全 文 ：河北林业科技第 5期 2011年 10月
香荚蒾组织培养快速繁殖的研究
杜姝睿，顾婷婷，潘 林，杨文新，姜长阳
（辽宁师范大学生命科学学院，辽宁 大连 116081）
摘要：为满足栽培对种苗的需要，以香荚蒾的嫩茎为材料，进行了愈伤组织诱导、分化、不定芽生根，试管苗的生根
继代、移栽和定植的研究。研究结果证明：MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 2.0mg/L是茎段愈伤组织诱导培养的理想培养基；
1/2MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.1mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基；将不定芽和试管苗的茎段下部切口在 5mg/L的
NAA溶液中处理 5min后，接种到 1/2MS+IAA 0.2mg/L培养基上进行生根培养的方法，是不定芽生根培养和试管苗生根
继代培养的理想方法。定植到花坛上的试管苗长势旺盛，观赏效果好。
关键词：香荚蒾；组织培养；无性系
中图分类号：S723.137 文献标识码：A 文章编号：1002-3356（2011）05-0005-03
收稿日期：2011-09-05
基金项目：辽宁省高等教育教学改革资助项目
（20090304）；辽宁师范大学教学改革资助
项目（LSJG：20090108）
香荚蒾（Viburunm farreri）又称探春、翘兰，
属禾忍冬科、荚蒾属、落叶灌木，在我国的甘肃有野
生[1]，我国一般作为园林栽培或庭院观赏栽培[2]。香
荚蒾花白色浓香，花期较早，是重要的早春花木。
丛植于草坪边、林缘下或建筑物前都很适宜，又
有较耐阴特性，可栽种于建筑物北侧，属于典型
耐阴观赏树种。由于香荚蒾的特有观赏性和耐阴
性，受到辽宁南部地区园林工作者的欢迎。但是，
由于香荚蒾不易收到种子 [3]，使其不能用种子进
行繁殖。采用压条和扦插的方法进行繁殖，其成
苗率又很低，难以满足栽培对种苗的需求。为此，
我们对香荚蒾进行了组织培养快速繁殖的研究，
以期满足人们栽培对种苗的需求。虽然目前已有
荚蒾组织培养研究的报道[4-5]，但迄今未见香荚蒾
组织培养及快速繁殖研究的报告。
1 材料与方法
1.1 材料及灭菌
于 7月上旬，把生长非常旺盛的香荚蒾嫩茎
采回实验室，剪成长约 3cm嫩茎段后，放到磨口
广口瓶中，用自来水洗涤 10min 左右，再用
0.005%安利洗涤液洗涤 5~10min。然后移到超净
工作台上，用 70%~75%的乙醇灭菌 15s左右，再
用 0.05%的 HgCl2溶液灭菌 15min，最后用无菌水
洗涤 5次[6]，即可获得无菌嫩茎。
1.2 培养条件
以 MS、1/2MS为基本培养基，附加不同浓度
6-BA、2，4-D、NAA、IAA。固体培养基胨力强度为
200g/cm2。以 MS 为基本培养基加蔗糖 30g/L，
1/2MS 为基本培养基加蔗糖 15g/L。光照强度
3000Lx左右；光照时间 12h/d；培养基 pH 为 5.8~
6.0；培养温度 26℃[6]。
1.3 方法
1.3.1 愈伤组织的培养 在超净工作台上，将无
菌嫩茎切成长 0.2~0.3cm的茎段后，接种到以 MS
为基本培养基，附加不同浓度 6-BA、2，4-D、NAA
的培养基上，进行嫩茎愈伤组织的诱导培养。每
种培养基接种 100个茎段，重复 2次。
1.3.2 愈伤组织分化培养 将以上诱导培养的
愈伤组织分割成 0.3cm左右的块状后，接种到以
1/2MS 为基本培养基，附加不同浓度的 6-BA、
NAA的分化培养基上，进行愈伤组织的分化培养
试验。愈伤组织的分化培养试验每种培养基接种
100块材料，重复 2次。
1.3.3 不定芽生根培养 将上述分化培养的不
定芽采用以下 3种方法进行处理：（1）向培养不
定芽的培养瓶中倒入 5ml浓度为 10mg/L的 NAA
溶液处理 24h后，将不定芽从基部切下，接种到
1/2MS+IAA 0.2mg/L培养基上进行生根培养。（2）
将不定芽切下后把下部切口在 5mg/L的 NAA溶液
中处理 5min后，接种到 1/2MS+IAA0.2mg/L培养
5- -
DOI:10.16449/j.cnki.issn1002-3356.2011.05.038
河北林业科技第 5期 2011年 10月
表 2不同浓度的 6-BA、NAA对愈伤组织分化培养的影响
6-BA
/mg·L-1
0
0.2
0.2
0.2
0.2
0.4
0.4
0.4
0.4
0.8
0.8
0.8
0.8
1.6
1.6
1.6
1.6
NAA
/mg·L-1
0
0.1
0.5
1.0
1.5
0.1
0.5
1.0
1.5
0.1
0.5
1.0
1.5
0.1
0.5
1.0
1.5
愈伤组织
分化率%
0
22
5
0
0
96
39
0
0
63
9
0
0
0
0
0
0
平均分化不定
芽数/块
0
2.4
1.6
0
0
5.1
3.1
0
0
3.4
2.6
0
0
0
0
0
0
不定芽
长势
-
++
+
-
-
++
+
-
-
++
-
+
+
-
-
-
-
注： ++为长势好；+为长势一般；-为不生长。
基上进行生根培养；（3）将不定芽切下后，不经任
何处理，直接接种到 1/2MS+NAA 0.1mg/L+IAA
0.5mg/L的基本培养上进行生根培养。不同处理
方法对不定芽生根培养试验中每种处理接种 200
个不定芽，重复 2次。
1.3.4 试管苗的移栽与定植 把培养生根试管
苗移到温室中，打开瓶塞，放在直射光下炼苗 2
d后，将试管苗移栽到上半层为干净河沙、下半层
为肥沃园土的花盆中，并在前 10d保持没有直射
光、湿度 90%左右的环境条件。移栽后 30d观察
统计。移栽试验进行 2次，每次移栽 400株。
把在温室中移栽成活的试管苗于 5 月中旬
分 2次定植到大连城区的花坛上和绿化带上。两
次定植的株数分别为 300株和 350株。
2 结果与分析
2.1 不同激素配比对愈伤组织诱导培养的影响
培养 45d统计，结果见表 1。由表 1可见，在
不加任何激素的培养基上，不能诱导生长出愈伤
组织；在不同浓度的 6-BA与 NAA配合使用时，
愈伤组织的诱导效果也较差。在不同浓度的 6-
BA与 2，4-D配合使用时，愈伤组织的诱导效果
较好。其中在 6-BA的浓度为 0.5mg/L与 2，4-D
的浓度为 2.0mg/L配合使用时，不仅愈伤组织的
诱导率达到了 87%，而且愈伤组织长势好。观察
还表明，接种 10d时，在这种培养基上的材料愈
伤组织开始生长。培养到 45d时，诱导形成直径
0.7~1.4cm的半球状愈伤组织，所形成的愈伤组
织外观上呈淡绿色，表面为大小不等的颗粒状。2
次重复试验的结果基本一致。以上结果说明：MS+
6-BA 0.5mg/L+2，4-D 2.0mg/L 培养基是香荚蒾
嫩茎段愈伤组织诱导培养的理想培养基。
2.2 不同浓度的 6-BA、NAA对愈伤组织分化培
养的影响
观察表明：接种后 12d 左右，有的培养基上
的愈伤组织开始分化。50d时观察统计，结果见表
2。由 2表可见，在不加任何激素、6-BA的浓度超
过 1.6mg/L、NAA的浓度为 1.0、1.5mg/L的培养基
上，愈伤组织不分化；在 6-BA的浓度分别为 0.2、
0.4、0.8mg/L，NAA 的浓度为 0.1、0.5mg/L 的培养
基上，愈伤组织均可分化；其中在 6-BA的浓度为
0.4mg/L，NAA 的浓度为 0.1mg/L 的培养基上，愈
伤组织分化效果最好，不仅愈伤组织的分化率为
96%，平均每块愈伤组织分化 5.1个不定芽，而且
分化的不定芽外观上长势好。每个不定芽生长着
3~6个伸展的叶片，高为 1.2cm左右，呈嫩绿色。2
次重复试验的结果基本一致。上述说明：1/2MS+
6-BA 0.4mg/L+NAA 0.1mg/L 培养基是香荚蒾愈
伤组织分化培养的理想培养基。
表 1 不同激素水平对愈伤组织诱导培养的影响
6-BA/mg·L-1
0
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
1.0
2,4-D/mg·L-1
0
1.0
1.5
2.0
0
0
0
1.0
1.5
2.0
0
0
0
1.0
1.5
2.0
0
0
0
NAA/mg·L-1
0
0
0
0
1.0
1.5
2.0
0
0
0
1.0
1.5
2.0
0
0
0
1.0
1.5
2.0
愈伤组织诱导率/%
0
32
43
56
0
0
19
57
72
87
0
11
25
33
35
41
6
0
0
长势
-
+
+
+
-
-
+
+
++
++
-
+
+
+
+
+
+
-
-
注： ++为长势好；+为长势一般；-为不生长。
6- -
河北林业科技第 5期 2011年 10月
2.3 不同处理方法对不定芽生根培养的影响
接种后 28d观察统计，结果见表 3。由表 3可
见，虽然采用 3种处理方法培养的不定芽均可生
根，但方法二的生根效果远远地好于其它两种处
理方法。采用将不定芽切下后在 5mg/L的 NAA
溶液中处理 5min后，接种到 1/2MS+IAA 0.2mg/L
培养基上进行生根培养的方法，不仅生根率为
93.5%、平均每株试管苗生根 5.4条，而且试管苗
长势好。观察也表明，采用方法二进行生根培养，
培养 5d可见开始生根，之后，随着根的生长、根
数的增加，生根率也在不断提高。培养到 28d时，
生根试管苗就会生长为株高 3.9~4.6cm、茎粗
0.2cm左右、具有 4~8个叶片的旺盛试管苗。2次
重复试验的结果基本一致。把由不定芽培养的试
管苗剪成长 1.0~2.0cm、至少具有 2个叶片的茎
段后，采用方法二进行生根继代培养。2次重复试
验，每次继代培养 5代的结果证明：经过 26d 的
培养，就又会培养出一代与不定芽生根培养相同
的试管苗。平均每代的繁殖系数为 2.8。以上结果
证明：将不定芽和试管苗的茎段下部切口在 5mg/L
的 NAA溶液中处理 5min后，接种到 1/2MS+IAA
0.2mg/L培养基上进行生根培养的方法，是香荚
蒾不定芽生根培养和试管苗生根继代培养的理
想方法。
2.4 试管苗的移栽与定植
移栽 30d 统计，2 次移栽的成活率分别为
89.6%、92.5%。试管苗在温室易移栽成活。
定植 30d 统计，2 次定植的成活率分别为
98.3%、98.8%。试管苗易定植成活。定植成活后的
试管苗 50d后开始快速生长，当年生长非常旺
盛，落叶比大田苗晚 8d左右，第 3年开花结果，
在花坛上定植的试管苗观赏效果好。
3 讨论
在本研究的生根继代培养快速繁殖中，26d
为 1个培养周期，其繁殖系数为 2.8。按照这个速
度，1株试管苗每年能繁殖出 2.814（约为 180万）
个后代，除掉各种不利因素的影响，1a完全可能
繁殖 90万株生长旺盛的试管苗。这种繁殖速度
能满足观赏栽培的需要。
在生根继代培养中，26d为 1个培养周期，比
不定芽生根培养周期缩短 2d。产生这种现象是由
于以下原因引起的：一是试管苗的茎段长得比不
定芽粗壮，适应性强；二是试管苗的茎段是在生
根培养基上培养生长的，材料本身就对这种培养
基具有一定的适应性；三是粗壮茎段自身含生长
素多，也有利于调节自身的生长。
定植于花坛上的试管苗出现了秋天落叶晚
的现象。产生这种现象的原因如下：一是本研究
所采用的实验材料本身是生长非常旺盛的植株，
材料本身具有生长非常旺盛的遗传性；二是在试
管苗的培养过程中使用了较高浓度的生长素。定
植后的试管苗体内仍然含有较高浓度的生长素，
其后效作用也促进生长。
参 考 文 献
［1］中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴（第四册）
［M］.北京：科学出版社，1975：307.
［2］韩全忠，王正兴.大连地区植物志（中册）［M］.大连：大
连工业大学出版社，1993：699.
［3］陈有民.园林树木学［M］.北京：中国林业出版社，1990：
700.
［4］甄雪花，胡蕙露，夏姚生.欧洲荚蒾组织培养技术研究
［J］.安徽农学通报.2010，16（9）：57-59.
［5］邓源，曹征宇，顾韵莉.地中海荚蒾的组织培养与快速
繁殖［J］.上海农业科技.2008，（5）：95.
［6］李菊，肖莹，杨阳，等.木芙蓉再生体系建立的研究［J］.
河北林业科技.2009，（6）：7-9
表 3 不同处理方法对不定芽生根培养的影响
处理方法
方法一
方法二
方法三
接种数/株
200
200
200
生根率/%
33.5
93.5
26
平均生根条数/条
2.2
5.4
2.0
试管苗长势
+
++
+
注：++为长势好；+为长势一般；-为不生长。
7- -