全 文 ：植物学通报 919 2 , 9 ( 3 ): 4 0 一 4 3
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o t i n o f B o t a n y
滇紫草 O n o s m a 刀a n i。 u la r u m
愈伤组织中主要成分的
抑菌作用
朱汝幸 肖文桥① 王曼丝
曹日强 潘大谦
浦京大学生物系 , 南京 21 侧沁 8
摘要 从诱导形成的滇紫草愈伤组织中分离得到四种单体1) . 其中两种单体渭、 卜二甲墓丙烯肤
阿卡宁(民口闭如以 h ay 卿a1 毯 a画 n, )和乙鼠阿卡宁《A ce yt al 压 a n in n, )的愈伤组织棍合色素 ,对金黄
色葡萄球菌和假单抱杆菌都有比较明显的抑制作用 . 尤其是乙欲阿卡宁抑制效果格外显著 . 然而
对大肠杆菌却表现不出抑制效应 .
关键词 滇紫草;愈伤组织五卜二甲基丙烯阮阿卡宁;乙曦阿卡宁;金黄色荀萄球菌 ;假单抱杆菌
A N T I B I O T I C E F F E C T O F T H E M A I N C O N S T I T U
-
EN T S
I N T H E O N O SM A P A N IC U L A T U M C A L L U S
Z h u R u一 x in g X i a o W e n 一q i a o W a n g M a n 一 5 1
C a o R i一q i a n g P a n D a 一q i a n
(刀e那r r川亡” r o f引 o OgI y . 刀口” lj 月g 山 I ,口咫 iyt . Na 月iln g ZI0 08 )
A b s t r a e t C a ll u s o f o n o sm a P a n ie u l a t u m P r o d u e e s s i x s h ik o n in d e ir v a t i v e s
.
T h e
s t ur e t u r e s o f ht e s i x e o m s it t u e n t s a r e e q u i v a le n t t o t h o s e o f ht e o ir g in a 1 P l a n t
.
F o u r
m o n o n e r s o f s h ik o n i n d e ir v a it v e s fr o m t h e e a l lu s h a v e b e e n o b t a i n e d b y u s i n g t h e
e o l u m n e d e h r o m a t o g r a P h y o f s i l ie a g e t H
.
T w o o f ht e m :刀刀一d im e ht y l a e r y l a lk a n n i n
a ce t y l a l k a n
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, a n d t h e t o t a l P u印 le一 r e d p i g m e n t m i x o f t h e e a l lu s i n h ib i t e d t h e
g r o w t h o f s t a P h y l o e o e e u s a u er u s a n d SP e u d o m o asn S P
.
E s P e i a l ly a e t y l a lk a n n i n
sh o w s s tr o n g e r e fe e t t h a n t h e o t h e
r t w o d o e s
.
H o w e v e r
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.
C o l i w a s n o t i n h ib iet d
.
①现在工作地址 :湖北省黄石市生物制药厂
一 4 0 一
K e y w o dr s O n o ms
a P a n ie u la tum C a l lu s;刀口记而 e th y a c yr la lk a n n ni ;
A c ty la kl a n n in: S t a p h y lo e o c u s a uer
u s: Ps e u do m oSna
·
经诱导产生的滇紫草愈伤组织能产生与原植物相同的紫草色素及其衍生物 13 . 其中有
些组分超出原植物许多 [,l . 据报道原植物中所含的紫草素有活血 、 抗菌和消炎等功
效 lt劫 ,l3 . 俞伤组织所形成的紫草色素及各类衍生物是否也具有与原植物同样的抑菌效果 ,
是采用细胞大盆培养技术的实用目的所在 . 通过这项工作的研究将更有力地提高紫草色素
的使用价值 . 材料·与方法
供试材料:滇紫草愈伤组织由本课题组提供 .
菌种 :金黄色葡萄球菌 ( S t a p h y ot c oc cus au er us , , .’假单抱杆菌 ( J俪 “而脚口翻 sP . J;大肠
杆菌 (.E co il) 由本系微生物组提供 .
滇萦草愈伤组织诱导以及紫草色素的提取 、 分离方法见前文 l,.l
抑菌试验方法采用抑菌圈法与比浊法 . 比浊法按表 1制备菌悬液 .
表 1 菌最液的制备
分 类 加 人 成 分 .
正 常 1 s m l无菌水
对照 (5% 乙醉 ) .0乃 m l无水乙醉+ 2 .2 5m l无苗水
二 对照 (20 % 乙醉 ) l园 无水乙醉咔 1. SnI l无菌水
组分 1 .0 sml l (母液 Zm g / m 1 5。% 乙醉液卜 Zm l无菌水
组分 DI .0 sm ll 《母液 ZmB / nI l 50%乙醉液卜 o . 7 5m l无水乙醉+I . 2 5m l无菌水
棍合组分 .0 sml 棍合液姆液 mZ g /口 150% 乙醉液卜 Zml 无菌水
注沮分 1消卜二甲基丙烯欧阿卡宁龙分 nI :乙欧阿卡宁
。 加人成分便各试液最终浓度为 .0 2m g / m l
二 组分 uI 在 5% 乙醉中不昌落解 ,故将乙醉浓度提高到 20 %
接完种的菌悬液放人 25 ℃下振荡培养 ( 12 0 转 / 分) ,各菌培养时间按照分别测定的生长
最佳点 (对数期中期 )来确定 :假单抱杆菌为 4 小时 ,金黄色葡萄球菌为 2 . 5 小时 ,大肠杆菌为
2
.
5 小时 .
实验结果
抑菌圈试验
(一 ) 我们对大肠杆菌进行了反复多次的抑菌实验 ,结果发现各试液在所用浓度范围中,
均无抑制效果 . 而金黄色葡萄球菌和假单抱杆菌都比较敏感 ,有明显的受抑现象 . 而且还
伴随着浓度变化而变化 . 实验结果见图 1 ,图 2 .
一 4 1 一
毛 对照 1
勺昆: .犯合色索
山 ; 乙队阿卡宁
U
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p 日一二甲基丙烯
酸阿卡宁
样一对吸
’《 n l一1一 ) { }
1
: 乙阶 阿卡 · i, ’
“ ’ ” : p ~ 三 1 肠丙
姆限阿 卜’ i
讹 : `很合 色素
4)
。
{亏
0
。
2
浓度
( m 昌户 m l )
0 。 5 浓度 ,
( m g j m l ) )
图 l 金黄色芍翻球翻对三种样品的徽感曲线 圈 2 恨单抱杆菌对三种样品的橄旅曲线
(二 )比浊实验
结果见表 2
, 表 2 浪草色素及其衍生物对金黄色菊萄球蔺、 假单抱杆 , 的抑侧
蔺 种 处 理 :平均 O D值人 二 4 2 0 n m 抑侧率 . (% )
廿 正常 .0石25 /
金黄色有萄球曲接种:上午 1 : o 5% 对照乙醉 0 .肠 5 /
比浊 :当天下午 ]: 4 O
O D起始 = 0 . 3 10 20 % 对照乙醉 .0 36 /
组分刀 0 . 4书, U . 5%
组分班 0, 3 10 皿6 .4 %
很合色索 0 .喇冷 14 一9 %
假单抱杆菌 正常 .0 翻7 /
接种 :下午 :3 30
比浊:当天下午 ,弓 O 5%对照乙醉 0. 4 39 /
g D 起始 = 0· 234
20 %对照乙辞 0 . 3 3 5 /
组分 1 0一 4 1 5 .3 ,%
组 0 . 305 .4 ,%分血
棍合色素 0 . 3 4 8 15%
对照一样品 (O D )
* 抑制率 =— x 10 0%正常一起始 (O D )注 :组分 n :口卜二甲基丙烯酸阿卡宁`组分 m :乙酸阿卡宁一 4 2一
讨 论
实验结果证明滇紫草愈伤组织不仅能产生与原植物类似的紫草素衍生物 ,而且这些衍
生物还具备着与原植物相似的抑菌功能 . 经过对愈伤组织所形成的两个主要衍生物抑菌能
力的比较发现 :乙酞阿卡宁的效果更强一些汉图 1 、 2, 表 2) . 这一结果进一步表明 :采用细
胞大规模培养技术来研究紫草色素是很有意义的 ,因为愈伤组织中乙酞阿卡宁的含量要超
出原植物许多 13 .
然而对大肠杆菌的作用却与原植物不同 . 从我们所使用的抑菌圈法和比浊法所得结果
均表明:紫草色素混合样品以及两个主要的衍生物对大肠杆菌都不表现出抑制作用 . 这问
题可能会在今后逐步深人的研究工作中得到说明 .
参 考 文 献
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15 ] 离菊红 , l , 8 4冲草药 ,一, (6 ): 2 5一 3一
体I M如 ak 面 ,H . , M . K o n o s h七n a , M .介 b a at , 1 9 77 ,丹夕t o c触用。 I即 , 1` : 11吕3·
17) T . b a .ta M
. ,
Y
.
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,
19吕5, B io tC h n o lo gy 恤儿 . t cs 蜘ce , ^ c a d e m ic p rCS s I n c 4 , 20 7e 2 39 ·
18) T ab a at
,
M
. ,
H
.
M让uk a m i , N
.
H ir a o k a
,
19 74
,
hP 夕t o che 川臼, r,
,
13
: 9 2 7
.
(上接 , I页 )
出 ,多效哇浸种对甜菜幼苗具有良好的生理效应 ,在苗期不但能有效地控制幼苗徒长 ,培育出
壮苗 ,而且幼苗移栽后具有缓苗快 ,成活率高的特点 ,这在甜菜育苗移栽上将起重要作用 ,
表 1 多效睦没种对甜菜的生物效应
浓度 发芽势 发芽率 苗高 胚轴长和. ) 叶面积 叶片数 叶厚 叶绿素 光合速率 电导卒
(% ) (% ) (恤 ) 《` m勺 (片) (口 . ) 口皿. d . 心 . h -I 二C O念如峨 户 , / 。 .水培苗 盆栽苗
训` k) 3 9 8 6 名. 9 1 . 9 5 3. 0 1 6 . 1 3. 1 0 J 7 13 5 3 14 . 7 5 2 6 7
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l / 万 39 8 5 7 . 5 . 0 . 7 4 . 2 . 0 . 14 . 6 “ 3 . 3 0 . 3 1 . 1 . 34 2 . 14 . 94 “ 18 5 .
2 / 万 肠 吕l “ ` . , ’ 0 . 7 2 “ 】. 5 . 13 J . 3 . 6 . 0 . 3 3 ’ 1 .劝 7 ’ l` . 32 . 1 1 0 .
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。 达 .0 05 显著水平
一 4 3一