全 文 ：作者简介:甄雪花(1982-),女 ,山东菏泽人 ,在读研究生 ,研究方向:林木遗传育种。 ＊通讯作者　　收稿日期:2010-03-19
欧洲荚蒾组织培养技术研究
甄雪花　胡蕙露＊　夏姚生
(安徽农业大学林学院,安徽合肥　 230036)
摘　要:以欧洲荚蒾的幼茎为外植体进行组织培养研究 , 结果表明:最适宜的启动培养基为 MS+6-BA2.0 mg/L+
IBA0.1 mg/L;增殖培养基为 MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.2mg/L;生根培养基为 1/2MS+NAA0.2 mg/L。
关键词:欧洲荚蒾;组织培养;快速繁殖
中图分类号　S722.3+7　　　文献标识码　A　　　文章编号　1007-7731(2010)09-57-03
StudyonTissueCultureofViburnumopulusL.
ZhenXuehuaetal.
(Forestrycolege, AnhuiAgricuturaluniversity, Hefei230036, China)
Abstract:AnexperimentwasconductedtostudythetissueculturetechniqueusingtenderstemsofViburnumopulusLasex-
plants.ResultshowedthattheshootdiferentiationmediumwasMS+ 6-BA2.0 mg/L+IBA0.1 mg/L;theoptimum
mediumforproliferationwasMS+ 6 -BA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L;thebestmediumforrootingwas1/2MS+
NAA0.2 mg/L.
Keywords:ViburnumopulusL.;Tissueculture;Rapidpropagation
　　欧洲荚蒾(ViburnumopulusL.)为忍冬科荚蒾属落叶
灌木 ,原产欧洲地区 ,高 3 ～ 5 m,花白 ,核果近球形 、红色 ,
花期 5月 ,果期 8 ～ 9月 ,枝叶繁茂 ,生长快速 ,耐修剪 ,适
于作绿篱 ,也可栽于庭园观赏 ,主要分布于中亚和西伯利
亚 ,在新疆主要分布在阿勒泰山地区哈巴河下游的桦木林
下层 、山谷和山坡以及布尔津河两岸较深厚肥沃湿润的沟
槽内和较阴湿的生境中。欧洲荚蒾具有较强的耐阴性 ,其
叶 、花和果均具有很高的观赏价值 ,也是进行复层配置重
要的花灌木之一 ,在园林绿化中具有一定的应用潜力 ,是
一种值得推广的优良树种 [ 1] 。采用播种或扦插繁殖 ,繁殖
系数低 ,而用组织培养的方法可在短期内得到大量试管
苗 ,但有关欧洲荚蒾的组织培养至今未见报道 ,本研究建
立了欧洲荚蒾组织培养的快速繁殖技术体系 ,拟为其规模
化育苗提供有效途径 ,以满足生产和市场需要 [ 2] 。
1　材料与方法
1.1　材料　试验材料采自盆栽优良植株 ,以健壮 、无病虫
害的欧洲荚蒾植株的顶芽 、侧枝的顶端组织 、带腋芽的茎
段作外植体。
1.2　方法
1.2.1　外植体的选择及处理　从健壮 、无病虫害的欧洲
荚蒾母株上部切取顶芽 、侧枝的顶端组织 、带腋芽的茎段 ,
除去老叶 ,放入加有少许洗衣粉溶液中反复振荡 10 ～ 15
min,清水冲洗 1 ～ 2 h;在超净台上用 75 %酒精浸泡灭菌
15 ～ 25 s,同时轻轻摇动容器 ,然后用无菌水冲洗 4 ～ 5次 ,
将酒精洗净 ,再用 0.1 %的升汞进行消毒处理 ,时间设置
为 1min、3min、5min、7min、9 min、11min6个水平 ,用无菌
水冲洗 4 ～ 5次。置于灭菌滤纸上吸干水分 ,用解剖刀切
取 2 ～ 3 cm带芽茎段备用 [ 3] 。
1.2.2　培养基　(1)启动培养基。在 MS培养基上分别
添加不同水平的 6 -BA(1.0 mg/L、2 .0 mg/L)、IBA(0.1
mg/L、0.2 mg/L)计 4个处理。
(2)增殖培养基。以 MS为基本培养基 ,分别添加 6-
BA(0.3 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L)、NAA(0.1 mg/L、
0.2mg/L、0.3 mg/L)计 9个处理 。
(3)生根培养基。在 1/2MS培养基和 MS培养基上分
别添加 NAA(0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.2 mg/L)计 6个
处理 [ 4] 。
以上各种培养基均加蔗糖 2%,琼脂 0.8%, pH5.8。
1.2.3　培养条件　光照强度 2000 ～ 2500 lx、光照时间 16
h/d、温度(25±2)℃。
2　结果与分析
2.1　无菌系的建立　将灭菌的外植体接种到诱导培养基
中 , 2 ～ 3周后发现芽开始萌动生长 ,经 5 ～ 6周的培养 ,可
见到外植体侧部陆续有小的侧芽产生 。表 1显示 , 4种不
同浓度培养基中的芽萌发率 ,其中 A3培养基的出芽率高
于其他培养基 ,且新芽生长健壮 、叶色绿 ,是较适宜的启动
培养基(如图 1、图 2)。
57安徽农学通报 , AnhuiAgri.Sci.Bul.2010, 16(9)
DOI :10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2010.09.061
图 1　A3培养基中芽萌发
图 2　A3培养基显示新芽生长健壮 、叶色绿
表 1　激素对芽萌发与生长的影响
代号 6-BA(mg/L)
IBA
(mg/L)
样本数
(个)
芽萌数
(个)
出芽率
(%)
A1 1.0 0.1 20 13 65
A2 1.0 0.2 20 10 50
A3 2.0 0.1 20 19 95
A4 2.0 0.2 20 18 90
2.2　芽的增殖　初代培养 25 d后 ,把获得的芽转接到增
殖培养基中培养 30 d,观察不同培养基中芽的增殖情况。
由表 2可知 ,在 NAA浓度相同的情况下 , 6 -BA浓度为
0.5 mg/L时培养 30 d就可达到 2 ～ 3倍的增殖效果 ,当 6
-BA浓度超过 0.5 mg/L,组培苗产生变异的可能性增
加 ,原来的性状发生改变 ,叶色发黄 , B9培养基中出现很
多畸形芽 ,且长势差 ,严重影响组培苗的质量 。B4、B5和
B6培养基中的增殖芽生长健壮 ,因此培养基 B6即 MS+6
-BA0.5mg/L+NAA0.2 mg/L是欧洲荚蒾丛生芽增殖的
适宜培养基。
表 2　不同浓度激素对芽增殖的影响
代号 6-BA(mg/L)
NAA
(mg/L)
样本数
(个)
出芽率
(%)
增殖
倍数
B1 0.3 0.1 20 70 1.4
B2 0.3 0.2 20 75 1.1
B3 0.3 0.3 20 80 1.7
B4 0.5 0.1 20 90 2.3
B5 0.5 0.3 20 85 2.1
B6 0.5 0.2 20 95 2.95
B7 1.0 0.2 20 80 2.5
B8 1.0 0.3 20 85 2.2
B9 1.0 0.1 20 85 2.8
2.3　生根诱导　当苗高长至 2 ～ 3 cm时 ,将其切下 ,转接
到生根培养基上 。 14 d开始生根 , 35 d时的情况见表 3。
本试验对欧洲荚蒾组培苗的生根从基本培养基成分 、激素
浓度等方面进行了研究 ,结果显示(见表 3):1/2MS培养
基比全量 MS培养基更适宜于欧洲荚蒾试管苗的生根;在
1/2MS培养基中随 NAA的浓度升高生根效果越好 。综合
比较认为 C3培养基中试管苗生根率最高 ,并且植株生长
健壮 ,叶色绿 ,根系粗壮 ,单株生根数较多。
表 3　激素对生根培养的影响
代号 基本培养基
NAA
(mg/L)
生根率
(%)
生根数
(条 /株) 生长情况
C1 1/2MS 0.05 62 2.5 叶色淡绿 ,根较细弱
C2 1/2MS 0.1 46 2.1 叶色绿 ,根较细
C3 1/2MS 0.2 94 3.6 叶色绿 ,根粗壮
C4 MS 0.05 53 2.0 叶色绿 ,根较细
C5 MS 0.1 16.4 1.0 叶色偏黄 ,根较细
C6 MS 0.2 51 3.0 叶色发白 ,根较细
　　无根苗接种于 C3培养基 3 ～ 4周后就能生出 3 ～ 4条
长约 2 ～ 3cm的根。当苗高至 2 ～ 3 cm时 ,即可进行炼苗
与移栽 。(如图 4)
图 3　B6培养基中芽增殖健壮
图 4　C3培养基中小苗生根待移栽
2.4　试管苗的移栽　将生根的组培苗连同培养瓶置于室
外阳光下闭口炼苗 ,逐渐去掉瓶盖。 7 d后 ,用镊子取出生
根苗 ,洗去基部培养基 ,在 1000倍多菌灵溶液中浸泡 15
min,然后栽入经高温灭菌的蛭石与珍珠岩混合(1∶1 )基
质中。以水浇透基质 ,再用塑料膜保湿 ,置于温度 22℃、
光照时间 12 h/d的光照培养箱中。 2周后 ,从基质中取出
苗 ,上盆栽培于自然光下 ,保证充足水分和一定温度 ,移植
成活率可达 95 %以上 [ 5] 。
58 安徽农学通报 , AnhuiAgri.Sci.Bul.2010, 16(9)
3　结论与讨论
3.1　消毒条件　通过用升汞对外植体分 6个时间梯度进
行消毒得知 ,消毒 7 min左右为最佳 ,既能消毒彻底又不
对外植体造成伤害 。
3.2　组培快繁条件　筛选出最适宜的启动培养基为 MS
+6-BA2.0 mg/L+IBA0.1 mg/L;增殖培养基为 MS+6
-BA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L;生根培养基为 1/2MS+
NAA0.2 mg/L。
3.3　本研究意义　通过芽器官培养而获得的组培苗 ,遗
传性质稳定 ,能保持母株的良好性状 ,是花卉品种快速增
殖的有效途径 。利用组织培养获得相应的快速增殖体系 ,
对欧洲荚蒾优良单株的繁殖与推广具有实用价值。欧洲
荚蒾的叶 、花 、果均具有很高的观赏价值 ,在园林绿化中具
有一定的应用潜力 ,是一种值得推广的优良耐阴树种 ,并
且其果实有清热凉血 、健胃消食 、消肿止痛之功 ,具有独特
的保健功效 [ 6] 。鉴于以上优点 ,欧洲荚蒾市场需求量不断
增多 ,本研究结果对短时间内快速繁殖苗木以满足市场需
求可能有一定的应用前景 ,不仅能降低苗木的价格 ,而且
减少了种子繁殖带来的变异 ,保持苗木的优良性状。
参考文献
[ 1]周佳玉 ,赵康银.欧洲荚蒾的繁殖技术及其在城市绿化中的应
用 [ J].农技服务 , 2008, 25(6):84.
[ 2]王国芳 ,阿宾 ,田国庆.欧洲荚蒾园林价值及繁育技木 [ J] .林业
实用技术 , 2002(10):25-26.
[ 3]谭文澄 .观赏植物组织培养技术 [ M] .北京:中国林业出版
社 , 2001.
[ 4]邓源 ,曹征宇 ,顾韵莉.地中海荚蒾的组培快繁技术研究 [ J] .上
海农业科技 , 2008(5):96.
[ 5]颜昌敬.植物组织培养手册 [ M] .上海:上海科学技术出版社 ,
1990:201-206.
[ 6]刘伟新.欧荚蒾果的生药学研究 [ J].新疆中医药 , 2008, 26(6):
44-45.
(责编:张琪琪)
(上接 31页)稳步提升。
2.2　加强农产品质量检验检测体系建设　从做好农产品
的检验检测入手 ,在生产 、流通 、加工等各个关口严把质量
关 ,建立农产品市场准入制度 ,不让有害有毒的农产品上
市流通 ,确保老百姓吃上放心食品。因此 ,各级政府及有
关部门要通过多渠道筹措资金 ,增加投入解决监管部门所
需的仪器设备和工作经费 ,逐步建立无公害农产品生产管
理体系和基地环境 、产品质量监测网络 。
2.3　建立健全优质农产品的质量安全认证和标准制度　
在生产管理中 ,要严格遵守 《中华人民共和国认证认可条
例 》、《无公害农产品标志管理规定 》、《无公害农产品管理
办法 》等法规 、规章和规范性文件 ,认真履行职责 ,切实把
好关 ,促进无公害农产品 、绿色食品和有机食品的健康
发展。
3　突出重点 ,坚持不懈地抓好经常性工作
由于各地的条件不同 ,起步有早晚 ,水平有高低 ,在今
后的发展中 ,既要看重共性 ,更要注意个性 ,因时而异 ,因
地制宜 ,逐步落实各项工作措施。
3.1　大力宣传无公害农产品 ,提高质量安全意识　加大
农产品质量安全管理的宣传教育力度 ,营造优质农产品发
展的社会环境和农产品质量安全管理的良好环境是一项
全新的工作 ,政府以及有关部门要从可持续发展和提高人
口素质的战略高度 ,进一步强化优质农产品生产的工作力
度 。通过加强培训 、更新知识 ,提高广大基层农业领导干
部 、农业技术干部和相关生产企业 、以及农民对优质农产
品生产的认识;广泛利用各种宣传媒介 ,如电视台 、电台 、
报社 、农业信息网络等 ,加大这方面的宣传报道力度 ,及时
报道工作动态 、相关工作法规 、外地成功经验等 ,同时倡导
科学消费 、绿色消费 ,提高广大消费者的安全质量意识 ,从
而营造农产品安全质量管理的良好社会环境。
3.2　强化保障措施　一是切实加强领导 ,为农产品质量
安全工作提供有力保障 。我们要把加强农产品质量安全
工作作为建立和谐社会 、推进社会主义新农村建设的重要
工作 ,切实加强组织领导。二是加大农产品质量安全工作
经费投入。政府要把农产品质量安全工作经费纳入财政
预算 ,加大对无公害农产品基地建设 、产地认定 、检验仪器
设备购置 、检测车辆配备 、技术培训及信息平台创建等基
础建设的投入 ,确保农产品质量安全工作顺利开展 。三是
完善应急机制 ,妥善应对突发事件。县 、乡(镇)要建立健
全重大农产品中毒事件的报告和处理制度 ,以及预警和应
急处理工作机制 ,落实相关预案 ,对造成农产品质量安全
事故的责任人依法追究责任 。
3.3　积极推进农业技术创新　农业技术创新是农业结构
调整和农业发展的重要支撑。加强协作和组织开展无公
害农产品生产技术研究 ,大力推广无公害农产品生产新技
术 ,加速科技成果转化 ,提高农业综合生产力和市场竞争
力 ,最终实现农业增产 、农民增收。
3.4　加强农业信息体系建设　加强信息体系建设是政府
在新阶段推动农业结构调整的一项基础性工作 ,其中标准
化信息是农业信息体系建设的重要组成部分 ,要把信息服
务作为重点 。一是建立起规范的有效的高质量的信息处
理系统;二是各种信息传递渠道要畅通 ,农户和企业能根
据市场需求变化及时调整生产经营决策;三是科学整合农
网 、农技 110、科研〈院 〉所 、专业院校 、农技推广部门等单
位的信息资源 ,发挥综合优势 ,增强整体效能。
(责编:陶学军)
59　 16卷 09期 甄雪花等　欧洲荚蒾组织培养技术研究