全 文 ：第 32 卷 第 3 期 青 海 医 学 院 学 报 Vol． 32 No． 3
2011 年 JOURNAL OF QINGHAI MEDICAL COLLEGE 2011
种植和野生甘西鼠尾草中丹参酮Ⅰ
测定方法的建立和含量比较
*
翁裕馨 刘占厚 陈湘宏
(青海大学医学院)
摘 要 目的 建立种植和野生甘西鼠尾草中丹参酮Ⅰ的测定方法并行含量比较。方法 借
助高效液相法，通过摸索试验条件建立相关试验方法。结果 丹参酮Ⅰ进样量在(0． 05 ～ 3． 2 )
μg /mL范围内与峰面积呈良好的线性关系。回归方程为 y = 18748． 96x + 116． 71，r = 0． 9963。回收
率为97． 75%，种植甘西鼠尾草丹参酮Ⅰ含量 1 年生为 0． 090%，2 年生为0． 156% ，3 年生为
0． 192%;野生品种为 0． 161%。结论 所建方法分离度高，重现性好，结果准确可靠，适于甘西鼠
尾草中丹参酮Ⅰ的含量测定。种植甘西鼠尾草中丹参酮Ⅰ含量以三年生为高。
关键词 高效液相色谱 甘西鼠尾草 丹参酮Ⅰ 含量测定
中图分类号 R972． 2 文献标识码 A
ESTABLISHMENT OF THE METHOD FOR DETERMINATION
AND COMPARISON CONTENTS OF TANSHINONE Ⅰ
IN PLANTING AND WILD SALVIA PRZEWALSKII
Weng Yuxin，Liu Zhanhou，Chen Xianghong
(Medical College of Qinghai University)
Abstract Objective To establish the determination method of Tanshinone I and to compare the content in
Salvia przewalskii by HPLC． Methods With the methods of HPLC to set up related experimental methods by search-
ing for experimental factors． Results HPLC method exhibited a linear relation of the peak area to the concentration
within 0． 05 ～ 3． 2 μg /mL of Tanshinone I． The regression equation was y = 18748． 96x + 116． 71(r = 0． 9963)and
the average recovery was 97． 75%，resoectively． The content of Tanshinone I was 0． 090% in one year old planting
Salvia przewalskii，0． 156% in two years old planting Salvia przewalskii and 0． 192% in three years old planting
Salvia przewalskii． The content of wild varieties was 0． 161% ． Conclusion The HPLC method is accurate，with a
high reproducibility and result is believable． The content of Tanshinone I was highest in three years old planting
Salvia przewalskii．
Key words HPLC Salvia przewalskii Tanshinone I Content determination
甘西鼠尾草(Salvia Przewalskii Maxim．)又名甘
肃丹参。甘西鼠尾草中的丹参酮Ⅰ是丹参酮类的代
表成分之一，具有抗心肌缺血、抗菌消炎、抗过敏、抗
炎、抗肿瘤等作用［1］。《中国药典》(2010 版)对丹
691
* 基金项目:青海大学医学院中青年科技基金项目(2005 － ky － 11)
翁裕馨(1978 ～) ，女，汉族，河南籍，讲师，硕士
DOI:10.13452/j.cnki.jqmc.2011.03.005
参中丹参酮Ⅰ含量未做明确规定［2］。
本文借助高效液相色谱法，通过摸索试验条件
建立相关试验方法。并用此法对不同生长年限的种
植甘西鼠尾草丹参酮Ⅰ含量进行了比较，为全面评
价和制定青海省种植甘西鼠尾草的质量标准提供数
据。
1 样品、仪器与试剂
1． 1 样品
贵德多年生野生甘西鼠尾草、贵德一、二、三年
生种植甘西鼠尾草。样品经青海大学医学院魏全嘉
教授鉴定。
1． 2 仪器
Agilent 1200 高效液相色谱仪(美国 Agilent 公
司) ，GM －0． 33Ⅱ隔膜真空泵(九鼎高科技过滤设
备有限公司) ，ChemStation色谱工作站、KQ － 400DB
型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司) ，
BS224S电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司) ，
AKRY － UP －1808 艾柯超纯水机(台湾艾柯成都康
宁实验专用纯水设备厂) ，W型和 F型微孔滤膜(上
海兴亚净化材料厂)。
1． 3 试剂
配制流动相用甲醇(2007110108 山东禹王实业
有限公司化学分公司)为色谱级纯，提取用甲醇
(090716 天津市富宇精细化工有限公司)为分析纯，
水为自制二次蒸馏水。
丹参酮Ⅰ(TanshinoneⅠ，购于中国药品生物制
品检定所，批号:0867 － 200205)。
2 方法
2． 1 色谱条件选择
Agilent Zorbax SB － C18 色谱柱(250mm ×
4． 6mm，5μm) ，甲醇 ∶ 水 = 80 ∶ 20，检测波长 270
nm，流速 1． 0 mL /min，进样量 20 μL(定量环控制) ，
室温。
2． 2 对照品溶液的制备
称取丹参酮Ⅰ对照品适量，加适量甲醇溶解，制
成每 1 mL含 0． 1 mg 的丹参酮Ⅰ对照品储备溶液;
精密吸取 4 mL置 25 mL棕色容量瓶中，加甲醇溶解
并稀释至刻度，摇匀作为丹参酮Ⅰ对照品溶液
(0． 016 mg /mL)。
2． 3 供试品溶液的制备
取干燥粉碎过三号筛的甘西鼠尾草粉末 0． 5 g，
精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 50
mL，塞紧，称定重量，超声提取 1 h，放冷后，称定重
量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，
经 F型微孔滤膜(0． 45μm)滤过。滤过液作丹参酮
Ⅰ供试品溶液。
2． 4 线性范围考察
精密吸取丹参酮Ⅰ对照品储备溶液 0． 25、0． 5、
1． 0、2． 0、4． 0、8． 0 mL于 10 mL棕色量瓶中，加甲醇
至刻度，摇匀，依次吸取丹参酮Ⅰ对照品系列溶液
20 μL 进样，按 2． 1 项下所示方法进行色谱条件测
定。以丹参酮Ⅰ的峰面积为纵坐标，以丹参酮Ⅰ的
浓度为横坐标，进行回归分析。得回归方程:y =
18748． 96x + 116． 71，r = 0． 9963。
结果表明丹参酮Ⅰ进样量在 0． 05 ～ 3． 2 μg 范
围内与峰面积呈良好的线性关系。
2． 5 精密度试验
精密吸取丹参酮Ⅰ对照品溶液进行测定，按2． 1
项下所示色谱条件连续进样 6 次，每次 20 μL，测定
峰面积，计算峰面积 RSD值。
丹参酮Ⅰ峰面积的 RSD为 1． 95%，表明仪器的
精密度良好。
2． 6 稳定性试验
取两年生种植甘西鼠尾草按 2． 3 项下所示供试
品溶液配制方法配制成丹参酮Ⅰ供试品溶液，常温
下取供试品溶液分别在 0、2、4、6、8、10 h 进样，按
2． 1项下所示色谱条件进行测定，计算峰面积 RSD
值为 2． 05%，说明样品至少在 10 h内稳定。
2． 7 重复性试验
取两年生种植甘西鼠尾草按 2． 3 项下所示供试
品溶液配制方法平行配制 5 份丹参酮Ⅰ供试品溶
液，按 2． 1 项下所示色谱条件进行测定，测得峰面积
值。
RSD =1． 35%，说明重复性良好。
2． 8 回收率试验
精密称取已知含量供试品 6 份(丹参酮Ⅰ含量
为 0． 156%) ，每份加入丹参酮Ⅰ对照品储备液 4
mL，按含量测定法制备，按 2． 1 项下所示色谱条件
进行含量测定，计算回收率。见表 1。
表 1 显示，结果平均回收率为 97． 75%，RSD 为
1． 99%(n = 6)。从回收率的结果看，方法的准确度
较好。
2． 9 供试品含量测定
791
表 1 丹参酮Ⅰ加样回收率试验结果
样品中丹参酮Ⅰ 丹参酮Ⅰ 测得量 回收率 平均回 RSD
含量 (mg) 加入量(mg) (mg) (%) 收率(%) (%)
0． 3721 0． 4000 0． 7749 100． 70
0． 3805 0． 4000 0． 7691 97． 15
0． 3802 0． 4000 0． 7710 97． 70 97． 75 1． 99
0． 3786 0． 4000 0． 7698 97． 80
0． 3795 0． 4000 0． 7583 94． 70
0． 3789 0． 4000 0． 7727 98． 45
精密称取干燥粉碎过三号筛的种植甘西鼠尾草
粉末 0． 5 g，按上述供试品溶液配制方法制成供试品
溶液，分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各 20
μL，在 2． 1 项下所示色谱条件下进样，用外标一点
法计算样品中丹参酮Ⅰ的含量。
色谱图见图 1 ～ 2。
图 1 丹参酮Ⅰ对照品色谱图
图 2 样品色谱图
3 实验结果
甘西鼠尾草丹参酮Ⅰ含量测定结果见表 2。
4 讨论
4． 1 提取条件的选择
本实验分别考察了甲醇、甲醇:二氯甲烷(4 ∶
1)、甲醇:二氯甲烷(1∶ 1)和乙醇 4 种提取溶剂，不
同比例的甲醇和二氯甲烷二元溶剂提取效果差异不
大，乙醇中水溶性成分含量相对较高，为避免水溶性
成分的干扰，本试验采用甲醇作为提取溶剂。
4． 2 提取方法的选择
本实验考察了加热回流和超声提取两种方式，
试验中超声提取具有快速简便、提取温度较加热回
流所用温度低、对热敏性物质不易破坏的特点，故本
891
实验采用超声提取方法。
表 2 甘西鼠尾草丹参酮Ⅰ含量测定结果
样品名称 丹参酮Ⅰ含量(%，n = 3)
贵德多年生野生品种 0． 161 ± 0． 010
贵德一年生种植品种 0． 090 ± 0． 009
贵德二年生种植品种 0． 156 ± 0． 011
贵德三年生种植品种 0． 192 ± 0． 025
4． 3 测定方法的选择
本实验借助高效液相色谱测定不同生长年限甘
西鼠尾草中丹参酮Ⅰ的含量，从线性、回收率、重复
性、精密度、稳定性等实验结果可以看出，本方法分
离度高，重现性好，结果准确可靠，适于甘西鼠尾草
中丹参酮Ⅰ的含量测定。
4． 4 色谱条件的选择
实验中分别用了甲醇∶ 水(70∶ 30)、甲醇∶ 水
(75∶ 25)、甲醇∶ 水(80∶ 20)、甲醇∶ 水(85∶ 15)4
种流动相。甲醇∶ 水为 70∶ 30、75∶ 25 时出峰时间
晚，峰形欠佳，甲醇∶ 水为 85∶ 15 时分离度不佳，甲
醇∶ 水为 80∶ 20 时在 9 min 左右出峰，峰形对称，
分离度达到要求。符合系统试验性要求。上述结果
显示，本实验所定条件适合作为甘西鼠尾草中丹参
酮Ⅰ的含量测定条件。
参考文献
［1］梁勇，羊裔明，袁淑兰．丹参酮药理作用及临床应用
研究进展［J］．中草药，2000，31(4) :304 － 306
［2］中华人民共和国卫生部药典委员会编．中华人民共
和国药典(2010 版)一部［S］． 北京;化学工业出版社，2010:
52 － 53
收稿
櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡櫡
2011 － 05 － 23
平衡针灸结合藏医祖传
肩痹方治疗肩关节周围炎
拉 本
(青海省尖扎县人民医院)
中图分类号 R684． 3 文献标识码 B
笔者运用平衡针灸肩痛穴为主配合藏医祖传肩
痹方治疗肩关节周围炎 28 例，效果较为满意，现报
道如下:
28 例均为门诊病例，年龄最小 40 岁，最大 63
岁，病程最短 3 个月，最长 3 年，女性多于男性，患者
痊愈(无痛感，肩关节活动自如)21 例，好转(痛感减
轻，受限肩关节活动范围扩大)6 例，无效(无任何改
观)1 例，有效率 96%。
治疗方法:1． 平衡针灸取穴:肩痛穴配颈痛穴，
交叉取穴。肩痛穴定位:腓骨小头与外踝连线的上
1 /3 处;颈痛穴定位:位于手背部，握拳第 4 与第 5
掌骨之间，指掌关节前凹陷处。患者取坐位，进针得
气后，嘱患者患肢不停地做外旋、外展、后伸等动作，
每次留针 10 分钟，6 次为 1 个疗程。2． 中药采用藏
医祖传肩痹方:药物基本组成为生黄芪、杜仲、山芋
肉、巴戟天、金毛狗脊、骨碎补、川断、羌活、威灵仙、
葛根、桑枝、连翘、乳香、没药、鸡血藤等加减，水煎
服，每日 3 次，饭后服，6 天为一疗程。
藏医认为，肩关节周围炎属于漏肩风，又名五十
肩，多为风寒湿侵袭，致肩部气血运行不畅，以不通
则痛、不荣则痛为主要病机，而致肩部疼痛及功能障
碍。笔者用藏医祖传肩痹方，以补肾固元气为主，配
以活血化瘀祛风湿，临床疗效确切。
平衡针灸取穴简单，配合颈痛穴，是因上肢的疾
患很大程度都与颈部有关，针药合用，功效相辅相
成，相得益彰，疗效显著。
收稿 2011 － 01 － 16
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