性的观察，以期为实现人工
引种栽培对叶百部提供参考。
关键词：对叶百部 ； 生物学特性 ； 物候期
中图分类号：S567 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2014)05-29-04
Observation on the Biological Characteristics of Stemona tuberose Lour.in Chongqing
Jinfo Mountain
CHEN Yu-han,LIU Xu*, LUO Chuan, YANG Yi,LIU Zhen-yu
(Institute of Chongqing Medicial Plant Cultivation , Nanchuan 408435,China)
Abstract: Stemona tuberose Lour. is a traditional Chinese medicine commonly used to clinical medicine,
which mainly depend on wild resources , but the wild resource is less and less. This paper observed the plant
morphology, phenology, stemona root, stem, leaf, fl ower, fruit growth and development characteristics of Stemona
tuberose Lour in Jinfo Mountain in order to provide reference for realizing artificial cultivation of Stemona
tuberose Lour..
Key words: Stemona tuberosa Lour.; biological characteristics; phenological period
收稿日期：2014-3-24
基金项目：重庆市卫生局中医药科技项目（编号：2012-2-149）。
作者简介：陈玉菡 (1981—)，女，本科，助理研究员，主要从事植物资源研
究。Tel:15978962670，E-mail: chenyuhan1002@126.com
* 通讯作者：刘旭（1981—），男，本科，助理研究员，主要从事从事野生
植物驯化及栽培工作。E-mail: liux9999@126.com