全 文 ：高速逆流色谱分离中藏药甘西鼠尾草脂溶性成分
翁裕馨，陈湘宏
（青海大学 医学院，青海 西宁８１０００１）
摘　要：利用高速逆流色谱对中藏药甘西鼠尾草进行脂溶性成分的分离研究。以石油醚、醋酸乙酯、甲
醇、水，按体积比８∶６∶７∶３配制 ＨＳＣＣＣ用两相溶剂系统，结果表明此条件可用作高速逆流色谱分离
甘西鼠尾草中的脂溶性成分，以期为甘西鼠尾草成分的短时间高效分离制备提供新思路和新方法，也为
藏药现代化积累一些有意义的经验。
关键词：高速逆流色谱；甘西鼠尾草；分离；脂溶性成分
中图分类号：Ｒ２８４　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１１）０８－００２７－０２
收稿日期：２０１１－０５－２２
作者简介：翁裕馨（１９７８－），女，硕士，青海大学讲师，研究方向为中藏药的化学成分与质量分析。
　　甘西鼠尾草（Ｓａｌｖｉａ　Ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ　Ｍａｘｉｍ）为唇形科
（Ｌａｂｉａｔａｅ）鼠尾草属（Ｓａｌｖｉａ）多年生草本植物（藏文译音：吉
子恩保）［１］，又名丹参（云南）、高原丹参（青海）、甘肃丹参（甘
肃）、红秦艽（四川），主要产地为青海、四川、甘肃西部、西
藏，同时大量销往北京、上海、宁夏等地。甘西鼠尾草在西
北、西南地区常作为丹参的替代品种使用，而丹参为重要的
传统中药材，始载于《神农本草经》，列为上品，有祛瘀止痛、
活血通经、清心除烦之功效。近年来，国内学者对丹参的类
同品进行了质量评价，由于样品及方法等原因影响，结果并
不一致，但研究者对甘西鼠尾草成为丹参类药材中优良品
种和具有进一步推广应用价值达成共识。甘西鼠尾草在西
南、西北地区使用极为广泛，并在全国流通，由于丹参需求
量逐年增加，具有成为主流商品的趋势［２］。１９９５年５月１
日甘肃省卫生厅将其正式收入甘肃省地方标准，并颁布试
行。１９８７年甘肃中草药资源普查探明全省蕴藏量７　０２６ｔ，
甘肃中部及东南部均出产［２］。在２０世纪８０年代，该药材就
已收入云南省地方标准。
高速逆流色谱（Ｈｉｇｈ－Ｓｐｅｅｄ　Ｃｏｕｎｔｅｒ－ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｃｈｒｏｍａ－
ｔｏｇｒａｐｈｙ，ＨＳＣＣＣ）是一种基于液液分配的新型色谱技术，
可在短时间内实现样品的高效分离和制备。它不使用固相
载体作固定相，不仅费用低，而且克服了固相载体带来的样
品预处理要求高、吸附、损失、污染和峰形拖尾等特点。鉴
于ＨＳＣＣＣ的显著特点，此项技术已被应用于生化、医药、生
物工程、天然产物化学、有机合成、环境分析、食品、

地质及
０．１ｇ），分别于５、１０、１５、３０、３５ｍｉｎ取样，滤过，精密量取续
滤液１ｍＬ至１０ｍＬ置棕色量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，
在２８０ｎｍ处测定。另精密称取头孢地尼标准品适量，置棕
色量瓶中，用溶出介质定量稀释制成每１ｍＬ中约含１０μｇ的
溶液，同法测定，利用外标法计算每袋在不同取样时间点的
累积溶出量，并分别绘制两种颗粒在三种介质下累计溶出
百分率图。结果见表２。
表２　头孢地尼两种颗粒在不同介质下的累积溶出度
（％）
溶出介质 制剂
取样时间
５ｍｉｎ　 １０ｍｉｎ　 １５ｍｉｎ　 ３０ｍｉｎ　 ４５ｍｉｎ
盐酸溶液
普通颗粒 ４３．６６　 ５９．２８　 ６５．１９　 ７５．０８　 ８２．３４
对照颗粒 ６１．１５　 ７９．８２　 ８８．６３　 ９６．０６　 ９９．３３
纯水
普通颗粒 ２７．６５　 ３８．０２　 ４５．１８　 ５８．９２　 ６５．９
对照颗粒 ３３．８２　 ４５．９１　 ５３．３８　 ６７．１２　 ７１．６３
ｐＨ７．２磷酸
盐缓冲液
普通颗粒 ５６．３８　 ７５．３２　 ８１．７４　 ９４．２８　 ９８．７９
对照颗粒 ６２．５１　 ８１．１３　 ８８．６５　 ９７．２１　 １００
２．２．２　溶出度测定结果与评价
由表可知，在三种不同的介质下，原料药微粉化后的溶
出度情况均有所改善。纯水中，两组颗粒在３０ｍｉｎ均未达
到７５％，不符合《中国药典》中的限度标准；ｐＨ７．２的磷酸盐
缓冲液下，微粉化前后的颗粒剂溶出度差别不大，表明偏碱
性的环境比较利于溶出；而盐酸溶液不但能够满足漏槽条
件，更好地模拟体内吸收环境，还可用于评价不同粒度的头
孢地尼颗粒的溶出度差别，有一定区分能力，提示微粉化原
料药确实能改善难溶性药物的溶出情况。
３　讨论
本实验用微粉化的原料药制成的颗粒（对照颗粒），在
三种不同介质下均能提高制剂的体外溶出度。推测微粉
化的原料药由结晶型粉末转变为无定型粉末，但无定型粉
末可能存在制剂长期稳定性方面的问题，有待于进一步考
察。
在溶出度试验的整个过程中，操作细节问题也将直接
影响测定结果。溶出介质应预先脱气处理，否则气泡会影
响样品的崩解扩散和溶出；搅拌桨的位置要严格按照药典
规定校正高度；取样过滤的损失也要计算在内。
溶出介质的选择非常重要，要满足漏槽条件，但为了加
强溶出方法的区分能力，溶解度也不宜过高。同时，在考察
评价制剂内在质量和处方工艺的合理性时，更为苛刻的条
件能更好地保证药物质量和生物利用度。这些可以作为难
溶性类药物溶出介质选择的重要依据。
（责任编辑：陈涌涛）
—７２—
材料领域。
本文以中藏药材甘西鼠尾草为原料，尝试利用高速逆
流色谱分离甘西鼠尾草中的脂溶性成分，为青海省种植甘
西鼠尾草的质量研究补充资料，也为藏药现代化积累一些
有意义的经验。
１　材料、试剂及仪器
１．１　材料
甘西鼠尾草样品经青海大学医学院魏全嘉教授鉴定为
甘西鼠尾草（Ｓａｌｖｉａ　Ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ　Ｍａｘｉｍ）的根。
１．２　试剂
甲醇（０９０７１６，天津市富宇精细化工有限公司），醋酸乙
酯（０８１２２０，天津市富宇精细化工有限公司），石油醚（沸程
６０～９０℃，天津市富宇精细化工有限公司）均为分析纯，水
为自制二次蒸馏水。
１．３　仪器
半制备型高速逆流色谱仪ＴＢＥ－３００Ａ（上海同田生化技
术有限公司），ＴＢＤ－２３ｕｖ检测器，ＴＢＰ－５０Ａ泵，ＨＸ－１０５０恒温
循环器（北京博医康实验仪器有限公司），Ｎ２０００分析系统。
２　方法与步骤
２．１　样品和溶剂系统的制备
取约３００ｇ甘西鼠尾草药材，加９５％乙醇约１５００ｍＬ索
式提取。将提取液在５０℃下旋蒸浓缩至约１５０ｍＬ，加入
１５０ｍＬ石油醚萃取，收集石油醚，合并石油醚萃取液，在
５０℃下旋蒸浓缩，得粗提膏状物１．７５ｇ，保存于－１０℃下备
用。
取石油醚、醋酸乙酯、甲醇、水，按体积比８∶６∶７∶３
配制 ＨＳＣＣＣ用两相溶剂系统，充分振摇后，静置分层过夜
后备用［６］。
２．２　试验步骤
将饱和的两相系统分离，取分层的上相作为固定相，下
相作为流动相。现将固定相快速注满管柱，按８００ｒ／ｍｉｎ正
转转速启动主机，再将流动相以２ｍＬ／ｍｉｎ的流速泵入，同
时将恒温水浴温度调至３０℃，待流动相从管柱出口流出，紫
外检测基线稳定后，再将溶解有２００ｍｇ样品的下相溶剂
５ｍＬ由进样圈注入。管柱出口的流出物经２５４ｎｍ紫外检
测，并按有响应峰收集相应的组分。经２５０ｍｉｎ洗脱后，将
泵流速调至４ｍＬ／ｍｉｎ，直至洗脱过程完成。
３　实验结果
实验结果见图１。
４　小结与讨论
从色谱图可以看出此条件分离度较好，分离时间合适，
此条件可用作高速逆流色谱分离甘西鼠尾草中的脂溶性
图１　高速逆流色谱分离中藏药甘西鼠尾草脂溶性成分色谱
成分，但经 ＨＳＣＣＣ分离的各馏分还未检验其纯度。我们想
通过进一步试验研究 ＨＳＣＣＣ分离甘西鼠尾草中的脂溶性
成分的优化条件及各馏分纯度，进一步探讨甘西鼠尾草中
的水溶性成分的条件和各馏分纯度，以期为甘西鼠尾草成
分的短时间高效分离制备提供新思路和新方法。
参考文献：
［１］　中国科学院西北高原生物研究所．藏药志［Ｍ］．西宁：青海人
民出版社，１９９１：９２－９３．
［２］　赵建邦．甘肃丹参（甘西鼠尾草）的研究与应用评价［Ｊ］．中药
材，２００３，２６（７）：５２９－５３１．
（责任编辑：姜付平）
Ｈｉｇｈ－Ｓｐｅｅｄ　Ｃｏｕｎｔｅｒ－ｃｕｒｒｅｎｔ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｆ
Ｃｈｉｎｅｓｅ－ｔｉｂｅｔｅｎ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓａｌｖｉａ　ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉ　ｆａｔ－ｓｏｌｕｂｌｅ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ
Ｗｅｎｇ　ＹｕＸｉｎ，Ｃｈｅｎ　ＸｉａｎｇＨｏｎｇ
（Ｑｉｎｇｈａｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｘｉｎｉｎｇ　８１０００１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ，ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ－ｔｉｂｅｔｅｎ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓａｌｖｉａ　ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉ　ｆｏｒ　ｔｈｅ
ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉｐｉｄ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｗｉｔｈ　ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ，ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｅｔｈｙｌ　ｅｓｔｅｒ，ｍｅｔｈａｎｏｌ，ｗａｔｅｒ，ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ
ｖｏｌｕｍｅ　ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ　８∶６∶７∶３ｔｏ　ｐｒｅｐａｒｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｐｈａｓｅ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ｓｙｓｔｅｍ　ｏｆ　ＨＳＣＣＣ，ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｗｈｉｃｈ　ｃａｎ　ｂｅ
ｕｓｅｄ　ａｓ　ａ　ｈｉｇｈ－ｓｐｅｅｄ　ｃｏｕｎｔｅｒｃｕｒｒｅｎｔ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｔｏ　ｓｅｐａｒａｔｅ　Ｓａｌｖｉａ　ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉ　ｏｆ　ｆａｔ－ｓｏｌｕｂｌｅ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ，ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｅｆｆｉ－
ｃｉｅｎｔ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ａ　ｓｈｏｒｔ　ｔｉｍｅ，ｎｅｗ　ｗａｙｓ　ｏｆ　ｔｈｉｎｋｉｎｇ　ａｂｏｕｔ　ｔｈｅ　Ｓａｌｖｉａ　ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ，ａｓ　ｗｅｌ　ａｓ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ
ｏｆ　ｓｏｍｅ　ｍｅａｎｉｎｇｆｕｌ　ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ａｎｄ　ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　ｍｏｄｅｒｎｉｓｍ．
Ｋｅｙ　Ｗｏｒｄｓ：ＨＰＬＣ；Ｓａｌｖｉａ　Ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉ；Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ；Ｆａｔ－ｓｏｌｕｂｌｅ　Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ
—８２—